大肠杆菌感染对家蝇幼虫ACP、POD活性的影响

观察家蝇(Musca domestica)三龄幼虫针刺感染大肠杆菌(Escherichia coli)后4、8、12、16 h血清和血细胞中酸性磷酸酶(ACP)、过氧化物酶(POD)活性的变化。结果表明,大肠杆菌感染后各时间组家蝇三龄幼虫血清和血细胞中ACP活性显著高于对照组(P﹤0.01)。其中血清和血细胞中ACP活性分别在感染8 h、4 h达高峰,然后逐渐下降;大肠杆菌感染后各时间组家蝇三龄幼虫血清和血细胞中POD活性显著高于对照组(P﹤0.01)。其中血清和血细胞中POD活性分别在感染12 h、8 h达高峰,然后逐渐下降。大肠杆菌感染后家蝇三龄幼虫血清和血细胞中ACP、POD活性均增强,提示这两种酶在防御微生物感染过程中发挥了重要作用。     

家蝇幼虫离体血细胞感染大肠杆菌后的形态变化

[目的]观察大肠杆菌感染对离体家蝇3龄幼虫血细胞形态的影响,了解参与家蝇幼虫细胞免疫反应的细胞类型。[方法]对家蝇3龄幼虫血细胞进行体外培养,并于培养后2、4、6、8 h对血细胞形态进行观察;离体家蝇3龄幼虫血细胞中加入大肠杆菌菌液,观察感染后不同时间血细胞形态的变化。[结果]家蝇三龄幼虫血细胞培养2 h后可区分血细胞的5种类型,培养6 h后血细胞部分贴壁;感染大肠杆菌后浆血胞发生空泡、细胞变形等变化,粒血胞周围见大量细菌聚集,未见原血胞、珠血胞、类绛血胞形态的变化。[结论]浆血胞和粒血胞是家蝇幼虫细胞免疫反应的主要参与者,而原血胞、珠血胞及类绛血胞不参与细胞免疫反应。     

感染后家蝇幼虫离体血细胞及培养上清中2种酶活性的变化

[目的]探讨大肠杆菌感染后家蝇三龄幼虫血清中酸性磷酸酶（ACP）、过氧化物酶（POD）活性升高的机制。[方法]家蝇三龄幼虫离体培养血细胞中加入大肠杆菌菌液,于离体培养后48、1、2、16 h测定血细胞及培养上清中ACP、POD活性的变化。[结果]（1）大肠杆菌感染后各时间组培养上清和离体血细胞中ACP活性显著高于CK（P〈0.01）。其中培养上清和离体血细胞中ACP活性分别在感染12 h8、h达高峰,然后逐渐下降。（2）大肠杆菌感染后各时间组培养上清和离体血细胞中POD活性显著高于CK（P〈0.01）。其中培养上清和离体血细胞中POD活性分别在感染12 h4、h达高峰,然后逐渐下降。[结论]家蝇幼虫血细胞脱颗粒释放ACP、POD是引起感染后血清中这2种酶活性升高的主要机制。     

家蝇幼虫离体血细胞感染大肠杆菌后的形态变化（摘要）（英文）

[目的]观察大肠杆菌感染对离体家蝇三龄幼虫血细胞形态的影响,了解参与家蝇幼虫细胞免疫反应的细胞类型。[方法]对家蝇三龄幼虫血细胞进行体外培养,并于培养后2、4、6、8 h对血细胞形态进行观察;离体家蝇三龄幼虫血细胞中加入大肠杆菌菌液,观察感染后不同时间血细胞形态的变化。[结果]家蝇三龄幼虫血细胞培养2 h后可区分血细胞的5种类型,即原血胞、浆血胞、粒血胞、珠血胞、类绛血胞,其中浆血胞又分为大核浆血胞和小核浆血胞2种;培养6 h细胞部分贴壁,少量浆血胞已生长成梭形,部分细胞伸出长短不等的伪足;培养8 h后培养血细胞发生黑化反应,液体发黑,不易观察;感染后2 h粒血胞周围见大量细菌聚集;感染后4 h浆血胞（主要是小核浆血胞）发生变形、碎裂、胞质普遍出现大小不等的空泡;感染后6 h浆血胞、粒血胞聚集成团将细菌包裹形成包囊;感染后8 h培养液完全黑化,已无法观察。,其中未见原血胞、珠血胞、类绛血胞形态的变化。[结论]浆血胞和粒血胞是家蝇幼虫细胞免疫反应的主要参与者,而原血胞、珠血胞及类绛血胞不参与细胞免疫反应。     

感染大肠杆菌后家蝇幼虫浆血胞和粒血胞的变化

为家蝇血细胞的功能、细胞免疫机制等的进一步研究提供基础依据,应用倒置显微镜结合姬氏染色观察家蝇3龄幼虫感染大肠杆菌后4h、8h、16h、24h血细胞总数及粒血胞和浆血胞的数量及形态变化。结果表明:家蝇3龄幼虫浆血胞和粒血胞是家蝇幼虫免疫反应的主要免疫细胞,感染后4h血淋巴细胞总数、浆血胞和粒血胞数增高,感染后8h达高峰,之后开始下降;感染后各组浆血胞和粒血胞聚集成堆,出现细胞变形、空泡和核内颗粒浓集。对照组家蝇幼虫浆血胞有细胞分裂,感染后各组可见粒血胞、浆血胞分裂,家蝇幼虫血细胞的自身分裂可能是其重要来源。     

家蝇幼虫血细胞的透射电镜观察

[目的]观察家蝇3龄幼虫血细胞的类型和超微结构。[方法]取孵化后第3天家蝇幼虫血淋巴,采用透射电镜观察家蝇3龄幼虫血细胞的形态和超微结构。[结果]家蝇3龄幼虫血细胞分为原血胞、浆血胞、珠血胞、粒血胞和类绛血胞5种类型,细胞核均匀透亮,核膜清楚,常染色质多,粒血胞内含吞噬体。[结论]透射电镜观察可将家蝇幼虫血细胞分为5种类型。     

家蝇幼虫提取物的抗菌活性

利用抑菌圈测量法研究家蝇幼虫提取物的抗菌活性,并且利用蛋白酶K水解和毛细管电泳对提取物中抗菌成分进行初步鉴定.结果表明,家蝇幼虫提取物对6种病原菌和工程菌大肠杆菌JM109均有抑制作用,其中对革兰氏阳性菌的抑制作用更强,诱导组的抗菌活性优于未诱导组;毛细管电泳显示志贺氏菌诱导的家蝇幼虫有56个新的主峰.因此,诱导组的高抗菌活性主要是由于昆虫体内诱导产生的肽类,组成性的蛋白性质的酶类,如溶菌酶对其抗菌活性有一些次要的贡献.     

链球菌诱导后家蝇幼虫提取物的抗菌活性研究

[目的]为枯草杆菌诱导后的家蝇幼虫提取物在饲料中的应用提供依据。[方法]采用抑菌圈测量法测定链球菌诱导后家蝇幼虫提取物的抗菌活性,分析其对温度、酸碱和离子强度稳定性的影响。[结果]链球菌诱导的家蝇幼虫提取物对细菌的抑菌圈直径为6.55~11.01 mm。诱导组中家蝇幼虫提取物对6种病原菌和工程菌大肠杆菌JM109均有抑制作用,其对革兰氏阳性菌的抑制作用较强。而未诱导组提取物对细菌的抑菌圈直径为6.01~8.01 mm,诱导组的抗菌活性高于未诱导组。抗菌肽样品具有较好的温度稳定性。当pH值为4~10时,抗菌肽样品的抗菌活性均较高,以pH值为8时最高。抗菌肽样品的抗菌活性随离子强度的升高而下降。[结论]抗菌肽的抑菌活性受环境离子强度的影响,与其作用机理有关。     

家蝇血细胞的扫描电镜观察

运用扫描电镜观察了家蝇的血细胞,发现家蝇的血细胞主要有原血胞,浆血胞,珠（粒）血胞以及类绛（囊）血胞４种类型;不存在典型的珠血胞与粒血胞,只是另有一类血胞兼具二者的特点;家蝇的浆血胞具有极强的吞噬能力,类绛（囊）血胞也可能与其免疫作用有关。     

乳糖诱导酸性木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达

[目的]以融合酸性木聚糖酶基因的大肠杆菌（E．coli）B121（DE3）为研究对象,研究以乳糖作为诱导剂时重组目的产物的表达规律。[方法]以重组木聚糖酶比酶活为评价指标,利用单因素试验和k（3。）正交试验考察摇瓶发酵条件下诱导剂浓度、诱导时机、诱导培养时间和诱导培养温度对木聚糖酶表达的影响。[结果]各因素影响程度依次为：诱导时机〉诱导温度〉诱导时间〉诱导剂浓度;最优表达条件为：诱导剂浓度5∥L、诱导时机0．5h、诱导培养时间4．5h、诱导培养温度32℃;在此工艺条件下,重组木聚糖酶比酶活可达49．69U／mg。[结论]乳糖作为诱导剂能够成功诱导酸性木聚糖酶在大肠杆菌中的表达。     

肉仔鸡群暴发呼吸道疾病的细菌学诊断

对肉仔鸡群暴发呼吸道病进行了部分细菌病源的分离鉴定，结果共分离出５种细菌，其中３种分别鉴定为埃希氏大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｅｈｉａｃｏｌｉ），克雷伯肺炎杆菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）和摩根氏变形杆菌（Ｍｉｒａｂｉｌｉａｐｒｏｔｕｓ）．另外两种尚待进一步鉴定．     

河南省鸡致病性大肠杆菌血清型、耐药性的研究

对河南省3个不同地区的38株鸡致病性大肠杆菌进行了O血清型的鉴定、15种抗生素药物的耐药性试验。结果表明:河南省鸡致病性大肠杆菌的血清型种类众多,以O78,O1,O2为优势血清型,分别占定型菌株的35.29%,23.53%,17.65%;耐药图谱复杂,可以分为21种耐药类型,菌株耐药种类4~14种;不同来源的菌株其血清型、耐药性一般不同;相同来源的菌株,其耐药图谱相同或相似,但血清型有多种。     

3M纸片检测大肠菌群法与国标快速检测法的比较研究

[目的]比较用3M纸片法与用快速检测国标法(MEFH)对不同样品大肠菌群的检测结果。[方法]以花生、小米、玉米、大米和花生油为检测样品,以Aliz-gal和MUGal肉汤为培养基,设大肠菌群污染的自然状态未知浓度和模拟培养已知浓度的两种处理,进行3M纸片法与MEFH法对大肠菌群的检测结果对比试验。[结果]3M法与MEFH中MPN法检测自然状态的5种样品的大肠菌群结果比较符合率为90%,3M纸片法和MEFH中的平板法检测结果无明显差异。3M纸片法未出现假阳性现象,证明了3M纸片法有很强的选择性。[结论]3M纸片法操作简便,适合企业现场食品卫生检测。