棕榈酸对牛瘤胃内环境的影响

选用4头装有永久瘤胃瘘管的杂交阉牛,采用4×4拉丁方设计,研究棕榈酸对瘤胃内环境的影响.结果表明:棕榈酸添加量分别为1.5%、3.0%及4.5%的纤毛虫活力沉淀的试验时间比对照组分别延长11.39%、26.77%及32.46%;瘤胃液的pH分别升高1.75%、2.71%及4.30%;瘤胃液Ca2+质量浓度分别下降9.51%、26.32%、28.83%(P<0.05);Mg2+质量浓度分别下降5.52%(P>0.05)、22.81%(P<0.01)、24.54%(P<0.01);NH3-N质量浓度分别下降3.28%(P<0.05)、23.03%(P<0.01)、24.02%(P<0.01);挥发性脂肪酸(VFA)浓度分别下降3.28%(P<0.05)、23.03%(P<0.05)、24.02%(P<0.01).     

LBP基因沉默对LPS诱导水牛单核巨噬细胞炎症相关基因表达的影响

为了探讨抑制脂多糖结合蛋白(LBP)基因表达对水牛单核巨噬细胞在内毒素(LPS)诱导下炎症相关基因的表达,首先采用三质粒慢病毒包装系统包装LBP基因shRNA重组质粒pSicoR-GFP-shLBP774.利用病毒颗粒感染水牛单核巨噬细胞,进行荧光定量qRT-PCR及ELISA检测.结果显示,单核巨噬细胞在用5×108 IU/mL滴度的LBP-shRNA774慢病毒颗粒,感染指数(MOI)为300、感染7d的条件下,感染效率超过50%.qRT-PCR检测结果显示,与LPS对照组相比,shLBP774感染组可极显著抑制LBP基因的表达(p0.01),CD14,TLR4,TNF-α,IL-1β,IL-8等基因表达显著降低(p0.05).ELISA检测结果发现,与对照组相比,细胞分泌的TNF-α,IL-1β蛋白量显著降低(p0.05).以上结果表明,抑制LBP基因表达可以有效降低LPS诱导下单核巨噬细胞炎症相关基因的表达,进而调控LPS引发的炎症反应,提示可将LBP作为靶基因深入研究水牛单核巨噬细胞免疫功能和LPS致炎信号传导分子机制.     

棕榈酸对营养物质瘤胃降解率及表观消化率的影响

选四头装有永久瘤胃瘘管的杂交黄牛,按4×4拉丁方设计,采用尼龙袋法研究棕榈酸对营养物质瘤胃降解率的影响。结果表明:添加1.5%～4.5%棕榈酸对干物质(DM)、有机物(OM)、中性洗涤纤维(NDF)、纤维素(CEL)及酸性洗涤木质素(ADL)的瘤胃降解率影响差异不显著(P>0.05)。第二个试验选用32头奶牛,分成4组,研究棕榈酸对营养物质全消化道表观消化率的影响。结果表明:添加1.5%棕榈酸,日粮有机物(OM)、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)及粗脂肪(EE)的表观消化率与对照组差异均不显著(P>0.05);添加3.0%棕榈酸,日粮OM表观消化率较对照组下降2.16%(P<0.05),EE表观消化率较对照组提高3.44%(P<0.05),CP及NDF表观消化率与对照组差异不显著(P>0.05);添加4.5%棕榈酸,日粮OM、CP及NDF表观消化率较对照组分别下降2.74%(P<0.01)、2.01%(P<0.05)及8.50%(P<0.05),EE表观消化率较对照组提高3.55%(P<0.05)。     

糖浓度变化对牛肺泡巨噬细胞促炎细胞因子释放的影响

探讨葡萄糖浓度变化能否上调牛肺泡巨噬细胞(BAMs)RAGE-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路,引起BAMs释放促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别用5.5、15.5、25.5 mmol·L-1葡萄糖以及葡萄糖(5.5 mmol·L-1)+甘露醇(20 mmol·L-1)作用BAM...     

化感物质棕榈酸对茄子根际土壤微生物组成及微生物量的影响

研究棕榈酸处理对茄子根际微生物种群结构、微生物生理功能性类群和微生物量的影响.结果表明:棕榈酸降低了茄子根际土壤中真菌的数量及其组成比例,组成比例最低降至0.001%;增加了细菌和放线菌的数量及其组成比例,组成比例最高分别增至98%和4.31%;经棕榈酸处理的茄子植株根际微生物几种生理功能性类群显著高于清水对照,氨化细菌、硝化细菌、固氮菌、纤维素分解菌最高分别增至375375.01×105cfu·g-1、2.5×105cfu·g-1、109.2×105cfu·g-1和0.78×105cfu·g-1;极显著地增加了茄子根际土壤微生物量碳、微生物量氮、微生物量磷,最高分别增至7.6μg·g-1、12.61 μg·g-1 和14.25μg·g-1.棕榈酸增加了茄子植株的株高和茎粗,最高分别增至23.28cm和0.9cm,大体表现出随浓度增加而增强的趋势.     

禽(番鸭)呼肠孤病毒诱导脾脏单核—巨噬细胞和淋巴细胞凋亡的超微观察

用禽(番鸭)呼肠孤病毒YB分离株,人工感染1日龄雏番鸭及鸭胚,扑杀典型症状的病雏鸭.采取病变的器官组织,进行透射电镜超微结构的观察和研究.结果显示:全身多种器官组织中的单核—巨噬细胞、淋巴细胞和成纤维细胞都受到番鸭呼肠孤病毒不同程度的破坏,其中以脾脏细胞受破坏最为严重,这些细胞除了急性死亡以外,均可在病毒诱导下发生细胞凋亡,表现为:细胞皱缩→染色体浓缩、边聚、外排→形成凋亡小体、自噬小体→被周围吞噬细胞包裹、吞噬、消化降解→终末溶酶体形成.     

海带岩藻聚糖及其级分在氧化应激条件下对肉鸡巨噬细胞免疫功能的影响

【目的】在氧化应激条件下,研究海带岩藻聚糖及其级分对肉鸡巨噬细胞免疫功能的影响,初步探讨海带岩藻聚糖及其级分的免疫调节功能与抗氧化作用的关系。【方法】以叔丁基过氧化氢（tBOOH）为活性氧诱导剂,加入肉鸡腹腔巨噬细胞培养液中,测定细胞培养液中抗氧化酶的变化,巨噬细胞分泌一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、以及细胞因子IL-1和TFN-α等免疫指标的变化。【结果】用tBOOH处理后的巨噬细胞,细胞存活率显著下降（P＜0.05）,乳酸脱氢酶（LDH）和丙二醛（MDA）显著升高（P＜0.05）,SOD和GSH-Px酶活性显著降低（P＜0.05）。巨噬细胞的吞噬活性显著降低（P＜0.05）,NO、iNOS和呼吸爆发显著降低（P＜0.05）,细胞因子IL-1分泌量显著下降（P＜0.05）,表明细胞出现明显的氧化损伤。在培养液中加入海带岩藻聚糖及其级分,能够缓解细胞的氧化应激,使得细胞存活率上升,LDH和MDA降低,SOD和GSH-Px升高,免疫指标均有不同程度的恢复。【结论】海带岩藻聚糖及其级分具有抗氧化活性,不同级分的抗氧化活性存在差异,其中级分Ⅲ、级分Ⅳ的作用较强。海带岩藻聚糖对巨噬细胞的免疫促进作用与其抗氧化活性有关。     

绵羊UCP4基因编码序列的克隆和mRNA表达研究

【目的】克隆绵羊UCP4基因的编码序列（CDS）,分析CDS及其编码蛋白结构特点,并探讨其mRNA的发育性表达规律,以期为该基因的结构和功能研究奠定理论基础。【方法】利用RT-PCR技术从绵羊大脑组织中扩增出该基因的编码区序列,运用生物信息学方法分析UCP4蛋白的理化性质和结构特点。利用实时荧光定量PCR技术,对两个具有显著尾型差异的绵羊品种（广灵大尾羊和小尾寒羊）2、4、6、8、10和12月龄共计96个个体的8种组织（大脑、小脑、下丘脑、垂体、皮下脂肪、肾周脂肪、肠系膜脂肪和尾部脂肪）进行mRNA表达研究。【结果】绵羊UCP4基因CDS区长972 bp,编码323个氨基酸,分子量为35.73 kDa,等电点为9.43。二级结构中α螺旋、β折叠股和环分别占56.04%、7.12%和36.84%。该蛋白为跨膜蛋白,无信号肽,但有2个糖基化位点和15个潜在的磷酸化位点。UCP4 mRNA在脑组织和脂肪组织中均有表达,但高表达于脑组织中。品种、月龄和组织对UCP4 mRNA表达均有显著影响。【结论】获得了绵羊UCP4 基因的CDS全序列,揭示了其mRNA的表达特征及其影响因素,对进一步研究该基因的结构及其与能量代谢的关系具有重要科学意义。     

用血清酸滴定法对3个品种绵羊进行早期妊娠诊断的研究

[目的]为了建立一种快速简易的绵羊早期妊娠诊断方法,提高母羊的繁殖效率,降低繁殖成本。[方法]选择1 317只母羊,为新疆地方品种多浪羊、策勒羊和卡拉库尔羊。于人工授精配种后16～30 d,采用血清酸滴定法进行了早期妊娠诊断。[结果]在试验绵羊中,共检出妊娠母羊1 128只,未妊娠羊189只。与实际妊娠结果相比,妊娠符合率为89.88%（1 013/1 128）,未孕符合率为96.83%（183/189）,总符合率为90.81%（1 196/1 317）。经卡方检验,这些指标在3个品种母羊或2个品种母羊间差异均不显著。[结论]血清酸滴定法诊断时间早、方法简便、结果准确,可以用于绵羊的早孕诊断,极具实用性和推广价值。     

FecB基因对多胎品系绵羊培育的影响

繁殖力是绵羊的主要经济性状,如何提高绵羊繁殖力一直都是国内外研究者不断探寻的问题。FecB基因是科学家最早发现的与绵羊繁殖力有关的基因。近年来,人们一直试图通过分子遗传标记技术来培育具有高繁殖力的绵羊后代。经研究发现,在我国的策勒黑羊、多浪羊、小尾寒羊、杜寒杂交肉羊以及洼地绵羊等羊群中都存在FecB基因。并且FecB基因可能是这些绵羊具有多胎性状的主效基因。FecB基因通过增加排卵数,从而影响产羔数。但同时排卵数的提高对胚胎成活率也有一定的影响。可以通过制定科学的育种计划,选择优秀的母体,利用本地绵羊的抗逆性等方法来不断完善多胎品系绵羊的培育。本文从FecB基因作用机理和在国内外不同地区品种中的分布作了简要的综述,并对该基因的利用进行了展望。     

胆酸负荷对妊娠母羊血浆某些激素的影响

6只考力代妊娠母羊随机分成试验组和对照组。安装颈静脉血管瘘后 ,试验组羊灌注胆酸溶液 (剂量 2mg/kg ,用生理盐水配制 2g/L ,灌注时间 5min) ,对照组羊灌注等量生理盐水。在灌注前和灌注后 2 ,4,8,12 ,2 4,72 ,12 0 ,16 8,2 16h分别采取血样 ,用放射免疫法测定血浆中雌二醇 (E2 )、孕酮 (P)、皮质醇 (Cort)等激素水平。结果表明 :母羊灌注胆酸后血浆E2 水平显著下降 ,对照组 (17 6 2 6± 1 6 5 6 )pg/mL ,试验组 (12 36 6± 1 0 31)pg/mL (P <0 0 5 ) ;P和Cort水平显著上升 ,对照组分别为 (0 2 84± 0 0 2 9)mg/mL和 (5 816± 0 2 2 2 )mg/mL ,试验组分别为 (0 70 1±0 0 71)ng/mL和 (8 5 71± 0 845 )ng/mL (P <0 0 1) ;E2 与P的比例也发生变化。说明胆酸对胎盘功能有较大影响 ,这可能是胎儿预后不良的主要原因。     

大豆异黄酮干预肥胖大鼠肝氧化应激及炎症反应

本研究旨在探究不同剂量大豆异黄酮(soy isoflavones,SIF)干预肥胖大鼠后肝的氧化应激及炎症反应情况。准备80只SD大鼠,普通饲料喂养16只SD大鼠做空白对照;高脂饲料喂养64只SD大鼠9周建立肥胖大鼠模型,将64只模型大鼠随机分成4组,每组16只,大豆异黄酮(0、150、300、450 mg·kg^-1)灌喂,每周定期测量体重,连续干预4周。取肝脏组织,苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色观察肝脏组织形态学结构;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;荧光定量PCR方法检测肝脏组织中促炎因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。组织病理学发现,肥胖大鼠出现典型的肝细胞脂肪变性伴肝组织炎性损伤,肝SOD、CAT和GSH-Px水平降低,IL-6、IL-1β和TNF-α mRNA表达水平升高。大豆异黄酮干预后,各剂量组肝组织病理损伤得到改善,抗氧化因子活性显著提高并呈剂量效应,促炎因子表达水平显著下调。大豆异黄酮可逆转肥胖致肝组织病理损伤和提高肝脏抗氧化活性,下调肥胖相关促炎因子基因的表达,上述结果可为大豆异黄酮的应用开发提供参考。     

紫檀茋影响脂多糖诱导巨噬细胞炎症因子的变化

采用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264. 7建立炎症模型,评价紫檀茋的抗炎作用。在LPS刺激的RAW264. 7细胞中,添加紫檀茋进行干预,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)方法检测细胞中炎症因子单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1),白细胞介素6 (IL-6),白细胞介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达量,Griess法检测培养基中一氧化氮(NO)的释放量,采用Western blotting方法进一步检测细胞中细胞外调节蛋白激酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和核转录因子κB-p65 (NF-κB p65)的蛋白磷酸化水平。结果发现:紫檀茋能够显著抑制炎症因子基因的表达和炎症介质NO的释放;紫檀茋+LPS组中ERK,p38和p65的蛋白磷酸化水平显著下降。紫檀茋能显著抑制炎症因子MCP-1,IL-6,IL-1β,TNF-α和iNOS的mRNA表达和NO的释放,其机制可能与阻断丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和NF-κB信号通路相关。     

砷和铅对HepG2细胞毒性和氧化损伤的研究

为研究砷(Arsenic,As)和铅(Lead,Pb)单独以及联合作用对人肝癌细胞(Human liver carcinoma cells,HepG2)毒性作用和细胞氧化损伤的机制,采用不同质量浓度的As(2.65、3.15、3.65、4.15和4.65μg/mL)和Pb(160、190、220、250和280μg/mL)以及质量浓度比为1∶55的As+Pb分别或联合处理HepG2细胞24、48和72h,使用MTT法检测细胞活力;细胞培养24h后测定细胞活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)的相对含量。MTT结果表明:As、Pb和As+Pb的24、48和72h半数抑制浓度(IC50),As分别为4.20、4.03和3.74μg/mL;Pb分别为228.01、205.46和203.40μg/mL;As+Pb分别为3.10、3.17和3.18μg/mL。3组处理分别作用HepG2细胞24、48和72h表现出显著的生长抑制(P0.05),且细胞毒性与时间和浓度呈依赖性。当As、Pb单独作用和As+Pb联合作用HepG2细胞诱导ROS、LDH和MDA水平显著升高(P0.05),GSH的含量显著降低(P0.05)。综上所述:As+Pb联合作用与单独作用表现出较强的细胞毒性,毒性大小顺序依次为:As+PbAsPb,且As+Pb联合作用表现为拮抗效应。活性氧以及细胞氧化应激的产物可能是诱导重金属对细胞毒性的重要原因。     

虾青素对小鼠肝脏原代细胞氧化应激的影响

【目的】研究虾青素对过氧化氢(H_2O_2)诱导小鼠肝脏原代细胞产生氧化应激的影响。【方法】原位二步灌流法提取ICR小鼠的肝脏原代细胞,用丙二醛(Malondialdehyde,MDA)作为指标、采用H_2O_2处理建立氧化应激模型。采用流式细胞仪测定细胞中活性氧(Reative oxygen species,ROS)含量及凋亡水平变化,生物化学法测定细胞中MDA和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的含量、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性,用荧光定量PCR检测抗氧化酶SOD、GSH-px mRNA的相对表达量,Western-blot检测细胞核中Nrf2蛋白相对表达量。【结果】使用5μg·mL~(–1)虾青素预保护细胞3 h,10μmol·L–1H_2O_2刺激3 h的情况下氧化应激模型效果最好。虾青素降低了H_2O_2诱导后小鼠肝脏原代细胞的细胞凋亡率以及ROS、MDA和GSH含量,提升了SOD、GSH-px的活性以及SOD、GSH-px的mRNA相对表达量,抑制了Nrf2蛋白的核转移。【结论】虾青素对H_2O_2诱导产生氧化应激的肝脏原代细胞具有保护作用。     

饲喂羊肉和鸭肉日粮对大鼠血清甲状腺素水平的影响

将40只大鼠随机均分为4组,分别饲喂羊肉、鸭肉、豆粕(对照组)和普通日粮(对照组),采用放射免疫分析法(RIA)测定血清四碘甲腺原氨酸(T4)、三碘甲腺原氨酸(T3)、促甲状腺激素(TSH)、游离四碘甲腺原氨酸(FT4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)水平和大鼠肝脏Ⅰ型甲状腺原氨酸脱碘酶(5′-脱碘酶)活性的变化,并测量大鼠直肠温度。结果显示:饲喂羊肉的大鼠体温升高,第29天达到(38.66±0.37)℃,显著高于饲喂鸭肉组大鼠体温(38.01±0.55)℃;饲喂羊肉组大鼠血清中T3、T4和FT3、FT4升高,分别达到(0.44±0.10)、(76.29±30.97)ng.mL-1和(7.74±1.75)、(4.37±1.88)pmol.mL-1);饲喂鸭肉组分别为(0.37±0.12)、(42.38±20.05)ng.mL-1和(5.50±1.98)、(3.76±1.63)pmol.mL-1,两组差异显著(P<0.05)。饲喂鸭肉组大鼠血清TSH水平((1.35±0.29)MIU.L-1)显著高于饲喂羊肉组大鼠血清TSH水平((1.01±0.22)MIU.L-1)(P<0.05)。结论:饲喂羊肉能明显促进大鼠...     

ABA对水分胁迫下玉米幼苗细胞氧化损伤的保护作用

以玉米种子苗为材料,通过添加ABA及其生物合成抑制剂fluridon(FLU)的方法,测试与分析玉米幼苗在水分胁迫下细胞内源ABA的动态变化及其与抗氧化损伤的关系.研究显示,水分胁迫引起玉米叶片膜脂过氧化和蛋白质氧化程度加重,质膜相对透性增加.利用外源ABA生物合成抑制剂fluridon抑制ABA合成后,水分胁迫引发的玉米叶片细胞氧化损伤加重,而添加外源ABA处理能减轻玉米叶片细胞的氧化损伤程度,表明水分胁迫下诱导和积累的ABA对玉米细胞氧化损伤起到了一定的保护作用.     

不同浓度和表面修饰的聚苯乙烯微塑料对水稻种子萌发、生长和氧化应激的影响

为揭示微塑料对陆生植物的影响,本研究探究了不同表面修饰（原始、羧基化和氨基化）的聚苯乙烯微球（PS、PSC、PSN）暴露下水稻种子萌发、生长和氧化应激状况,暴露浓度分别为0.2、1、5 mg·L^-1和30 mg·L^-1。结果表明,3种微塑料对水稻种子发芽率和幼苗根质量的抑制程度表现为PSN＞PSC＞PS,对水稻根系形态（根长、根表面积和根投影面积）的抑制程度总体表现为两种经表面修饰的微球强于原始微球。PS在较低浓度（0.2、1 mg·L^-1）下通过刺激水稻根部提高抗氧化系统的应激水平,避免了氧化损伤;随着浓度的升高,根部抗氧化防御能力逐渐减弱,在30 mg·L^-1时引发了脂质过氧化。两种经表面修饰的微塑料在较低浓度（0.2、1 mg·L^-1）下即可抑制根部抗氧化系统。PSC仅在最高浓度（30 mg·L^-1）下诱导了根部氧化损伤,而 PSN在 1 mg·L-1时就引发了氧化损伤,且随着PSN浓度的升高,氧化损伤进一步加剧。随着微塑料浓度的升高,水稻根表洗脱物明显增多,可能与根部的抗氧化反应有关。最高浓度（30 mg·L^-1）PSC和PSN的根表洗脱液中可观察到微塑料,根表吸附可能是导致氧化损伤和生长发育受阻的原因。水稻的芽对微塑料的敏感性远低于根部,芽质量和叶绿素含量受到了一定程度的抑制;3种微塑料均在最高浓度（30 mg·L^-1）时引发了芽的氧化损伤,但各处理组间的差异不大。研究表明,与原始聚苯乙烯微塑料相比,经表面修饰的微塑料,尤其是氨基化微塑料对水稻种子萌发、根系生长和抗氧化系统的负面影响更强。     

ROS诱导的氧化应激和细胞程序性死亡对超低温保存后花粉生活力的影响

[目的]超低温保存后花粉生活力呈多种变化情况,已有研究表明活性氧(ROS)是超低温保存后花粉生活力变化的主要原因之一.因此,本研究探讨液氮冻存后花粉生活力与ROS诱导的氧化应激和细胞程序性死亡间的关系,以进一步揭示ROS在超低温保存后花粉生活力变化中的作用机制.[方法]以芍药'粉玉奴'的花粉为材料,对比分析超低温保存不...     

Effect of neuropeptides on production of inflammatory cytokines by human monocytes

Two groups of mediators, the neuropeptides substance P and K and the monocyte-derived cytokines, interact in the neural regulation of immunological and inflammatory responses. Substance P, substance K, and the carboxyl-terminal peptide SP(4-11) induce the release of interleukin-1, tumor necrosis factor-alpha, and interleukin-6 from human blood monocytes. The neuropeptide effects occur at low doses, are specific as shown by inhibition studies with a substance P antagonist, and require de novo protein synthesis. Since monocyte-derived cytokines regulate multiple cellular functions in inflammation and immunity and since neuropeptides can be released from peripheral nerve endings into surrounding tissues, these findings identify a potent mechanism for nervous system regulation of host defense responses.