黑白花奶牛发情周期血液中各种生殖激素含量及其变化

用放射免疫测定法，测定了７头黑白花奶牛发情周期血液中促卵泡素，促黄体素，孕酮，雌二醇１７β的含量及其变化规律，为研究黑白花圾牛的生殖生理激素之间消长的协调关系和进行生物技术研究提供理论依据。     

不同"肝郁"大鼠模型生殖激素及卵泡发育的研究

目的:通过对几种"肝郁"大鼠模型生殖激素及卵泡发育的比较研究,探讨适合"肝郁与不孕关系研究"的动物模型.方法:选择有性周期的正常雌性SD大鼠为实验动物,分为正常对照组、带枷组、夹尾组、捆绑组、慢性应激组,现察各组大鼠一般情况,比较各级卵泡数、黄体数,卵巢血管数目、子宫内膜厚度及血清E2、P、T、PRL的含量.结果:与正常对照组比较,带枷组及夹尾组大鼠体质量无明显差异,捆绑组及慢性应激组大鼠体质量增长迟缓;带枷组、捆绑组及慢性应激组的窦前卵泡数明显减少,各模型组的窦状卵泡数均明显减少,带枷组、夹尾组及捆绑组的成熟卵泡数明显减少,各模型组的黄体数无明显差异;各模型组卵巢血管数明显减少、子宫内膜厚度明显降低;带枷组及捆绑组血清PRL明显增多、E2明显降低,而夹尾组及慢性应激组血清PRL、E2无明显差异;各模型组血清P、T无明显差异.结论:采用颈部带枷单笼喂养所致的"肝郁"模型,可能是更适合"肝郁与不孕关系研究"的动物模型.     

绵羊腔卵泡中葡萄糖和生殖激素及其受体基因表达的相关性分析

通过分析绵羊不同直径腔卵泡中葡萄糖与生殖激素(FSH、LH和17β-E_2)含量和相关受体基因表达的相关性,阐明不同腔卵泡发育中葡萄糖和生殖激素对卵泡生殖调控的机制。根据绵羊腔卵泡不同直径划分为小卵泡组(2.0～3.4 mm)、中卵泡组(3.5～5.4 mm)和大卵泡组(5.5 mm)3组,收集其卵泡液及颗粒细胞(GCs)。采用AnnextinV-FITC测定小、中和大卵泡中GCs凋亡情况;利用放射免疫法检测小、中和大卵泡组中葡萄糖浓度及FSH、LH和17β-E_2的含量;运用qRT-PCR技术检测小、中和大卵泡GCs中FSHR、LHR和G6Pase基因的转录水平。结果显示,不同直径绵羊腔卵泡中GCs凋亡无显著差异(P0.05);随着腔卵泡直径的增大,卵泡液中葡萄糖浓度、FSH、LH和17β-E_2的含量均升高;同时,GCs上FSHR、LHR、G6Pase基因的转录水平极显著升高(P0.01)。不同直径腔卵泡中,葡萄糖浓度与FSH含量均呈显著正相关,仅在大卵泡中与LH呈显著正相关(P0.05)。另外,葡萄糖浓度与FSHR、G6Pase基因的表达量呈显著正相关,只在大卵泡中与LHR表达量呈显著正相关(P0.05)。随着绵羊腔卵泡生长,葡萄糖与生殖激素含量和相关受体基因表达量具有显著相关性,共同参与调节卵泡发育。     

理囊散对卵泡囊肿和排卵延迟奶牛血清生殖激素的影响

研究理囊散对卵泡囊肿和排卵延迟奶牛血清中雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P4)4种生殖激素的影响,初步探讨理囊散治疗奶牛卵泡囊肿和排卵延迟疾病的作用机理.用理囊散治疗奶牛卵泡囊肿和排卵延迟,统计发情率;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测奶牛血清中的E2 、FSH、LH、P44种生殖激素,并与正常奶牛对比.结果显示,理囊散治疗卵泡囊肿发情有效率为83.33％,治疗排卵延迟发情有效率为90.91％.理囊散处理前,卵泡囊肿E2水平显著高于正常组(P＜0.05),P4水平显著低于正常组(P＜0.05),FSH和LH水平无显著差异;排卵延迟组的E2、FSH、LH水平与正常组间无显著差异,P4水平低于正常组,差异极显著(P＜0.01).理囊散处理后,卵泡囊肿组药后4d,E2 、FSH、LH急剧显著上升并达到高峰,相比治疗前差异极显著(P＜0.01),P4出现显著下降趋势,于药后4d达到低谷值;排卵延迟组的E2 、FSH、LH于药后7d明显上升,药后20d的水平与药前差异极显著(P＜0.01);P4明显上升,药后7d达到高峰值且与药前的差异极显著(P＜0.01),而后显著下降到处理前水平.结果表明,理囊散对卵泡囊肿和排卵延迟奶牛的E2 、FSH、LH、P44种生殖激素具有显著调节和诱导发情的作用.     

生殖激素在奶牛临床上的应用

从奶牛生殖细胞生成和成熟一直到射精、排卵、妊娠和泌乳等过程的各个环节,生殖激素都有调控作用。利用生殖激素的协调作用机理。结合多年在临床应用体会,本文详细阐述了生殖激素在母牛超数排卵、同期发情处理和母牛生殖机能异常上的临床应用效果。     

丹顶鹤血浆中生殖激素浓度的初步测定

以盐城国家级珍禽自然保护区人工饲养的丹顶鹤为试验素材，以放射免疫测定法，对3对配对成鹤繁殖季节血浆中生殖激素浓度的变化进行初步的测定分析。结果表明：在产卵的前、中、后期，公鹤的促黄体生成素（LH）、促卵泡素（FSH）、睾酮（T）和母鹤的LH、FSH、雌二醇（E2）均表现出“低－高－低”的变化趋势，而母鹤的促乳素（PRL）则表现为“低－低－高”；在整修繁殖期，公鹤血浆中的LH和FSH浓度均高于母鹤。     

天津白母猪性发育过程中生殖激素变化规律

测定了 6头天津白母猪从出生至 7月龄之间血清中 4种生殖激素浓度变化规律。结果表明出生时血清促黄体素 (LH)和雌二醇 (E2 )浓度很高 ,之后迅速下降 (P<0 .0 5 )并保持较低水平 ,促卵泡素 (FSH)在短时期内有一定上升 ;2 .5～ 3月龄之间血清 L H、FSH和 E2 浓度均相对较高 ,随后都下降并稳定在较低水平上 ;6月龄以后 ,L H、FSH、E2 浓度都出现上升 ,其中 6.2 5月龄时的 E2 浓度显著高于 6月龄且个体差异很大 ;5～6.5月龄之间的血清孕酮 (P4 )浓度低于 1μg.L-1,6.75月龄时的 P4 浓度显著升高 (P<0 .0 5 )且个体差异很大。根据生殖激素水平变化可推断出天津白母猪大致在 6.2 5～ 6.75月龄之间达到初情期     

丹顶鹤血浆中生殖激素浓度的初步测定

以盐城国家级珍禽自然保护区人工饲养的丹顶鹤为试验素材 ,以放射免疫测定法 ,对 3对配对成鹤繁殖季节血浆中生殖激素浓度的变化进行初步的测定分析。结果表明 :在产卵的前、中、后期 ,公鹤的促黄体生成素 (LH)、促卵泡素(FSH)、睾酮 (T)和母鹤的LH、FSH、雌二醇 (E2 )均表现出“低高低”的变化趋势 ,而母鹤的促乳素 (PRL)则表现为“低低高” ;在整个繁殖期 ,公鹤血浆中的LH和FSH浓度均高于母鹤。     

牛优势卵泡颗粒细胞与膜细胞中生殖激素合成相关基因的筛选与分析

【目的】探究牛优势卵泡颗粒细胞(GCs)和膜细胞(TCs)中基因的表达差异,筛选并研究与生殖激素合成相关的基因。【方法】在GEO数据库获得GSE83524芯片数据,通过在线软件GEO2R筛选牛优势卵泡中GCs和TCs之间的差异表达基因。使用DAVID软件对获得的差异表达基因进行GO功能富集分析;使用KOBAS软件进行KEGG信号通路分析,筛选出GCs和TCs之间参与生殖激素合成相关信号通路;使用String结合Cytoscape软件构建蛋白与蛋白之间的相互作用网络(PPI)。以牛的优势卵泡为材料,采用Real-time PCR对筛选出的差异表达基因进行验证。【结果】经在线软件GEO2R分析,共获得247个差异表达基因,其中43个表达上调,204个表达下调;247个差异表达基因的GO功能分析结果共分为3大类41组,其中参与生物学过程(BP)的有22组,参与细胞组分(CC)的有12组,参与分子功能(MF)的有7组;KEGG信号通路分析共发现17条通路,其中腺苷酸环化酶3基因(ADCY3)、细胞色素P450 17A1基因(CYP17A1)、腺苷酸环化酶8基因(ADCY8)、鸟嘌呤核苷酸结合蛋白基因(GNAS)、骨形态发生蛋白6基因(BMP6)5个差异表达基因参与了卵巢类固醇生成通路。经PPI网络互作分析,筛选出了前10位的Hub基因;Real-time PCR结果显示,CYP17A1、ADCY8在TCs中的表达量极显著高于GCs (P0.01);ADCY3、BMP6在TCs中的表达量显著高于GCs(P0.05),GNAS在GCs中的表达量极显著高于TCs(P0.01),这5个基因在GCs和TCs中的表达趋势与GEO芯片数据结果一致。【结论】ADCY3、CYP17A1、ADCY8、GNAS、BMP6在GCs与TCs之间表达量存在显著差异,其可能在牛优势卵泡GCs和TCs中对生殖激素的合成及分泌产生了重要作用。     

瘦素与奶牛泌乳早期能量平衡和生殖机能的关系

为阐明奶牛血浆瘦素、能量状况和生殖机能之间的关系,随机选取年龄、胎次、泌乳量相近的奶牛60头,分别在产后1、14、28、42、56和70 d时颈静脉采血,根据血糖浓度在6个时间点分为低血糖组(L)和对照组(CK).同时调查和检测奶牛的生产性能(体重、泌乳量和干物质摄入量)、繁殖性能(首次配种间隔、情期受胎率、发情率和配种指数)、血液生化指标(血糖、β-羟丁酸和游离脂肪酸)和内分泌指标(胰岛素、胰高血糖素、瘦素、雌二醇和孕酮).结果显示:奶牛泌乳早期存在不同程度的能量负平衡,产后14 d最高.能量负平衡(negative energy balance,NEB)能使奶牛产后干物质摄入量(DMI)、体重(BW)和泌乳量(MY)减少,首次配种间隔延长,情期受胎率和发情率降低,配种指数增高,血浆胰岛素(Ins)、胰高血糖素(Gn)、瘦素(leptin)、雌二醇(E2)和孕酮(P4)浓度降低,呈现低血糖(Glu)、高血浆游离脂肪酸(NEFA)和β-羟丁酸(BHBA)生化特性;能量负平衡时,奶牛血浆瘦素与血浆Glu、E2、P4之间呈显著正相关,与BW损失、血浆NEFA之间呈明显负相关;能量平衡时,奶牛血浆瘦素与DMI、Glu、Ins之间呈显著正相关,与Bw损失呈显著负相关,与血浆E2和P4之间相关不显著.这些结果提示,奶牛泌乳早期易发能量负平衡不仅与干物质摄入量、体重、泌乳量密切相关,而且与机体内分泌未完全协调发挥作用有关.能量负平衡明显降低泌乳早期奶牛的生产性能和繁殖性能.血浆瘦素与生产性能指标、血浆生化指标的相关性分析证实瘦素在奶牛能量平衡、生产性能和繁殖性能之间起到一个平衡纽带的作用.     

不同Se源对奶牛繁殖性能和免疫功能的影响

30头健康、经直肠检查确定已妊娠的黑白花母牛 ,分成 5组 ,其中 4组为处理组 (T1 、T2 、T3、T4 ) ,1组作为对照组(CK) .各处理组分别添加 4种 Se添加剂 ,即 Se酵母 (Sel-Plex5 0 ,Alltech产品 )、混合 Se化合物 (70 % Se酵母 +3 0 %亚硒酸钠 )、Se氨基酸络合物 (主要是 Se蛋氨酸 )和亚硒酸钠 .试验持续了 1 68d,在此期间 ,对血液 GSH-Px活性、血清 Se水平、淋巴细胞转化率和 T细胞数做了测定 ,同时观察了某些繁殖性能的变化 .结果表明 :(1 ) GSH-Px活性和血清 Se水平 ,T1 、T2 和 T3显著高于 CK(P<0 .0 1 ) ,而 T4 亦高于 CK(P<0 .0 5 ) ;T1 显著高于 T2 、T3和 T4 (P<0 .0 5 ) .(2 )补 Se后第 70天测得的淋巴细胞转化率和 T细胞数 ,T1 和 T2 显著高于 CK(P<0 .0 1 ) ,而 T3、T4 高于 CK(P<0 .0 5 ) ;同时 T1 、T2 和 T3的淋巴细胞转化率和 T细胞数亦高于 T4 (P<0 .0 5 ) .(3 )补 Se明显改善了某些繁殖性能 ,如减少了每次受孕的配种次数并降低了诸如胎衣不下和子宫内膜炎等产科疾病的发病率 .试验也证明 ,补充有机 Se可明显提高母牛抗感染 ,促进淋巴细胞增殖 ,增进嗜中性白细胞的吞噬作用     

奶牛子宫内膜炎防治前后血液流变学参数的变化

检测了患子宫内膜炎奶牛用中药方剂防治前后的血液流变学指标。结果表明：（１）患子宫内膜炎奶牛的全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、红细胞聚积指数和红细胞刚性系数极显著高于临床健康牛,经治疗方剂治疗后上述指标极显著地下降;（２）临床健康奶牛试验组在产后第５和第７天使用预防方剂后,全血粘度和全血还粘度、血浆粘度和红细胞聚积指数样对照组显著下降;（３）各组奶牛的红细胞压积无显著差异。     

放射免疫分析法比较奶牛粪便和乳汁中的孕酮含量

利用放射免疫分析方法（ＲＩＡ）,以奶样为对照,测定了奶牛粪便中的孕酮（Ｐ４）．用９０％乙醇抽提粪便孕酮,回收率为（９５．２±０．５０）％．通过测定正常发情奶牛、配种后怀孕奶牛和卵巢机能性疾病奶牛粪样和奶样孕酮含量的变化,发现两者趋势一致,有较好的相关性（ｒ＝０．７９８４）,而且通过粪样测得的发情周期天数与奶样完全一致（２０．０±１．４１）ｄ．     

奶牛产后血液流变学及生化主要指标动态变化

为了解产后健康奶牛血液流变学及生化主要指标的变化规律，对9例2～4胎龄健康奶牛产后0、4、8、12、16h的血液流变学及生化主要指标进行了检测。结果表明，产后健康奶牛全血比粘度(ηb80s^-1,ηb20s^-1)、全血还原比粘度(ηr80s^-1,ηr20s^-1)、血浆比粘度(ηp)和血细胞聚集指数(AI)等血液流变学指标呈逐渐降低趋势；血糖(GLU)、球蛋白(GLO)和淀粉酶等呈逐渐升高趋势。     

不同日粮对奶牛养分消化的影响

选择4头安装有永久性瘤胃、十二指肠前端和回肠末端T形瘘管的荷斯坦泌乳奶牛,按4×4拉丁方设计,分别以铬染纤维和Co-EDTA为食糜固相和液相指示剂,研究精粗比约为30∶70的"高低质粗料型"日粮、30∶70的混合型高青贮日粮、50∶50的精粗料比例相当的日粮及65∶35的高精料日粮等4种日粮对瘤胃食糜稀释率及干物质(DM)、有机物(OM)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)等养分的进食量、十二指肠流量及消化道不同部位表观消化量和消化率的影响.结果表明:日粮精粗比显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)影响奶牛对DM、OM、NDF和ADF的进食量,且DM进食量与日粮水分含量呈负相关;日粮精粗比对奶牛瘤胃食糜液相和固相稀释率均没有显著(P＞0.05)影响;日粮精粗比显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)影响DM、OM、NDF和ADF的十二指肠流量及瘤胃和全消化道表观消化量,而对其后肠道表观消化量没有显著(P＞0.05)影响;日粮精粗比显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)影响DM、OM和ADF的瘤胃表观消化率,而对NDF的瘤胃表观消化率及DM、OM、NDF和ADF的后肠道和全消化道表观消化率没有显著(P＞0.05)影响.     

影响奶牛产后卵巢活动恢复的几个因素

应用通讯奶样放射免疫分析法测定奶中孕酮含量，确定了１６４头次奶牛产后卵巢活动恢复的时间，并根据年产奶量、产犊季节和有无子宫内膜炎等进行分类统计．产后卵巢活动恢复延迟高产（１００００～７０００ｋｇ）奶牛中有５２．４％（１１／２１）；低产奶牛中占４１．３％（２６／６３）．秋季产犊的奶牛较早恢复卵巢活动，其次是冬季、春季和夏季．患子宫内膜炎的奶牛，有６６．７％产后卵巢活动恢复延迟，配种无效占５０．０％，情期受胎率为１４．３％．     

日粮精粗比对奶牛瘤胃发酵及泌乳性能的影响

选择4头安装有永久性瘤胃瘘管的泌乳奶牛,按4×4拉丁方设计,分别饲喂精粗比约为30∶70的“高低质粗料型”日粮、30∶70的混合型高青贮日粮、50∶50的精粗料比例相当的日粮及65∶35的高精料日粮等4种不同精粗比日粮,研究日粮精粗比对奶牛瘤胃发酵及泌乳性能的影响。结果显示,日粮精粗比对奶牛瘤胃pH值,氨氮质量浓度,总挥发性脂肪酸、丙酸、丁酸的浓度和乙酸/丙酸、(乙酸+丁酸)/丙酸有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)影响,而对瘤胃乙酸浓度影响不显著(P>0.05);饲喂不同精粗比日粮,奶牛乳产量、4%标准乳产量均有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异,而乳脂、乳蛋白、乳糖、非脂固形物及总固形物的含量差异均不显著(P>0.05),但其产量随乳产量的增加而增加,存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异。结果表明,4种精粗比日粮能使瘤胃发酵和乳成分含量保持稳定,但影响瘤胃挥发性脂肪酸浓度和乳产量;低质和优质粗料的合理搭配有利于稳定瘤胃内环境和乳脂含量,且能改善泌乳性能。     

Effects of Bupleurum extract on blood metabolism,antioxidant status and immune function in heat-stressed dairy cows

This experiment was conducted to evaluate the effects of Bupleurum extract(BE) on blood metabolites, antioxidant status, and immune function in dairy cows under heat stress. Forty lactating Holstein cows were randomly assigned to 1 of 4 treatments. The treatments consisted of 0, 0.25, 0.5, and 1.0 g of BE kg–1 dry matter. Supplementation with BE decreased(P0.05) blood urea nitrogen(BUN) contents and increased blood total protein(TP) and albumin(ALB) levels compared with control cows, but it had no effects(P0.05) on blood glucose(GLU), nonesterified fatty acid(NEFA), total triglyceride(TG), low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C), and high density lipoprotein cholesterol(HDL-C). Compared with control cows, cows fed BE had higher(P0.05) superoxide dismutase(SOD) and glutathione peroxidase(GSH-Px) activity. However, supplementation with BE had no effect(P0.05) on total antioxidant capacity(T-AOC) or malondialdehyde(MDA) levels. The immunoglobulin(Ig) A and G contents increased(P0.05) in cows fed 0.25 or 0.5 g of BE kg–1. Interleukin(IL)-2 and IL-4 levels were higher(P0.05) in cows fed 0.5 and 1.0 g of BE kg–1, and IL-6 was significantly elevated(P0.05) in cows fed 0.5 g of BE kg–1. There were no treatment effects(P0.05) on the CD4+ and CD8+ T lymphocyte ratios, CD4+/CD8+ ratio, or tumor necrosis factor-α(TNF-α) level among the groups. These findings suggest that BE supplementation may improve protein metabolism, in addition to enhancing antioxidant activity and immune function in heat-stressed dairy cows.     

孕牛血中cAMP、cGMP水平变化的测定

选择３０头妊娠奶牛，根据妊娠不同分为妊娠前期（＜１００ｄ）、妊娠中期（１００～２００ｄ）和妊娠后期（＞２００ｄ）３组，应用放射免疫法测定孕牛血浆和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ的含量．结果表明：随着妊娠期延长，孕牛血清和单个核细胞的ｃＡＭＰ是逐渐减少，而ｃＧＭＰ则是逐渐升高，但与对照组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５）；血浆中ｃＡＭＰｃＧＭＰ之比值均比对照组高且差异显著（Ｐ＜０．０５），但随妊娠期延长而逐渐下降．