鸡减蛋综合症免疫斑点诊断法的研究

本研究以鸡减蛋综合症（EDS－76）为模型，对常规的免疫斑点（IB）试验做了改进，在对各主要参数进行系统测定的基础上，建立了可用于检测EDS－76的IB诊断法。在该方法中，病鸡血清呈“＋”形染色，健康鸡血清呈“－”形染色，从而使检测结果与判定符号实现了统一。对16种鸡病的标准阳笥血清、EDS－79病毒人工感染鸡血清、临床健康鸡血清和SPF鸡血清的检测结果及与现行的EDS－76血凝抑制（HI）试验和琼旨扩散（AD）试验比较表明，IB试验不仅特异、敏感，而且简便、快速。本研究在禽病系列诊断试剂盒的研制方面是一个有益的尝试。     

鸡传染性支气管炎HA和HI试验方法的研究

用传染性支气管炎(IB)红细胞凝集抑制(HI)试验对SPF鸡血清、健康鸡血清、用SPF鸡制备的IBV标准阳性血清、感染鸡血清和自然发病鸡血清及野外样品测定结果证明,本法操作简便、特异性强、敏感性高、需时短、结果易判定。IBV HI抗体于感染后3周开始出现,然后持续上升,二个月后仍呈上升趋势.本法可定性或定量检测鸡IBV抗体,特别适用于现地诊断和免疫监测。     

黑河市区鸡疫病的调查

为查清我市及周围地区鸡病的情况,从1686年7月至9月,在黑河市及周围地区八个鸡场共采集2～5月龄鸡血清100份,成母鸡血清20份,采用琼扩试验、血清平板凝集试验、血球凝集抑制试验对10种疫病进行血清学调查,结果,鸡传染性鼻炎的阳性率为4％、传染性喉气管炎为2％、传染性支气管炎为2％、鸡痘为8％、禽霍乱为8％、鸡白痢为10％、法氏囊炎为20％、马立克氏病为12％、病毒性关节炎为44％、鸡败血支原体为34％,未检出减蛋综合症(EDS-76)抗体。由以上结果可以看出,我市鸡疫病的感染率是比较高的,尤其是病毒性关节炎的感染率为最高。同时还存在多种度病同时感染现象。但在抽检时,大部分鸡外观健康。由此表明,这些鸡多为带毒者。EDS-76虽未检出阳性,     

江都市主要鸡病的调查

对本市范围内的23个乡镇场，85个点，550份鸡血清样本进行鸡新城疫（ND）、鸡马立克氏病（MD）、鸡痘（FP）、鸡病毒性关节炎门A）、鸡腺病毒病（CELD）、白血病（AL）、鸡传染性法氏囊病（IBD）、鸡传染性支气管炎（IB）、鸡传染性喉气管炎（IL）、鸡传染性鼻炎（IC）、禽霍乱（FC）、鸡白痢（SP）、鸡减蛋综合征任DS-76）等共间种疾病进行监测。检狈OMD、FP、VA、CELD、IBD、IB、ILT、IC、FC、SP等10种病，用琼脂扩散试验即AGP法。检测ND、EDS-76用血凝抑制试验（HI）。鸡白痢用平板凝集试验。l调查结果表明，…     

缓释复方免疫增强剂对4种鸡传染病疫苗免疫增强效果研究

为了验证缓释复方免疫增强剂对鸡减蛋综合征(EDS-76)、鸡新城疫(ND)、鸡传染性支气管炎(IB)和鸡传染性法氏囊病(IBD)4种疫苗的免疫增强作用,试验选用30日龄海兰褐蛋鸡80只,随机分为4组,每组又均分为试验组和对照组,分别注射EDS-76、ND、ND-IB和IBD疫苗,同时对试验组雏鸡投服缓释复方免疫增强剂1粒/只,在免疫前、免疫后12、27 d采血测定抗体效价(或阳性率)、T淋巴细胞花环形成率和ANAE阳性率。结果表明,试验组鸡EDS-76、ND、IB抗体效价和IBD抗体阳性率、T淋巴细胞花环形成率和ANAE阳性率均显著或极显著高于对照组。以上结果说明,缓释复方免疫增强剂可以提高EDS-76、ND、ND-IB和IBD4种疫苗抗体效价(或阳性率),增强鸡体液免疫功能和细胞免疫功能。     

鸡减蛋综合征与传染性支气管炎二联油佐剂灭活苗的田间免疫试验

鸡减蛋综合征 ( EDS- 76)和传染性支气管炎( IB)均为病毒性传染病 ,给养鸡业带来巨大的经济损失。目前对 EDS- 76和 IB尚无有效治疗方法 ,注射疫苗是防制疾病的重要手段。国内外已研制出许多疫苗来预防和控制 EDS- 76和 IB。但由于 IB病型复杂 ,血清型众多 ,IBV容易发生变异 ,不同血清型间仅有部分或根本没有交叉保护作用 ,宁夏使用进口或外地疫苗 ,IB的免疫效果往往不太理想。根据生产中存在的问题和要求 ,利用分离的病毒研制了EDS- 76与 IB二联灭活苗。在 EDS- 76与 IB二联苗制备及实验室检验工作的基础上 ,为了进一步验证实…     

免疫层析试纸条(ICS)检测禽流感抗体

以纯化的禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）核蛋白作为捕捉抗原，金标兔抗鸡抗体作为金标二抗，建立检测禽流感血清抗体的胶体金免疫层析试纸条（immunochromatographic strip, ICS）。对标准阳性血清不同滴度进行检测，ICS试验的敏感性高于琼脂扩散试验（AGP）。特异性试验证实，禽流感的ICS试验与新城疫（ND）、传染性支气管炎（IBV）、鸡传染性法氏囊病（IBD）及减蛋综合症（EDS-76）均无交叉反应。同时，用ICS试验和HI试验检测105份鸡血清，两者具有较好的符合性。结果认为：禽流感ICS具有快速简便、特异、灵敏等优点。     

鸡减蛋综合征与传染性支气管炎二联油佐剂灭活苗的研究--二联苗的保存期试验

鸡减蛋综合征(EELS-76)是引起产蛋母鸡产蛋量下降的一种病毒性传染病，广泛流行于国内外，给养鸡业造成巨大经济损失。鸡传染性支气管炎(IB)是一种病毒性传染病，各种品种、日龄的鸡均易感，但主要侵害1～4周龄鸡，以上呼吸道出现炎症为特征；该病还可能侵害肾脏及造成产蛋鸡产蛋量下降。IB在国内外普遍存在，给养鸡业带来严重危害。从发病地区分离病毒后制成灭活苗对鸡群进行免疫是EDS-76和IB的主要防制方法，因此，笔者应用从宁夏分离的EDS-76病毒和肾型IBV研制了EDS-76与IB二联灭活苗。为了进一步检验疫苗的免疫效果并为今后疫苗的大批量生产及推广应用做准备，进行了二联苗的保存期试验。     

鸡减蛋综合征HI抗体的检测

运城某养鸡场一批“农大褐”父母代种鸡,在产蛋期间,产蛋率达不到生产性能指标,从21周龄到43周龄最高产蛋率为73.8％,同时产出软壳、薄壳或无壳等畸型蛋,疑似发生减蛋综合征(EDS-76).为了调查EDS-76感染情况.对该场产蛋鸡群进行了EDS-76 HI抗体的检测. 材料与方法一、EDS-76抗原及标准阳性血清:均由哈尔滨兽研所提供, 二、血清样品:共55份,采自运城疑似发生EDS-76鸡场的5批产蛋鸡群,其中种1(农大褐)15份,种2(巴布考克B-300)、蛋1(京白)、蛋2(京白)、蛋3(巴布考克B-300)各10份. 三、用真和器皿:国产96孔“U”形微孔反应板、取液器、稀释棒等. 四、血凝抑制(HI)试验:采用总体积为75μl的微量法,按常规方法进行,试验使用4个     

鸡产蛋下降综合症病毒快速纯化及其多抗血清制备

为研制鸡产蛋下降综合症病毒(EDS-76)检测用标准抗原及标准多抗血清,以EDS-76国际通用毒株AV-127株为抗原,进行了EDS-76病毒抗原纯化及多抗血清制备。研究表明,经氯仿抽提,并经PEG浓缩处理病毒的尿囊液可获得良好的纯化效果,纯化病毒背景干净,血凝效价达19Log2。以此研制出的鸡抗EDS-76多抗血清血凝抑制效价达13Log2,间接免疫荧光效价达1∶2000,Western-blot试验分析表明该多抗血清可以识别两个分子大小在50 kD至85 kD之间的蛋白抗原,HI及IFA试验发现所制备的特异性,多抗血清与12种常见禽病病原(NDV、AIV-A、ALV-J、ALV、GPV、REV、MDV、IBV、CAV、IBDV、TMUV、REOV)均不反应。本研究建立的快速简便的EDS-76病毒纯化方法以及获得的抗EDS-76多抗血清,为进一步研制EDS-76标准抗原以及标准多抗血清提供了有效的方法与材料。     

5种禽用多联疫苗的安全性和免疫效力试验

鸡新城疫 (ND)、鸡传染性法氏囊病 (IBD)、鸡传染性支气管炎(IB)、减蛋综合征 (EDS-76)和鸡马立克氏病 (MD)是危害养禽业的几种主要传染病。疫苗免疫是防止疫病爆发的主要措施和关键环节 ,多年的实践证明 ,优质高效的疫苗能有效地预防传染病的发生。我们对梅里亚动物保健有限公司生产的 5种禽用油乳剂灭活疫苗进行了安全性和免疫效力试验 ,现报道如下。1　材料和方法1.1　疫苗IB -ND -IBD三联灭活苗 ,批号为OBPT5D0 2 1;新一代IB-ND -IBD -EDS-76四联灭活疫苗 ,批号为OBGP5D0 2 1;IB -ND -IBD -EDS-76四联灭活疫苗 ;MD…     

传染性支气管炎病毒(M41株)HI试验抗原的特异性和敏感性试验

采用本研究室制备的3批传染性支气管炎病毒(IBV,M41株)HI试验抗原,分别对100份和80份不同鸡血清进行IBV HI抗体检测,同时用IBV ELISA抗体检测试剂盒进行检测,比较两种不同方法检测的特异性和敏感性。结果显示,特异性试验中80份SPF鸡血清,自制抗原检测均为阴性,IBV ELISA检测79份为阴性,10份其他鸡病血清,两种方法检测9份均为阴性,10份IBV阳性血清两种方法检测均为阳性;敏感性试验中,74份已知IB疫苗免疫或IBV M41株感染鸡血清IBV HI检测72份为阳性,阳性检出率为97.3%(72/74),IBV ELISA检测74份均为阳性,阳性检出率为100%(74/74),SPF鸡血清及其他鸡病血清,两种方法检测均为阴性,两种检测方法总符合率为97.5%,差异不显著(P0.05)。试验结果证明,本研究室自制抗原具有良好的特异性,特异性为100%,抗原同时具有良好的敏感性,但IBV ELISA方法的敏感性要高于IBV HI方法。     

应用间接ELISA检测鸡病毒性关节炎抗体的研究

用本试验建立的抗鸡病毒性关节炎(AVA)抗体的间接 ELISA 方法检测了实验感染 AVA 病毒(AVAV)的鸡血清、自然感染鸡血清及 IBD,ND 和 MD 病鸡血清,证明其具有较高特异性.通过对鸡实验感染 AVAV 后不同时期的检测表明.间接 ELISA 可在感染后6天检出血清特异性抗体,且不同时期检出率均高于 AGID 法,并可在2小时内报告试验结果.适用于 AVAV 抗体的常规检测.用该法对来自南京、海宁、长春等地鸡场的162份血清进行检测,阳性率为10.5%.     

基于禽流感NS1蛋白ELISA诊断方法的建立及临床应用

本研究利用体外表达获得的H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白包被ELISA板,建立鉴别诊断方法,对111份健康非免疫鸡血清及456份待检禽流感灭活疫苗免疫鸡血清进行检测发现,检测健康非免疫鸡血清的阴性率为100%,检测禽流感灭活疫苗免疫鸡血清的阴性率达到94%（429/456）;检测62份禽流感病毒感染鸡血清,有55份呈阳性反应,敏感性为88.7%（55/62）;进行NS1抗体消长规律试验,显示攻毒后第7天开始部分鸡血清NS1抗体水平上升,至14～21 d抗体水平达最高峰。     

鸡产蛋下降综合症病毒快速纯化及其抗血清制备

为研制鸡产蛋下降综合症病毒（ EDS-76）检测用标准抗原及标准多抗血清,以EDS-76国际通用毒株AV-127株为抗原,进行了EDS-76病毒抗原纯化及多抗血清制备。研究表明,经氯仿抽提,并经PEG浓缩处理病毒的尿囊液可获得良好的纯化效果,纯化病毒背景干净,血凝效价达19Log2。以此研制出的鸡抗 EDS-76多抗血清血凝抑制效价达13Log2,间接免疫荧光效价达1∶2000,Western-blot试验分析表明该多抗血清可以识别两个分子大小在50 kD至85 kD之间的蛋白抗原,HI及IFA 试验发现所制备的特异性,多抗血清与12种常见禽病病原（ NDV、AIV-A、ALV-J、ALV、GPV、REV、MDV、IBV、CAV、IBDV、TMUV、REOV）均不反应。本研究建立的快速简便的EDS-76病毒纯化方法以及获得的抗EDS-76多抗血清,为进一步研制EDS-76标准抗原以及标准多抗血清提供了有效的方法与材料。     

ELISA检测鸡新城疫病毒特异性IgM抗体的研究

以新城疫病毒单克隆抗体包被板,用10％小牛血清-PBS封闭后,捕获尿囊液中的新城疫病毒作固相抗原.在此板上应用酶标抗鸡IgM单克隆抗体进行间接ELISA试验检侧鸡血清中新城疫病毒的特异性IgM抗体.试验证明该方法特异性强、敏惑性高.兔抗新城疫病毒阳性血清可特异性阻断反应,将新城疫病IgM阳性血清用2-ME处理可使ELISA反应呈阴性,与禽源多杀性巴氏杆菌鸡IgM阳性血清、鸡传染性支气管炎病毒IgM阳性血清无交叉反应.该试验可检测到La Sota免疫后3天鸡血清中的特异性IgM,对鸡新城疫病毒IgM阳性血清的检测效价可达1:320以上,并可检测到临床新城疫病鸡血清中的特异性IgM抗体.     

缓释复方免疫增强剂对四种鸡病疫苗免疫增强效果研究

鸡新城疫（ND）、传染性支气管炎（IB）、传染性法氏囊病（IBD）、减蛋综合征（EDS-76）是由各自病毒引起的鸡的传染病,在养鸡业中比较常见和多发,严重威胁着养鸡业的健康发展,生产中主要应用疫苗接种进行预防。     

产蛋下降综合症的血清学调查

应用微量血凝抑制试验(MHI).对20个鸡场482份抽样血清进行了产蛋下降综合症(EDS-76)的血清学调查.结果,阳性279份,阳性率为57.9%,并对不同周龄、不同品种及不同性别的鸡进行了检测.     

鸡传染性支气管炎病毒血凝抑制试验研究

用A型魏氏梭菌滤液处理鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株,使其产生血凝性,成功建立IBV血凝抑制试验方法(IBV-HI).血凝效价为1:256～1:1024.抗原在2～8℃的保存期至少为5个月.用该抗原对IBV标准阳性血清、SPF鸡血清、其它鸡病标准阳性血清以及含M41株病毒的灭活苗免疫的鸡血清进行检测,证明IBV-HI试验具有很好的特异性.结果表明,该方法简便、快速、特异性强,可用于疫苗质量控制和疫苗免疫效力测定.     

马立克氏病病鸡血清蛋白成份分析

鸡马立克氏病是疱疹病毒引起的一种淋巴组织增生性疾病.目前对本病的诊断依赖于临床检查、病理检查、病毒分离及病毒抗原、抗体检测等。本试验对病鸡血清进行了电泳分析,力求为研究该病的发病机制提供科学依据.材料与方法一、试验鸡:长春某鸡场健康鸡31只,羽囊琼脂扩散检查为阴性;马立克氏病鸡31只,羽囊琼脂扩散检查均为