田东县兽医实验室管理体系运行体会

田东县动物疫病预防控制中心兽医实验室(以下简称中心实验室)2013年11月通过广西壮族自治区动物疫病预防控制中心兽医实验室(以下简称区实验室)考核验收,2014年1月取得兽医实验室考核合格证,具备承担动物疫病诊断、监测和检测等任务的资格。实验室现有技术人员9名,其中高级职称3人,中级职称6人。     

2019年柳州市县(区)兽医实验室检测能力比对实验结果的分析报告

为贯彻落实《兽医系统实验室考核管理办法》和《农业农村部办公厅关于做好2019年兽医实验室检测能力比对工作的通知》(桂农厅办函[2019]124号文)的要求,我中心于2019年8月6日至10日组织了我市5个兽医系统实验室(2019年三江实验室通过了自治区验证考核未参加本市实验室能力比对实验)开展检测能力比对工作,现将检测能力比对实验结果的分析如下。     

雄蚕生丝的热学性能研究

丝茧育生产正在逐步推广专养雄蚕的品种,研究雄蚕生丝的热学性能有助于更加科学合理地开发利用高品位的雄蚕生丝。以不同试验点雄蚕专用品种生产的生丝和普通家蚕品种生产的生丝为材料,通过差示扫描量热法(DSC)、微商热重法(DTG)、静态热机械分析(TMA)、动态热机械分析(DMA)等多种热力学分析方法,比较2种生丝的热性状。结果表明:雄蚕生丝的热分解温度约为316℃,略高于普通生丝(312℃);雄蚕生丝的热分解温度区间比普通生丝窄5~7℃,且玻璃化转变温度也较高,说明雄蚕生丝的热稳定性较好;雄蚕生丝经热分解反应后最终的质量损失率较普通生丝低,即雄蚕生丝的热分解残余量较多。依据检测结果认为:雄蚕生丝的储能模量高,刚性好,不易发生形变,并且损耗模量高,损耗角正切值高,损耗因子大,阻尼性能好。     

牛白血病前病毒Taqman荧光PCR检测方法的建立

设计并合成荧光引物,建立了Taqman荧光PCR体系,可快速检测全血样品中的牛白血病前病毒DNA。所建立的荧光PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸,而对牛病毒性腹泻—粘膜病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)以及羊胎肾细胞(FLK)、牛布鲁氏菌扩增均呈阴性反应,对pBST-pol重组质粒的检测敏感性可达0.32拷贝。重复性实验的Ct值变异系数介于0.67%~1.16%之间,稳定性实验的Ct值变异系数为3.14%。采用建立的Taqman荧光PCR体系和OIE推荐的套式PCR对94份临床样品进行检测,两者定性符合率达到97.87%。     

木瓜蛋白酶用于鲜茧缫丝脱胶的工艺试验

为了实施绿色环保的鲜茧缫丝工艺,在鲜茧缫丝中采用木瓜蛋白酶进行脱胶处理,并建立基本的脱胶工艺技术,以脱胶率、解舒率和茧丝单纤维断裂强力作为考核指标,通过单因素试验研究脱胶工艺中木瓜蛋白酶用量、脱胶时间、脱胶温度、脱胶液p H值对鲜茧脱胶效果、缫丝性能和茧丝强力的影响。结果表明,上述工艺因素对鲜茧脱胶效果均有明显影响,确定用木瓜蛋白酶对鲜茧脱胶的工艺条件为:脱胶温度35℃,脱胶时间2 h,酶液质量浓度4 g/L,脱胶液p H值7.0。鲜茧在此工艺条件下的平均脱胶率为23.42%,平均解舒率达到82.4%,单根生丝纤维平均断裂强力达到12.52 c N。红外光谱表征鲜茧用木瓜蛋白酶脱胶后缫制的生丝与干茧用传统缫丝方法缫制的生丝在结构上没有明显的差异,热重分析2种茧丝样品的热稳定性也没有明显差异,但扫描电子显微镜下观察鲜茧缫制生丝的表面较光滑。建立的木瓜蛋白酶脱胶工艺技术可以用于鲜茧缫丝。     

产气荚膜梭菌肠毒素cpe阳性双重荧光定量PCR方法的建立及应用

为了建立一种双重荧光定量PCR方法检测肠毒素cpe阳性的产气荚膜梭菌,试验通过对部分发表在NCBI中的产气荚膜梭菌序列进行比对,找到其α毒素和肠毒素cpe相对保守的序列,根据保守序列设计合成2对引物和1对探针,以构建的含有α毒素和cpe序列的克隆载体作为标准品,进行系列条件优化及特异性、灵敏性和重复性试验。结果表明:该方法具有很好的特异性和重复性,外毒素cpa的灵敏度为1.5×10~(-2)ng/m L,且在1.5×104~1.5×10~(-2)ng/m L内Ct值与阳性质粒浓度的对数值呈很好的线性关系,R2值达到0.991;肠毒素cpe的灵敏度为1.8×10~(-2)ng/m L,且在1.8×103~1.8×10~(-2)ng/m L内Ct值与阳性质粒浓度的对数值呈很好的线性关系,R2值达到0.996;该方法对大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌等细菌核苷酸无交叉反应;批间和批内重复性良好;同时对实验室保存的临床分离的疑似菌株用建立的荧光定量方法进行检测,结果临床分离菌株均为A型产气荚膜梭菌。说明该双重荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性强和重复性好。     

加入WTO以后影响中国生丝出口因素的实证研究

为了深入理解入世以来中国生丝出口贸易的现状并对出口贸易总额波动进行合理的解释,分析了中国加入WTO以后影响生丝出口的诸多因素。通过Gmnger因果关系检验发现,对中国生丝出口贸易总额起到决定性影响的是国际市场规模和国内生丝的产量两个因素：中国生丝的出口存在国际市场依赖的现象,且生丝出口并不注重整体质量。进一步在Granger因果关系检验的基础上,通过各个变量间的相关性分析,发现中国生丝的出口贸易总额受到价格和质量的作用并不明显,生丝的产量和国际市场份额则起到主导作用。鉴于此,分别从国际市场依赖性强和品质价格依赖性弱的角度提出了一些建议。     

浅谈兽医实验室样品管理

2009年8月1日,农业部发布《兽医系统实验室考核管理办法》,办法规定“国家实行兽医实验室考核制度.兽医实验室经考核合格并取得兽医实验室考核合格证的,方可承担动物疫病诊断、监测和检测等任务.”“本办法所称兽医实验室是指隶属于各级兽医主管部门,并承担动物疫病诊断、监测和检测等任务的国家级区域兽医实验室、省级兽医实验室、地(市)级兽医实验室和县(市)级兽医实验室.”也就是说,河南省各级动物疫病预防控制机构(以下简称疫控机构)的实验室就是办法中所说的兽医实验室.     

2018—2022年云南省兽医系统实验室检测能力比对

为全面了解云南省兽医系统实验室检测能力和水平,提高各级兽医实验室监测预警和风险评估能力,2018—2022年云南省动物疫病预防控制中心组织全省16个州(市)级动物疫病预防控制中心实验室(简称州市级实验室)、30个国家动物疫情测报站/边境动物疫情监测站实验室(简称测报站/监测站)、79个已通过兽医系统实验室考核的县(区)级兽医实验室(简称县区级实验室)开展了检测能力比对工作。11个检测项目均采用国家标准进行比对。结果显示:各年份实验室正确率为52.27%～70.97%,样品正确率为94.04%～96.06%;连续5年全部正确的实验室有7个,此外还有10个实验室连续3年全部正确。结果表明,全省大部分兽医系统实验室具备了相应的检测能力和水平,且整体水平呈上升趋势,能够为云南省动物疫情监测预警和风险评估提供有力支撑,但部分县区级实验室及个别测报站/监测站仍有不足,尤其在HA-HI检测项目上还有待进一步提高。建议继续加强实验室管理,强化实验技能培训,提升检测人员的能力和水平,提高检测结果的准确性,积极支持有条件的测报站/监测站、县区级实验室开展分子生物学检测,以进一步提高全省兽医系统实验室检测水...     

大熊猫IgG双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立

为建立大熊猫IgG的定量双抗体夹心ELISA检测方法(DAS-ELISA),本研究纯化了大熊猫血清中IgG,并将其作为免疫原分别免疫家兔和豚鼠,制备兔抗和豚鼠抗大熊猫IgG高免血清,经优化DAS-ELISA反应条件,建立了以纯化的兔抗大熊猫IgG作为捕获抗体和豚鼠抗大熊猫IgG高免血清作为检测大熊猫IgG的定量DAS-ELISA 检测方法.该方法能检测1.5625μg/mL～100 μg/mL的大熊猫IgG,大熊猫IgG含量(Y)与DAS-ELISA检测OD值(X)之间呈良好的线性关系,Y=4.7186X+0.044,相关系数为0.9911,该方法特异性强,稳定性好,能用于大熊猫IgG的定量检测.     

牛诺如病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×10~2～2.24×10~8拷贝·μL~(-1)线性关系良好,相关系数R~2=0.997,扩增效率为98.44%;该方法可特异性检出BNoV,对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性;最低检测限为22.4拷贝·μL~(-1);批间和批内的变异系数均小于2%,重复性好。对2017年9月—2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31%(25/221),采样场阳性率为92.86%(13/14)。本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段。     

不同类型高寒草地群落物种特征和均匀度的重要性

通过对不同类型草地生产力与物种特征(重要值)、均匀度之间的关系研究,结果表明:群落物种特征(重要值)与生产力之间呈极显著的线性关系;物种均匀度与生产力之间呈负线性关系,但差异不显著.在自然生态系统中,由于物种间的相互作用(资源的竞争利用),物种数目在不同类型草地群落的物种组成上的不均匀分布,导致不同生境条件下均匀度的异同.     

警犬追踪作业延时与迹线长短的影响试验分析

一、材料与方法 (一)试验犬的选择 试验犬为2019～2020 年通过公安部昆明警犬基地培训5 个月且考核合格的刑侦综合犬,共计20 头,月龄为10 个月至12 个月. (二)试验设备器材准备 秒表、嗅源罐、纱布、剪刀、塑料密封袋、一次性手套、一次性脚套、镊子、上海楷久"工作犬无线声像监控作战与救援指挥系统"(以下简称...     

农业部蜂产品质量监督检验测试中心(北京)通过“2+1”复评审和扩项评审

正2018年3月2日农业部蜂产品质量监督检验测试中心(北京)(以下简称"中心")通过了农产品质量安全检测机构审查、机构考核和检验机构资质认定"2+1"现场复评审和扩项评审。按照农业部相关要求,国家认监委农业评审组通过资料审查和现场项目考核,评审组认为,中心符合《检验检测机构资质认定评审准则》、《农产品质量安全检测机构考核评审细则》和《农业部产品质量监督检验测     

龙根犬业:在2021年度上海海关口岸监管工作犬资质考核中获佳绩

2021年11月25日,上海海关组织开展了2021年度口岸监管工作犬资质考核,合计有60头犬参加了考核,33头顺利通过,其中,中国工作犬管理协会会员单位中保华安龙根特种犬公司(以下简称:龙根犬业)也参加了此次考核,龙根犬业共有22头参赛犬通过了考核.     

杜仲叶中绿原酸含量测定方法的建立

用紫外分光光度法与高效液相色谱法相结合,建立一种新的、简单快捷的杜仲液提取液绿原酸检测方法-紫外分光光度法直接测定杜仲叶提取液绿原酸含量。采用方法:(1)绘制绿原酸标准曲线:分别绘制紫外分光光度法、高效液相色谱法的绿原酸标准曲线并考察每种检测方法的线性关系;(2)研究两种检测方法是否存在关系:探索杜仲叶提取液中绿原酸吸光度值与对应峰面积是否存在关系。结果:(1)紫外分光光度法标准曲线方程:y=22.6442x-0.2039,r=0.9999(n=6)。绿原酸浓度在5~40μg/m L范围内呈良好线性关系;高效液相色谱法的标准曲线方程:y=0.0653x+0.6412,r=0.9994(n=6)。绿原酸浓度在5~40μg/m L范围内呈良好线性关系;(2)杜仲叶提取液中绿原酸吸光度值(紫外分光光度法)和对应峰面积(高效液相色谱法)存在关系,关系方程为:y=228.66x-14.538,r=0.9995(n=6)。结论:本试验建立了一种新的绿原酸检测方法-紫外分光光度法直接测定杜仲叶提取液绿原酸含量。     

仅需20分钟!普泰生物非洲猪瘟诊断创中国速度

近日,中国动物疫病预防控制中心公布全国非洲猪瘟现场快速检测试剂比对结果,由洛阳普泰生物技术有限公司国内首创的非洲猪瘟病毒荧光热对流PCR(简称cPCR)快速检测试剂盒及便携式cPCR扩增仪顺利通过比对和专家评审,批准应用于非洲猪瘟防控,为我国非洲猪瘟病毒现场即时准确诊断再添利器!     

PRS-LS法鉴别市售纯牛乳制品的热处理方式

本实验通过借鉴AOAC的蛋白-还原物质(PRS)测定法以及国标GB 4801-84的染料结合赖氨酸(DBL)法,对不同热处理的纯牛乳制品及其在货架期内的PRS值和赖氨酸标准(LS)值进行检测研究与分析,建立了一套鉴别纯牛乳制品热处理方式的检测方法,即PRS-LS法.应用该方法检测纯牛乳制品热处理方式的流程有两条,经样品验证,该方法可靠易行、便于掌握、实用性强,适于在国内推广应用.     

新城疫病毒荧光RT-PCR检测方法的建立及应用

经对部分发表在NCBI里的新城疫病毒序列进行比对,在其F基因上找到1段相对保守序列,根据保守序列设计1对引物和1条TaqMan探针,以新城疫Ⅰ系疫苗株(Mukteswar株)作为标准品,通过系列条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了一种灵敏度高、特异性强和重复性好的荧光RT-PCR检测新城疫病毒的方法.该方法能检测最低初始病毒浓度为102.2 ELD50/mL,且在108.2～102.2 ELD50/mL内Ct值与病毒浓度的对数值(lgELD50/mi)呈很好的线性关系,R2达到0.997 5;该方法对禽流感、禽痘病毒和禽大肠杆菌等禽病病原核酸无交叉反应;批间和批内重复性良好;临床样品检测中荧光RT-PCR与鸡胚分毒的符合率、诊断灵敏度和诊断特异性分别为98.5％,50.0％和98.4％.因此,荧光RT-PCR检测方法的建立为新城疫病毒检测提供了一种快速有效的方法,为新城疫病毒的研究奠定了一定的基础.     

农业部种畜品质监督检验测试中心通过“2+1”认证复审

日前,农业部种畜品质监督检验测试中心顺利通过了由国家认监委和农业部组织的实验室资质认定、机构审查认可和机构考核认证(以下简称"2+1"认证)复查现场评审。农业部质量安全管理局检测处副处长杨扬和全国畜牧总站牧业发展处处长王志刚出席评审会议。农业部种畜品质监督检验测试中心(以下简称"中心")于2005年9月通过了国家计量认证和农业部机构认可,2009年9月完成第一次"2+1"认证复核审查,今年9月完成第二次"2+1"认证复审,以及"遗传缺陷基因检测"和"纯血马DNA亲子鉴定"的扩项评审。