小鹅瘟病原分离及鉴定

2007年3月,某地区雏鹅出现下痢、口吐黏液、采食量减少等症状,个别鹅出现转脖、抽搐的症状.发病后的前4d曾经用庆大霉素治疗,但未见效果.     

小鹅瘟病原分离及鉴定

2007年3月,某地区雏鹅出现下痢、口吐黏液、采食量减少等症状,个别鹅出现转脖、抽搐的症状。发病后的前4d曾经用庆大霉素治疗，但未见效果。发病鹅肠浆膜呈橘黄色，小肠中后段膨大增粗，肠壁变薄，有凝固性栓子，肝脏肿大，胆囊明显膨大，心肌颜色变淡，肾脏肿胀。     

小鹅瘟病毒分离与初步鉴定

取死于具有小鹅瘟典型症状的 7日龄吉林白鹅脾脏 ,制成乳剂 ,接种于未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产种蛋的 12日龄鹅胚尿囊腔。结果当盲传至第 3代 ,鹅胚死亡 ,电镜负染尿囊液观察到细小病毒样粒子。雏鹅接种试验结果表明 ,试验组雏鹅表现出小鹅瘟临床症状和剖检特征。由此证明 ,该雏鹅死于小鹅瘟     

鸡抗小鹅瘟病毒卵黄抗体的研制与应用

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒(GPV)感染引起的雏鹅的一种急性传染病。近年来,在养鹅生产中,采用抗血清或卵黄抗体给雏鹅注射进行被动免疫预防本病,取得了较好的防治效果。抗血清或鹅源卵黄抗体生产的成本高、产量低,尚不能满足养鹅业快速发展的需求。为此,试制鸡抗小鹅卵黄抗体(IgY)并进行了防治效果试验和现地应用效果观察。1材料与方法1.1材料海兰蛋鸡40只,由黑龙江省生物制品一厂监察室试验动物室提供;2日龄雏鹅40只,购于哈尔滨市道里区某孵化场,供试验用。GPV免疫用抗原、GPV琼扩抗原及阳性血清和抗小鹅瘟鹅源血清琼扩抗体(效价416),均由…     

鸡抗小鹅瘟精致高免蛋黄抗体的研制

利用发生小鹅瘟死亡的鹅的病料分离病毒,经处理后制备抗原,以制备的小鹅瘟灭活油乳剂抗原对试验鸡颈部皮下注射0.5ml/只;2周后加倍量进行强化免疫;间隔2周后用灭活油乳剂抗原再次强化免疫1次,颈部皮下注射2.0ml/只;以后间隔8周进行1次强化免疫,每次颈部皮下注射2.0ml/只;用琼扩方法检测萃提蛋黄上清液中抗小鹅瘟特异抗体效价,直到抗体效价达到1：64以上即可集蛋,用于制备琼扩抗体效价达到1：32及以上小鹅瘟蛋黄抗体;并对抗体进行无菌检验、安全试验、效力试验、临床治疗试验等,效果明显。     

小鹅瘟病毒地方株的分离与鉴定

对安徽省六安地区疑似小鹅瘟病死雏鹅进行剖检,对具有典型症状和病变的病死雏鹅脏器进行病毒的分离培养.用接种鹅胚的病毒增殖法,从病死雏鹩的脏器中分离到一株病毒.通过鹩胚致病性试验、鹅胚中和试验、雏鹅感染试验和琼脂扩散试验,初步鉴定所分离的毒株为小鹅瘟病毒,且该病毒具有较强的致病性.     

小鹅瘟的诊断及病毒分离鉴定

小鹅瘟又称鹅细小病毒病，是由鹅细小病毒（Goose parvovirus，GPV）引起的鹅的一种急性、高度接触性、败血性传染病，主要侵害出壳后4-20日龄的雏鹅和雏番鸭，本病的特征性病变是小肠空肠和回肠部分呈急性卡他性、纤维素性坏死性肠炎。根据调查分析情况看，它流行广，传播快，危害严重，10日龄以内雏鹅发病后，死亡率可达100％。近些年，该病已经给我市部分饲养户造成较为严重的经济损失。为此本试验对虎林市月牙湖养殖场死亡的疑似小鹅瘟雏鹅进行了流行病学调查、临床症状和病理学观察。同时对病死雏鹅病料进行了鹅细小病毒的分离鉴定及免疫保护试验。应用琼脂扩散和免疫荧光抗体实验方法对小鹅瘟进行了快速诊断。病毒分离鉴定及诊断结果证实该养殖场发生的雏鹅死亡是由小鹅瘟病毒感染造成。     

小鹅瘟卵黄抗体的理化特性研究

对实验室试制的3批小鹅瘟卵黄抗体(lg Y)进行了理化性质测定。结果表明,电泳出现2条电泳带(67 k D和22 k D左右),证明提取的Ig Y纯度较高;Ig Y在2.0 mg/m L的胃蛋白酶以及2.5 mg/m L的胰蛋白酶环境下,37℃作用3h,其抗体效价均无明显下降;Ig Y在60℃作用30min,其抗体效价也无明显下降;在p H4~11时稳定;反复冻融5次,抗体效价稳定。该研究为小鹅瘟卵黄抗体的使用奠定基础。     

小鹅瘟病毒贵州株的分离与鉴定

采用鹅胚接种、动物感染、电镜观察及病原核酸与结构蛋白分析等方法对贵州省某养殖场疑似小鹅瘟病例进行了病原的分离与鉴定.结果:该病例组织病料可使鹅胚呈现特征性病变,雏鹅人工感染后能表现出与自然感染病例相似的症状;电镜下病毒粒子直径为20～25 nm,无囊膜,具有典型细小病毒特征;经1%琼脂糖凝胶电泳,病毒核酸扩增片段约为5100 bp;经SDS-PAGE发现,病毒结构蛋白由3条多肽组成,即VP1、VP2、VP3,分子量依次为88、68、57 ku.实验成功分离得到了一株贵州小鹅瘟病毒流行毒株.     

抗小鹅瘟卵黄抗体脱脂方法研究

通过对产蛋母鸡免疫接种小鹅瘟JS1株油乳荆灭活苗,从而获得含高效价小鹅瘟病毒抗体的鸡蛋.采用聚乙二醇6000和泊洛沙姆进行脱脂试验,并优化脱脂条件.结果表明,聚乙二醇6000和泊洛沙姆对鸡卵黄具有良好的脱脂作用,其中聚乙二醇6000价格低廉,更适合大规模工业化生产.     

一种新型鸭瘟病原的分离鉴定及其特性

从2000年起．山东省的潍坊、临朐、昌乐、昌邑、沂源等饲养肉鸭集中的地区发生一种同鸭瘟症状、剖检变化相似的疾病．但该病主要侵害1月龄以下的雏鸭．成年鸭发病率较低。从自然感染该病典型病死鸭脏器中获得1株病毒，病毒粒子直径80～200nm，呈圆形．有囊膜。进一步试验鉴定，该病毒核酸类型为DNA,ELD50为10^-3.46／0．2mL，对樱桃谷鸭胚、番鸭胚、麻鸭胚及SPF鸡胚的致死率分别为100％、90％、20%和0％。该病毒对氯仿、乙醚、酸碱处理敏感，56℃ 30min能使病毒灭活，该病毒无血凝活性．不能凝集“O”型人、鸡、鸭、鹅、猪、小鼠、豚鼠、绵羊等的红细胞。血清学试验表明，该病毒与鸭肝炎病毒阳性血清、雏番鸭细小病毒阳性血清、小鹅瘟阳性血清之间无中和作用，而能部分中和鸭瘟病毒阳性血清，表明该分离株与传统鸭瘟病毒呈部分相关性。初步确定该病毒为疱疹病毒属疱疹病毒科成员。鉴于该病用传统的鸭瘟疫苗不能预防．故现暂定名为“新型鸭瘟”。     

小鹅瘟卵黄抗体效价与攻毒保护相关性试验

将实验室试制的3批小鹅瘟卵黄抗体,琼扩效价为1:16,分别稀释成琼扩效价为1:4、1:8,分别按每只0.5 m L接种3日龄易感雏鹅,24 h后,试验组与对照组攻击小鹅瘟病毒。结果显示:雏鹅注射相同剂量不同琼扩效价的卵黄抗体,随着卵黄抗体琼扩效价的升高,对雏鹅的保护率也随之升高。     

利用宏病毒组学对鹅痛风病原的鉴定

为确定2020年江苏盐城一鹅场雏鹅痛风的病原,试验对病料样品进行宏病毒组测序,通过比对分析原始数据发现疑似病原;通过从头组装获得其全基因组序列,并进行相似性比对和遗传进化分析;通过对疑似病毒的分离、鉴定和动物回归试验进行验证。宏病毒组学测序结果显示,在获得的全部599 733条原始读长(reads)中,病毒reads有278 593条,其中鹅星状病毒序列占95%,未发现其他疑似病毒序列;经从头组装获得了一条完整的鹅星状病毒全基因组序列,命名为YC20,该病毒基因组全长7 137 nt,GenBank登录号为:MW536497,基因组结构及特征与其他星状病毒相同。全基因组序列相似性比对结果显示,YC20与新型鹅星状病毒SD01相似性最高,达98.2%;遗传进化分析结果显示,YC20与其他新型鹅星状病毒在同一分支,属于新型鹅星状病毒。禽胚分离结果显示,用鹅胚进行病原分离时,前3代次未出现死亡,第5代次后,可对鹅胚100%致死,而用SPF鸡胚或SPF鸭胚分离病原时,均未出现病变或死亡,PCR检测亦为阴性;纯化的尿囊液经负染后,电镜下可见大小约25 nm的病毒粒子。雏鹅回归试验结果显示,YC20接种3日龄雏鹅后,第6~8天出现死亡高峰期,死亡率为58.3%,剖检死亡鹅可见心脏、肝脏表面覆盖一层白色包膜,膝关节有大量白色颗粒样沉淀,肾脏充血肿大。以上结果说明,该鹅场痛风的病原为新型鹅星状病毒。本研究将宏病毒组学与传统的病毒分离鉴定技术相结合,证实了鹅痛风的病原,对病原的鉴定和研究具有指导意义。     

疫苗免疫及抗体注射预防雏鹅小鹅瘟效果比较

为更好地控制小鹅瘟的发生,探究疫苗免疫及抗体注射对雏鹅小鹅瘟的预防效果。将200只1日龄试验鹅随机分成4组,其中A组为疫苗组,B组为卵黄抗体+疫苗组,C组为卵黄抗体组,D组为对照组。对试验鹅分别于1日龄、7日龄进行注射,并在首免后第7、14、21及28天检测小鹅瘟抗体。结果显示:在第7天,B组和C组的免疫抗体平均效价均高于A组;在第14天,B组抗体平均效价出现明显下降,均低于A组和C组。在第21～28天,A组和B组均保持较高的抗体水平,而C组抗体效价下降较快。结果提示,在没有母源抗体保护的情况下,对于雏鹅小鹅瘟多发高发的地区和场群,建议1日龄、7日龄均注射卵黄抗体加以预防;对于雏鹅发病日龄明显增加,超过20日龄仍有发病的地区和场群,建议1日龄、7日龄均免疫小鹅瘟疫苗加以防控。     

小鹅瘟暴发病例及其诊断

小鹅瘟(Gosling Plague)是由小鹅瘟病毒引起雏鹅的一种急性传染病,对养鹅业威胁极大。本病在广州、湖北一带流行,2007年8月至9月,驻凉山某部副业组所养雏鹅暴发了一种急性传染病,经初步诊断为小鹅瘟。     

小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒组装和初步应用

本试验旨在研制小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据小鹅瘟和鹅病毒性肠炎基因序列,设计合成一对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性和保存期进行研究,之后进行临床扩大试验。该二联PCR诊断试剂盒能扩增出预期的小鹅瘟375 bp核酸片段和鹅病毒性肠炎223 bp核酸片段,与鸭瘟病毒、鹅副黏病毒无交叉反应;最低能检测到小鹅瘟病毒10⁴ ELD₅₀/mL,雏鹅新型病毒性肠炎病毒2.5×10^-1ELD₅₀;不同批次的试剂盒对同一样品检测结果一致;常温下至少可保存5个月;临床应用效果显著。该二联PCR检测试剂盒能够对小鹅瘟和雏鹅病毒性肠炎早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。