高产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及产酶特性研究

为了从腐殖质土壤中筛选得到高产纤维素酶菌株,本试验进行了产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及其产酶特性研究。首先用羧甲基纤维素钠(CMA-Na)培养基初步分离产纤维素酶菌株,再经过酶活复筛得到一株高产纤维素酶菌株B17。经过形态学和16S rDNA测序鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),并对其发酵产酶条件和酶学性质进行初步研究。试验结果表明,菌株B17的最佳发酵条件为:培养时间3 d、发酵温度35℃、初始pH为6.0,该条件下测得CMC酶活达85.48 U/mL、FPA酶活达59.85 U/mL。酶学性质研究表明:菌株所产纤维素酶最适反应条件为温度50℃、pH为6.0,且具在30～60℃、pH为4.0～7.0范围均具有较高酶活。以上结果表明,本研究所得菌株B17具有较高的开发价值,可应用于农作物秸秆饲料的生产。     

饲用木聚糖酶菌株的筛选及鉴定

利用刚果红透明圈法,从采集的土样中筛选分离一株产木聚糖酶的菌株,根据其形态学和生理生化特征,结合16 SrDNA分子水平分析,鉴定该菌为短小芽孢杆菌。摇瓶发酵粗酶液的性质测定表明,该菌株酶活力可达132.53 IU/mL。     

鸡源芽孢益生菌的筛选及JM-11菌株的鉴定

为了筛选对鸡腹泻有治疗作用的益生菌,试验利用琼脂扩散法,以大肠杆菌菌株为病源指示菌,在鸡肠道内分离得到具有较强抑菌活性的颉颃细菌70株。利用发酵液平板打孔对其中24株进行复筛,得到1株颉颃活性较高的菌株JM-11。对该菌株进行形态特征的观察和生理生化试验,结合16SrDNA序列分析,并与相应种和属的菌株进行对比,表明JM-11与芽孢杆菌相应性状相近。用BLAST软件在Genbank数据库中对JM-11菌株的序列进行比对,经分析JM-11菌株与枯草芽孢杆菌的相似性水平达到100%,且二者在所构建的系统发育树上处于同一个分支。最终鉴定JM-11菌株为枯草芽孢杆菌。     

一株高产α-淀粉酶的地衣芽孢杆菌的筛选及鉴定

芽孢杆菌属的一些菌株对动物和人类具有广泛的作用而被认为是益生菌,其中地衣芽孢杆菌是芽孢杆菌中较具有应用潜力的菌种之一.本文从健康的鸡、鸭、鹅、马、牛、羊粪便及周边土壤中分离出12株芽孢杆菌,并通过产总淀粉酶活性和α-淀粉酶活性筛选出6株产淀粉酶的芽孢杆菌,通过形态学分析、生理生化分析及分子鉴定,确定产酶性能最优的1株芽...     

产淀粉酶菌株的筛选鉴定及酶学特性研究

试验旨在开发饲料用淀粉酶制剂,提高饲料利用率并探索新型非常规饲料资源。研究利用平板法从土壤中筛选产淀粉酶细菌,经形态学和分子生物学法对淀粉酶细菌进行鉴定,并分析其生长特点及酶学特性。结果表明,该产淀粉酶细菌为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),该菌所产淀粉酶的最适反应条件为50℃、pH值7.0,且在中低温以及中性和弱碱性条件下稳定性较好,Na^(+)、K^(+)和Ca^(2+)能够激活酶活力,而Mn^(2+)和Zn^(2+)能够抑制酶活力,该菌在生长稳定期产淀粉酶活力最高,可在发酵14~16 h对淀粉酶进行收获。研究表明,试验菌株所产淀粉酶可以在动物肠道中发挥一定的作用,可用于开发新型发酵饲料及酶制剂产品,在饲料行业具有较广阔的应用前景。     

鸡肠道芽孢杆菌的分离鉴定及产蛋白菌株的筛选

本实验从鸡肠道分离出50株菌种,通过对菌种菌落培养特性、形态观察、生理生化实验,初步鉴定出8株为芽孢杆菌。通过产蛋白菌株的筛选试验筛选出1株能够分泌蛋白的芽孢杆菌,该菌株可望成为外源蛋白高效分泌表达的宿主。     

高产γ-氨基丁酸益生菌的筛选

为了筛选得到高产γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid, GABA)菌株,本试验以从云南不同地区食品中分离出的27株菌为材料,通过菌株复壮、革兰氏染色形态学观察、过氧化氢酶实验、单菌株发酵及高效液相色谱法检测GABA,筛选其中高产菌株进行种属鉴定并测定其发酵性能。结果表明,27株菌中筛选得到的LSR-L-L4为高产GABA菌株,其发酵液中GABA检测值为490.59 mg/L;经16S rDNA基因序列分析鉴定其为德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus),最适发酵温度为42℃;3～12代菌株凝乳时间4.5～5h,酸度52～56°T,120h极限酸度118～122°T;生长曲线稳定期OD₆₀₀=1.01～1.11,24h未见衰退;活菌数1.20×10⁹～1.50×10⁹cfu/mL;双乙酰含量10.32～11.50 mg/L;γ-氨基丁酸产值467.58～490.59 mg/L。LSRL-L4高产γ-氨基丁酸,兼具优质发酵特性,为...     

高产中性蛋白酶芽孢杆菌的筛选鉴定及酶学性质研究

为了获得高产中性蛋白酶芽孢杆菌菌株,试验从不同环境样本中分离细菌并进行16S rDNA序列鉴定,利用酪蛋白琼脂培养基对产蛋白酶菌株进行初筛、福林酚法检测中性蛋白酶活性,结合形态学和分子生物学鉴定对高产中性蛋白酶芽孢杆菌菌株进行分类鉴定,通过对培养时间、温度和pH值的调节,研究该菌株的酶学性质。结果表明：成功筛选出1株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)A1,该菌株具有较强产中性蛋白酶能力,中性蛋白酶活性为31.40 U/mL,所产中性蛋白酶的最适反应温度为50℃、最适pH值为7,在pH值=6～8时稳定性较好,对碱性环境有一定的耐受性,5.0 mmol/L的Ca²⁺和Mn²⁺对中性蛋白酶活性有显著促进作用(P<0.05),Zn²⁺和Fe²⁺对中性蛋白酶活性有抑制作用(P<0.05),Mg²⁺无明显作用。说明贝莱斯芽孢杆菌A1可以作为生产中性蛋白酶的备选菌株。     

产角蛋白酶菌株的筛选、鉴定和发酵特性的初步研究

通过酪蛋白平板初筛,以羽毛为唯一的碳源与氮源复筛,筛选出一株新型的高产角蛋白酶的菌株S6,根据其形态观测结果和生理生化指标的测定结果,初步鉴定其属于地衣芽孢杆菌属。以羽毛为底物对地衣芽孢杆菌S6的发酵特性初步研究发现,在72 h,地衣芽孢杆菌S6酶活性、可溶性蛋白量达到最大,分别为186.8 U/mL,160.87 μg/mL,表明在降解羽毛的过程中,其具有很好的开发前景。     

酒糟中高产纤维素酶菌株的筛选及鉴定

文章采用以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基,从酒糟中分离纯化出一株具有产纤维素酶能力的维氏芽孢杆菌(Bacillus velezensis strain) P-7.采用3,5-二硝基水杨酸法测定P-7的内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶活,并对其进行生理生化、形态学及分子生物学鉴定.结果 表明,编号为P-7的菌...     

产蛋白酶芽孢杆菌的筛选鉴定及酶学特性分析

为了分离筛选产蛋白酶芽孢杆菌,以开发新型饲料添加剂,本研究选取小鼠肠道内容物为样品,通过对样品进行预处理以及酪蛋白平板检测法分离筛选获得产蛋白酶芽孢杆菌,对该菌进行形态学和分子生物学鉴定并分析其生长规律、产酶规律以及所产蛋白酶的酶学特性。结果表明,经形态学和分子生物学鉴定该菌为特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis),其所产蛋白酶的最适反应条件为50℃,pH=8.0,具有一定的高温耐受性,在弱酸、中性和弱碱性条件下表现出一定的稳定性,Ca²⁺和Mn²⁺能够显著提高酶活(P<0.05),Zn²⁺、Mg²⁺、Cu²⁺和EDTA、尿素溶液对蛋白酶活力具有显著抑制作用(P<0.05),培养至16 h菌体量达到最大值,发酵22 h上清液中的蛋白酶活力达到最高值(57.77 U/mL)。该芽孢杆菌的成功筛选分离以及其所产蛋白酶的分析研究,为新型饲料添加剂的开发利用提供了物质基础。     

枯草芽孢杆菌的分离筛选

本文基于从秸秆垛底层土壤中分离枯草芽孢杆菌的目的,为发酵秸秆提供菌株,从陕西杨凌农村秸秆垛中采取底层土样并进行分离。分离出11株菌,经过形态特征、生理生化特征等方法从中分离初步鉴定了3株疑似菌株。经对液态发酵条件的优化,对3株疑似菌进行液态发酵试验,以粗蛋白和粗纤维含量为标准,筛选出一株发酵效果最好的菌株b-1进行了16SrDNA序列分析,最终鉴定b-1菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其同源性≥99%。     

构树青贮发酵菌株筛选及鉴定

本试验采取构树根际土壤、青贮池、腐败构树茎叶土壤、其他腐败树叶土壤等自然环境样品进行分离细菌,并通过纤维素酶筛选培养基、蛋白酶筛选培养基、单宁酶筛选培养基筛选构树青贮发酵菌株并对其进行鉴定,结果表明,通过培养基筛选生产蛋白酶菌,产纤维酶菌和产单宁酶菌,可明显提高构树中蛋白质含量,降低纤维素含量和单字含量。     

氨氮降解菌的分离、筛选及鉴定

家禽的规模化、集约化养殖产生了大量排泄物,这成为鸡舍内氨气的主要来源。氨气挥发前在粪便中的主要存在形式是NH4+-N,试验以硫酸铵为唯一氮源,从鸡粪便中筛选对氨氮具有高效降解性能的菌株,对其进行相关氨氮降解特性和体外抑制氨气试验。结果发现,C-2菌株能够高效降解氨氮,72 h时,C-2氨氮降解率为45.3%,且能够高效抑制鸡粪便氨气的释放。通过对其菌落形态、菌体特征、16S rDNA序列分析及生理生化试验结果,鉴定C-2菌株为枯草芽孢杆菌。本研究为以后在家禽粪便减排中的应用提供参考。     

产有机酸芽孢杆菌的筛选、鉴定及产芽孢条件优化

试验旨在筛选一株高产有机酸的芽孢杆菌,并对其芽孢形成条件进行优化。从实验室保藏的200株芽孢菌株中筛选能够使溴甲酚紫平板变黄的菌株。利用液相色谱对筛选所得的菌株发酵液中有机酸的种类、含量进行测定。根据目的菌株的形态特征和生理生化试验以及16S r DNA序列分析结果对菌株进行种属鉴定。利用单因素试验和正交试验结合的方法,考察不同的碳源、氮源、无机盐、p H值、培养时间、接种量对菌株芽孢形成的影响。结果表明,菌株R42-16发酵液中乙酸、乳酸的含量较高,分别为221、174μg/ml。经鉴定菌株R42-16为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amy-loliquefaciens)。本试验条件下,菌株R42-16的最佳培养基组成为:玉米粉1%、酵母浸粉2%、Mn SO4·H2O 0.01%、Ca Cl2·H2O 0.01%,培养基最佳初始条件为:发酵时间48 h、接种量4 ml、p H值6、装液量50 ml/250 ml。在此优化条件下,发酵液中菌株R42-16的活菌数达到3.19×109cfu/ml,芽孢形成率达到93.76%。     

土壤中产广谱抗菌肽菌株的筛选及鉴定

用双层平板法从土壤中分离到4株具有广谱抑菌活性的菌株,利用琼脂扩散法测定其对鼠伤寒沙门菌、大肠杆菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌的抑菌能力,筛选其中抑菌能力最强的菌株命名为JZ4。菌液上清分别经过盐析、透析或与蛋白酶作用后测定其抑菌能力,发现该抑菌物质中含有肽类物质。经16S r DNA序列比对,初步鉴定其为侧孢短芽孢杆菌。     

两株类炭疽菌株的鉴定

检验炭疽沉淀素血清特异性的两株类炭疽菌Ｃ４１－１和Ｃ４１－３，经培养特性和生化特性的鉴定与蜡状芽孢杆菌基本一致。这两个菌株应归为蜡状芽孢杆菌。     

亚硝酸盐降解芽孢杆菌的筛选鉴定及其降解效果研究

在贵州省都匀市雨花湖公园附近5～15厘米深土层的土壤和水域区泥底中采样,通过分离、筛选后得到了1株具有降亚硝酸盐(NO2-)优势的菌株且命名为Y2;经过测序及形态学等分析,判断Y2为Bacillus aryabhattai,即阿氏芽孢杆菌.实验分析显示该菌在养殖水样和模拟水样中7天后NO2-的降低率分别为24.3％、6...