番茄灰霉病拮抗芽孢杆菌LW-6-1的筛选、鉴定及抑菌活性研究

【目的】从福建、四川、陕西等地耕作土壤中筛选对番茄灰霉病有较强生防效果的拮抗芽孢杆菌。【方法】随机采集福建、四川、陕西等地耕作土壤样品30份,采用平板稀释法从中分离芽孢杆菌,以番茄灰霉病菌、稻瘟病菌、辣椒疫霉病菌、苹果轮纹病菌、小麦根腐病菌、棉花枯萎病菌为靶标菌筛选拮抗芽孢杆菌;检测拮抗芽孢杆菌菌株无菌发酵液对供试病原真菌菌丝生长、孢子萌发、菌丝形态的影响;通过形态学特征、生理生化特征及16SrDNA序列分析,对筛选出的拮抗菌株进行鉴定。【结果】从采集的30份土壤样品中分离得到273株芽孢杆菌,经病原真菌定向筛选后,得到1株对番茄灰霉病菌、稻瘟病菌、辣椒疫霉病菌、苹果轮纹病菌、小麦根腐病菌、棉花枯萎病菌有较强生防效果的芽孢杆菌LW-6-1,LW-6-1菌株无菌发酵液对番茄灰霉病菌和稻瘟病菌菌丝生长的抑制效果较好,菌丝生长抑制率分别为95.34%和92.56%,EC50分别为10.18和10.84mL/L;对抑制番茄灰霉病菌和稻瘟病菌孢子萌发的抑制率分别为93.98%和92.09%,EC50分别为2.03和2.67mL/L。经鉴定,LW-6-1为甲基营养型芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus。【结论】筛选到的拮抗芽孢杆菌LW-6-1对番茄灰霉病有较强的生防效果,能显著抑制番茄灰霉病菌的生长。     

生防菌株NJ-18的鉴定及其对几种植物病原真菌的拮抗作用研究

NJ-18是从油菜田土壤中分离筛选获得的一株具有抗真菌活性的细菌,该研究从形态和生理生化特征及16S rDNA序列分析,鉴定NJ-18菌株为枯草芽孢杆菌.经平板对峙试验表明,NJ-18发酵液对 Sclerotinia sclerotiorum、 Rhizoctonia solani、 Fusarium moniliforme、 Magnaporthe grisea、 Fusarium、 graminearum、 Rhizoctonia. cerealis、 A lternaria solani、 Botrytis cinerea、Fusarium oxysporum 等 9种植物病原真菌菌丝生长都具有良好的广谱抑菌活性;盆栽植株试验表明,NJ-18发酵液对小麦白粉病具有很好的保护和治疗作用,发酵原液的保护和治疗作用效果分别高达到96.1%和88.2%,发酵液稀释200倍后处理,对小麦白粉病的保护和治疗作用效果分别达到58.8%和51.4%.     

番茄灰霉病高效拮抗菌株鉴定及抗菌活性研究

采用形态特征观察、生理生化特性测定以及16S rDNA序列分析,对分离于淄博感染灰霉病的大棚番茄土壤样品中的6株拮抗细菌进行了分类鉴定和拮抗活性分析。结果显示,6株细菌形态均为直的杆状,有鞭毛能运动,能生成抗热的芽孢,芽孢椭圆形,革兰氏染色均为阳性,通过对菌株16S rDNA序列进行测定和同源性比对,发现与芽孢杆菌同源性达99%,结合生理生化特性确定B-01、B-02、B-03、B-04为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),B-06为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),B-07为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。通过滤液抑菌活性测定,B-02、B-06滤液对病原菌有很强的抑制作用,并且在稀释不同倍数时均能抑制灰霉病菌的生长。     

甲基营养型芽孢杆菌BH21对葡萄灰霉病菌的拮抗作用

【目的】甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）BH21是一株对葡萄灰霉病菌（Botrytis cinerea）有较好拮抗作用的海洋源细菌,鉴定该菌株脂肽类抗菌物质合成基因,检测脂肽粗提物对葡萄灰霉病菌的拮抗作用,为应用该菌株防治葡萄灰霉病提供科学依据。【方法】通过特异引物的基因组PCR法检测甲基营养型芽孢杆菌BH21菌株合成脂肽的能力;盐酸沉淀和甲醇抽提法从无菌发酵液中提取脂肽粗提物;排油圈法检测脂肽粗提物的表面活性;采用菌丝生长速率法检测脂肽粗提物对灰霉病菌菌丝生长的抑制作用并计算有效中浓度EC₅₀;利用高效液相色谱技术（HPLC）对脂肽粗提物洗脱分离,并采用菌丝生长速率法检测各组分对葡萄灰霉病菌的抑制能力;采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）分析主要抑菌成分的脂肽类型。采用离体叶片接种法检测脂肽粗提物对葡萄灰霉病的防治效果。【结果】选取11对特异引物对菌株BH21基因组扩增,其中7对引物扩增出预期核酸片段;扩增产物经测序、BLAST比对分析,结果显示扩增产物与相关菌株脂肽基因相似度为96%-99%,扩增产物翻译的蛋白与相关菌株的脂肽合成蛋白相似度为96%-100%,表明甲基营养型芽孢杆菌BH21基因组中含有ituA、bamD、ituC、ituD、fenD、srfAB、yndJ,该菌株具有合成surfactin、iturin及fengycin等多种脂肽类抗菌物质的能力。盐酸沉淀和甲醇抽提从LB无菌发酵液中获得脂肽粗提物,得率为428 mg·L^-1。排油圈检测结果显示,脂肽粗提物使橄榄油膜形成排油圈,表明脂肽粗提物具有表面活性。脂肽粗提物对葡萄灰霉病菌菌丝生长具有显著的抑制作用,脂肽粗提物浓度为440 μg·mL^-1时,对葡萄灰霉病菌菌丝生长的相对抑制率为82.8%。根据毒力方程计算,抑制葡萄灰霉病菌菌丝生长的脂肽粗提物EC₅₀为144.39 μg·mL^-1。HPLC分离纯化脂肽粗提物获得6个组分,只有组分BH21-2和BH21-3抑制葡萄灰霉病菌的生长,RP-HPLC色谱图分析表明组分BH21-2和BH21-3属于fengycin家族脂肽。葡萄灰霉病离体叶片试验结果表明,脂肽粗提物浓度为400 μg·mL^-1时,对葡萄叶片灰霉病防病效果为100%;脂肽粗提物浓度为220 μg·mL^-1时,对葡萄叶片病斑扩展相对抑制率为94.4%。【结论】甲基营养型芽孢杆菌菌株BH21具有合成surfactin、iturin及fengycin等多种脂肽类抗菌物质的基因,该菌株脂肽粗提物对葡萄灰霉病菌具有较强的拮抗作用,在葡萄灰霉病生物防治中具有应用潜力。     

植物内生菌G-1菌株的鉴定及其拮抗物质的初步研究

[目的]G-1菌株为1株对多种病原真菌具有拮抗活性的植物内生细菌,本研究旨在明确G-1菌株的分类地位及其抗菌物质的主要类型。[方法]首先,采用平板对峙法分析其抑菌谱,然后通过形态学观测与分子检测相结合界定G-1菌株的分类地位,再进行理化性质测定的同时通过脂肽类抗生素编码基因簇分析,进一步研究该菌株代谢物中抗菌物质的主要类型。[结果]G-1菌株具有较强的抑菌活性(抑菌率69.1%～83.14%),是较广的抗菌谱(对9种病原菌均有抑制作用)。在形态分析的基础上,综合16SrDNA、gyrA和gyrB基因数据集分析,发现G-1菌株与甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)的相似度最高,达91%。菌株的理化特性分析发现,G-1菌株抗菌粗提物在热稳定性、酸碱稳定性及抗紫外辐射方面都有较好的表现,如121℃处理30 min后对番茄灰霉病菌的抑菌率为81.76%,与对照相比仍保持其86.7%的活性。特异引物扩增分析发现,G-1菌株拥有分泌ituA、fenA、srfC的能力,表明G-1菌株可能是通过分泌抗菌脂肽类物质达到抑菌的作用。[结论]菌株G-1为1株具有开发潜力的拮抗菌株,研究结果可为后期生防菌制剂的研发奠定基础和数据支撑。     

核桃炭疽病高效生防菌株鉴定及抑菌活性

在对土壤有益微生物的分离、筛选中获得4株对核桃炭疽病菌具有较强抑制活性的拮抗细菌(编号分别为PF-1,PF-2,Bs-03,Bf-02)。通过对菌株的形态特征、染色反应、培养性状、生理生化特征、染色反应、培养性状、生理生化特性等试验项目,初步鉴定Bf-02为坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus),Bs-03为枯草芽孢杆菌(Bacil-lus subtilis),PF-1为幼虫芽孢杆菌(Bacillus lacivae),PF-2为短芽孢杆菌(Bacillus brevis)。采用平板对峙培养法测定4株拮抗细菌对核桃炭疽病菌抑菌活性,4株拮抗细菌对核桃炭疽病菌具有较强的抑制活性,抑菌率均达到83%以上,抑制活性最强的是PF-2,抑菌率为88.47%,与其它3株拮抗细菌的抑菌率在P<0.05水平上具有显著性差异。其次为PF-1,抑菌率为86.11%,Bs-03和Bf-02的抑菌率在P<0.05水平上无显著性差异。     

柑橘溃疡病生防菌株CQBS03的鉴定及其培养特性研究

【目的】筛选鉴定柑橘溃疡病菌拮抗菌,研究其培养特性及拮抗物质的初步性质,为柑橘溃疡病的生物制剂研制奠定基础。【方法】利用对峙培养法筛选对柑橘溃疡病菌具有良好抑制作用的生防菌,并通过对菌株形态、生理生化特征以及16SrDNA序列分析鉴定其分类地位;以单因素试验和正交设计方法对影响CQBS03菌株抑菌活性物质产生的各种培养条件进行优化;利用硫酸铵沉淀获得抑菌物质粗提物并测定其对温度、蛋白酶及氯仿的敏感性。【结果】经鉴定CQBS03为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。CQBS03抑菌活性成分主要存在于培养液中,能被80％饱和度硫酸铵沉淀,最高可耐受的温度范围为60-70℃;活性成分在280nm处有最大吸收峰,分子量大于10kD,对蛋白酶K和胰蛋白酶稳定,而对氯仿部分敏感。培养特性研究表明,CQBS03最适培养基为YPG液体培养基,抑菌物质产生的最适培养条件为：pH8．0左右,28℃培养72h。【结论】枯草芽孢杆菌CQBS03所产生的抑菌物质主要成分是蛋白质,且属于外泌型蛋白;该抑菌蛋白对多种植物病原菌有抑菌作用,尤其对柑橘溃疡病菌抑菌活性高,稳定性好,是一株极具开发潜力的生防菌株。     

柑橘溃疡病生防菌株CQBS03的鉴定及其培养特性研究

 【目的】筛选鉴定柑橘溃疡病菌拮抗菌,研究其培养特性及拮抗物质的初步性质,为柑橘溃疡病的生物制剂研制奠定基础。【方法】利用对峙培养法筛选对柑橘溃疡病菌具有良好抑制作用的生防菌,并通过对菌株形态、生理生化特征以及16S rDNA序列分析鉴定其分类地位;以单因素试验和正交设计方法对影响CQBS03菌株抑菌活性物质产生的各种培养条件进行优化;利用硫酸铵沉淀获得抑菌物质粗提物并测定其对温度、蛋白酶及氯仿的敏感性。【结果】经鉴定CQBS03为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。CQBS03抑菌活性成分主要存在于培养液中,能被80%饱和度硫酸铵沉淀,最高可耐受的温度范围为60～70℃;活性成分在280 nm 处有最大吸收峰,分子量大于10 kD,对蛋白酶K和胰蛋白酶稳定,而对氯仿部分敏感。培养特性研究表明,CQBS03最适培养基为YPG液体培养基,抑菌物质产生的最适培养条件为：pH 8.0左右,28℃培养72 h。【结论】枯草芽孢杆菌CQBS03所产生的抑菌物质主要成分是蛋白质,且属于外泌型蛋白;该抑菌蛋白对多种植物病原菌有抑菌作用,尤其对柑橘溃疡病菌抑菌活性高,稳定性好,是一株极具开发潜力的生防菌株。     

成人高等教育农村实用人才培养初探

成人高等教育农村实用人才培养不同于传统的高等教育,学员在年龄、学习目的、精力及时间等方面都存在很强的特殊性。文章界定了农村实用人才的内涵,分析了成人高等教育农村实用人才培养的特点,提出了成人高等教育农村实用人才培养应遵循的原则,阐述了对成人高等教育农村实用人才培养的认知,即成人高等教育农村实用人才培养有利于推动农业科技应用、促进农业现代化发展,既是推进社会主义新农村建设的现实需求,也是构建社会主义和谐社会的重要内容等。     

潮间带菌株CZⅣ-1068的鉴定及抑菌活性研究

CZⅣ-1068是从舟山长峙岛潮间带海泥中分离到的一株细菌,最适NaCl浓度范围为1%～3.5%,经琼脂扩散法抗菌模型筛选表明对大肠杆菌、副溶血性弧菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和白假丝酵母有拮抗作用。利用形态学观察、生理生化反应对菌株进行了初步研究,并利用PCR的方法扩增了CZⅣ-1068的16S rDNA,然后进行核苷酸序列测定分析,结果表明CZⅣ-1068与Bacillus sp.82344（AF227848）相似性高达100%,初步确定为腊状芽孢杆菌的一种。     

农业高职“基础＋专业＋方向”应用型人才培养模式的研究

农业高职教育专业人才培养方案必须遵循高职学生成长规律、农业生产工作规律和高职教育发展规律,必须符合农业高职教育人才培养工作特点的要求,全面设计、整体优化,必须反映最新教育教学改革成果,必须体现专业人才培养方案的时代特征、行业特征和职业特征。在该背景下,探讨了“基础＋专业＋方向”人才培养模式的内涵与要求。     

高等农业教育在乡村振兴中的功能及战略思考

在中国特色社会主义社会主要矛盾发生变化的基础之上,党中央着眼于党和国家事业全局,深刻把握新时代内涵,为应对"三农问题",提出了乡村振兴战略。高等农业教育作为推动乡村振兴的重要力量应发挥人才培养、科学研究、社会服务、文化传承与创新功能,为乡村振兴提供人力支持、科技支撑、服务保障、文化助力,加快乡村振兴的步伐,进一步实现农业现代化。同时,针对发挥高等农业教育功能的政府、学校、企业、农民四大主体,分别提出相应战略对策,具体为政府制定相关法律法规、学校改革相关体制机制、企业积极参与和配合、农民转变思想观念,形成政产学研四位一体格局,为乡村振兴贡献教育力量,为建设社会主义新农村贡献文化力量。     

论农村信用社制度改革

阐述了我国农村信用社发展中存在的问题,论述了农村信用社在产权制度上存在的缺陷,介绍了如何根据实际情况进行体制改革模式的选择,最后提出了转换农村信用社经营机制的对策。     

我国建立农村信用合作社存款保险制度之思考

农村信用合作社是我国的合作金融组织，在支持农村经济发展方向发挥了巨大作用。但近些年来，农村信用合作社在经营中出现了许多问题，面临诸多风险。为有效遏制其经营风险，需建立农村信用合作社存款保险制度。     

邮储银行农村信用工程建设研究

基于农村金融的脆弱性及邮储银行的自身特性,论证了构建信用工程是落实邮储银行农村战略的现实选择,并从健全组织结构、完善评价体系、优化服务模式等方面提出邮储银行构建信用工程的策略建议。     

高等农业院校应用型人才人文素质教育课程体系改革

根据高等农业院校应用型人才培养规律,结合和谐社会与新农村建设的要求,探究人文素质教育课程体系改革的客观依据、总体目标、基本原则和主要对策,以期为高等农业校院应用型人才人文素质教育提供一些有益的建议。     

基于卓越农林人才教育培养计划的森林工程专业实践教学研究

培养创新应用型森林工程专业的卓越农林人才,必须构建合理的教学实践体系。笔者通过对森林工程专业实践教学进行研究,分析目前森林工程专业教学实践体系的现状和存在的问题,寻求实践教学的创新和突破。根据森林工程专业的特点和卓越农林人才的培养目标,改革实践教学的内容和方式,完善现有的实践教学体系,制订合理的人才培养方案,以期通过践行完善后的实践教学体系,培养具有实践能力和创新能力的卓越农林人才。     

新农村建设中农村实用人才培养存在的问题及改善措施

概述了我国农村实用人才资源的现状,分析了农村实用人才培养中存在的诸多问题,提出了树立科学的农村人才观、加大教育培训力度、加大政策扶持力度、加强公共服务体系建设、加强农村实用人才管理等促进人才培养措施,为建设社会主义新农村提供智力支持。     

高职公共英语教学中跨文化理解教育策略——基于多元文化教育的视角

高职英语教学不仅是语言教育,也是文化教育.跨文化理解教育是多元文化教育背景下高职英语教学的必不可少的一部分.开展跨文化理解教育是跨文化交流的内在要求,也是基于应试教育下学生跨文化意识缺乏的现实和国际交流项目驱动之间张力的驱动.在高职公共英语教学中开展跨文化理解教育宜采取观念策略、开发策略、实施策略和互动策略等策略.