如何结合肝脏病变诊断鸡病

临床上，我们常用病理学诊断法对疾病进行初诊，很多鸡病在肝脏上有特异性病变，因此正确判断肝脏的病变对诊断鸡病意义重大。根据多年的实践经验，现将鸡的一些常见病变以及在具体疾病中的诊断归纳总结如下：     

大黄鱼肝脏蛋白质组双向电泳技术的建立及优化

通过对不同裂解液配方、等电聚焦程序和上样量等条件的对比试验,建立和优化了大黄鱼肝脏蛋白质组双向电泳的相关技术体系。试验结果表明,裂解液中添加Tris和TBP,聚焦时适当延长除盐时间,提高聚焦电压和功率,能显著提高双向电泳图谱的分辨率,而17 cm pH 5~8 IPG胶条的最佳上样量为2.0 mg。通过相关条件优化提高了大黄鱼肝脏蛋白双向电泳图谱的分辨率,为大黄鱼肝脏蛋白质组学的进一步研究奠定了基础。     

高温胁迫下大黄鱼肝脏的蛋白质组学

为探究大黄鱼在高温胁迫条件下的蛋白表达情况,实验应用串联质谱标签tan-dem mass tag(TMT)标记结合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术对大黄鱼耐高温组和不耐高温组的肝脏组织进行蛋白组学分析.共鉴定到3 369个蛋白,其中有687个差异表达蛋白,包括281个上调蛋白和406个下调蛋白.用平行反应监测...     

大黄鱼感染哈维氏弧菌后血液生化指标的变化及组织病理学观察

从患病大黄鱼病灶中分离出病原哈维氏弧菌,并人工回接感染大黄鱼,病鱼出现典型的皮肤溃疡症。测定大黄鱼血液各项指标发现,病鱼单核细胞、嗜中性粒细胞、血栓细胞百分率明显下降,而淋巴细胞百分率增加,均呈极显著差异(P<0.01)。患病大黄鱼总蛋白为(12.8±3.95)g/L,对照组鱼为(19.4±4.33)g/L,病鱼球蛋白、甘油三脂、血糖含量也明显低于对照组(P<0.01)。然而病鱼谷丙转氨酶为(37±5.11)IU/L,对照组为(28±5.54)IU/L;病鱼谷草转氨酶为(164±47.19)IU/L,对照组为(117±21.84)IU/L,均呈极显著差异(P<0.01)。研究结果说明,病鱼肝脏和肾脏组织受损。对患病大黄鱼进行病理组织学观察,结果发现病鱼病变组织头肾、肝出现不同程度的变性以及坏死。细胞超微病变观察发现,头肾肾小管上皮细胞变性、坏死。肝细胞胞浆内脂滴积累多。血清指标的测定可以作为大黄鱼哈维氏弧菌病细菌感染的指标。     

高温胁迫下大黄鱼肝脏的蛋白组学

为探究大黄鱼在高温胁迫条件下的蛋白表达情况，实验应用串联质谱标签tandem mass tag (TMT)标记结合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术对大黄鱼耐高温组和不耐高温组的肝脏组织进行蛋白组学分析。共鉴定到3 369个蛋白，其中有687个差异表达蛋白，包括281个上调蛋白和406个下调蛋白。用平行反应监测(parallel reaction monitoring, PRM)对随机挑选的13个蛋白进行验证，其结果与TMT标记的蛋白组学分析结果一致。随后，通过生物信息学分析发现，高温胁迫对大黄鱼的蛋白质折叠、能量代谢有显著影响，其中热休克蛋白70 (heat shock proteins 70, HSP70)、钙网蛋白(calreticulin, CRT)和葡萄糖调节蛋白(glucose-regulated protein, GRP)参与调节蛋白质的正确折叠，丙酮酸激酶(pyruvate kinase, PK)参与高温条件下的能量供给。由此推测HSP70、CRT、GRP和PK在大黄鱼应对高温胁迫时发挥着重要的作用。     

养殖大黄鱼一种黏孢子虫病的组织病理学及检测方法初探

运用组织病理切片、电镜观察及PCR扩增等方法对2017年在舟山采集到的临床表现"白鳃"症状的发病大黄鱼(Larimichthyscrocea)开展了病原学及快速检测方法的初步研究。组织病理观察显示,患病鱼的肝、脾、肾等内脏组织发生严重的病理变化,尤其是组织内红细胞发生明显的退行性变化,同时血液中红细胞数量显著减少。在病鱼组织的电镜超薄切片中可观察到直径约300～600 nm的孢子虫样结构。提取病鱼内脏组织总基因组DNA样本,采用1对针对寄生原虫的通用引物进行SSUrDNA的PCR扩增,最终获得大小为1471bp的特异性条带,经测序比对发现,该条带与GenBank中1种黏孢子虫Sinuolinea sp.的序列同源性最高,达89%。根据获得的SSU rDNA序列,建立了适用于该病临床检测的巢式PCR方法,最小灵敏度可达0.5 pg。研究表明,引起此次网箱养殖大黄鱼"白鳃"症状并导致鱼类大量死亡的是一类寄生性黏孢子虫。     

近年来大黄鱼肝脏病十分严重

近年来，大黄鱼肝脏病流行十分严重，每年6月中下旬，水温在28℃以上时开始流行，一般的体长10～20cm大黄鱼鱼种为多见。专家分析：主要摄食发霉的营养成分不全的变质饲料，水中氨氮含量高，长期使用抗菌素或含铜(Cu)、锌(Zn)的添加剂，经常使用敌白虫挂袋或抗菌素消毒剂造成的。具体症状：病鱼鳃丝发白，肠道充满黄色液体，胆囊胀大呈深绿色，肝呈浅淡或黄色，肝脏细长或委     

加州鲈肝脏病变症状及防治

近几年来，在溧水县石湫镇的特水养殖基地流行一种以“暴发性出血病”为特征的加州鲈严重肝脏疾病，此病流行快、死亡率高，危害大，一年四季都能发病，夏、秋季流行最为严重。近两年来发病尤为频繁，有的塘口死亡率高达90%以上，不少发病鱼池全军覆没。目前暂无特别有效的药物或治疗措施，只能采取预防治疗，通过改善水体环境、控制继发感染和提高鱼体抵抗力等措施预防该病的发生。     

牛蛙慢性氨中毒的组织病理学研究

在正常的养殖条件下，使试验水体的氨浓度逐步升高，从而造成牛蛙慢性中毒，牛蛙慢性中毒昏迷或死亡后，解剖并取其内脏组织如肝脏、脾脏、胸腺、肠、肾脏、血液等制作病理切片或涂片。观察比较，发现中毒后的牛蛙胸腺、肝脏明显肿大，胸腺颜色变为淡黄色，脾脏表面变得粗糙等。显微镜检，细胞出现肿大、空泡化、坏死等一系列组织病理学变化。     

大黄鱼鱼种阶段脂肪酸组成研究

对人工培育的90-180日龄的大黄鱼鱼种,用GC/MS法分析比较了其肌肉和肝脏的脂肪酸组成,肌肉和肝脏分别检出脂肪酸25种和42种.试验结果表明,7-10月,肌肉中的脂肪不断积累,而肝脏中则保持相对恒定,且是肌肉的1.7～3倍;2种组织中均以C16∶0(棕榈酸)含量最高,其次为C18∶1(油酸);肝脏中脂肪酸以饱和脂肪酸(SFA)为主,SFA的平均含量是多不饱和脂肪酸(PUFA)的4倍,而肌肉中的SFA平均含量则与PUFA基本相当;花生四烯酸(AA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)及亚油酸(C18∶2)等n-3和n-6系列的PUFA在肌肉中含量更高;大黄鱼鱼种首先利用肌肉组织中以C16∶0为主的十八碳以下的SFA作为能量来源,而不轻易动用肝脏贮藏的能量.通过与幼鱼和成鱼比较可知,随着鱼体的成长,其脂肪酸种类不断丰富,组成也更趋合理.     

大黄鱼(Pseudosciaena crocea)内脏白点病的组织病理和超微病理分析

利用组织切片及超薄切片电镜技术对患内脏白点病大黄鱼(Pseudosciaena crocea)的肝脏、脾脏和肾脏3种组织进行病理学分析,探讨该病的致病机理.结果显示,大黄鱼的临床症状为体表无明显病症,脾、肾、肝等内脏有大量白色结节;组织病理显示,肝、肾和脾是感染损伤的主要靶器官,出现组织变性坏死,空泡化严重,炎性细胞浸润;病变组织均出现病理性结节.超微病理显示,病鱼肝、肾、脾细胞超微结构受损严重,尤以线粒体和细胞核损伤明显.线粒体肿胀,嵴断裂消失,空泡化;细胞核核膜破裂,染色质浓缩边集;肾脏和脾脏均发现大量菌聚集成团的病原.研究表明,大黄鱼内脏白点病的组织细胞病理变化特征显示了病原菌的入侵和危害,造成鱼体生理代谢紊乱,免疫力和抵抗力下降,鱼体终因无法维持正常的生命活动而导致死亡.     

大黄鱼(Pseudosciaena crocea)的染色体研究

利用胸腔注射植物血凝素和秋水仙碱溶液制备肾细胞的方法,对大黄鱼(Pseudosciaena crocea)染色体组型进行分析研究。结果表明,大黄鱼染色体数目为 48条,全部是端部着丝点染色体,核型为2N=48t,臂数NF=48。     

养殖大黄鱼冷藏过程中细菌菌相的变化

采用感官、挥发性盐基氮(TVBN)、菌落总数对大黄鱼(Pseudosciaena crocea)在0℃、5℃冷藏过程中的品质变化特征进行分析,并对细菌菌相进行定性和定量研究。结果表明,冷藏初期、高品质期和货架期终点菌落总数N(CFU/g)的对数值(lgN)分别为5.40±0.17、6.98±0.17、7.38±0.09,TVBN分别为(7.00±1.82)mg.100-1.g-1、(13.00±1.42)mg.100-1.g-1、(29.92±1.75)mg.100-1.g-1。冷藏初期分离获得211株菌株,84.8%是革兰氏阴性菌,出现少量革兰氏阳性菌(6.2%),优势菌群是肠杆菌科细菌(6.6%)、气单胞菌属(14.2%)、不动杆菌属(13.3%)、摩氏杆菌属(11.8%),并出现了一定比例的假单胞菌属、嗜麦芽窄食单胞菌和其他细菌。冷藏过程中细菌菌相逐渐变得单一,腐败希瓦氏菌上升趋势明显。高品质期时,0℃冷藏大黄鱼优势菌群为腐败希瓦氏菌(45.8%)和缺陷短波胞单胞菌(13.6%);5℃冷藏大黄鱼优势菌群为腐败希瓦氏菌(37.9%)和假单胞菌属(15.6%)。货架期终点时,0℃、5℃冷藏大黄鱼优势菌为腐败希瓦氏菌,比例分别为75.5%和59.6%。     

大黄鱼深水网箱养殖技术

于2009年4月至2010年11月在平均水深18m、流速0.7m/s的福建省罗源湾岗屿海区,采用2口(c/)12.8m、入水深10m的深水网箱放养 110.3g/尾规格鱼种进行大黄鱼养殖试验.经19个月养殖,平均规格达到597.5g/尾,养成成活率约43.7％.试验结果表明:相对小网箱养殖,大黄鱼深水网箱养殖成品鱼体色...     

自然海区大黄鱼围养技术的研究

从环境的选择、围网的架设、日常管理等方面,按照绿色食品标准开展大黄鱼围养技术的研究,取得成功,并制定了一套较完善的大黄鱼围养技术规范。研究结果表明：每口围养大黄鱼3年总产值614．5万元,利润494万元;大黄鱼体形较为修长,体色呈淡金黄色,蛋白质含量18．7％,脂肪含量13．6％,氨基酸总含量181．5g／kg,其中鲜味氨基酸总含量87．1g／kg。     

大黄鱼消化道器官显微与亚显微结构

采用电镜和光镜技术研究大黄鱼消化道的组织结构。大黄鱼舌粘膜上皮为复层扁平上皮，其中含有杯状细胞和味蕾，舌腹面固有膜有浆液性腺泡；食道粘膜上皮为复层扁平上皮，表层扁平细胞下有粘液细胞。胃粘膜上皮为单层柱状，细胞游离端含有大量成熟粘液原颗粒，核周有不同成熟阶段的粘原颗粒，细胞器位于核周及下方，贲门和盲囊部胃小凹处有粘液腺，固有膜含大量胃腺，幽门部没有胃腺；胃腺细胞为矮锥形，细胞内含微管泡系和酶原颗粒，是一种典型的泌酸胃酶细胞。前肠、中肠和后肠粘膜上皮均为单层柱状上皮，其中有许多杯状细胞，肠上皮有密集的微绒毛，侧面有连接复合体，胞内各种细胞器均较丰富。大黄鱼消化道组织结构的特点与消化、吸收作用密切相关。     

养殖大黄鱼溶藻酸弧菌病病原菌传染途径的研究

从养殖大黄鱼病鱼的肝脏和脾脏内分离、纯化到溶藻酸弧菌，经回归感染试验证实它是该病的致病菌。使用法国生物一梅里埃公司生产的自动细菌鉴定仪(ATB)进行细菌鉴定，该菌株的生理生化特性符合溶藻酸弧菌的特性。研究结果表明，养殖大黄鱼溶藻酸弧菌病病原菌传染途径，主要是从水经伤口传染到体内，在试验条件下传染率为60％。病原菌在30℃时生长很快，20℃时生长慢，10℃时基本不生长，对氟苯尼考、四环素和乙酰螺旋霉素等7种药物敏感。     

网箱养殖大黄鱼遗传多样性的同工酶和RAPD分析

采用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳方法(PAGE)和RAPD技术对象山港网箱养殖大黄鱼群体遗传多样性进行检测。结果表明，所分析的12种同工酶共记录了27个基因座位，其中3个基因座位Est-2、Est-3和m-Adh-2为多态，其多态座位比例为11．111％，平均杂合度为0．0279。16个RAPD随机引物共检测出119个位点，其中多态位点20个(16.81％)，个体间的遗传相似系数为0．844～0．972，遗传变异度为0．0927，Shannon多样性指数为6．326，多样性值为0．0532。不论是同工酶电泳分析结果还是RAPD分析结果，均表明象山港网箱养殖大黄鱼遗传多样性水平较低。     

大黄鱼和(鱼免)的远缘杂交初步研究

进行了大黄鱼和（鱼免）的远缘杂交试验,结果表明：（鱼免）（♀）×大黄鱼（♂）杂交组受精率为52%,孵化率为71%,但孵化后未能开口摄食,15天内杂交苗逐渐全部死亡。大黄鱼（♀）×（鱼免）（♂）杂交组受精率为75%,孵化率为83%,度过了开口摄食轮虫和开始摄食桡足类2个死亡高峰期,存活率仅为1.2%。并分析了（鱼免）（♀）×大黄鱼（♂）的杂交子代不能存活的原因,以及大黄鱼（♀）×（鱼免）（♂）的杂交子代的遗传本质和成活率低的原因。     

岱衢族大黄鱼放流增殖试验

为了恢复舟山渔场本地种岱衢族大黄鱼（Pseudosciaenac Focea）资源,2000～2009年进行了岱衢族大黄鱼增殖放流试验。10年间共放流了经过人工繁育的岱衢族大黄鱼苗种1288．0×10^4尾,其中包括标志鱼62680尾。回捕标志鱼1432尾,平均回捕率2．73％。回捕试验结果表明,在岱衢洋进行本地大黄鱼的放流可行,体外挂牌法适合于大黄鱼的标志放流,放流鱼苗不仅可以成活、生长,还能够产卵、增殖并进行洄游;放流使舟山渔场本地岱衢族大黄鱼资源得到显著恢复,并产生了一定的经济效益。