奶山羊乳房类型变化及其对泌乳性能的影响

【目的】探究奶山羊不同泌乳时期乳房类型的变化规律及其对泌乳性能的影响。【方法】以99只健康、产奶期相近的初产泌乳西农萨能奶山羊为试验对象,对其5个泌乳时间点（14,70,126,182和211 d）的乳房类型（乳房外形分为方圆形、长条形和宽扁形,乳房基部分为半球形和柚子形）和日产奶量进行记录,同时采集乳样对乳成分（脂肪率、蛋白率、乳糖率、总固体和非脂率）和体细胞数进行检测,并利用SPSS软件对试数据进行分析。【结果】随着泌乳时间的增加,方圆-半球型（Sh）乳房数量占比呈下降趋势,长条-柚子型(Lg)乳房数量占比呈上升趋势;乳房外形由方圆形(S)和宽扁形(W)趋向长条形(L)转变,乳房基部由半球形(h)趋向柚子形(g)转变; 5种乳房类型整体趋向长条-柚子型(Lg)乳房变化。泌乳70 d时,方圆-半球型（Sh）乳房和长条-半球型(Lh)乳房的奶山羊产奶量显著高于长条-柚子型(Lg)乳房和宽扁-柚子型(Wg)乳房(P＜0.05); 泌乳14 d时,宽扁-柚子型(Wg)乳房的奶山羊的脂肪含量和总固体量均显著高于方圆-柚子型(Sg)乳房（P＜0.05）;泌乳182 d时,方圆-柚子型（Sg）乳房的奶山羊的乳蛋白率显著低于长条-半球型(Lh)乳房和宽扁-柚子型(Wg)乳房（P＜0.05）。不同乳房类型奶山羊乳体细胞数无显著差异(P＞0.05)。【结论】奶山羊的乳房类型随着泌乳时间的推移而发生变化,泌乳70 d时,方圆-半球型（Sh）乳房和长条-半球型（Lh）乳房奶山羊的产奶量高。     

奶山羊乳房炎乳腺上皮细胞膜流动性的变化

为探讨奶山羊乳房炎乳腺上皮细胞膜流动性的变化,实验测定了奶山羊丙二醛含量和乳腺上皮细胞膜微黏度(η)值。结果表明,乳房炎奶山羊MDA含量和乳腺上皮细胞膜微黏度(η)值显著高于其他各组(P<0.01);疫苗组显著低于乳房炎组(P<0.01);中药组显著或极显著低于对照组(P<0.05、P<0.01);联合组显著或极显著低于疫苗组(P<0.05、P<0.01);联合组与中药组比较差异不显著(P>0.05)。说明乳房炎奶山羊脂质过氧化物含量升高,乳腺上皮细胞膜流动性降低,影响膜的正常功能;乳房炎疫苗免疫和中药可阻止自由基对乳腺上皮细胞膜的氧化损伤。     

PCV2感染通过胞内Ca2+超载诱导仔猪腹股沟淋巴结及脾脏淋巴细胞凋亡

为探讨猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染仔猪的淋巴结和脾脏淋巴细胞内钙信号变化在细胞凋亡中的作用,选取19头PCV2抗原和抗体均为阴性的5周龄健康断奶仔猪,随机分成对照组(4头)和试验组(15头),试验组仔猪通过滴鼻接种PCV2,并于接种后14、21和35 d分别扑杀5头,对照组仔猪滴鼻同量PBS后当天扑杀。所有仔猪扑杀时均取腹股沟淋巴结及脾脏,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光分光光度法检测细胞内Ca2+浓度,孔雀绿比色测定法检测Ca2+-ATP酶的活性,荧光定量RT-PCR检测钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA转录水平。结果表明:所有接种病毒仔猪腹股沟淋巴结及脾脏细胞凋亡率均极显著高于对照组(P<0.01),Ca2+浓度均极显著高于对照组(P<0.01);接种病毒仔猪腹股沟淋巴结Ca2+-ATP酶活性在21 d时显著下降(P<0.05),脾脏中Ca2+-ATP酶活性在21 d和35 d时显著下降(P<0.05);腹股沟淋巴结CaMKⅡmRNA转录在整个试验过程中无明显变化,但脾脏中CaMKⅡmRNA在PCV2接种后21 d和35 d比对照组显著上调(P<0.05)。结论:细胞内Ca2+超载是PCV2感染引起仔猪淋巴结及脾脏淋巴细胞凋亡的重要机制。     

奶山羊实验性乳房炎病理模型

通过在健康奶山羊一侧乳区内接种1mL(10^6cfu/mL)金黄色葡萄球菌悬液复制乳房炎病理模型，其模型指标有：临床症状，体温变化，乳中体细胞数测定，乳牛乳腺炎电子检测仪检测，病原菌分离培养主病理组织学变化。结果表明按上述方法乳房内接种金黄色葡萄球菌可复制出典型的奶山羊急性乳房炎病理模型。     

不同温湿指数下荷斯坦奶牛外周血抗氧化指标的变化及其与淋巴细胞凋亡的关系

选择体重、胎次、泌乳量均接近的健康荷斯坦奶牛32头,研究不同温湿指数(THI)条件下奶牛生理常数、外周血淋巴细胞凋亡和细胞周期以及血液抗氧化指标的变化,探讨血液抗氧化指标与细胞凋亡的关系.结果表明:(1)夏季热应激时期奶牛的呼吸频率和直肠温度极显著高于冬季非热应激处理组(P<0.01).(2)热应激可明显地增加奶牛外周血淋巴细胞的凋亡率,淋巴细胞凋亡率在THI为83.58时达到最高,为17.79%,与非热应激处理组相比差异极显著(P<0.01).(3)在THI为78.09时,G0/G1期细胞比例下降到最低,S期和G2/M期细胞比例达到最高,与非热应激处理组相比较差异均极显著(P<0.01);同时外周血淋巴细胞的增殖指数在此时达到最大值.(4)奶牛外周血超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性在夏季高温季节比非热应激处理组均呈极显著下降(P<0.01);丙二醛(MDA)含量在夏季高温季节时呈极显著上升(P<0.01);抗活性氧(抗ROS)活性在THI为83.58时最低.(5)血液中SOD、GSH-Px和抗ROS的活性与奶牛淋巴细胞凋亡率均呈中等强度负相关(P<0.01);MDA含量与淋巴细胞凋亡率呈正相关(P<0.01).可见:(1)热应激显著提高了奶牛的直肠温度和呼吸频率;(2)热应激对奶牛血液抗氧化指标与淋巴细胞凋亡率的变化影响显著;(3)奶牛外周血抗氧化指标的变化与淋巴细胞凋亡存在显著的相关性.     

乳酶作为奶牛隐性乳房炎诊断指标的研究

【目的】定量实时检测奶牛牛乳中的乳酶活性,通过分析其变化规律为奶牛隐性乳房炎的诊断提供理论依据。【方法】随机选择220头荷斯坦泌乳奶牛,采集乳汁测定体细胞数(Somatic cell counts,SCC)和5种乳酶活性,研究乳酶活性在健康和患隐性乳房炎奶牛乳汁中的变化规律及与SCC的相关性。【结果】以乳汁体细胞数50×104mL-1作为判定乳房炎的标准,患隐性乳房炎奶牛乳汁中N-乙酰基-1-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳过氧化物酶(LP)、碱性磷酸酶(ALP)和髓过氧化物酶(MPO)活性均显著高于健康奶牛(P<0.05),乳酶活性与SCC(lgSCC)呈正相关,其中NAG活性与SCC(lgSCC)的相关性系数R2=0.98,NAG与LDH活性之间的相关性系数R2=0.95。【结论】奶牛隐性乳房炎对LDH、NAG、LP、ALP和MPO活性有显著影响(P<0.05),乳酶NAG和LDH可联合应用作为早期奶牛隐性乳房炎的诊断指标。     

甘氨胆酸对小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的影响

本研究旨在探索不同浓度的甘氨胆酸(Glycocholic acid,GCA)对小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的影响。在0.02μg/ml,0.035μg/ml,0.07μg/ml,0.21μg/ml,1.05μg/mL不同浓度的GCA作用下,应用倒置显微镜观察了体外脾淋巴细胞的核形态,采用琼脂糖凝胶电泳法检测了脾淋巴细胞的DNA片段,采用流式细胞仪测定了脾淋巴细胞凋亡早期磷脂酰丝氨酸外翻百分率;采用分光光度法测定了凋亡细胞氧化还原反应活性——GSH的含量;通过ELISA法检测了Caspase-3和Caspase-9的活性。结果:GCA能够使脾淋巴细胞细胞产生核固缩和凋亡小体;显著引起脾淋巴细胞DNA片段化(P<0.05),极显著的诱导脾淋巴细胞磷脂酰丝氨酸外翻(P<0.01);显著降低GSH的含量(P<0.05);显著提高Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05)。结论:GCA具有显著的提高小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的作用(P<0.05)。     

乳宁散对隐性乳房炎奶牛产奶性能影响和防治效果的评价

【目的】通过测定隐性乳房炎奶牛的产奶性能、血液理化和抗氧化能力等指标评价乳宁散在奶牛TMR全日粮中添加对隐性乳房炎的防治作用。【方法】选取400头高产奶牛，分为四组，每组100头牛，分别为乳宁散添加组（饲粮中每日添加乳宁散140 g/头牛，患隐性乳房炎），微生态制剂组（饲粮中每日添加微生态制剂100 g/头牛，患隐性乳房炎），对照组（正常日粮，患隐性乳房炎）及空白组（正常日粮，不患隐性乳房炎），试验期30 d。投药前一天和添加第30天检测4组奶牛的体细胞数和产奶性能；每组选取8头奶牛采集外周血及乳汁，分析比较血液理化、抗氧化（SOD、GSH-PX和T-AOC等）指标和促炎因子指标（IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α）。【结果】乳宁散添加组奶牛的产奶性能、血液理化指标和对照组相比与空白组相比均无显著性（P>0.05），乳宁散组与空白组的体细胞数和对照组相比差异显著（P<0.05），乳宁散组抗氧化能力和对照组与空白组相比有显著性差异（P<0.05），与微生态制剂组结果一致；乳宁散组IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α表达量对对照组有极显著性差异（P<0.0...     

IBDV超强毒株感染SPF鸡后法氏囊淋巴细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白动态表达的研究

 为证实传染性法氏囊炎超强毒SNJ93株感染SPF鸡后1～14 d内法氏囊淋巴细胞中Bcl-2、Bax蛋白的动态表达与淋巴细胞凋亡的关系。应用透射电镜观察、TUNEL法标记检测凋亡的淋巴细胞，用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax蛋白。结果表明，感染后1～7 d可见到大量凋亡的淋巴细胞，其中感染后3～5 d最多。感染后1～9 d Bcl-2蛋白显著高于同时点的对照组（P<0.01）；感染后1～5 d Bax蛋白明显高于同时点的对照组，差异极显著（P<0.01）；感染后第7天高于同时点的对照组,差异显著（P<0.05）； Bcl-2/Bax比率在感染后第1天低于同时点的对照组（P<0.05）；3～5 d明显低于同时点的对照组(P<0.01)。SNJ93感染SPF雏鸡后1～7 d内法氏囊淋巴细胞会发生大量凋亡，Bcl-2/Bax能准确反映淋巴细胞的凋亡程度。     

奶牛乳房炎对其产奶性能的影响

为了研究乳房炎对奶牛产奶性能的影响,采集西安市某奶牛场618头荷斯坦奶牛完整记录的各月DHI报告中体细胞数据和兽医记录,统计分析乳房炎发病率、临床乳房炎及其患病时期对奶牛305d奶量的影响。同时另采集108头奶牛有完整记录的150个泌乳期的1 368条DHI记录,对比分析不同体细胞水平对奶牛胎次奶量、日产奶量和乳成分含量的影响。结果表明,隐性乳房炎年发病率为50.5%,临床乳房炎头阳性率为4.37%,头次阳性率为8.25%。临床乳房炎极显著降低奶牛305d奶量(P0.01),而在泌乳盛期患病的牛305d奶量降低可达32.5%。隐性乳房炎对奶牛生产性能的影响随患病程度加重而加重,平均体细胞数20万/mL胎次奶量就会显著减少(P0.05),而体细胞数50万/mL,胎次奶量极显著降低(P0.01)。奶牛泌乳盛期患隐性乳房炎比泌乳中后期患隐性乳房炎对产奶量和乳蛋白率的影响更大,患病程度重的奶牛相对于健康牛日平均奶量显著降低(P0.05),乳蛋白率显著增高(P0.05),乳脂率显著降低(P0.05)。     

转移因子对鸡传染性喉气管炎灭活疫苗作用的研究

用ILT油乳剂灭活疫苗免疫雏鸡和蛋鸡,同时实验组肌注TF,于免疫后不同时间用ILT种毒攻击,并测定蛋鸡的淋巴细胞转化率。结果试验组于免疫后第5d产生保护力,第9d产生全保护(对照组分别为7d和11d),雏鸡和蛋鸡的保护期可达90d及180d,蛋鸡免疫后7d的淋巴细胞转化率达高峰48.7%,而对照组的为14d和38.5%,90d时分别为36.3%和28.5%。表明TF能提高ILT灭活疫苗的免疫效果,提高蛋鸡的细胞免疫机能,经统计学检验,对雏鸡免疫保护力无显著差异,而蛋鸡的差异显著(P<0.05)。     

不同水平瘤胃保护赖氨酸对奶牛产奶性能的影响

选用32头泌乳奶牛配对分为4组,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组在基础日粮中分别添加瘤胃保护赖氨酸(RPLys)10、20、30 g/头.d。研究结果表明:相对于对照组,饲喂RPLys组的产奶量与乳蛋白质率都有所提高,其中试验Ⅲ组的产奶量增幅最大,试验Ⅲ组与对照组的乳蛋白质率差异显著(P0.05);添加RPLys对乳脂率、乳糖、非脂总固形物含量没有显著影响(P0.05)。     

壳聚糖对黑白花奶犊牛脂肪代谢的影响

试验选用10日龄奶犊牛20头, 随机分到 4个日粮处理组,进行为期30 d 的饲养试验.在基础日粮中分别加入 0、200、400、600 mg/d的壳聚糖.结果表明:600 mg/d壳聚糖组相比对照组明显降低了血清中 TC含量 (P＜0.05);在试验第20和30天,600 mg/d壳聚糖组相比对照组降低了血清中高密度脂蛋白的含量(P＜0.05).     

中药对围产期奶牛生产性能及血液生化指标的影响

为探明中药对围产期健康奶牛生产性能及血液生化指标的影响,选临床检查健康的围产期荷斯坦奶牛90头,按年龄、胎次和预产期相近的原则随机平均分成A、B、C 3组,A组:于预产期前15 d喂服中药加味四君子散(每头400 g/d),连用5 d,分娩后当天喂服益母生化散(每头400 g/d),连用2 d;B组:产前不喂服中药,分娩后当天喂服益母生化散(每头400 g/d)),连用2 d;C组为对照组,产前、产后均不喂服中药。各组奶牛分别测定干物质摄入量、日产奶量、乳成分及血液生化指标。结果显示:与对照组相比,A组奶牛干物质采食量增加10%以上(P<0.05),平均日产奶量提高10%以上(P<0.05),血清甘油三酯含量明显降低(P<0.05),血清葡萄糖、血清总蛋白和血清钙维持较高水平(P<0.05)。表明奶牛产前与产后喂服加味四君子散和益母生化散能有效改善血液生化指标并利于产后生产性能的充分发挥。     

中药复方制剂对奶牛免疫机能的影响

选取30头健康奶牛和30头隐性乳房炎奶牛进行中药复方制剂饲喂试验,对奶牛的B淋巴细胞EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数和T淋巴细胞转化率进行测定,观察中药复方制剂对奶牛免疫机能的影响.结果显示,健康奶牛的EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数、T淋巴细胞转化率均显著高于隐性乳房炎奶牛(P＜0.01或P＜0.05);中药复方制剂可以显著提高健康奶牛和隐性乳房炎奶牛的EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数、T淋巴细胞转化率(P＜0.01或P＜0.05).试验表明,中药复方制剂可以增强奶牛机体的体液免疫和细胞免疫功能,促使隐性乳房炎奶牛免疫机能的恢复.     

奶牛趾间皮肤外植体模型的构建及效果评价

为建立一种可用于奶牛蹄部感染性疾病研究的皮肤外植体模型，本研究利用气液交界面皮肤组织培养模式离体培养健康奶牛后蹄趾间皮肤，分别于培养0、12、24、36、48和72 h收集皮肤组织并采用HE染色法、原位末端标记(TUNEL)法及免疫组织化学方法对外植体的病理组织变化、组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白Caspase-3表达进行检测。结果表明：1)与0 h对照组模型相比，培养12、24和36 h的皮肤组织表皮结构完整，真皮层发生不同程度变性；36 h皮肤组织上皮细胞出现变性迹象；48 h皮肤组织上皮细胞发生不同程度变性、坏死，并伴有核固缩；72 h皮肤组织表皮脱落、缺失，皮肤附属器官发生不同程度坏死，无法保持正常的组织结构和功能。2)皮肤外植体细胞发生不同程度凋亡，Caspase-3蛋白呈阳性表达，且表皮中凋亡细胞数量及Caspase-3蛋白阳性表达情况高于真皮。与对照组相比，24 h皮肤外植体细胞凋亡情况出现显著差异(P<0.05),36 h皮肤外植体Caspase-3蛋白阳性率出现显著差异(P<0.05)。本研究构建了一种稳定的奶牛趾间皮肤外植体模型，离体培养24 h仍保持正常的...     

丙氨酰-谷氨酰胺对建鲤体外培养淋巴细胞增殖的影响

【目的】探讨丙氨酰-谷氨酰胺（Ala-Gln）对免疫抑制和应激建鲤体外培养淋巴细胞增殖的调控作用。【方法】通过对建鲤注射环磷酰胺和皮质醇来建立免疫抑制和应激模型,以注射生理盐水为对照,分离头肾、脾脏和外周血淋巴细胞进行体外培养,测定培养液中不同浓度Ala-Gln（0.0,2.0,4.0,6.0,8.0和10.0 mmol/L）对淋巴细胞转化率的影响。【结果】免疫抑制模型及应激模型中,建鲤头肾、脾脏和外周血的淋巴细胞转化率均显著低于对照组（P<0.05）,Ala-Gln浓度在0.0～8.0 mmol/L时,可以促进免疫抑制建鲤的淋巴细胞增殖（P<0.05）,在0.0～6.0 mmol/L 时,可以促进应激建鲤的淋巴细胞增殖（P<0.05）,随着Ala-Gln浓度的进一步增大,淋巴细胞转化率不再继续增大（P＞0.05）。【结论】Ala-Gln对离体培养免疫抑制和应激条件下的建鲤淋巴细胞增殖具有明显的促进作用,是有潜力的鱼用抗应激免疫增强剂。     

马尾藻多糖的提取及免疫研究

[目的]研究马尾藻多糖的提取工艺和药理免疫能力。[方法]以广西北海涠洲岛特有的马尾藻为材料,探索马尾藻多糖的最佳提取工艺,并对其进行免疫试验。[结果]结果表明,马尾藻多糖提取的最佳条件为：水浴温度80℃,提取时间10 h,胶体磨处理马尾藻2 min,藻粉∶水=1∶20,提取液的浓缩液体积数∶95%酒精=1.0∶3.0。马尾藻多糖对小鼠免疫的试验表明,多糖剂量为200、400、600 mg/kg.d时,小鼠脾的重量显著增加（P〈0.05） 当多糖剂量为400、600 mg/kg.d时,小鼠腋下淋巴结的重量显著增加（P〈0.05）,对单核巨噬细胞的吞噬功能有显著影响,能明显提高小鼠碳粒廓清速率,提高吞噬指数α（P〈0.05）,并对巨噬细胞增生以及淋巴小结形成有明显作用 当多糖剂量为600 mg/kg.d时,小鼠淋巴结不但产生明显的淋巴小结,而且形成大量巨噬细胞。[结论]该研究结果为马尾藻生理活性物质多糖的更进一步研究提供参考。     

消乳灵对奶牛隐性乳房炎的治疗效果研究

[目的]探讨中药复方制剂＂消乳灵＂治疗奶牛隐性乳房炎的效果。[方法]选择28头患隐性乳房炎的奶牛为试验动物,随机分为试验组（20头）和对照组（8头）。选用清热燥湿中药黄柏、大黄和公英经乙醇提取后加入冰片制成涂搽剂＂消乳灵＂,局部涂搽乳房治疗奶牛乳房炎,试验期为2周。[结果]涂搽＂消乳灵＂2周后乳房炎治愈率达89.47%,泌乳量显著提高（P〈0.05）;同时乳汁中体细胞数明显下降,差异极显著（P〈0.01）;血浆中SOD和GSH-Px活性极显著提高（P〈0.01）。[结论]消乳灵对奶牛乳房炎有很好的治疗效果。