我国苹果潜隐病毒的研究进展

本文概述了我国近十五年来苹果潜隐病毒研究的进展。着重评述了苹果潜隐病毒的检测方法。     

苹果潜隐病毒的快速鉴定试验

在前人温室鉴定基础上，利用国外引进的人工气候室对国内已知的３种主要苹果潜隐病毒在几种恒温条件下进行鉴定。结果表明，用木本指示植物鉴定法，褪绿叶斑病毒在１８℃、茎痘病毒和茎沟槽病毒在２６℃条件下症状出现早、强度大，易于观察识别，仅需１０～２０ｄ好可鉴定清楚，比现有条件下（１６～２７℃）的温室鉴定周期缩短１５ｄ左右。     

苹果潜隐病毒(Latent Virus)研究——苹果主栽品种潜隐病毒毒原鉴定

1984—1985年对陕西、甘肃的红星、黄元帅、秦冠、国光和红富士五个苹果主要栽培品种,进行潜隐病毒毒源种类鉴定,其结果是:这些主要栽培品种都普遍带有苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟槽病毒。其潜带率是:褪绿叶斑病毒为70—100%;茎痘病毒为80～100%;茎沟槽病毒为20—40%。     

苹果无病毒苗木的繁育技术

果树病毒病及其类病毒病害均经嫁接传染,随繁殖材料远距离传播.而一旦感染病毒,终身则不得免除,加之目前没有能够有效防止病毒病的化学药剂和生物制品.因此,果树无病毒种苗的生产在病毒病防治上具有重要地位.基于此,详细介绍果树无病毒种苗的繁育技术.     

苹果无病毒幼树促发枝试验

在无病毒幼树上进行摘心,短截及涂发枝素试验,结果表明３种处理的可促进幼树多分枝,摘心和短截过的枝条促发的中,短枝较多,涂发枝素的枝条促发的超长枝较多,这有利于调整树林类组成和纠正偏冠树形。     

苹果无病毒砧木的无性繁殖技术研究

苹果无病毒砧木的无性繁殖技术研究何水涛，刘沛镇，崔怀玉（中国农业科学院郑州果树研究所，郑州４５０００４）苹果集约化栽培和其向优良品种、矮密无毒化的方向发展已成定势，如何快速大量地繁育无病毒苹果苗木已成为苹果生产中急待解决的问题。目前，苹果无病毒砧木的...     

苹果潜隐病毒快速检测

该文以优系短枝富士为主要试材，采用木本指示植物和间接酶联免疫（ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ）两种方法，对苹果褪绿叶斑病毒（ＣＬＳＶ）、苹果茎沟病毒（ＳＧＶ）和苹果茎痘病毒（ＳＰＶ）进行了检测．试验表明，俄罗斯苹果Ｒ１２７４０－７Ａ、司派２２７和弗吉尼亚小苹果３种指示植物可作为上述３种潜在病毒的鉴定植物．植物生长状况对鉴定结果有重大影响．间接酶联免疫检测速度快，准确度高．该试验所用最佳抗体工作浓度ＣＬＳＶ：第一抗体１／６０００，第二抗体１／２０００；ＳＧＶ：第一抗体１／５０００，第二抗体１／３０００．     

苹果无病毒苗木和幼树的生育表现

本试验用无病毒的金冠、国光、甜黄魁等品种苗木和幼树,进行观察研究表明,无病毒苗木比带毒苗木生长旺盛.苗木高度、粗度、叶片大小和鲜重呈极显著差异,而且苗木高度和粗度的整齐度高.无病毒幼树与带毒树比较,干周、新梢生长总量、新梢长和叶片大小均呈显著或极显著差异,同时单株花量多,产量高,果个大,比带毒树易早期丰产.     

苹果潜隐病毒的研究——Ⅱ.苹果茎沟槽病毒对苹果生理生化的影响

用金冠、富士二品种幼苗接种茎沟槽病毒(SGV)后,分期测定蛋白质、核酸、DNA、总氮、氨基酸、可溶性糖、铁和锌含量。结果表明:受SGV侵染的植株,核酸、蛋白质含量下降;DNA、总氮、游离氨基酸含量增加;铁含量增加,锌含量减少,可溶性糖含量增加。     

苹果茎沟病毒RT-PCR检测技术

用苹果的叶片作为材料,研究比较了两种提取苹果总RNA方法的效果,确定了较好的提取方法。根据苹果茎沟病毒外壳蛋白基因设计引物,通过RT-PCR扩增在苹果叶片总RNA样品中获得了524 bp的特异片断,通过对该片段的序列分析与苹果茎沟病毒外壳蛋白基因源序列比较,其同源性高达93%。通过多次重复实验验证,该方法能很好地检测苹果茎沟病毒。     

苹果潜隐病毒的研究——Ⅲ.茎沟槽病毒对苹果内源激素的影响

用LC—6A高效液相色谱仪测试富士二年生苹果苗的三种内源激素。结果表明:受茎沟槽病毒侵染植株GA_3、CTK及IAA,三种内源激素的含量均较对照(无毒植株)低。GA_3降低最显著,比无毒植株低111.18％,CTK比无毒株低19.66％,IAA比无毒株低17.69％。     

生物素标记cDNA探针检测苹果锈果类病毒

以含苹果锈果类病毒(ASSVd)全长序列的重组质粒PUC为模板DNA,加入ASSVd类病毒特异性引物,应用聚合酶链式反应技术(PCR)合成了生物素标记的cDNA探针,在斑点杂交反应中,探针最适使用浓度为1/10,探针检测感病的ASSVd类病毒的最大稀释倍数是1/100。利用制备的探针进行田间检测,结果与RT-PCR检测结果一致,阴性对照均无杂交信号出现。     

苹果优新品种无病毒母本树的培育

采用盆苗或试管苗热处理方法对昂林等16个苹果优新品种进行脱毒处理,采用木本指示植物2重芽接法和RT-PCR技术检测ASGV、ASPV和ACLSV 3种病毒,共获得11个苹果品种35株无病毒母本树,其中,盆苗热处理平均脱毒株率为46.1%,试管苗热处理平均脱毒株率为79.2%。