中药有效成分对细菌溶血素的抑制作用

在防制细菌性疾病方面,抗菌药物起着非常重要的作用,但是随着抗菌药物在临床上的广泛应用,细菌的耐药问题日益突出,给临床治疗带来极大困难。近年来,以中药抑制细菌毒力因子控制细菌感染的治疗策略已引起国内外学者的广泛关注。细菌溶血素是细菌产生的主要毒力因子之一,随着研究的不断深入,开发溶血素抑制剂成为解决细菌感染问题的关键。现针对中药对细菌溶血素的抑制作用进行综述,以期为临床治疗细菌性疾病提供理论依据。     

猪链球菌2型毒力因子及疫苗候选蛋白研究进展

猪链球菌2型（ss2）是一种重要的人兽共患病病原菌,可引起人和猪发生严重疾病。SS2的经典毒力因子有荚膜抗原、溶菌酶释放蛋白、溶血素等。随着研究的深入．又发现了一些与SS2致病性相关的基因和毒力相关元件,以及一些蛋白酶类,这些毒力因子多数具有较好的免疫原性,并在链球菌致病和生长过程中发挥十分重要的作用。通过对一些具有免疫原性的SS2毒力因子蛋白片段进行体外重组表达,有望研制出有效预防SS2感染的基因工程疫苗。     

无乳链球菌毒力基因与耐药性的相关性研究进展

乳房炎是奶牛养殖业中最常见的一种疾病，会造成奶牛乳腺发炎肿胀，使产奶量大幅下降。作为一种多因素性疾病，奶牛乳房炎发病原因复杂，饲料污染、病原菌感染以及环境因素均可以导致乳房炎的发生。无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）作为奶牛乳房炎的主要致病菌，常会造成乳腺组织的局部炎症，随着无乳链球菌分离率的增加以及抗菌药物的滥用，其对抗菌药物的耐药性逐步攀升，给临床治疗带来了一定的困难。此外，无乳链球菌能够定植于宿主体内，破坏宿主的免疫系统，而其自身毒力因子会引起宿主机体疾病的产生。随着相关研究的深入，发现毒力与耐药性本身互为关联，耐药性的增强以不同的方式影响毒力，表明了耐药性与毒力因子之间存在着一定的相关性。笔者主要回顾了国内外链球菌以及其他细菌毒力基因与耐药性之间相关性的研究进展，从无乳链球菌毒力因子及耐药性等多种角度入手，分析了无乳链球菌的毒力机制以及毒力基因，并对近5年国内不同地区无乳链球菌耐药性进行统计，从细菌种类、环境和相关机制对链球菌的毒力和耐药性之间的关系展开综述，以期为无乳链球菌所引起的临床症状筛选出合理的抗菌药物并对毒力基因与耐药性的相关性研究提供理论参考。     

黄酮类化合物抗菌作用及机制的研究进展

随着抗菌药物在临床预防与治疗中的广泛应用,细菌耐药性问题日趋严重,泛耐药菌株及多重耐药菌株显著增多。中草药因其特殊的抗菌机制而不易产生耐药性,使得抗耐药菌中草药的研发及其抗菌机制的研究越来越受到人们的关注。天然存在的黄酮类化合物具有一定的抗菌活性,其中大部分种类对金黄色葡萄球菌、链球菌和枯草杆菌等革兰氏阳性菌的抑制作用较明显,不良反应相对较轻,且不易出现耐药性。文章就黄酮类化合物的抗菌作用及机制作一综述。     

一株草鱼维氏气单胞菌的分离鉴定及毒力基因分析

为了鉴定贵州芩巩县某养殖场草鱼发病死亡的病原,本研究通过临床解剖观察、细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化鉴定、药敏试验、动物回归试验、16S rDNA与gyr B基因测序及系统分析进行鉴定。结果显示,本研究从发病草鱼体内分离到1株致病菌GZQG2019,分离菌在培养基中呈圆形、表面湿润光滑、边缘整齐半透明的灰白色菌落,菌落周围呈现β-溶血环;革兰氏镜检显示,分离菌呈两端钝圆短小阴性杆菌;16S rDNA、gyr B基因序列分析显示,分离菌与维氏气单胞菌聚为一支,同源性均在99%以上;药敏试验结果显示,在使用的20种抗菌药物中,该菌对四环素、丁胺卡那、多黏菌素B和头孢曲松等10种药物敏感,对苯唑西林、青霉素、阿莫西林和庆大霉素等8种药物中度敏感,对头孢氨苄、复方新诺明2种药物耐药;动物回归试验显示,该菌对健康草鱼具有强致病性;10种毒力基因扩增结果显示,分离菌携带气溶素、热不稳定性肠毒素、溶血素、核酶、丝氨酸蛋白酶、弹性蛋白酶和酯酶7种毒力基因。本试验成功分离到1株草鱼源维氏气单胞菌,具有较强毒力,且携带多种毒力因子;对四环素、丁胺卡那等药物敏感,对四环素、丁胺卡那等耐药,为维氏气单胞菌病临床用药提供参考依据。     

中药与甲氧苄啶复方对小鼠血液学和免疫学指标的影响

为明确中药与甲氧苄啶复方在动物体内抗感染作用的机制,本试验研究了其对小鼠血液学和免疫学指标的影响。将受试药物按1、5、10 g/kg体重连续腹腔注射15 d,通过Coulter-JT血细胞分析仪对血液中的红细胞、白细胞、中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞进行了计数。采用脏器系数测定法、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞法、比浊法和MTT法分别对小鼠免疫器官指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶菌酶含量、血清溶血素水平和淋巴细胞增殖能力进行测定。结果表明中药与甲氧苄啶复方可显著增加血液中的红细胞数、单核细胞比例等(P＜0.05),显著增加免疫器官指数,增强腹腔巨噬细胞吞噬功能和血清溶菌酶活性,提高血清溶血素水平和淋巴细胞增殖能力(P＜0.05)。因此中药与甲氧苄啶复方对小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能均有增强作用。     

犬牙周病的临床研究进展

牙周病(periodontal disease, PD)是由细菌在牙齿表面聚集形成的牙菌斑和牙结石逐渐侵蚀牙周组织,引发周围组织炎症的一类疾病。根据疾病的发展进程,可分为齿龈炎与牙周炎2个阶段。在小动物临床疾病中牙周病尤为常见,世界范围内约有80%的成年犬患有该病。由于饲主对于犬的口腔保健意识薄弱且该疾病隐秘性较高,患犬就诊时往往已出现牙周支持组织不可逆的损伤,细菌及其毒力因子通过血液循环进入全身从而引发系统性疾病的风险大大提高。但目前犬牙周病的核心致病菌属、菌群失调的原因与发病机制尚不明确。因此,笔者基于高通量测序方法的病原学研究结果,分析与疾病发展相关的微生物群。同时,整合目前世界通用的最新犬牙周病临床诊断分级标准及犬牙周病的中西医防治方案,分析犬牙周病与全身系统性疾病之间的相关性,系统综述犬牙周病在国内外小动物临床领域的研究进展,以期为该类疾病的临床诊疗提供理论参考,推进兽医师在临床实践中更高效地开展该类疾病的诊疗工作,并为犬牙周病相关的临床研究提供思路。     

Staphylococccus pseudintermedius surface proteins SpsD and SpsO mediate adherence to ex vivo canine corneocytes

The Gram-positive bacterium Staphylococcus pseudintermedius is regarded as the major cause of canine bacterial pyoderma. Despite its clinical importance, there is only very limited knowledge about the pathogenesis of S. pseudintermedius infection and the specific bacterial virulence factors involved in causing disease. Using a whole-genome approach, we have previously identified 18 predicted cell-wall-anchored surface proteins representing possible virulence factors in a clinical isolate of S. pseudintermedius (strain ED99). They were designated S. pseudintermedius surface proteins A-R (SpsA-SpsR). The present study tested three of the putative Sps proteins (SpsD, SpsL and SpsO) for their ability to mediate adherence of bacteria to canine corneocytes. The three proteins were expressed on the surface of the nonpathogenic surrogate host Lactococcus lactis, a Gram-positive bacterium that does not adhere to canine corneocytes. Adherence assays were performed using corneocytes from different healthy canine donors (n = 5), and bacterial cells were quantified using computerized image analysis. Two of the proteins, SpsD and SpsO, mediated adherence of L. lactis to canine corneocytes, suggesting that they contribute to S. pseudintermedius pathogenesis and may represent novel therapeutic targets to combat infection.     

鹅巴氏杆菌病病原分离鉴定与中药的筛选

应用常规分离鉴定技术,对湛江市某养鹅场的病鹅进行病原分离与鉴定,通过试管二倍稀释法测定鱼腥草、五倍子、黄芩等30种中药药液对病原菌的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),筛选出抗菌作用较强的中药作为主药,与其他中药组成复方,测定中药复方对病原菌的体外抑制效果.结果表明:分离的病原菌符合巴氏杆菌的生化特性;五倍子(MIC=3.125mg/mL)和诃子(MIC=12.5mg/mL)对巴氏杆菌有较强抑菌活性,选取五倍子、诃子、五味子、乌梅、山茱萸、石榴皮、栀子和虎杖作为主药与其他中药分别组成复方,主药与大多数中药组成的复方抗菌作用增强.     

中草药对细菌耐药质粒的消除作用研究

动物养殖中常见病原菌对抗菌药物的耐药性呈逐年上升的趋势,引起了广大科研工作者的极大关注。病原菌耐药性的产生主要与质粒有关,质粒能够将耐药基因传递给环境中的其他细菌,进而引起多重耐药菌株的出现。本文就细菌耐药现状、细菌耐药性与质粒关系、中草药对细菌耐药质粒的消除效果、中草药消除耐药质粒的机理、存在的问题、中草药对耐药质粒消除的展望这些方面进行简单综述。     

犬脓皮病耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌抗菌药耐药性及消毒剂抗性研究进展

犬脓皮病是一类主要由耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌（MRSP）感染而引起的化脓性皮肤病。葡萄球菌是一种人与动物均易感的细菌，常引起各种化脓性疾病，其中，MRSP作为一种动物源葡萄球菌还会成为耐药基因贮存库，可将耐药基因通过环境或食物链传给人类。近年来MRSP造成的皮肤疾病病例大幅上升，给感染的控制带来挑战。笔者综合了犬脓皮病致病菌的抗菌药耐药性及其消毒剂抗性的相关研究，从MRSP的致病机制出发，总结了MRSP通过破坏细胞免疫系统的功能导致感染发生的相关机制，简述了多个国家MRSP对抗菌药的显著耐药性与相关耐药基因，如mecA和cat基因等，介绍了MRSP对胍类消毒剂与季铵盐类消毒剂的抗性及抗性机制，对外排泵、基因调控与抗性基因的可转移性等多种机制进行了论述，同时为避免MRSP对抗菌药与消毒剂的共同耐药性对犬脓皮病的治疗造成干扰，笔者从移动遗传元件介导的获得性抗性与依赖于细菌细胞结构的固有抗性等方面系统地分析了MRSP对消毒剂抗性和抗菌药耐药性之间的争议与联系，以期寻找一种科学合理的治疗方案，为犬脓皮病的临床用药提供参考。     

5种中药和28种抗生素对养殖鳗鲡致病菌的抑制作用

采用琼脂稀释法和纸片扩散法分别测定了5种中药（五倍子、虎杖、黄芩、大黄、石榴皮）和28种抗生素对养殖病鳗中分离到的5株病原菌（创伤弧菌、嗜水气单胞菌和迟钝爱德华氏菌）的体外抑菌作用。结果表明,5种中药对5株致病菌均具有较好的抑菌效果,MIC范围为0.125-1.500 mg/mL,平均抑菌作用依次为五倍子〉虎杖〉黄芩〉大黄〉石榴皮,其中五倍子抑菌作用最强,平均MIC为0.200 mg/mL。28种抗生素药物敏感试验结果表明,5株致病菌均对利福平、链霉素、庆大霉素、哌拉西林、青霉素G、强力霉素、头孢曲松、头孢克洛、头孢噻吩、头孢唑啉10种抗生素药物敏感,对奥格门丁、阿奇霉素耐药。     

Lymphocyte transformation suppression caused by pyoderma--failure to demonstrate it in uncomplicated demodectic mange

Three dogs with demodectic mange uncomplicated by a bacterial infection and 9 dogs with demodectic mange and pyoderma were tested for their lymphocyte response to phytomitogens in vitro and for the presence of the serum's lymphocyte immunoregulatory factors (SLIF) suppressing blastogenesis. None of the 3 dogs with uncomplicated demodectic mange showed any detectable dysfunction of their lymphocytes or presence of the blastogenesis suppressing SLIF. Their lymphocytes generally responded to the mitogens with more blastogenesis than lymphocytes from healthy controls. On the other hand, in the group of 9 dogs with demodicosis complicated by a bacterial infection, high levels of the blastogenesis suppressing SLIF for concanavalin A-sensitive cells were detected in 4 dogs, for phytohemagglutinin-sensitive cells in 2 dogs, and for pokeweed mitogen-sensitive cells in 1 (of only 3 tested) dog. Dysfunction of lymphocytes per se (detected by a decreased blastogenesis in nonsuppressive normal canine and bovine sera) was detected in 3 dogs with demodicosis with pyoderma. The success of the treatment of demodectic mange or the bacterial skin infection did not correlate with the previous presence or absence of the blastogenesis suppressing SLIF. The treatment of pyoderma was less successful in dogs with an increase in blastogenesis of unstimulated cells in fresh normal canine serum over that in autologous serum. All 3 dogs with a detected dysfunction of their lymphocytes either died or were euthanatized as untreatable cases. It is concluded that the development of demodectic mange per se did not cause the appearance of the blastogenesis suppressing SLIF, which was primarily related to the appearance and extent of the secondary bacterial skin infection.     

桑树病原原核生物及其病害的研究进展(Ⅰ)

侵染桑树的病原原核生物有细菌、菌原体、螺原体、立克次体等,其中由病原细菌引发的桑树细菌病害对蚕桑生产的危害极大。主要介绍原核生物界薄壁菌门的病原细菌侵染桑树导致的桑疫病、桑青枯病、桑枝软腐病、桑枯萎病和桑叶斑病等重要桑树细菌病害,从病原及其侵染循环,桑树发病规律、发病症状,病害防治方法几个方面概述其研究进展。     

亚抑菌浓度穿心莲提取物对减缓金黄色葡萄球菌α-溶血素介导的A549细胞损伤作用的影响

金黄色葡萄球菌是一种广泛存在的重要致病菌,可引起人类和动物许多严重的感染。另外,α-溶血素是金黄色葡萄球菌最重要的毒力因子之一。本研究通过乙醇回流提取方法,获得中草药穿心莲提取物,然后通过最低抑制浓度(MIC)值测定、溶血活性测定、Western blotting、RT-PCR、LDH及Live/dead等方法研究分析穿心莲提取物对金黄色葡萄球菌α-溶血素分泌的影响及对A549细胞的保护作用。试验结果表明,穿心莲提取物对金黄色葡萄球菌的MIC值为2048 μg/mL,且呈剂量依赖性地抑制金黄色葡萄球菌α-溶血素分泌,并能有效减缓金黄色葡萄球菌菌液上清对A549细胞的损伤。提示,穿心莲提取物是一种潜在的抗金黄色葡萄球菌感染的药物。     

Update on the diagnosis of Haemophilus parasuis infection in pigs and novel genotyping methods

Haemophilus parasuis causes Gl?sser's disease as well as a number of other diseases in pigs. The diagnosis of H. parasuis-associated disease is usually established by clinical signs, pathological findings and bacterial isolation but diagnosis is complicated by the existence of non-virulent strains and the early colonisation of the upper respiratory tract of healthy piglets. Moreover, several strains can be found on a farm and even within a single animal so it is important to determine the specific strain that is causing the clinical outbreak. Recently, genotyping methods have been developed with the goal of correlating genotype with the degree of virulence of H. parasuis strains. The association between genotype and virulence in H. parasuis is challenging due to the lack of knowledge of the complete genomic sequence and virulence factors of this bacterium.     

猪链球菌2型的分离鉴定及致病性试验

从全国部分猪场采集疑似猪链球菌感染病例脑样品20份进行细菌分离,成功分离到10株细菌,通过猪链球菌及血清类型鉴定,最终确定其中一株为2型猪链球菌。应用猪链球菌7种主要毒力因子特异性基因扩增检测方法检测所分离到的2型猪链球菌的毒力因子分布情况,并应用小鼠攻毒试验对其致病性进行观察研究。结果表明:分离的2型猪链球菌具备7种毒力因子;动物试验表明SS2能引起小鼠的急性败血症及脑膜炎;细菌回归试验结果表明,试验组死亡小鼠的脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植,且能分离出攻毒菌。此分离菌株的研究为研制2型猪链球菌病疫苗奠定了基础。