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1.
为研究从酸马奶中提取的植物乳杆菌DSM20174细菌素的理化特性,本试验提纯植物乳杆菌DSM20174细菌素,经过硫酸铵沉淀、透析后得到细菌素粗提液,再利用SephadexG-100凝胶柱层析进行纯化后,细菌素的比活力明显增加,达到154.70 AU/mL,得率为43.5%.采用牛津杯法测定纯化的植物乳杆菌DSM20174细菌素在3种不同方式处理下对牛源野生致病性大肠杆菌O78抑菌效果的影响.结果显示:①植物乳杆菌DSM20174细菌素在5组温度处理下,随着温度的升高抑菌作用降低,各组抑菌作用差异显著(P<0.05).即使121 ℃处理30 min后,抑菌直径仍达14.90 mm.②植物乳杆菌DSM20174细菌素在pH 2.0~12.0由低到高的11组酸碱处理下,pH越大抑菌直径越小,且除了pH 9.0和pH 10.0之间差异不显著(P>0.05)外,其余各组抑菌作用均差异显著(P<0.05). ③植物乳杆菌DSM20174细菌素经胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶3种酶处理后抑菌直径变化明显,处理前后抑菌作用均差异显著(P<0.05).结果表明植物乳杆菌DSM20174细菌素是较好的抑菌活性物质,但不是热稳定性物质;具有较广泛的pH适用范围,且pH越小时其抑菌活性越强,在最适生长pH时抑菌活性有所增强;不是蛋白酶稳定性物质. 相似文献
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为了探究天然发酵酸马奶中发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O8(E.coli O8)的抑菌机理,本试验从酸马奶中分离筛选出抑菌效果最佳的菌株,对其进行16S rDNA序列鉴定,经NCBI网站BLAST对比鉴定菌种;对菌株进行培养发酵,制备无细胞发酵上清液(CFS);通过排酸、排过氧化氢(H2O2)、不同蛋白酶处理等方法初步确定CFS中的抑菌活性物质性质及其含量;采用牛津杯法和二倍稀释法确定CFS对致病性E.coli O8 24 h生长曲线的最佳抑菌浓度;试剂盒法测定CFS对致病性E.coli O8的细胞膜和细胞壁通透性的影响。结果显示,从酸马奶中分离出22株对致病性E.coli O8有抑制作用的菌株,对抑菌作用最好的菌株进行16S rDNA序列鉴定及系统进化树分析后确定其为发酵乳杆菌属;CFS中主要的抑菌物质为蛋白,含量为399.5 μg/mL;最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别为25.0和49.9 μg/mL;CFS能使致病性E.coli O8的碱性磷酸酶(AKP)含量在1 h内快速升高,之后呈缓慢增长趋势,且使致病菌培养液中的蛋白含量明显升高。综上所述,发酵乳杆菌CFS的主要抑菌物质为蛋白,蛋白浓度越高抑菌能力越强;CFS通过破坏或改变致病性E.coli O8细胞膜和细胞壁的通透性,使其释放出AKP和胞内蛋白,从而在短时间内起到抑制致病性E.coli O8生长的作用。 相似文献
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细菌素因具备抵御食源性致病菌和腐败菌的特性,可作为天然无毒抗菌剂应用在食品中。生物信息学是以计算机科学和应用数学为基础理论,将生命科学领域测得的生物信息经搜索比对,分析相关的核酸信息和蛋白结构基因,从而定位功能基因的一门科学。其中,转录组学即从整体转录水平分析不同细胞或组织在特定条件下所转录的所有RNA,从而揭示生物学通路和调控分子机制。将转录组测序结果中获得的海量数据与参考基因组比对,即可从基因表达水平上定量分析转录本的遗传信息。通过差异表达倍数筛选出差异基因,对其进行GO(Gene Ontology)功能注释和KEGG通路富集分析,进而推测其功能特性,并揭示细菌素等代谢产物的合成机理。由于转录组测序不存在安全隐患且属于较为经济的调控方式,因此该技术有望为细菌素大规模投入生产提供新思路。 相似文献
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自然发酵泡菜汁中植物乳杆菌的分离鉴定与体外益生特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用MRS固体培养基从自然发酵的泡菜汁中分离到1株优势乳酸菌,将其命名为菌株R1,经16S rRNA基因序列分析,并结合生理生化特性和糖发酵试验将其鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。菌株R1具有很强的产酸能力,24 h内可使MRS液体培养基p H从6.14降为3.59。菌株R1的发酵上清液对痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鸡肠炎沙门氏菌、大肠埃希氏菌均有很好的抑制作用。体外益生试验表明,菌株R1能耐受0.3%的胆盐、p H 3.0的酸度以及60℃、30 min的热处理,对人工胃液和人工肠液也有很好的耐受性。菌株R1对头孢类和青霉素类抗生素较敏感,对诺氟沙星、卡那霉素、链霉素等抗生素不敏感。 相似文献
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【目的】筛选新型广谱有效的抑菌蛋白,为全面解析植物乳杆菌抑菌机制和开发新型抗菌制剂奠定基础。【方法】以植物乳杆菌GX20200417-1为研究对象,采用牛津杯法测定其抑菌活性,以低温离心和超滤法初步分离获得胞外蛋白并测定其抑菌活性,对胞外蛋白进行不同温度、pH及蛋白酶处理,研究抑菌蛋白理化特性,利用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)进一步分析鉴定植物乳杆菌代谢产物中的抑菌成分。【结果】植物乳杆菌GX20200417-1对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有良好的抑菌作用;发酵上清液在发酵24 h的抑菌能力最强;胞外蛋白的抑菌能力与发酵上清液相近;植物乳杆菌抑菌蛋白具有较好的耐热特性,与对照组相比,在20~80 ℃时抑菌活性均无显著变化(P<0.05),在pH 6.0~8.0时抑菌活性最佳,对蛋白酶敏感;经LC-MS/MS鉴定分析,检测出5种可信度较高且与抑菌作用相关的蛋白质,分别是片球菌素pediocin PA-1、溶菌素(lysin)、聚酮合酶(polyketide synthase)、辅助蛋白(accessory protein)和LysM peptidoglycan-binding domain-containing protein,分子质量分别为5.348、7.348、8.348、6.348和19.662 ku;蛋白质功能分析结果表明,片球菌素pediocin PA-1与溶菌素主要通过破坏细菌细胞壁与细胞膜,从而达到抑菌效果。LysM peptidoglycan-binding domain-containing protein可识别含有N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)残基的肽聚糖,上调抗菌肽的表达;辅助蛋白主要参与细菌素的合成,聚酮合酶主要参与抗生素的合成,二者通过参与抑菌物质的合成间接发挥抑菌作用。【结论】本研究成功分离并鉴定植物乳杆菌GX20200417-1的5种抑菌蛋白;植物乳杆菌GX20200417-1可能通过其代谢产物中的多种抑菌蛋白协同发挥抗菌作用。 相似文献
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【目的】试验旨在研究植物乳杆菌GX20200417-1菌株的生物学特性及体外抑菌活性,探讨其在生产中应用的可能性。【方法】将植物乳杆菌GX20200417-1菌株接种至不同pH和含不同浓度胆盐的PBS,以及人工胃肠液中,使用菌落计数分析其对酸、胆盐和人工胃肠液的耐受性。使用牛津杯法检测GX20200417-1菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及沙门氏菌的抑菌能力;通过与霉菌毒素共培养后使用ELISA方法研究GX20200417-1菌株对霉菌毒素的降解能力,并饲喂小鼠进行安全性试验。【结果】植物乳杆菌GX20200417-1菌株能够耐受pH 2.0及0.3%胆盐,并在人工胃肠液中有至少1×104 CFU/mL的活菌数;GX20200417-1菌株发酵上清液对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用,对玉米赤霉素及黄曲霉毒素均有降解作用,但对呕吐毒素无降解作用;灌服GX20200417-1菌株后小鼠安全、无毒副作用。【结论】植物乳杆菌GX20200417-1菌株具有优良的益生特性,在畜禽生产中有一定的开发潜力。 相似文献
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试验对植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,Lp)出发菌与携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记基因的重组植物乳杆菌(Lp-GFP)生物学特性进行了详细的比较研究,以便于深入开展益生菌植物乳杆菌在动物肠道内分布和定植规律的研究。结果显示,Lp和Lp-GFP生长曲线的变化趋势基本相同,其中Lp-GFP的生长速度略有滞后;Lp和Lp-GFP最适培养温度均为37 ℃,最适初始pH均为6.5;Lp和Lp-GFP耐高温、耐人工胃液、耐人工肠液和耐胆盐的特性趋势一致;Lp和Lp-GFP的抑菌特性无显著差异(P>0.05);除了红霉素,Lp和Lp-GFP对其他药物的敏感性基本没有发生变化。综上所述,植物乳杆菌的重组对其生物学特性没有显著的影响,这为重组标记菌株的后续培养和机理研究奠定了重要基础。 相似文献
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为了初步研究前期试验筛选获得的枯草芽孢杆菌产细菌素的生物学活性,本试验采用杯碟扩散法绘制出硫酸黏杆菌素和杆菌肽锌两种抗生素的抑菌效价标准曲线,用抗生素效价当量来评价细菌素的活性,并在不同温度处理下测定其抗菌活性和热稳定性。结果表明,125 mg/mL细菌素溶液抑菌效价与26 mg/mL硫酸黏杆菌素或11.9 mg/mL杆菌肽锌溶液相当。此外,该细菌素在高温条件下(60~80 ℃)处理15 min仍能维持较高抑菌活性。综上所述,本试验在细菌素和抗生素的抑菌活力之间建立了更直观的联系,并证明了该细菌素具有较好的热稳定特性,为其产业化推广提供了理论支持和技术借鉴。 相似文献
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WEI Xu-biao WU Ru-juan ZHENG Zhao-jun MA Guang LIAO Xiu-dong ZHANG Ri-jun 《中国畜牧兽医》2015,42(12):3268-3273
The standard curve of two antibiotics (colistin sulfate and bacitracin zinc) was carried out to assess antimicrobial activity of bacteriocin,which obtained from our earlier work,using cup-dish method.In addition,we also observed the effects of the reaction temperature on the antibacterial activity of the bacteriocin.Results showed that 125 mg/mL bacteriocin displayed similar antibacterial activity to 26 mg/mL colistin sulfate or 11.9 mg/mL bacitracin zinc.Furthermore,the bacteriocin remained good thermal stability under high temperature (nearly 60 to 80 ℃) in 15 minutes.Overall,this research built a direct relationship between this bacteriocin and antibiotics,and testified good stablility of this bacteriocin,providing theoretical support and technology reference to promote its large scale production. 相似文献
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Kensuke ARAKAWA Yasushi KAWAI Kenji FUJITANI Junko NISHIMURA Haruki KITAZAWA Ken-ichi KOMINE Kenzo KAI Tadao SAITO 《Animal Science Journal》2008,79(5):634-640
The use of bacteriocins from Lactobacillus gasseri , a probiotic lactic acid bacterium, as bio-preservatives in the food industry and animal formulations has been limited because few strains of Lb. gasseri are cultivated and produce a bacteriocin in natural media such as milk and milk-based media. By the determination of the growth-supplements to milk among the 47 nutrients, Lb. gasseri JCM1131T , LA39 and LA158 isolated from human feces were successfully cultured in reconstituted skim milk and cheese whey using proteose peptone as a nutrient supplement, where Lb. gasseri LA39 produced a useful bacteriocin, gassericin A, with effective growth-inhibiting activity against Gram-positive food-borne pathogens. The data suggest these developed low-cost safe media supporting enough production of bacteriocins by the probiotic Lb. gasseri LA39 could be used to improve the safe bio-preservation of foods and therapy of bovine mastitis, and extra cheese whey produced by cheese making industry is reused in the cultivation for probiotics effectively. 相似文献
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以益生菌植物乳杆菌LIP-1为研究对象,MRS基础培养基为对照,通过改变培养基的成分及其含量(碳源、氮源、碳氮总量及碳氮比、缓冲盐),研究培养基成分的变化对植物乳杆菌LIP-1高密度培养的活菌数以及冷冻干燥后存活率的影响。结果表明:通过优化工艺和配方确定的最佳培养基组成为碳源(蔗糖)添加量33.35 g/L、复合氮源(酵母粉、大豆蛋白胨、酪蛋白胨质量比3∶3∶5)添加量10.80 g/L、缓冲盐(乙酸钠、磷酸氢二钾、柠檬酸钠质量比2.5∶1∶1)添加量14.85 g/L(即0.13 mol/L);用优化后 相似文献
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试验旨在利用色谱-质谱联用(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)代谢组学技术分析植物乳杆菌发酵黄芪的代谢产物,并探索其互作发酵机制。分别采取植物乳杆菌发酵黄芪(FT组)和未发酵黄芪固态粉末(CT组),经样本前处理、LC-MS分析、生物学信息分析等探寻差异代谢物并分析代谢通路。结果显示,总离子流图峰图重现性良好,发酵黄芪主要代谢物共鉴定出183种代谢成分,正离子和负离子模式样品间关系PCA图均能良好区分。火山图分析表明,FT和CT组间的代谢物变化具有差异性,正离子模式上调的1 416个代谢物富集到83个代谢途径;下调的935个代谢物富集到83个代谢途径;负离子模式上调的1 040个代谢物富集到52个代谢途径,下调的809个代谢物富集到45个代谢途径。发酵黄芪差异代谢产物酸类、脂类、酮类等氨基酸显著增加,烯类等氨基酸显著下调,其中上调代谢物15个,下调代谢物2个,关键代谢产物主要为α-硫酸二乙酯、2-甲基柠檬酸、3-异丙烯基-6-氧代庚酸等,涉及到丙酮酸代谢、丙酸代谢、半乳糖代谢等途径。本研究结果为发酵黄芪的代谢产物、发酵互作机制和临床应用提供理论依据。 相似文献
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为改善酸羊乳风味与品质,提高酸羊乳的功能价值,将自浆水中筛选的植物乳杆菌JS5和JS19用于羊乳发酵,研究其对酸羊乳理化性质、质构特性及功能特性的影响。结果表明:2 种植物乳杆菌与商业发酵剂复合发酵后,均能在贮藏期内有效提高酸羊乳持水性和表观黏度,降低其硬度与胶着性,促进乙醛和双乙酰的释放;添加植物乳杆菌JS5的酸羊乳胆固醇降解率显著高于对照组(P<0.05),最高可达36.62%;添加植物乳杆菌JS19的酸羊乳体外抗氧化能力更强,贮藏1 d时1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率高达70.58%,铁离子还原/抗氧化能力达32.03 μmol/L。2 种菌株均为适用于羊乳发酵生产的优良菌株。 相似文献
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添加糖蜜和植物乳杆菌对谷草黄贮发酵品质的影响 《畜牧与饲料科学》2021,42(3):28-31
[目的]探究糖蜜和植物乳杆菌的添加对谷草黄贮发酵品质的影响。[方法]以内蒙古自治区农牧业科学院院内试验基地106号和107号两种谷草为研究对象,试验组添加糖蜜(鲜重1.0%)和植物乳杆菌(106 CFU/g鲜重),无添加作为对照组进行黄贮调制,每组3个重复,于10~15 ℃室温中存放90 d。开封取样,测定黄贮的pH值、营养成分、乳酸和挥发性脂肪酸含量以及乳酸/乙酸值。[结果]添加组可以极显著(P<0.01)提高2种谷草黄贮中乳酸、乙酸含量以及乳酸/乙酸值;显著(P<0.05)降低106号谷草ADF含量;极显著(P<0.01)降低107号谷草pH值。[结论]添加糖蜜和植物乳杆菌可以提高谷草黄贮发酵品质。 相似文献
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为研究防治鸡大肠杆菌病的新方法,减少抗生素的使用及耐药菌株的产生,试验选取黄连、乌梅、白术等中药制成黄连组方口服液,检测其对大肠杆菌O78的抑制作用与临床疗效。体外试验采用最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC)检测口服液抑菌效果;应用流式细胞仪观察口服液对细菌死亡率的影响;利用扫描电镜和透射电镜观察口服液对菌体形态与结构的影响;临床试验检测口服液对鸡大肠杆菌病的治疗效果及免疫器官指数的影响。结果显示,口服液对大肠杆菌的MIC为62.5 mg/mL,MBC为250 mg/mL;流式细胞仪检测可见口服液组大肠杆菌的死亡率为74.1%,空白对照组大肠杆菌死亡率为37.2%;扫描电镜下可见口服液处理组的菌体溢缩、断裂,形成许多残体;透射电镜下可见菌体变形,质壁分离现象。临床疗效显示,黄连组方治愈率为86.67%,而西药组治愈率为63.33%;空白对照组和西药组脾脏指数与模型组差异极显著(P < 0.01),空白对照组、西药组、黄连组方高剂量组的法氏囊指数极显著高于模型组(P < 0.01),模型组的胸腺指数显著低于其余各组(P < 0.05)。本试验结果表明,黄连组方可使菌体发生变形、溢缩断裂、质壁分离等变化达到杀菌效果,并可通过提高动物体免疫力来防治雏鸡大肠杆菌病。 相似文献
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This study was aimed to explore the effect,dose of Lactobacillus reuteri on inhibition of pathogenic Escherichia coli infection on Kunming mice as well as its potential mechanism. 96 Kunming mice were randomly allocated into four groups with 4 replicates per group and 6 mice per replicate,which were control group,low dose group,middle dose group and high dose group. All of the mice feed commercial basal feedstuff,meanwhile the mice in control group drank tap-water,three treatments were supplemented with 1.0×106,1.0×107 and 1.0×108 CFU/mL Lactobacillus reuteri in water. The feeding period was 28 days. All the mice were weighted, and the ADFI,ADG and F/G were calculated at the end of experiment.At the day of 28,pathogenic Escherichia coli (4.98×109 CFU/mL) were irrigated to study the mortality. The indexes of intestinotoxin and antioxidation in serum and cecal microbacteria were inspected.The results indicated that supplemented with middle dose of Lactobacillus reuteri could significantly improve the final body weight,ADG compared with the control (P<0.05). The mortality, serum intestinotoxin level and MDA concentration,Escherichia coli and Staphylococcus were significantly lower than control group (P<0.05),while the T-SOD,T-AOC,GSH-Px,Lacobacillus and Bifidobacterium were significantly improved (P<0.05).In conclusion,with Lactobacillus reuteri supplementation,the growth performance was improved and antioxidant capacity and cecal microbacteria were enhanced after pathogenic Escherichia coli infected, mouse mortality caused by the pathogenic Escherichia coli was effectively reduced,and the effect of 1.0×107 CFU/mL Lactobacillus reuteri was the best. 相似文献
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本研究旨在探索益生罗伊氏乳杆菌抑制致病性大肠杆菌感染昆明鼠的效果、剂量及潜在机制。将96只昆明鼠随机分为4个组,每组4个重复,每个重复6只,分别为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。昆明鼠饲喂商品化基础日粮,对照组饮用自来水,低、中、高剂量组在饮水中分别添加1.0×106、1.0×107及1.0×108 CFU/mL罗伊氏乳杆菌。试验期为28 d,试验结束后称重,计算昆明鼠平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及料重比(F/G);并灌胃致病性大肠杆菌(4.98×109 CFU/mL),观察小鼠死亡率;检测血清大肠杆菌肠毒素含量、抗氧化能力及肠道菌群数量。结果显示,中剂量组小鼠末重和平均日增重均显著高于对照组(P<0.05),小鼠死亡率、血清大肠杆菌肠毒素浓度和丙二醛(MDA)水平均显著低于对照组(P<0.05)。中剂量组血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化力(T-AOC)活力均显著高于对照组(P<0.05),总乳杆菌和双歧杆菌数量显著提高(P<0.05),大肠杆菌和沙门氏菌含量显著降低(P<0.05)。综上,在小鼠饮水中添加罗伊氏乳杆菌可提高生长性能,改善攻毒后机体抗氧化力和盲肠菌群结构,降低血清大肠杆菌肠毒素含量和小鼠死亡率,有效降低致病性大肠杆菌的感染造成的死亡率,其中添加1.0×107 CFU/mL伊氏乳杆菌效果最好。 相似文献
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本试验旨在研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)GF103对生长猪生长性能、营养物质消化率及粪便微生物数量的影响。利用随机区组试验设计方法,将平均体重(26.36±1.93)kg的300头生长猪分为5个组,每组3个重复,每重复20头,重复内生长猪日龄一致、公母各占1/2。对照(CON)组饲喂基础饲粮,抗生素(PC)组在基础饲粮中添加杆菌肽锌40 mg/kg,植物乳杆菌1~3(T1、T2和T3)组分别在基础饲粮中添加1×109、5×109、1×1010CFU/kg的植物乳杆菌GF103。试验预试期7 d,正试期30 d。结果表明:1)T1组生长猪平均日增重和平均日采食量均显著高于其他各组(P0.05),料重比则显著低于其他各组(P0.05)。T2和T3组生长猪的平均日增重、平均日采食量和料重比与PC和CON组相比差异均不显著(P0.05)。各组间生长猪腹泻率无显著差异(P0.05)。2)T1、T3及CON组的总能、干物质、有机物质、粗蛋白质、粗脂肪消化率显著高于PC和T2组(P0.05),各组之间的中性洗涤纤维和磷的消化率无显著差异(P0.05)。3!T1、T2和T3组生长猪粪便中乳酸菌数量显著高于CON和PC组(P0.05),并且粪便乳酸菌数量随着植物乳杆菌GF103添加剂量的增加而增加;各组生长猪粪便大肠杆菌数量无显著差异(P0.05);T1组生长猪粪便中乳酸菌/大肠杆菌与T3组无显著差异(P0.05),显著高于其他各组(P0.05)。结果提示,在生长猪饲粮中添加1×109CFU/kg植物乳杆菌GF103,能够改善生长猪肠道菌群环境,提高生长猪生长速度和饲料利用效率。 相似文献
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四川规模化鸡场鸡致病性E.coli血清型、耐药性和质粒图谱的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
从四川10个规模化鸡场分离的经生化鉴定、动物回归试验获得46株鸡致病性E.coli。对46株鸡致病性E.coli进行了耐药性、血清型鉴定和质粒DNA分析的研究。试验结果表明:鸡致病性大杆菌易产生耐药性,且多为多重耐药;鉴定出36株大肠杆菌的O血清型共16种,占鉴定菌株的78.3%;流行的主要血清为O89、O141、O119、O127和O131,共22株,占定型菌株的61.6%,鸡致病性大肠杆菌血清型多,各地血清型各类差异大;质粒得率为100%,来源相同的菌株有相同或相似的质粒图谱和酶切图谱,来源不同的菌株质粒图谱一般不同,同一血清型可以有不同的质粒图谱。 相似文献