绿针假单胞菌HL5-4对番茄灰霉菌的抑制活性及其定殖能力

为探讨绿针假单胞菌HL5-4对番茄灰霉病的生防潜力,通过对峙培养和孢子萌发试验测定其对灰葡萄孢菌的抑制活性;进行离体试验和苗期试验测定其对番茄灰霉病的防治效果;采用平板稀释法测定其在番茄果实和叶片的定殖能力;并根据形态特征、生理生化特性及16SrDNA序列同源性对其进行鉴定。结果表明:HL5-4显著抑制灰葡萄孢菌的菌丝生长和分生孢子萌发,萌发抑制率为70.74%;在离体试验中,对番茄果实和叶片灰霉病的防治效果分别达到72.36%和59.85%,在盆栽试验中,对番茄苗期灰霉病的防治效果为62.88%;HL5-4在番茄果实和叶片保持一定的定殖密度,处理7d时能保持10~4和10~3 cfu·g~(-1)以上;HL5-4菌株鉴定为绿针假单胞菌(Pseudomonas choloeaphtis)。     

枯草芽孢杆菌NBF809防治番茄棒孢叶斑病研究

采用平板对峙结合显微观察确定枯草芽孢杆菌NBF809菌株对多主棒孢的抑菌活性,采用活体盆栽试验研究其对番茄棒孢叶斑病的防治效果。结果表明,在平板对峙条件下NBF809菌株对多主棒孢具有良好的抑菌活性,显微镜下观察到菌丝发生扭曲、肿胀和变形;盆栽试验结果表明NBF809菌株对番茄棒孢叶斑病的防治效果达到73.26%。聚合酶链式反应用于检测NBF809菌株的抗菌素生物合成基因,扩增到bac D、itu C、itu D、mrs M和myc C 5个基因,涉及Bacilysin、Iturin、Mersacidin和Mycosubtilin 4种抗菌素的合成。     

番茄匍柄霉叶斑病拮抗细菌的筛选与鉴定

应用平板对峙法从连作多年的番茄根际土样中筛选得到对番茄匍柄霉叶斑病具有较强拮抗活性的细菌菌株ZF161,该菌株对番茄匍柄霉的平板抑制率达到70.51%。离体叶片试验显示,菌株ZF161对番茄匍柄霉叶斑病防治效果达到69.83%。通过菌落形态观察、生理生化特性、Biolog测定和多基因系统发育树综合分析,鉴定菌株ZF161为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。番茄盆栽试验结果表明,菌株ZF161对番茄匍柄霉叶斑病的防治效果达到63.27%。进一步平板对峙抑菌谱试验结果显示,菌株ZF161对其他7种病原真菌也具有较好的抑制效果。上述结果说明,菌株ZF161对番茄匍柄霉叶斑病具有良好的防治效果,且对多种病原真菌也具有抑制作用,具有开发应用的潜力。     

番茄匍柄霉叶斑病拮抗细菌的筛选与鉴定

应用平板对峙法从连作多年的番茄根际土样中筛选得到对番茄匍柄霉叶斑病具有较强拮抗活性的细菌菌株ZF161,该菌株对番茄匍柄霉的平板抑制率达到70.51%。离体叶片试验显示,菌株ZF161对番茄匍柄霉叶斑病防治效果达到69.83%。通过菌落形态观察、生理生化特性、Biolog测定和多基因系统发育树综合分析,鉴定菌株ZF161为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。番茄盆栽试验结果表明,菌株ZF161对番茄匍柄霉叶斑病的防治效果达到63.27%。进一步平板对峙抑菌谱试验结果显示,菌株ZF161对其他7种病原真菌也具有较好的抑制效果。上述结果说明,菌株ZF161对番茄匍柄霉叶斑病具有良好的防治效果,且对多种病原真菌也具有抑制作用,具有开发应用的潜力。     

番茄灰霉病生防菌株TL1的分离、鉴定及其生防能力分析

为了筛选对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)具有拮抗作用的菌株,通过平板对峙法从西藏高原土壤中分离筛选到一株具有较好拮抗作用的菌株TL1。形态学观察、生理生化分析以及分子生物学鉴定结果表明,该菌株为马氏类芽孢杆菌(Paenibacillus maysiensis),并具有固氮和溶磷作用。TL1在平板上能显著抑制灰霉病菌菌丝生长,抑菌率为74.32%,且该菌产生的挥发性物质呈现显著抑菌活性。进一步平板抑菌试验表明,TL1菌株对褐斑病菌等6种病原真菌均具有显著抑菌活性,其中对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抑制率最高(73.48%),对黄瓜褐斑病菌(Corynespora cassiicola)的抑制率最低(57.37%)。TL1菌株能够在番茄果实上定殖并抑制由灰霉病菌引起的腐烂,且可以显著提高番茄种子的萌发率以及促进番茄幼苗生长。     

新型抗菌肽对番茄灰霉病的防治效果与机理的研究

以番茄、抗菌肽和番茄灰霉菌为试验材料,采用平板试验和番茄盆栽植株试验,研究了抗菌肽CB和D20I-39对灰霉菌(Botrytis cinerea)的抑菌效果及抑菌机制、抗菌肽对番茄灰霉病防效及对番茄叶片的抗病、抗氧化指标的影响,以期为抗菌肽防治番茄灰霉病提供参考依据。结果表明：CB和D20I-39均能抑制灰霉菌菌丝的生长和孢子萌发且具剂量依赖效应,并造成灰霉菌胞内核酸和蛋白质的泄露;CB和D20I-39处理后灰霉菌菌丝呈扁平状、皱缩变细,且随浓度增大菌丝皱褶越发严重甚至出现破裂。番茄盆栽试验显示,预防试验的CB和D20I-39防治效果分别为96.37%±0.13%和83.41%±0.17%;治疗试验的CB和D20I-39的防治效果则分别为14.86%±0.35%和59.74%±0.23%。外源喷施抗菌肽能够提高苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和游离脯氨酸(Pro)含量,降低丙二醛(MDA)含量。新型抗菌肽CB和D20I-39通过破坏细胞膜抑制灰霉菌,降低番茄灰霉病发病率和病情指数。抗菌肽CB和D20I-39对番茄灰霉病具有良好的防治效果。     

解淀粉芽胞杆菌防治番茄果实灰霉病及其抑菌物质分析

通过对峙培养法筛选对灰葡萄孢菌有显著拮抗性的产芽胞细菌,利用番茄果实检测拮抗菌及其发酵上清液对灰霉病的防治效果,采用ESI-MS检测拮抗菌发酵上清液粗提取物中主要抑菌物质并利用PCR检测合成抑菌物质的相关基因,通过菌体菌落形态观察、生理生化试验、16S rDNA及gyrB分析对拮抗细菌进行种属鉴定。结果表明,分离筛选的拮抗菌fqhm-13及其发酵上清液对番茄果实灰霉病防治效果分别达到69.0%和78.1%。fqhm-13发酵上清液粗提取物中主要抑菌物质为脂肽抗生素C14 ~ C16的surfactin A和C15 ~ C17的iturin A。fqhm-13基因组中含有脂肽抗生素合成基因ituC、ituD、fenD和srfAB。fqhm-13菌株为解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。该研究为利用芽胞杆菌及其代谢产物防治番茄果实灰霉病奠定了材料基础。     

芍药灰霉病拮抗细菌的筛选及生防机制研究

以芍药灰霉病发病典型叶片为试材,采用组织分离法进行病原菌的分离,平板对峙法筛选拮抗芍药灰霉病原菌的内生细菌,结合形态学特征和分子生物学手段进行病原真菌和拮抗细菌菌株的鉴定;采用离体叶片法测定拮抗细菌菌株对芍药灰霉病的防治效果,明确引起洛阳地区芍药灰霉病的病原菌种类,并获得防治芍药灰霉病的内生细菌菌株,以期为芍药灰霉病的防治提供参考依据。结果表明：引起洛阳地区芍药灰霉病的病原菌种类为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea),筛选获得3株对灰葡萄孢菌具有显著拮抗作用的内生细菌菌株SY5、SY15和SY30,其中菌株SY5抑菌效果明显,抑菌率为84.44%。芍药离体叶片防治结果发现,3个菌株均对芍药灰霉病具有良好的防治效果,菌株SY5的防治效果可达67.66%。菌株SY5、SY15和SY30均被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。初步探讨3个菌株的生防机制,结果表明3个菌株均可合成脂肽类物质,且对灰霉病菌菌丝有较强的致畸作用,其中菌株SY5脂肽类物质对灰葡萄孢菌的抑制率最高,为88.89%。     

贝莱斯芽孢杆菌SM2对番茄灰霉病的生防效果

为探寻高效防治番茄灰霉病（Botrytis cinerea）的优良菌株及其防治机制,从番茄根分离获得内生菌SM2,经平板对峙法分析其对B. cinerea的抑菌特性,并通过生理生化特征和16S rDNA测序对其进行鉴定;采用盆栽法和田间试验测定SM2对番茄灰霉病的防效,并测定防病组、致病组和对照组番茄叶片的生理生化指标等。结果表明,菌株SM2可引起B. cinerea菌丝发生畸变,抑菌率达66.67%,被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）;SM2有效降低了番茄灰霉病的发病率和病情指数,盆栽、田间防效分别达到71.73%、65.22%。与对照组相比,防病组和致病组番茄叶片的SOD活性、APX活性、脯氨酸含量和可溶性蛋白含量均显著升高,且防病组显著高于致病组。来自番茄的贝莱斯芽孢杆菌SM2是一株具有生防应用价值的菌株,通过显微拮抗作用和诱导番茄高表达保护酶活性与渗透调节物含量等途径有效防治番茄灰霉病。     

根际细菌LK2-3对黄瓜枯萎病的生物防治作用

LK2-3菌株是从番茄根系分离的植物根际生防细菌。为探讨生防细菌LK2-3对黄瓜枯萎病的生防潜力,采用皿内对峙试验和孢子萌发试验,测定LK2-3对黄瓜枯萎病菌的抑制活性;通过盆栽试验验证其对黄瓜枯萎病的防治效果,并根据形态特征、生理生化特性和16S rRNA序列同源性分析进行鉴定。结果表明,LK2-3菌株对黄瓜枯萎病菌的菌丝生长和孢子萌发均具有显著的抑制作用;在盆栽试验中,LK2-3处理显著促进黄瓜生长,并对黄瓜枯萎病具有明显的防治效果,其防治效果达到88.89%。同时,LK2-3在黄瓜根系和根际土壤具有良好的定殖能力。将LK2-3菌株鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。综上所述,生防细菌LK2-3防治黄瓜枯萎病具有极大的潜力。     

番茄灰霉病和叶霉病拮抗细菌WXCDD51的筛选鉴定及其生防促生作用

从健康番茄植株根际土中分离筛选得到对番茄灰霉病菌和番茄叶霉病菌均有较强拮抗作用的生防细菌WXCDD51,通过形态特征、生理生化特征和16S r DNA序列分析鉴定其属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。菌丝生长试验研究结果表明,该菌株的无菌滤液可以显著抑制番茄灰霉病菌和番茄叶霉病菌菌丝生长,抑制率分别为94.29%和94.06%;盆栽试验结果表明,该菌株可以有效防治番茄灰霉病和番茄叶霉病,防效分别为66.23%和69.45%;拮抗试验显示,该菌株对10种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用,抑菌率在53.04%~94.59%;促生试验表明,该菌株对番茄种子萌发及幼苗生长均具有一定的促进作用,用浓度为10~6 cfu·mL~(-1)的菌液浸种处理,种子发芽率、胚根长度与对照相比分别增加80.0%和62.57%。用菌液(10~7 cfu·mL~(-1))灌根处理的番茄幼苗,其各项生理指标均显著高于对照;用菌液(10~7 cfu·mL~(-1))浸泡番茄果实可防止腐烂且对果实营养品质无不良影响。     

氟吡菌酰胺与啶菌噁唑混配对灰葡萄孢的联合毒力

采用菌丝生长速率法测定了氟吡菌酰胺与啶菌噁唑不同配比(质量比2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4)混配对灰葡萄孢XSZH1的联合毒力,以及最佳增效配比对XSHF6、XSHF2、17RC12和XSHF7等4株灰葡萄孢的联合毒力,并在田间验证了最佳组合对番茄灰霉病的防治效果。结果显示,氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1和1∶4混配时,对灰葡萄孢XSZH1具有毒力增效作用,前者的增效作用最明显,增效系数为1.69。氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1混配时对其他4株灰葡萄孢菌株也显示出毒力增效作用,且在田间有效剂量为150～250g·hm-2时,对番茄灰霉病的防治效果为80.50%～90.13%。可见氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1混配可以有效地控制番茄灰霉病,适合在田间应用推广。     

钙对茉莉酸甲酯诱导番茄抗灰霉病及防御酶活性的调控作用

以番茄品种L402幼苗为试材,通过外源施钙和缺钙处理,探讨钙对茉莉酸甲酯（MeJA）诱导番茄抗灰霉病的作用及其生理机制。结果表明：（1）外源MeJA显著诱导番茄抗灰霉病|外源钙离子进一步增强MeJA诱导的抗病程度|而钙螯合剂EGTA和质膜钙通道抑制剂LaCl3则不同程度抑制MeJA诱导番茄的抗病性。（2）MeJA单独处理后2～5 d内PAL、PPO和POD活性显著高于对照,外源钙离子进一步增强MeJA诱导的上述防御酶活性,两种缺钙处理则不同程度降低防御酶活性。（3）外源施钙及不同缺钙处理,对MeJA诱导的CAT和SOD活性没有规律性影响。由此认为,钙增强MeJA诱导番茄抗灰霉病的程度,可能与其对MeJA诱导番茄叶片中PAL、PPO和POD等防御酶活性的调控有关。     

生防菌基质促进黄瓜幼苗生长及防治枯萎病的研究

采用平板对峙法从15种生防菌中筛选出对黄瓜枯萎病菌抑制效果较明显的4种生防菌NSY4、NSY19、NSY50、DSN012。以津研4号黄瓜品种为试材,研究4种生防菌基质对黄瓜幼苗生长及枯萎病防治的作用。结果表明,生防菌NSY4基质可显著提高黄瓜幼苗的株高、地上部鲜质量、地下部鲜质量、地上部干质量、总根长及根体积,分别比不添加生防菌的对照增加42.86%、26.09%、47.06%、58.82%、57.58%和51.44%;黄瓜根际基质酶活性显著高于对照,蔗糖酶、脲酶、磷酸酶、过氧化氢酶活性分别比对照提高了16.20%、37.60%、71.88%、5.22%。添加生防菌的基质处理显著增加了根际基质中细菌、放线菌数量,减少了真菌、尖孢镰孢菌数量;对黄瓜枯萎病的防治效果达到25.00%～62.50%。因此,基质中接种生防菌可促进黄瓜植株生长,降低黄瓜枯萎病的发病率,其中添加生防菌NSY4的基质处理可显著促进黄瓜植株生长,有效缓解尖孢镰孢菌的侵害,对黄瓜枯萎病的防治效果最佳。     

碳酸钠和碳酸氢钠对番茄壮苗和灰霉病的防治作用

以番茄品种L402幼苗为试材,研究外源喷施碳酸钠和碳酸氢钠对番茄生长和灰霉病的防治作用。结果表明:25mmol·L~(-1)和50 mmol·L~(-1)的碳酸钠与碳酸氢钠对番茄幼苗具有显著的壮苗作用;30～60 mmol·L~(-1)的碳酸钠和碳酸氢钠对灰霉菌菌丝生长具有不同程度的抑制作用,且抑制作用通常随着浓度的升高而加强;30～40 mmol·L~(-1)的碳酸钠和50～60mmol·L~(-1)的碳酸氢钠对番茄灰霉病具有良好的预防作用;50 mmol·L~(-1)的碳酸钠和50～60 mmol·L~(-1)的碳酸氢钠对番茄灰霉病具有良好的抑制作用。生产上可应用适宜浓度的碳酸钠和碳酸氢钠防治番茄灰霉病。     

折耳根提取液对番茄灰霉病菌的 抑菌活性分析

摘要：为分析折耳根（蕺菜）提取物对番茄灰霉病菌的抑制作用,采用番茄活体接种法（以4叶1心 的番茄幼苗为试验材料）和培养基接种法（体外抑菌试验）,分析比较折耳根提取液对灰霉病菌的抑菌 作用。番茄活体接种试验结果表明：折耳根提取液预处理的叶片发病程度比蒸馏水处理（对照）的轻, 在接种病害3 d后,发病率和病情指数分别下调至81.5%和3.0左右,灰霉Actin基因相对表达量显著低于对 照处理,叶片叶绿素a、b含量分别为4.96 （对照的1.25倍）、2.23 mg/L（对照的1.30倍）,均显著高于对 照;折耳根提取液预处理和接种灰霉病菌均导致番茄叶片脂氧合酶（LOX）活性上升,接种灰霉菌后, 折耳根提取液处理的叶片LOX活性为13.52 OD/g（FW）,显著高于蒸馏水处理（对照）的10.92 OD/g （FW）,且两者均显著高于未接种灰霉病菌的预处理。体外抑菌试验表明：折耳根提取液处理后灰霉菌 的长势及扩散程度小于蒸馏水处理的对照,表明其对番茄体外培养的灰霉病菌生长也有抑制作用。     

申嗪霉素与氨基酸浸种对黄瓜和番茄种子萌发的影响

以黄瓜品种碧秋和番茄品种中杂9号为试材,研究不同浓度申嗪酵素(10、50、100、125、175 mg·L~(-1))、氨基酸母液(50、333、833、1 250、2 000 mg·L~(-1))及适宜浓度的复混液对黄瓜和番茄种子萌发及胚生长的影响。结果表明:适宜浓度的氨基酸母液和申嗪酵素能显著提高番茄、黄瓜种子的发芽势、发芽指数、活力指数,并显著促进胚根和下胚轴的生长。番茄种子萌发的最适浓度为氨基酸母液50 mg·L~(-1),申嗪酵素10 mg·L~(-1);黄瓜种子萌发的最适浓度为氨基酸母液333 mg·L~(-1),申嗪酵素50 mg·L~(-1);番茄和黄瓜种子胚根及下胚轴生长最适浓度均为氨基酸母液333 mg·L~(-1),申嗪酵素50 mg·L~(-1)。申嗪酵素对2种蔬菜种子萌发的促进效果优于氨基酸母液,对黄瓜的促根生长作用亦优于氨基酸母液,而氨基酸母液对番茄的促根生长作用较好。333 mg·L~(-1)氨基酸母液与50 mg·L~(-1)申嗪酵素的复混液(1 V∶1 V)对番茄和黄瓜种子萌发及胚根、下胚轴的生长具有一定的促进作用,但不如两种物质单独使用效果好。