肾型传染性支气管炎病毒理化特性的鉴定

气管环组织培养（ＴＯＣ）是用于传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分离、鉴定和血清学检查的有效方法〔１〕。Ｊｏｈｎｓｏｎ（１９７５）应用ＴＯＣ中和试验将分离的ＩＢＶ分为１０个血清型〔２〕;吕化广（１９８９）采用ＴＯＣ、鸡胚接种增殖和血清学鉴定的联合方法诊断Ｉ...     

气管环组织培养的一种简易方法探讨

气管环组织培养的一种简易方法探讨杨小燕，甘孟侯（中国农业大学动物医学院，北京１０００９４）气管环组织培养（ＴＯＣ）作为研究鸡传染性支气管炎（ＩＢＶ）的一个重要手段，已越来越受到重视。ＴＯＣ不仅可用于ＩＢＶ的分离、毒力测定，还可用于ＩＢＶ的血清分型￣［...     

鸡传染性支气管炎可疑病料的病毒分离及初步鉴定

１９份鸡传染性支气管炎（ＩＢ）可疑病料通过ＳＰＦ鸡和鸡胚感染试验、血凝（ＨＡ）试验、气管环培养（ＴＯＣ）感染试验、单克隆抗体（Ｍａｂ）ＥＬＩＳＡ和电镜形态学观察，初步证明其中１３份病料含ＩＳ病毒（ＩＢＶ）．在用其中９份接种８～９周龄ＳＰＰ鸡进行的发病试验中，全部呈现临床症状，其中３份引起病死亡率（６０～８０％），接种后５周从存活鸡采血作ＩＢＶ血凝抑制（ＨＩ）试验，结果均为阳性．     

用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究

用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。     

应用气管环组织培养鉴定鸡传染性鼻气管炎病毒

气管环组织培养 (ＴＯＣ)是用于鸡传染性鼻气管炎病毒 (ＴＲＴＶ)分离、鉴定和血清学检查的有效方法 ,Ｂｕｙ、ＭｃＤｏｎｇａｌｌ、Ｃｏｏｋ等应用ＴＯＣ已成功地分离到ＴＲＴＶ。我们曾用ＴＯＣ鸡胚成纤维细胞 (ＣＥＦ)、绿猴肾细胞 (ＶＥＲＯ)对可疑的鸡传染性鼻气管炎病鸡进行野毒株分离 ,证明ＴＯＣ比ＣＥＦ、ＶＥＲＯ细胞更适于ＴＲＴＶ的分离和鉴定。经过鸡胚传代、电镜观察和中和试验等初步鉴定为鸡传染性鼻气管炎病毒 ,并通过理化特性和病原学的特性作进一步研究。1　材料与方法1 .1　病毒及血清标准株 :ＮＬ 7784株。分离株 :上海…     

用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究

用传染性支气管炎病毒Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒、鸡传染性喉气管炎病毒，减蛋综合症病毒等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７Ｃ孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗，进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＴＢＤＶ、ＩＬＴ     

鸡传染性支气管炎病毒（IBV）与鸡新城疫病毒（NDV）在SPF鸡胚上的相互干扰作用

鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）与鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）在ＳＰＦ鸡胚上的相互干扰作用江国托，王永坤，丛华，许彩芸，陆梅（扬州大学农学院，江苏２２５００１）鸡传染性支气管炎（ＩＢ）和鸡新城疫（ＮＤ）是鸡的两种主要病毒性传染病。目前国内多采用Ｈ＿（５２）和...     

鸡肾病变型传染性支气管炎病毒分离及免疫的研究

对自然发生的鸡肾病变型传染性支气管炎病例,进行了流行病学及病理化方面的检验。以新鲜病死鸡肾脏为材料,通过接种易感发育鸡胚尿囊腔的途径,进行病毒的分离与传代,分离到５株病毒（分别记作ＩＶＢ－ＨＱＣ９６０１、ＩＢＶ－ＨＱＣ８６０４、ＩＢＶ－ＨＱＬ９６０６、ＩＢＶ－ＨＱＣ９６１０、ＩＢＶ－ＨＴＬ９６１１）,经初步检验及对易感鸡的感染发病试验,表明为鸡肾病变型传染性气管炎病毒。用鸡肾病变型传染性气管炎Ｔ毒株分离毒株,制备灭活疫苗,初步试验表明具有良好的特异免疫保护效果。     

琼脂凝胶扩散试验检测鸡传染性支气管炎抗体

本文对鸡传染性支气管炎琼脂凝胶扩散试验进行了研究。试验结果表明，感染鸡传染性支气管炎病毒的鸡胚绒毛尿囊膜和尿囊液都能用于制备琼扩抗原，而且以感染ＩＢＶ后２０－３０小时的绒毛尿囊膜和感染ＩＢＶ后４８－６０小时的尿囊液效果最佳。通过传染性支气管炎琼脂凝胶扩散试验的研究和对血清样品的测定，以及与美国ＫＰＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ的ＩＢＶ－ＥＬＩＳＡ诊断盒比较，表明所建立的琼脂凝胶扩散试验可用于鸡传染性支气     

单克隆抗体在鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究中的应用

单克隆抗体在鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究中的应用朱建国（郑州牧业工程高等专科学校医药系，４５００４５）刘秀梵（扬州大学农学院）鸡传染性支气管炎（ＩＢ），是由传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）引起的鸡的一种急性、高度接触性传染的呼吸道疾病，以气管罗音、...     

单抗介导的斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

用群特异性的单克隆抗体作第一抗体,用酶标兔抗体ＩＢＶＩｇＧ作第二抗体,建立夹心法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测鸡传染性支气管炎病毒抗原。试验表明,本程序检测ＩＢＶ抗原高度敏感性和特异性。最低抗原检出量为０．５μｇ,约１００个气管环半数感染量（１００ＴＯＣＩＤ５０）,阳性检出率为９６％。     

平板血凝试验鸡快速诊断传染性支气管炎病毒

鸡的传染性支气管炎（ＩＢ）１９３０年首先发现于美国，到６０年代初世界各国均报道了此病，它是由传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）引起的一种急性、高度传染性的疾病。主要感染雏鸡的呼吸道和泌尿生殖道，ＩＢＶ属于冠状病毒科，冠状病毒属。诊断ＩＢＶ，主要是通过鸡胚尿囊液或气管组织培养物中分离病毒，也可以对气管或其他组织粘膜进行涂片通过免疫荧光法或免疫过氧化物酶法鉴定。血清学试验如血凝抑制试验、琼脂扩散试验、ＥＬＩＳＡ等也可以用于诊断。中和试验由于比较费时费钱而少用。最近几年新兴的方法有ＲＴ－ＰＣＲ法，通过对尿囊…     

鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

应用ＳＰＦ鸡胚盲目传代的方法，分别从陕西省西安市、扶风县、武功县和杨陵区具有传染性支气管为（ＩＢ）、临床特征的鸡群中分离到４株病毒。经电形态学观察、核酸型鉴定试验、脂溶剂敏感性试验、ＮＤＶ干扰试验、回归易感动物试验和鸡胚血清中和试验，鉴定为鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）。首次从病原学上证实陕西省确有ＩＢ流行，为省内防制该病提供了科学依据。     

鸡传染性支气管炎可疑病料的病毒分离及初步鉴定

１９份鸡传染性支气管炎可疑病料通过ＳＰＦ鸡和鸡胚感染试验，血凝试验，气管环培养感染试验，单克隆抗体ＥＬＩＳＡ和电镜形态学观察，初步证明其中１３份病料含ＩＢ病毒，在用其中９份接种８－９周龄ＳＰＦ鸡进行的发病试验中，全部呈现临床症状，其中３份引起高死亡率（６０－８０％），接种后５周从存活鸡采血作ＩＢＶ血凝抑制试验，结果均为阳性。     

PCR方法快速检测鸡传染性支气管炎病毒

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性 Ｐ Ｃ Ｒ 方法。通过对纯化后 Ｉ Ｂ Ｖ核蛋白基因进行直接 Ｐ Ｃ Ｒ及套式 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增表明，两次 Ｐ Ｃ Ｒ 产物的大小为０．７ ｋｂ 和０．５ ｋｂ，与实际设计相符。而对照的 Ｎ Ｄ Ｖ 及 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 的 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增产物均为阴性。用 Ｉ Ｂ Ｖ Ｈ Ｂ株感染 Ｓ Ｐ Ｆ鸡后，应用我们所建立的 Ｐ Ｃ Ｒ 方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的 Ｉ Ｂ Ｖ，在 Ｓ Ｐ Ｆ鸡感染 Ｉ Ｂ Ｖ后的２１ ｄ 仍然能够检测到 Ｉ Ｂ Ｖ 的基因组， Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 杂交试验证明了我们获得的 Ｐ Ｃ Ｒ 产物为 Ｉ Ｂ Ｖ 的核蛋白基因。该 Ｐ Ｃ Ｒ 检测方法比免疫荧光抗体（ Ｆ Ａ）法更具敏感、特异、快速等特点，完全适用于不同来源及不同血清型 Ｉ Ｂ Ｖ 的检测。     

养鸡技术讲座 第六十一讲 当前若干重要鸡疫发病及防治对策（下）

养鸡技术讲座第六十一讲当前若干重要鸡疫发病及防治对策（下）甘肃农业大学兽医系沈正达四、鸡传染性支气管炎鸡传染性支气管炎（ＩＢ）是由鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）引起的鸡的重要的呼吸道传染病，临床上以呼吸困难、咳嗽和气管　音为重要特征，成年鸡除呼吸道症...     

用间接荧光抗体试验检测鸡肾型传染性支气管炎抗原的研究

建立检测鸡肾型传染性支气管炎抗原的间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）其抗体感染作时间Ｉ抗以５０～６０ｍｉｎ，Ⅱ抗以３０～４０ｍｉｎ最佳。该法具有良好的特异性，可检测出人工感染鸡肾型传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ａｕｓｔ－Ｔ，ＨＮ９３０１，ＴＪ９３０１，ＢＪ９３０１毒株后的抗原；对自然发病病例检测结果，阳性符合率高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和气管环中和试验法。     

Dot—ELISA间接法检测鸡新城疫病毒（NDV）的研究

常规方法分离纯化鸡ＩｇＧ,免疫羊制备羊抗鸡ＩｇＧ二抗,以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记制备酶标记物的工作浓度为１：１０００;选用硝酸纤维素（ＮＣ）膜作固相载体,建立检测ＮＤＶ抗原的斑点间接酶联免疫吸附试验诊断方法。检测ＮＤＶ鸡胚毒４０份,阳性检出率１００％;人工感染非免疫鸡的气管组织、肺组织各４７份,检出率为９３．６％;人工感染ＳＰＦ鸡气管组织、肺组织各４０份,检出率１００％。与传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）、传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）无交叉反应。试验显示该方法简便、特异、快速、结果直观,便于生产应用     

鸡肾型传染性支气管炎病毒BK株的分离与鉴定

通过ＳＰＦ鸡胚传代培养、ＳＰＦ鸡胚气管环组织培养和鸡胚肾原代细胞培养,从一起有明显呼吸症状且又表现严重肾病变的鸡传染性支气管炎病例中分离到一株肾型传支病毒ＢＫ株。电镜观察表明,病毒粒子呈球状,直径９０～１００ｎｍ,纤突长１５ｎｍ,为典型冠状病毒。在ＳＰＦ鸡胚上盲传至５代,在ＴＯＣ上测其ＣＤ５０为１０－６．２。动物回归试验结果,试验鸡出现典型“花斑肾”,表明ＢＫ株具有较强嗜肾脏致病性。     

鸡胚气管环纤毛对不同类型AIBV毒株的敏感性

以鸡胚气管环纤毛运动作指示系统,应用鸡胚气管环组织培养不同血清型的７个标准ＡＩＢＶ毒株及５个不同致病型的分离毒株。采用５０ＣＤ５０病毒量ＩＢＶ毒株感染鸡胚气管环培养物,观察感染后不同时间气管环纤毛的存活率。结果表明,鸡胚气管环纤毛对不同血清类型的ＡＩＢＶ毒株敏感性各具特征。