猪卵巢发育的组织学变化及卵泡闭锁规律研究

旨在对不同日龄猪卵巢组织结构以及卵巢发育过程中卵泡闭锁规律进行研究。取3、40、50、60、72、86、95及165日龄猪卵巢各3例,采用常规石蜡切片、HE染色和TUNEL技术检测卵巢组织结构及卵泡闭锁规律,结果表明,猪卵巢发育从组织学上可分为卵原细胞增殖期、卵泡缓慢生长期及卵泡快速生长期3个阶段。卵原细胞增殖期主要以卵原细胞的增殖分裂为特点;在卵泡缓慢生长期,原始卵泡的数量随日龄增加逐渐减少,初级卵泡数量及体积则明显增加;至卵泡快速生长期,生长卵泡的数量及体积继续增大,其数量在86日龄达到最大值;72日龄卵巢中出现三级卵泡,至95日龄卵巢中出现近成熟卵泡。在各时期的卵巢组织,均可观察到卵原细胞及卵泡的闭锁现象,以原始卵泡的退化最为显著。TUNEL检测表明,在卵原细胞增殖期,可见大量原始卵泡及初级卵泡的闭锁,其闭锁主要源自卵泡卵母细胞的凋亡。在卵泡缓慢生长期,各级生长卵泡均可出现闭锁,初级卵泡的闭锁主要由卵母细胞的凋亡引起,也有部分是同时伴有卵母细胞和卵泡细胞凋亡的;次级卵泡的闭锁则主要由于颗粒层细胞的凋亡所致。在卵泡快速生长期,随着卵泡的快速生长,各级卵泡的闭锁也变得更加明显,次级卵泡及三级卵泡的闭锁主要是由颗粒细胞凋亡引起。     

Ube2s在小鼠卵泡发育和黄体形成过程中的表达研究

本研究旨在通过原位杂交、免疫组织化学和实时荧光定量PCR检测在小鼠性成熟、孕马血清促性腺激素(PMSG)诱导的卵泡发育、人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导的排卵以及黄体形成过程中,卵巢组织中泛素结合酶E2 S(Ube2s)的表达变化。结果表明:在不同日龄小鼠卵巢中,Ube2s在原始卵泡和初级卵泡的卵母细胞中表达强,在次级卵泡和有腔卵泡的卵母细胞中表达减弱;Ube2s在原始卵泡的颗粒细胞中有表达,在初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞中表达增强,在有腔卵泡的颗粒细胞表达减弱。给21日龄雌性小鼠注射PMSG诱导卵泡发育模型,并利用hCG诱导排卵模型,结果显示Ube2s的表达与不同日龄小鼠卵巢中Ube2s的表达规律一致,提示Ube2s可能与卵泡发育有关。在小鼠黄体形成与退化过程中,Ube2s在新生黄体中呈强表达,在退化黄体中表达减弱,提示Ube2s可能与黄体的形成与退化有关。综上,Ube2s可能在小鼠卵泡发育和黄体形成过程中发挥作用。     

淫羊藿多糖对小鼠卵泡发育的影响

对健康雌性小鼠灌服不同剂量淫羊藿多糖,研究淫羊藿多糖对卵泡发育及卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:连续灌服7 d淫羊藿多糖后,高剂量组(6 mg/0.2 mL),中剂量组(4 mg/0.2 mL)与对照组子宫卵巢系数分别为0.403%,0.245%和0.146%,差异显著(P<0.05)。灌服淫羊藿多糖后小鼠卵巢卵泡个数和直径均有所提高。卵巢组织学分析表明,随着给药剂量的增加,有腔卵泡的数量也有增加,中、高剂量组卵巢上出现黄体。卵母细胞体外成熟培养表明,中、高剂量组所获GVBD卵母细胞百分率(61.4%和73.0%)与对照组相比(50.0%)均有显著提高(P<0.05)。本研究表明,小鼠每天灌服淫羊藿多糖4⁶ mg,连续1周后可明显促进卵泡发育,并提高卵母细胞体外成熟率。     

优良家畜(奶牛、猪)卵巢资源高效利用的生物学基础研究

哺乳动物出生时，卵巢中存在大量处于成熟分裂前期的原始卵泡卵母细胞。以牛为例，母牛在出生时，其卵巢上的原始卵泡数有数百万个，随着母牛年龄的增长其数量下降，在原始卵泡中不断有一些卵泡在发育的过程中闭锁退化。在母牛达到初情期以后，周期性地有卵泡发育成熟并排卵。在母牛有效繁殖年限内，卵巢上发育为有腔卵泡的数量(无论是退化的还是排卵的)只占原始卵泡库极少比例，绝大多数卵母细胞均未被利用，造成遗传资源的浪费。     

休情期银黑狐卵巢形态和卵泡发育的显微结构观察

研究休情期银黑狐卵巢形态和卵泡的显微结构,以揭示银黑狐卵巢发育的一般规律。本试验于2012年12月份采集5只健康一岁龄银黑狐卵巢10枚,用游标卡尺测量其长、宽、厚,用电子天平测量其重量,并对其表面可见卵泡数量进行统计,然后利用光学显微镜对各级卵泡分别观察1~3个,共计原始卵泡30个,初级卵泡20个,次级卵泡15个,三级卵泡12个,成熟卵泡10个,并进行拍照。结果表明:随银黑狐卵巢体积不断增大,其中80%的卵巢重量也随之增大;可见卵泡数量与卵巢体积及重量没有相关性;卵巢由被膜、皮质和髓质构成,髓质位于卵巢内层,分布着较多血管,皮质位于卵巢外层,内有不同发育阶段的卵泡;原始卵泡由卵母细胞和颗粒细胞构成,初级卵泡开始出现透明带物质,到次级卵泡阶段发育完整,三级卵泡出现卵泡腔,卵泡及卵母细胞直径在有腔卵泡阶段比腔前卵泡阶段增长速度快,成熟卵泡的直径及透明带厚度达到最大,各级卵泡均有闭锁现象。     

褪黑素对动物生殖功能的影响

正哺乳动物卵巢中含有大量的腔前卵泡,但是在发育到有腔卵泡前大约99.9%的卵泡都走向闭锁、退化,这无疑是动物繁殖领域内巨大的浪费。卵母细胞是体外受精、胚胎移植、动物克隆和转基因等胚胎生物技术研究和开发不可或缺的材料,然而卵母细胞来源十分匮乏成为其发展的一个制约性因素,无疑腔前卵泡的体外培养技术为其提供了一个有效途径。目前,在动物卵泡体外培养实验中仅有小鼠的原始卵泡经培养后,卵母细胞发育成熟并获得了活体后代。     

山羊卵母细胞闭锁的超微结构研究

利用透射电镜技术研究了不同发育阶段山羊卵母细胞闭锁时亚显微结构的变化.各发育阶段卵母细胞闭锁的基本过程为:胞质中首先出现许多小空泡,线粒体嵴消失,聚集成团.在退化后期的卵母细胞中,线粒体数量减少,高尔基体、内质网等细胞器消失,皮质颗粒及微绒毛缺乏,而空泡及初级溶酶体数量增加,核膜崩解,卵母细胞解体.在发育早期及晚期卵泡,卵泡细胞及卵丘细胞的退化迟于卵母细胞闭锁.     

哺乳动物腔前卵泡的研究进展

哺乳动物的卵巢中,含有数万个卵泡．其中绝大部分为原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡等腔前卵泡。然而能发育到成熟并排卵的卵泡为数甚少,约99．9％的卵泡在腔前卵泡阶段闭锁、退化,这无疑是动物遗传和育种资源的极大损失。目前,卵母细咆是休外受精胚胎移植、性别控制、胚胎分割、动物克隆和转基凶等胚胎生物技术研究和开发必不可少的材料,卵母细胞来源匮乏成为制约这些技术研究进展的主要因素,因此卵巢腔前卵泡的开发无疑是解决这一难题的有效途径。本文介绍了腔前卵泡研究的历史和现状以及最新的研究情况．目的是为有关的研究工作提供有益的启示和参考。     

间情期银黑狐腔前卵泡卵泡细胞的超微结构

为了研究间情期银黑狐腔前卵泡卵泡细胞的超微结构,试验通过透射电子显微镜对卵泡细胞进行超微结构观察、拍照,11月份采集的5只2岁健康银黑狐左侧卵巢共5枚,选择腔前卵泡1~5个(共计20个原始卵泡、25个初级卵泡、18个次级卵泡)进行观察研究。结果表明:卵泡细胞在原始卵泡阶段,线粒体、内质网大多较少,未见高尔基体;发育到初级卵泡阶段后,线粒体、内质网数量开始增多,高尔基体罕见,有少量脂滴出现;而在次级卵泡阶段,所含线粒体、内质网数量进一步增多,高尔基体和脂滴数量未见明显变化,微丝成簇分布。线粒体、内质网的变化趋势与其他哺乳动物基本一致,但高尔基体和间隙连接出现时间较晚。说明间情期银黑狐卵泡细胞逐渐具备辅助卵母细胞成熟的典型特征。     

东北梅花鹿卵泡发育的显微结构

为揭示雌性东北梅花鹿的生殖机理提供组织依据,利用光学显微镜观察7只成年东北梅花鹿卵巢的组织结构和卵泡的发育过程,同时利用目镜测微尺和显微照相技术分别对60个原始卵泡、60个初级卵泡、25个次级卵泡、34个三级卵泡和3个成熟卵泡及透明带厚度进行测量和拍照。结果表明,东北梅花鹿卵巢组织也是由生殖上皮、白膜、皮质和髓质构成;皮质部在卵巢的外周,但间质腺不发达;髓质位于皮质深层,分布有较多的血管。卵泡在发育过程中,各级卵母细胞和卵泡的直径差异较大,卵泡和卵母细胞的生长呈双向生长;透明带物质出现于3~4层卵泡细胞包围卵母细胞时;卵泡闭锁发生于卵泡生长的各个时期,主要表现为卵母细胞和卵泡细胞的形态变化,有两种形式;三级卵泡的闭锁过程分为早期、中期和后期3个阶段。     

猪人工授精和繁殖疾患的防治(续一)

第二讲母猪的生殖生理第一节母猪的内生殖器官母猪的生殖器官主要有内生殖器官(卵巢和生殖道—输卵管、子宫和阴道)和外生殖器官(包括尿生殖前庭、阴唇、阴蒂),还有副性腺体(位于子宫颈以及阴道的一些腺体)共同构成母猪的生殖器官。一、卵巢在卵巢表面皮质部有一层生殖上皮,其中发育着卵泡。卵泡由原始卵泡开始经初级卵泡发育为次级卵泡,再继续发育形成卵泡细胞,再和卵丘上的卵泡壁相连,发育为三级卵泡,最后发育为成熟卵泡。发情期卵泡体积增大,卵泡中通常只有一个卵母细胞。未成熟的卵泡退化为闭锁卵泡。发情前夕,卵泡不断增长,卵泡液增多,…     

醋酸铅对母鼠生殖与胚胎发育影响

将420只体质量为(15.32±2.01)g的雌性昆明系小鼠随机分为5个处理组和1个对照组,每组设7个重复,每个重复10只。各处理组分别腹腔按体质量注射10、15、20、25、30mg/kg的醋酸铅溶液,对照组注射等体积的灭菌生理盐水,每隔2d注射并称重1次,共注射10次,期间记录小鼠体质量及临床表现。当小鼠体质量达到25g以上时,分批对各试验组和对照组进行超排处理,腹腔注射10IU马绒毛膜促性腺激素(PMSG),47h后注射10IU人绒毛膜促性腺激素(hCG),并与公鼠合笼。合笼后87~96h内颈椎脱臼处死小鼠,观察卵巢、子宫形态,并统计胚胎数,同时制作卵巢、子宫石蜡切片,观察其病理组织学变化,研究醋酸铅对雌性小鼠卵巢、子宫组织结构及早期胚胎发育的影响。结果显示:(1)当醋酸铅染毒剂量≥20mg/kg时,可明显抑制小鼠体质量的增长,随着染毒剂量的增加,作用时间的延长,小鼠体质量增加明显趋缓,与对照组相比,差异显著或极显著(P0.05,P0.01);(2)染铅组母鼠早期胚胎发育受到显著影响,主要表现为回收胚胎总数以及受精卵发育到桑椹胚和囊胚的总数均显著低于对照组(P0.05),而各染铅组退化胚、延迟胚数和未受精卵总数显著高于对照组(P0.05);(3)染铅组卵巢中的初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡数量明显低于对照组,而原始卵泡、闭锁卵泡数量明显高于对照组。(4)染铅组小鼠卵巢和子宫形态发生明显畸形,当醋酸铅染毒剂量≥20mg/kg时,与对照组相比,差异显著或极显著(P0.05,P0.01)。且上述变化均呈明显的剂量一时间效应。研究结果表明,当醋酸铅暴露剂量≥20mg/kg时,可对小鼠生长发育具有明显抑制作用,同时使母鼠生殖器官卵巢和子宫的结构造成严重损害,并影响其生殖功能与早期胚胎发育。     

牦牛卵巢组织学结构的观察

本试验对牦牛的卵巢结构进行了研究,主要是通过大体解剖和显微结构的观察。通过研究,把牦牛的卵泡分为了原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和囊状卵泡。研究发现,牦牛的卵巢中数量较多的是原始卵泡,它主要分布在皮质的浅表层。原始卵泡是由卵母细胞以及周围单层的扁平卵泡细胞组成。初级卵泡体积增大,透明带开始形成。次级卵泡体积迅速增大,透明带厚度明显增加,卵泡膜增厚。囊状卵泡腔体大,卵母细胞位于卵泡一侧,形成放射冠状的卵丘。     

山羊卵巢无腔卵泡的体外发育

在三维琼脂凝胶培养体系中 ,山羊无腔卵泡的生长模式类似于体内。在一定培养时间内能善为保持其完整的立体结构和形态。原始卵泡能在体外启动 ,并得到一定程度的生长。初级卵泡能发育为次级卵泡 ,次级卵泡发育为有腔卵泡。卵泡在体外发育过程中 ,表现出了明显的优势化。本试验首次初步揭示了山羊无腔卵泡的体外发育基本过程和规律。     

母猪性早熟卵巢的组织学及其PCNA和Caspase-3表达特性

为研究性早熟对母猪卵巢功能的影响,随机选取江苏某猪场同一批洋三元育肥断奶小母猪8头,在60日龄屠宰取卵巢和子宫,根据屠宰结果分成卵巢发育正常组和性早熟组,进行组织学观察和免疫组织化学分析。结果表明:60日龄卵巢发育正常组与性早熟组卵巢重差异极显著(P0.01),子宫重差异显著(P0.05)。通过HE染色观察,60日龄卵巢发育正常组以原始卵泡、初级卵泡为主兼少量次级卵泡,60日龄性早熟组卵巢出现多个三级卵泡,这些三级卵泡发育正常。免疫组化结果显示,增殖细胞核抗原(PCNA)、Caspase-3在原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡颗粒细胞中都有广泛的表达。在性早熟组卵巢三级卵泡中,PCNA在颗粒细胞中较强表达而在闭锁卵泡中不表达。而Caspase-3表达不变但在闭锁卵泡中也不表达。结果提示:洋三元育肥断奶小母猪普遍存在卵巢过早发育现象,需进行有效管理。     

母犬出生后生殖器官发育的显微结构研究

为了研究母犬出生后生殖器官发育的组织学变化,试验采集了从初生至18月龄Beagle母犬的卵巢、输卵管和子宫,并采用石蜡切片、光学显微镜方法检查。结果表明:初生犬卵巢皮质部含有大量原始卵泡,且扁平卵泡细胞排列在卵母细胞周围,3月龄出现初级卵泡,6月龄出现次级卵泡,9月龄出现成熟卵泡和黄体。犬卵巢中有多卵卵泡,数量随年龄增长呈下降趋势。初生时,子宫腺体体积小、数量少,以后不断发育增生,腺体周围的基质也逐渐密集。初生至9月龄的输卵管黏膜仅有初级皱襞,12月龄后开始出现较多次级皱襞。     

一氧化氮与哺乳动物卵泡发育

一氧化氮作为一种分子物质参与哺乳动物生殖活动,参与卵泡发育周期的各个阶段,如原始卵泡、腔前卵泡、有腔卵泡,排卵和黄体阶段。文章主要围绕卵泡发育的各个阶段,一氧化氮合成酶在卵泡中不同细胞中的定位,一氧化氮与卵母细胞的成熟、排卵及卵泡闭锁方面进行综述。     

双峰驼卵巢的组织结构

应用组织学方法对双峰驼卵巢的形态结构进行了显微与亚显微观察。结果显示 ,双峰驼卵巢表面被覆单层立方至单层扁平的生殖上皮 ,无排卵窝 ,上皮下为致密结缔组织白膜 ,卵巢实质由外周的皮质和中央的髓质构成。皮质中原始卵泡和初级卵胞数量稀少 ,其分布位置更靠近皮质中层 ,偶见同一卵泡内含 2个卵母细胞。体积大小和发育阶段不同的次级卵泡与三级卵泡闭锁时 ,所发生的形态变化不一致 ,可出现实心和囊状 2种闭锁卵泡。黄体中以粒性黄体细胞占优势 ,其细胞质中含大量脂质泡而呈海绵样。卵巢髓质中除含大量血管外 ,还见卵巢网分布     

猪卵巢颗粒细胞和黄体细胞凋亡的调控机制研究进展

母猪卵巢皮质上存在大量卵泡，卵泡由原始卵泡向初级卵泡、次级卵泡逐步发育为排卵前的成熟卵泡时，伴随着卵泡闭锁的发生。目前认为颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的主要因素，并且已经证实。卵泡成熟后会破裂排卵，如果卵子未受精，则黄体会发生萎缩并退化，形成称作白体的结缔组织，最终被组织吸收。细胞凋亡受到多基因严格控制，随着分子生物学技术的发展，已经证明存在多个信号通路。本文以猪卵巢为模型，综述了卵泡闭锁期间颗粒细胞凋亡和黄体退化过程中黄体细胞凋亡的调控机制，以期为深入研究卵巢细胞凋亡提供理论基础。     

卵泡发育的激素调节研究进展

卵泡的发育经历了早期的发育、有腔卵泡的生长、优势卵泡的选择以及卵泡成熟排卵等过程。在一个发情周期中，数以万计的原始卵泡发育到排卵阶段时排卵数仅占原始卵泡总数的0.1%-0.2%，绝大数与产仔率有着极大的正相关，要提高产仔率就要防止卵泡闭锁，增加排卵数。而激素调节伴随着卵泡发育的始终，其中垂体促性腺激素和甾体激素可促进卵母细胞的生长、卵母细胞的增殖和卵泡腔的形成，在卵泡发育的过程中起着至关重要的作用。本文主要就促性腺激素、甾体激素和抑制素在卵泡发育中调节作一综述。