奶牛源MRSA流行株的耐药特性SCCmecA分型研究

为了了解引起奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌分离株的耐药性及其分子流行病学特征,本研究采用纸片扩散法检测临床分离的71株金黄色葡萄球菌的耐药特性,并对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)进行判定;应用多重PCR方法对MRSA进行SCCmec分型。结果显示:在新疆地区71株金黄色葡萄球菌临床分离株中共检出13株MRSA,检出率为18.3%;金黄色葡萄球菌对呋喃妥因、利福平100%敏感,MRSA对头孢类、氟喹诺酮类和大环内酯类抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin sensitive staphylococcus aureus,MSSA);MRSA的SCCmec基因型共以SCCmecⅠ和SCCmecⅣa型为主,均占76.9%,另外,1株MRSA仅有1种SCCmecⅢ型,1株MRSA有SCCmecⅠ、SCCmecⅢ和SCCmecⅣa型。本研究结果表明,MRSA耐药性多样,新疆地区MRSA主要流行株为SCCmecⅠ和SCCmecⅣa型。     

奶牛乳房炎样品金黄色葡萄球菌分离株的基因分型

为了掌握上海地区引起奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌基因型,本文采用ERIC-PCR分型方法,对从患有乳腺炎的奶牛乳汁中分离所得的74株金黄色葡萄球菌进行了基因分型。结果显示,74株金黄色葡萄球菌可扩增出4~9条带,共分为4个聚类群,亲缘关系相同或相近的菌株占97.7%。发现在同一牛群中的分离株可以是相同的基因型,也可以存在不同的基因型,而不同牛群中的分离株也可属于同一基因型。但总的来说,上海地区引起奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌多为同一基因型,在某个或某些牛群中存在金黄色葡萄球菌的优势基因型,而不同地区、不同环境和条件下同一种病原菌的基因型也存在一定差异,可能存在多个金黄色葡萄球菌基因型。     

乳房炎奶牛金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及PFGE分型研究

作者针对临床及亚临床乳房炎奶牛乳汁中金黄色葡萄球菌分离株的毒素基因进行检测和脉冲场凝胶电泳(PFGE)基因分型,比较2种类型乳房炎金黄色葡萄球菌分离株的差异.无菌法采集奶样,采用国际标准方法从中分离金黄色葡萄球菌,用多重PCR方法扩增nuc基因和mecA基因以确证金黄色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA).进一步用PCR方法检测SA的各种毒素基因(SEs、ETs、TSST 1和PVL基因等).利用限制性内切酶Sma Ⅰ对SA基因组DNA进行酶切和PFGE分析,最后利用BioNumerics软件进行聚类分析.结果:19.3％(23/119)的临床乳房炎奶样和14.8％(26/176)的亚临床乳房炎奶样确定为金黄色葡萄球菌阳性样品,分别从中分离鉴定出43株和26株金黄色葡萄球菌,其中临床乳房炎分离株中有5株为mecA基因阳性.临床乳房炎奶牛奶样中检测到SA的SEA、SEB、SED、SEJ和PVL毒素基因,检出率分别为3.8％(1株)、11.5％(3株)、19.2％(5株)、7.7％(2株)和31.2％(10株);亚临床乳房炎奶牛乳样中仅检测到SA的SEA和PVL毒力基因,检出率分别为7.0％(3株)和84.1％(37株).表明临床与亚临床乳房炎奶牛乳汁中SA菌株携带的毒素基因不一样,SEs可能是临床乳房炎菌株的重要致病基因,PVL可能是亚临床乳房炎菌株的重要致病基因.69株SA使用Sma Ⅰ酶切分型后,可分为7个大簇、50个基因型,来源相同的SA分型后大部分位于同一簇内.临床乳房炎奶牛乳汁中检测到MRSA菌株,PVL基因在亚临床乳房炎中的检出率为临床乳房炎的2.7倍.PFGE方法能较好的区分临床乳房炎和亚临床乳房炎的SA分离菌株.     

奶牛源金黄色葡萄球菌新疆流行株的耐药特性、毒力基因及分子分型

旨在了解引起奶牛乳房炎和子宫内膜炎的金黄色葡萄球菌(SA)新疆流行株的耐药性、毒力基因及其分子流行病学特征。对2014—2016年新疆地区155株SA奶牛临床分离株的耐药表型进行分析,并对耐甲氧西林SA(MRSA)进行鉴定;通过PCR技术对SA的耐药基因、毒力基因进行检测及SCCmec、MLST分子分型。结果在155株SA中检出22株MRSA,检出率为14.2%;MRSA流行株的耐药性明显高于甲氧西林敏感SA(MSSA);不同的毒力基因在MSSA和MRSA中的检出率有所差异;SCCmecⅠ为新疆地区SA主要基因型;MLST分型共检出14种ST型,分别为ST188、ST584、ST9、ST805、ST2373、ST968、ST2139、ST1、ST2700、ST903、ST2454、ST2990、ST63、STX,其中ST1和ST9检出率相对较高,在MSSA菌株中ST9型的检出率最高,MRSA菌株中ST1检出率最高。研究表明,新疆地区奶牛源SA中主要流行株为MSSA,但MRSA耐药性更强,且毒力基因分布多样,ST9为MSSA流行株的主要基因型,ST1-SCCmecⅠ为MRSA流行株的主要基因型。     

临床型乳房炎奶牛的血液学检测

奶牛业是我国农业的重要组成部分,奶牛乳房炎是危害奶牛业发展的重要疾病之一.多年来,在奶牛乳房炎治疗过程中,由于抗生素的广泛使用而产生耐药菌株,同时严重危害人类的健康.此外,由于治疗不良造成乳房萎缩、瞎奶头,降低奶牛饲养价值,最后导致被淘汰[1].本文对发生临床型乳房炎的奶牛进行血液学检测,以期为治疗奶牛乳房炎提供更科学合理的方法.     

辽宁地区奶牛乳房炎源大肠杆菌毒力基因及耐药基因检测分析

为了掌握辽宁地区规模奶牛场乳房炎源大肠杆菌携带的毒力基因和耐药基因,为奶牛养殖业提供更好的乳房炎防制方案,本研究采用PCR检测方法对辽宁地区多个规模奶牛场临床奶牛乳房炎奶样中分离的66株大肠杆菌进行了4种毒力基因和4种耐药基因的检测分析。结果发现,66株大肠杆菌中仅有1株未检出相关目的基因,其余65株中最少检出2种目的基因,最多检出7种目的基因。其中,毒力基因stx2e、eaeA、K99和astA的检出率分别为56.1%、47.0%、34.8%和31.8%,双重毒力基因的检出率达到43.9%,以eaeA/stx2e基因型的检出率最高;耐药基因sul3、sul1、cmlA及aacA4的检出率分别为87.9%、83.3%、40.9%和28.8%,双重耐药基因的检出率为36.4%,以sul1/sul3基因型检出率最高;三重耐药基因的检出率为37.9%,以cmlA/sul1/sul3检出率最高。本研究结果证实,辽宁地区奶牛乳房炎源大肠杆菌携带磺胺类耐药基因和氯霉素类耐药基因的比率较高,与大肠杆菌的耐药性有较直接的关系,该结果对于辽宁地区奶牛乳房炎的防制具有重要的指导意义,更具有重要的公共卫生意义。     

奶牛乳房炎克雷伯氏菌的基因分型

采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对内蒙地区37株奶牛乳房炎克雷伯氏菌进行了基因分型。试验结果表明：利用引物（P1）将37株菌分7个基因型，37株的56．8％（21／37）是同一个基因型。本结果对克雷伯氏菌性乳房炎的防治研究有重要的参考意义。     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌基因多态性分型试验

利用随机引物AP-7,建立引物随机多态性扩增(RAPD)体系对71株引起内蒙古和贵州地区奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌分离株进行基因分型研究。结果表明,71株金黄色葡萄球菌均得到清晰的RAPD指纹图谱,扩增产物为2～9条带,产物大小为240～4 500bp。菌株共分为6个基因型,其中Ⅰ型17株(占23.9%)、Ⅱ型3株(占4.2%)、Ⅲ型33株(占46.5%)、Ⅳ型15株(占21.1%)、Ⅴ型2株(占2.8%)、Ⅵ型2株(占2.8%)。Ⅰ型为内蒙古地区的流行优势菌群,Ⅲ型为贵州地区的流行优势菌群。两地区各基因型菌株比例有明显差异,这可能与奶牛养殖业水平和环境差异有关。     

奶牛乳房炎耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及mecA耐药基因分型研究.

为了解奶牛场乳房炎金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的耐药性,并对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药基因进行研究,本研究采集奶牛场临床型乳房炎奶样89份进行金黄色葡萄球菌分离鉴定及药敏试验,采用K-B法检测其对常用13种抗生素的敏感性;利用双重PCR扩增MRSA的nuc基因和mec A耐药基因;应用基因外重复回文序列(repetitive extragenic palindromic elements,REP)PCR对分离菌株进行基因多样性分析。结果显示,共分离到16株MRSA;在监测的13种药物中,耐药率超过50%的达到10种,其中对头孢曲松(CRO)、头孢噻肟(CTX)、环丙沙星(CIP)和亚胺培南(IPM)耐药率高达93.75%(15/16),但未见对头孢呃酮(SCF)耐药的分离菌株;耐药基因检测结果显示,16株菌中都携带有mec A耐药基因,除1株外其他15株分离菌都携带特异致病nuc基因。REP-PCR把分离菌株分为13种基因型(A-M),同源性≥90%的只有6株菌。研究结果表明,奶牛乳房炎金黄葡萄球菌的多重耐药比较严重,分子多样性复杂,mec A是其耐甲氧西林类药物的重要机制,本研究为MRSA耐药菌的有效检测及奶牛乳房炎的治疗提供了科学依据。     

新疆阿克苏地区奶牛乳房炎源大肠杆菌毒力基因检测及耐药性分析

为了解新疆阿克苏地区致奶牛乳房炎性大肠杆菌的耐药性及其耐药基因的流行状况,从患有乳房炎的奶牛病例中分离出20株大肠杆菌,采用K-B(Kirby-Bauer)法对其耐药性进行了检测,对其耐药基因进行了分子生物学检测。结果表明:分离菌株对氨苄西林的耐药性最高,耐药率达到了50%,对多西环素、四环素和链霉素的耐药性次之,耐药率为40%,而对环丙沙星、阿米卡星、诺氟沙星则比较敏感;能够检出的毒力基因为astA、escV、eaeA、sepA和hlyA,能够扩增出的耐药基因为tetB、tetC、GyrA、GyrB和ParC。说明新疆阿克苏地区奶牛乳房炎源大肠杆菌主要携带四环素和氟喹诺酮类耐药基因,耐药菌株的耐药基因型与耐药表型呈现正相关。     

新疆石河子地区奶牛临床型乳房炎发病规律及治疗现状

通过对新疆石河子地区6个大中型牛场2600头奶牛的跟踪调查发现,在4-9月份奶牛临床型乳房炎发病249头,临床型乳房炎平均发病率11.55%;10月份-次年3月份奶牛临床型乳房炎发病163头,临床型乳房炎平均发病率6.99%。根据中草药的药理性质进行组方,采用TMR饲喂技术预防性投放中草药＋抗生素乳区局部治疗的方式用药,经过该技术措施的预防和治疗后在4-9月份奶牛临床型乳房炎发病率降低至4.92%;10月份-次年3月份奶牛临床型乳房炎发病率降至3%,目前在规模化或大中型牛场一般常见的治疗方法主要有抗菌增效剂、抗生素＋激素、中草药和抗生素＋中草药等四种方式,试验结果表明,中西药相结合用药对临床型乳房炎起到积极的治疗作用。     

奶牛临床型乳房炎类型及防治

乳房炎是奶牛泌乳期发病率最高的一种疾病,奶牛乳房炎是一种世界性疾病,据统计,全世界奶牛乳房炎的发病率在48%,我国奶牛乳房炎的发病率较高,在50%～70%,美国奶牛乳房炎的发病率在16%～27%。奶牛临床型乳房炎主要的几种类型:1坏疽性乳房炎1.1临床症状乳房出现紫斑、肿胀、发热现象,触摸乳房有痛感,乳上淋巴结肿胀,产奶量急剧下降,严重者停     

新疆部分地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌荚膜多糖分型的研究

为调查新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要流行血清型,本研究采用玻板凝集和双重PCR方法对不同地区奶牛乳房炎乳样中分离的117株金黄色葡萄球菌进行血清分型.结果表明荚膜多糖5型占10.26％(12/117),8型占13.68％(16/117),336型占64.96％(76/117),未分型菌株占11.11 ％(13/117).该研究为新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌疫苗菌株的筛选提供了依据.     

奶牛临床型乳房炎的诊治

临床型乳房炎为乳房间质、实质或间质实质组织的炎症。其特征是乳汁、乳房有肉眼可见的变化,乳汁变性,乳房组织不同程度地旱现肿胀、发热和疼痛。根据病程长短和病情严重程度不同,分为最急性、急性和慢性乳房炎。据统计,临床型乳房炎占奶牛总发病率的21％～23％,     

奶牛临床型乳房炎的预防

奶牛乳房炎是奶牛最常见的一种乳腺疾病,多发生于泌乳奶牛的初期和高产牛的泌乳高峰期。奶牛乳房炎主要分为隐性乳房炎和临床型乳房炎两大类型,笔者主要谈谈临床型乳房炎的发病原因及预防。1发病原因1.1细菌感染:如大肠杆菌、葡萄球菌、厌氧菌、李氏杆菌、布氏杆菌。1.2病毒感染:如水泡病病毒感染乳房引起乳房水肿发炎。1.3初产母牛或经产母牛饲养管理不善引起。1.4分娩时引起的难产、胎衣不下、子宫炎、盆腔炎等。由于上述原因难产时助     

内蒙古地区奶牛乳房炎链球菌毒力基因检测及耐药性研究

为了解内蒙古地区奶牛乳房炎链球菌毒力基因的分布情况及其耐药现状,通过该地区360份乳房炎奶样链球菌的分离鉴定,利用微量肉汤稀释法测定了81株链球菌对15种药物的MIC,采用PCR法检测耐药基因及毒力基因的携带情况。结果显示,分离到的81株链球菌对β-内酰胺类的耐药率最高;对红霉素和四环素的耐药率在40%~85%;对氟喹诺酮类的耐药率相对较低。多重耐药菌株达88.9%(n=72)。耐药基因pbp2b的检出率为86.4%,tetL和tetM的检出率在75%以上,红霉素耐药表型主要由ermB介导。分离菌株毒力基因中cfb的检出率最高(50.6%),其次为cyl和hylB。内蒙古地区奶牛乳房炎链球菌对β-内酰胺类、大环内酯类和四环素耐药情况严重,且发现多重耐药菌株的流行;链球菌中尤以无乳链球菌的毒力基因携带率较高。     

临床型奶牛乳房炎的防治

奶牛乳房炎是一种奶牛的常见病、多发病,该病是由于病原菌通过乳头管而引起的奶牛不同性质的炎症,多表现为乳房红肿、泌乳量减少,乳汁不能利用,严重时造成奶牛瞎乳头等,是造成奶牛养殖场（户）经济损失的重要原因之一。     

规模化奶牛场奶牛亚临床型乳房炎流行规律调查

目的 本研究旨在摸清兰考县规模化奶牛场奶牛亚临床乳房炎流行规律,为该病的防控提供参考。方法 采用加州奶牛亚临床乳房炎试验（CMT）方法对3 家规模化奶牛场的547 头泌乳奶牛进行亚临床乳房炎检测,调查该病与奶牛胎次、泌乳期和乳区的关系。结果 奶牛阳性率为20.11%,乳区阳性率为10.88%;1~2、3~4和≥5胎次的奶牛发病率分别为13.37%、20.53%和29.46%;泌乳前期、泌乳中期和泌乳后期发病率分别为15.11%、22.12%和30.89%;乳区阳性率介于8.59%~13.16%。结论 兰考县规模化奶牛场奶牛亚临床型乳房炎的发病率相对较低,与胎次、泌乳期存在正相关,与乳区无明显关系。