一种快速提取甘薯基因组DNA方案的建立

建立了一种小量快速提取甘薯基因组DNA的方法。用该法以甘薯幼叶为实验材料,用小量快速法提取甘薯基因组DNA。提取的DNA经酶切、琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明DNA质量较好,所提取的DNA可用于RAPD、AFLP等技术。此方法具有提取速度快、利于规模化提取、DNA质量好和经济实用等优点,为甘薯及其它相关植物基因组DNA的提取提供了一种快速、简便的途径。     

芦笋DNA提取方法的比较研究

以芦笋植株叶片为材料,比较了改良SDS法、改良CTAB法和试剂盒法3种提取DNA的方法,并利用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和PCR检测DNA质量,探索最佳的芦笋DNA提取方法。结果表明：上述3种方法都适合于芦笋DNA的提取,提取的DNA均能够满足ISSR分子标记等试验的需要。     

5种提取方法对甘蔗汁中DNA提取的效果

[目的]研究5种提取方法对甘蔗汁中DNA提取的效果。[方法]以甘蔗种茎中获得的蔗汁为材料,采用2种植物基因组提取试剂盒柱式法和磁珠法、SDS法、CTAB法及简化提取法5种方法提取DNA,对比所提取的DNA浓度、纯度及后续PCR扩增的影响。[结果]以SDS法提取获得的蔗汁DNA浓度最高,平均可达377.50 ng/m L。而柱式法的试剂盒,提取的DNA浓度最低,PCR检测没有能够获得特异的目标条带,不适合用于蔗汁DNA的直接提取。虽然简化法提取的DNA浓度较低,但是能够满足PCR扩增的要求,由于不涉及氯仿等有害物质,操作简单,适用于对DNA质量要求不高时的快速提取。[结论]SDS法最适合用于蔗汁中DNA的提取。     

蓖麻基因组DNA提取方法研究进展

目前,基因组DNA的提取已有多种方法,但是不同的方法具有各自的优缺点。本文介绍了蓖麻基因组DNA提取原理,并叙述了近年来提取蓖麻基因组DNA的主要方法,如CTAB法、SDS法、试剂盒法、磁性微球法,通过比较这些不同提取方法的优缺点,分析了影响DNA纯度的因素,如样本的采集与保存、提取缓冲液成分的作用、DNA提取纯化方法等,以期为蓖麻相关研究提供理论基础。     

甘薯DNA的小量快速提取

以甘薯幼叶为试验材料,用小量快速法提取转基因甘薯总DNA。所提取的DNA以0.8%琼脂糖凝胶电泳检测和用试ECORI对DNA进行酶切。结果证明,该方法提取的DNA质量较高,可满足RAPD标记、PCR检测和Southernblot杂交等技术分析的需要。为甘薯及其他多糖类植物DNA的提取提供了一个所需材料量少、简便、快速的方法。     

噬菌体基因组DNA快速提取方法

针对传统噬菌体基因组DNA的提取方法缺乏广泛适用性,并且提取中用到酚/氯仿抽提,操作步骤繁琐,会对操作人员身体造成一定程度的损伤等不足,笔者建立了1种噬菌体基因组DNA快速提取方法。其提取的主要步骤包括宿主核酸降解、噬菌体粒子沉淀、噬菌体DNA释放、杂质去除、DNA吸附、DNA清洗和DNA洗脱等。结果表明,通过此法能快速提取以溶藻弧菌、大肠杆菌和阴沟肠杆菌为宿主菌的多种噬菌体基因组DNA,最快可以在2 h内完成,而且提取的产量和纯度均较高,DNA浓度超过100 ng·μL~(-1),OD_(260/280)达到1.8以上,提取产物不受宿主菌基因组DNA污染,可用于下游的实验分析。     

条斑紫菜叶状体DNA提取方法的研究

以常用的植物基因组DNA提取方法—LiCl法、SDS法、CTAB法、高盐脲法和试剂盒法提取条斑紫菜叶状体DNA,对不同提取方法的效果进行了比较分析,同时探讨了SDS法的细胞破碎方法和不同样本量提取条斑紫菜DNA的效果。对DNA纯度、DNA浓度、DNA得率等分析表明,SDS法效果较好,其次是LiCl法;在使用SDS法时,液氮研磨破碎细胞效果好于其他方法;在小样本量提取DNA时,SDS法比LiCl法效果好。     

一种简单快速的DNA提取方法在水稻上的应用

采用了一种简单快速的DNA提取方法来提取水稻DNA,并用提取的DNA进行了PCR扩增。结果表明,该方法提取DNA不需要碾磨、离心等步骤,通过简单的加热、稀释等操作便能制备100个PCR反应的DNA模板,1h能提取96个样品的DNA。本研究成功地将该方法用于水稻SSR分析、白叶枯抗病基因Xa21的分子标记辅助育种和不育系纯度鉴定等方面。     

玉米基因组DNA不同提取方法及提取部位的比较研究

分别探讨CTAB法和SDS法对玉米不同部位基因组DNA的提取效果。综合比较了2种方法提取的DNA浓度、纯度及完整性,结果表明SDS法是比较适合玉米基因组DNA提取的方法;同时比较了以玉米叶片、幼根和成熟胚为材料提取的DNA质量,发现以新鲜叶片为材料提取的DNA浓度和纯度较高,更适合用于玉米基因组DNA的提取。     

莲雾DNA的提取

针对莲雾体内含有大量影响DNA提取质量的多酚等次生代谢物质的特点,在常规提取方法的基础上做了技术改进,即加入PVP和β-巯基乙醇防褐变,成功地从叶片中提取染色体DNA,并可作为RAPD模板应用。     

微波萃取法提取盾叶薯蓣皂苷元及含量分析

[目的]研究微波萃取法提取盾叶薯蓣皂苷元的最佳条件。[方法]采用微波萃取法提取盾叶薯蓣皂苷元,高效液相色谱法检测薯蓣皂苷元提取率,选取粉碎粒度、提取时间、提取温度、固液比为影响因素进行单因素试验和正交试验,确定盾叶薯蓣中皂苷元的最佳提取工艺。[结果]单因素试验发现石油醚作提取溶剂、粉碎粒度为60目、固液比为1∶20(g/ml)、提取时间为10 min、提取温度为100℃,盾叶薯蓣中皂苷元的提取率最高。正交试验表明,微波萃取法提取盾叶薯蓣皂苷元的最佳条件为:粉碎粒度60目,提取时间10 min。[结论]在最佳提取条件下微波提取盾叶薯蓣皂苷元,提取率达1.837%。     

微波萃取与常规提取方法对大黄总蒽醌提取率的影响

试验研究了大黄总蒽醌的微波辅助提取、超声提取和索氏提取方法，并利用分光光度法测定了提取液中总蒽醌的含量。结果表明：微波辅助提取法的提取率最高(1．91％)，是超声法的1．13倍，是索氏提取法的1．29倍。微波辅助提取法仅需10min，而索氏法和超声法分别需要90，30min。微波辅助提取法用于中药大黄的提取，具有高效、省时的特点。     

黑木耳黄酮类化合物提取工艺研究

[目的]研究乙醇浸提法提取黑木耳中黄酮类化合物的工艺。[方法]采用单因素试验和正交试验检测料液比、乙醇浓度、提取时间和提取温度对黑木耳黄酮类化合物提取得率的影响。[结果]最佳提取条件为：料液比1：7,乙醇浓度80%,提取时间6h,提取温度50℃,在该工艺条件下提取率达到0.43%。[结论]该工艺条件下提取率较高,适于提取黑木耳中黄酮类化合物。     

萃取法制备辣椒碱提取工艺的研究

为辣椒碱的制备奠定理论基础。以辣椒为原料,研究料液比、乙醇浓度、提取温度及时间对提取得率的影响,采用正交试验设计优化有机溶剂萃取法制备辣椒碱的提取工艺。提取辣椒碱的适宜条件为:乙醇浓度50%~70%,浸提温度60~80℃,浸提时间1 h内,料液比1∶8~1∶15。4个因素对辣椒碱提取得率的影响程度依次为提取温度>乙醇浓度>提取间>料液比。最佳工艺是:70%的乙醇浸提辣椒3次,料液比为1∶10,提取温度80℃,浸提时间1 h,按此工艺,辣椒素得率达0.456%±0.048%。有机溶剂萃取法有效地提取了辣椒碱,且对辣椒中的其他成分没有破坏作用,是制备辣椒碱的好方法。     

微波提取法与索氏提取法提取杏仁油的比较研究

[目的]确定杏仁油的适宜提取方法.[方法]以杏品种为原料,分别采用微波提取法和索氏提取法对新疆产量较大的小白杏进行正交试验,研究各种提取因素对杏仁油提取率的影响.[结果]最佳提取条件下微波法小白杏出油率69.91;,索氏提取法小白杏出油率72.67;.[结论]两种杏仁油提取方法的比较结果显示,微波提取法提取的杏仁油百分含量略低于索氏提取法,但与索氏提取法相比,微波提取法具有节省时间、环保节能、提取效率高、控制方便及易工业化等优点.     

不同提取方法对黄芩苷提取率的影响

[目的]探讨不同提取方法对黄芩苷提取率的影响。[方法]采用超高压处理,通过不同的提取压力、料液比、压力作用时间和乙醇浓度测定超高压条件下黄芩苷提取率,并与浸提法、煎煮法、回流法和微波法等传统的黄芩苷提取工艺进行比较。[结果]当提取压力为450 MPa、乙醇浓度为40%、压力作用时间为25 min、料液比为1∶10时,黄芩苷提取效果达到最佳。[结论]超高压条件下,黄芩苷的提取率明显高于其他几种传统提取方法,这为利用超高压研究黄芩苷的提取提供了依据。     

甘草总黄酮提取方法的对比及工艺优化

[目的]比较不同提取方法提取甘草（RADIX GLYCYRRHIZAE）总黄酮的提取效率,并对最优方法的提取工艺进行优化。[方法]比较了快速溶剂萃取法、超声法、回流提取法和温浸提取法对甘草中总黄酮提取效率的影响,并通过正交试验优化快速溶剂萃取法的提取工艺。[结果]快速溶剂萃取法优于回流提取法、超声提取法和温浸提取法;快速溶剂萃取法提取甘草中总黄酮的最佳提取条件为：提取时间为7 min,提取温度为110℃,提取次数为1次,乙醇浓度为70%。[结论]该试验得到提取甘草总黄酮的较优化方法,并优化了其提取工艺,为甘草总黄酮的提取提供了一种快速高效的方法。     

微波辅助提取法提取复方中草药有效成分的研究

[目的]研究微波辅助提取法提取复方中草药的有效成分。[方法]采用乙醇回流提取法和微波辅助提取法提取复方中药中的有效成分,同时采用紫外-可见分光光度法测定了黄芩苷和葛根素的含量,并以黄芩苷得率和葛根素得率为考察指标,比较了2种不同提取方法的提取效果,同时研究了微波辅助提取法的微波作用时间对提取的影响。[结果]以不同浓度的乙醇进行回流提取时,黄芩苷和葛根素的得率随着乙醇浓度的增加先增大后减小;以微波辅助提取法进行提取时,浓度为60%乙醇提取的黄芩苷和葛根素的得率最高。当乙醇浓度为60%时,采用微波辅助提取法提取的黄芩苷和葛根素的得率均明显高于乙醇回流提取。最佳微波作用时间为15 min,此时黄芩苷得率和葛根素得率最高,分别是0.315 5和0.502 5 mg/g。[结论]采用微波辅助乙醇回流提取法可提高复方中草药中黄芩苷得率和葛根素得率。     

微波辅助法提取山楂黄酮类化合物的工艺条件研究

[目的]探讨微波辅助法提取山楂中黄酮类化合物的工艺。[方法]采用单因素试验和正交试验,研究微波处理时间、微波功率、乙醇浓度和液固比4个因素对提取山楂黄酮类化合物的影响。[结果]最佳提取工艺条件为：液固比60∶1、乙醇浓度80%、微波处理时间60 s、微波功率420 W。在此工艺条件下,提取率达到3.47%。[结论]该工艺条件适合于提取山楂中黄酮类化合物。     

超声波协助提取芦荟多糖的研究

利用超声波提取法协助提取芦荟多糖,在单因素试验的基础上,用正交试验法分别确定了常规提取和超声提取法的最佳工艺条件。结果表明:超声提取法有明显的优势,在各自的最佳工艺条件下比较其得率,超声波法得率是常规法的1.37倍,且所用沉淀剂乙醇较少,提取时间大大缩短(由4 h缩短至40 min),只需浸提1次,可提高效率,简化提取工艺,节约成本。