猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株的毒力评价

为了评估当前优势流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）NADC30-like毒株的毒力，试验利用经猪肺泡巨噬细胞分离的5个NADC30-like毒株接种6～7周龄健康易感猪，以进行毒力评价（A-E组），并设立未攻毒阴性对照组（F组）。所有组攻毒后进行临床症状观察，并在第0、3、5、7、10、14和21天采集全血、咽拭子和肛拭子进行病毒载量检测。结果显示，除D组外其他攻毒组表现一过性体温升高，偶有到41℃，而D组在攻毒后第4～15天，该组试验猪平均体温均不低于40.5℃，体温显著高于其他攻毒组。病毒血症检测发现，除D组外，其他攻毒组在第3、5、7和10天均为核酸阳性，在第14天部分转为核酸阴性，但到第21天又转为阳性，而D组从攻毒到结束病毒血症始终为阳性。肛拭子和咽拭子病毒载量测定发现，除D组外，其他攻毒组在第3、5和7天均为核酸阳性，在第10、14和21天部分猪有时转为阴性，后又转为阳性；D组攻毒到结束肛拭子始终为阳性。从上述数据统计综合分析，结果表明D组所攻击的毒株毒力高于其他毒株，可引起3/5猪发病，且死亡一头，该毒株感染能产生PRRSV的典型临床症状，可初步用于NADC30-...     

不同厂家猪肺炎支原体灭活疫苗免疫效力对比实验

本研究旨在评价不同厂家猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫攻毒保护效果。选择4周龄仔猪25头,随机分为5组,每组5头猪,分别免疫四种猪肺炎支原体灭活疫苗（即疫苗A组、疫苗B组、疫苗C组、疫苗D组）,E组为攻毒对照组,不做任何处理,在同等条件下隔离饲养。各疫苗按照对应的说明书进行免疫,免疫后第14、28天进行采血,检测支原体抗体水平,一免后28 d时,所有免疫组连同攻毒对照组,各气管注射猪肺炎支原体CJ株5 m L/头（含0.01 g肺组织毒）。攻毒后饲养观察28 d,对所有实验组动物进行观察临床症状。A组实验动物攻毒后未出现咳嗽、腹式呼吸等支原体临床症状,B-D组实验猪攻毒后偶尔出现轻微间隔性咳嗽,E组实验动物攻毒后出现连续性咳嗽,个别猪出现腹式呼吸等临床症状。攻毒后第28天进行病理剖检。结果表明,攻毒对照组猪4/5头出现典型猪肺炎支原体病变,在肺脏尖叶、心叶、膈叶前1/3部位以及中间叶,出现“肉样”或“胰样”实质样病变,界限明显。B～D组解剖后个别猪出现典型猪肺炎支原体病变,A组实验动物解剖后个别猪肺脏出现零星病变,剩余实验动物肺脏均未出现猪肺炎支原体病变。根据肺部病变较少率计算,A～D组病变...     

马传贫强毒攻击穴位注苗马的形态学观察

穴位注射马传贫弱毒苗马２２匹，分别在注苗后２、３、６个月用马传贫强毒攻击，３个月后迫杀。经病理学与免疫形态学联合检查表明，攻毒马有三种类型形态学改变：第Ⅰ种有较典型马传贫病理变化，免疫活性细胞数量减少，且变性、坏死；第Ⅱ种类型无马传贫规律性病理变化，免疫活性细胞活化，增殖，但肝内有铁反应；第Ⅲ种类型马无马传贫病理性损伤，免疫系统明显活化，增殖。据此查明２个月攻毒马１匹，出现第Ⅰ种类型形态学改变，３个月攻毒马８０％以上呈现Ⅱ、Ⅲ类型反应，与疫苗皮下注苗６个月再攻毒效果相仿，表明穴位注苗具有缩短免疫发生时间的效果。但穴位注射６个月攻毒的马出现Ⅰ型，变化例数较多（３３％），病理变化较明显，免疫反应有下降趋势，本文对这种异常现象进行了初步讨论。     

苦马豆素抗血清治疗家兔小花棘豆中毒

通过检测苦马豆素（swainsonine,SW）抗血清治疗小花棘豆中毒家兔血清免疫和生化指标变化,评价SW抗血清对家兔小花棘豆中毒的治疗效果。将18只家兔随机分为对照组（6只）、攻毒组（6只）和攻毒治疗组（6只）,攻毒试验兔按干重拌料饲喂10g／（kg·d）小花棘豆草粉,攻毒组试验兔出现死亡时（第70天）停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW抗血清,每只兔每天0．5mL,连续注射4d。以攻毒试验开始进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW含量显著高于对照家兔（P〈0．05）;第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔（P〈0．05）,血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔（P〈0．05）;第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU含量显著高于对照家兔（P〈0．05）。攻毒治疗组家免注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性及BuN、CRE、GLU、SW含量较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E～玫瑰花环率显著上升。结果表明,SW抗血清可有效治疗家兔小花棘豆中毒。     

猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌5型二联灭活疫苗研制与免疫效力研究

猪圆环病毒2型(PCV2)和副猪嗜血杆菌(HPs)混合感染十分普遍,造成我国养猪业严重经济损失。本研究将杆状病毒表达的重组PCV2 Cap蛋白(BCap)和PCV2灭活病毒液(i PCV2),分别与HPs血清5型(HPs5)灭活菌液混合,加入水性佐剂混合制备成BCap/HPs5与i PCV2/HPs5二联灭活疫苗,进行猪体免疫保护试验。仔猪免疫保护试验结果为:两种疫苗免疫后均可诱导猪体产生PCV2和HPs抗体。免疫后35天用PCV2攻击,两免疫组猪均无明显临床症状,相对日增重(RDWG)与空白对照组相似,但高于攻毒对照组(P0.05);攻毒后14天,病毒血症明显低于攻毒对照组(P0.05);攻毒后28天剖解,腹股沟淋巴结PCV2载量明显低于攻毒对照组(P0.05),病理学变化明显轻于攻毒对照组。免疫后35天用HPs攻击,对照组猪均出现明显临床症状,但两免疫组猪无明显临床症状;攻毒后14天剖检,两免疫组病理学变化方面相似,但明显轻于攻毒对照组。结果表明,BCap/HPs5与i PCV2/HPs5两种二联苗免疫仔猪后均能诱导机体产生免疫应答,产生免疫保护作用,具有较好应用前景。     

蓝耳病阴性猪PRRSV攻毒试验结果及在血清驯化中的应用

良圻原种猪场2009年在后备猪采用血清驯化,以保持猪群蓝耳病的稳定。为进一步了解公司内部所用猪蓝耳病病毒的特性,用同一猪蓝耳病病毒的不同拷贝数(0、20、40、400、4 000和20 000)分别对6头蓝耳病抗原抗体双阴性仔猪进行攻毒试验。病原检测:攻毒24h后,除阴性猪外,5头猪均抗原检测到PRRSV病毒核酸,抗体检测;攻毒后的前6 d抗体均为阴性,7 d后攻毒猪只抗体逐渐转阳;第9天抗体全部转阳且较第7天有大幅升高第11天后,整体抗体稍有上升但较缓慢,攻毒21 d后,各猪只抗体值在1.7~2.3之间。表明20个病毒拷贝数就足以感染猪只。     

两种猪蓝耳病活苗单独与同时免疫试验

丹麦兽医研究所的人员对猪美洲型蓝耳病疫苗(2型)与欧洲型蓝耳病疫苗(1型)同时与单独注射4周龄SPF猪进行了研究,发现采用RT-PCR检测鼻拭子,免疫后第5天阳性率最高,第14天后显著降低,第21天后均为阴性,病毒血症时间长。通过攻毒,2种PRRS疫苗同时注射后的安全性和效力与单独注射的安全性和效力相似。     

鸡毒支原体人工发病模型的建立

本文进行鸡毒支原体强毒R株攻毒方法的比较,采用气雾、气囊注射、肺部注射、气囊注射施以氨水逆境、肺部注射施以氨水逆境和单纯氨水对鸡的应激6种攻毒方法,攻毒后第15天剖检观察鸡的气囊损伤情况。结果发现,气囊注射施以氨水逆境攻毒效果最好,致病率达100%(10/10);气囊注射次之,致病率达90%(9/10);气雾攻毒效果最差。因此,我们选用气囊注射施以氨水逆境做为鸡毒支原体强毒R株人工发病的模型。     

CA菌苗免疫猪对鸡的安全性试验

A 型(群)猪肺疫 CA 株弱毒菌苗从1984至1987年在广东省17个县(市)以及湖北省5个县(区)共注射各类猪只196.77万头,表现安全有效。其菌种是哈尔滨兽医研究所的禽霍乱731菌株。由于731菌苗注射鸡以后出现过不安全的事故,究竟用731菌株制造的CA 株弱毒菌苗注射猪以后会不会对鸡不安全呢?我们进行了本试验。结果表明,CA菌苗在猪体连传6代,毒力无返强现象。免疫猪经48小时后体内已分离不到本菌。敏感鸡与大剂量接种 CA 菌苗的猪同饮同食同居34～45天不发病,攻毒无保护。试验证明生产上用 CA 菌苗免疫猪,对鸡是安全的。     

广东一株猪伪狂犬病毒野毒的分离鉴定和致病性初步研究

为了证实广东阳江某猪场存在猪伪狂犬病毒(PRV)强毒力野毒感染,试验采用病毒分离鉴定及仔猪攻毒试验的方法,对该猪场保育猪群病料中存在的病毒进行分离鉴定,以及用15日龄含有母源抗体(中和效价水平为1∶16)的仔猪进行毒株致病性的初步研究。结果表明:从病料中成功分离出1株PRV野毒株GD-1406株;经滴鼻攻毒,试验Ⅰ组(病毒攻毒效价为1×106TCID50/m L)仔猪攻毒后第5天全部死亡,试验Ⅱ组(病毒攻毒效价为1×104TCID50/m L)仔猪攻毒后第4天死亡率达80%,第6天全部死亡;病理剖检显示,分离的PRV对试验组仔猪的多种组织器官造成肉眼可见的损伤,对照组正常。说明该猪场保育猪群中有PRV野毒强毒株存在。     

育成猪感染猪肉孢子虫后获得性免疫持续期的研究

16头8周龄猪用10~3猪肉孢子虫孢子囊作亚临床感染免疫,另以不免疫的8头猪作对照。上述猪分为4组(每组免疫猪4头加入对照猪2头),在免疫后的第40,80,120和160天,分别以3×10~6猪肉孢子虫孢子囊感染攻毒,以观测抗急性猪肉孢子虫感染的保护免疫持续期。试验结果:免疫40天攻毒组能抵抗攻毒致死或发病,而有坚强的免疫     

实验性传染性法氏囊病凝血功能动态研究

９０只健康白来航雏鸡于５０日龄 种传染性法氏囊病理毒强化株。分别于攻毒前（即攻毒０ｈ），攻毒后２４ｈ，４８ｈ和７２ｈ随机抽承５只鸡，心脏采血，对其６项凝血指标进行动态测定。结果表明，攻毒后２４ｈ血浆再钙化时间和凝血酶原时间显著延长；４８ｈ不凝；７２ｈ逐渐恢复。     

免疫刺激商品断奶仔猪复制多系统衰竭综合征(PMWS)

猪圆环病毒2型（PCV2）是引起PMWS的必需病原,与其他病原混合感染或受到外界刺激时表现PMWS临床症状。本试验将16头商品化断奶仔猪（32日龄）随机分为4组（每组4头）,即对照组、钥匙孔血蓝蛋白刺激组、PCV2攻毒组和PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组,用上海某猪场分离株PCV2-SH、钥匙孔血蓝蛋白（KLH）反复刺激断奶仔猪以复制PMWS。其中对照组、钥匙孔血蓝蛋白刺激组未出现症状;PCV2攻毒组症状较轻,出现增重缓慢,伴有短暂的体温升高;而PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组出现明显的临床症状,2头猪在攻毒后第11天濒临死亡,其中1头在第12天死亡,攻毒猪宰杀后脏器出现明显的病理变化。PCV2攻毒组和PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组于攻毒后第4天出现病毒血症,宰杀后肺脏、淋巴结均检测到PCV2的DNA。以上结果说明,PCV2-SH感染结合免疫刺激可以引起商品化仔猪发生PMWS,为PCV2致病机理和免疫学研究提供了动物发病模型。     

不同配比IBD油苗预防鸡传染性法氏囊病的试验

在相同条件下，给11日龄试验鸡注射不同配比的IBD油 苗，注射后第21天采各组鸡血液。分离血清，用酶联免疫法测定IBD抗体水平，并于第 23天攻毒，注意观察记录其临床表现。攻毒后第7天和14天分别将各组鸡半数致 死剖解，观察其法氏囊、肾等病理变化。试验结果从临床保护率、法氏囊和肾病变及N/P值 三个方面进行综合评价，筛选出用浓缩液制成的油苗和浓缩液加TF制成的油苗预防IBD效果较好。     

母猪流行性腹泻返饲后免疫应答评估

当前,猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行广、危害严重。除进行疫苗免疫工作外,返饲常常做为猪场控制猪流行性腹泻的重要手段。笔者用6头育肥后期猪模拟母猪返饲(攻毒)实验,研究母猪返饲后排毒情况与血清抗体消长变化,来探究母猪返饲最佳时机以及如何避免返饲带来的风险。结果表明,试验猪在返饲后第2、3天相继发生腹泻并检测到PEDV,在返饲后11 d猪血清中IgG抗体明显上升,并在攻毒后第20天IgA与IgG检测值均达到峰值,在攻毒后第15天唾液与粪便均检测不到病毒。说明,生产上在产前15 d到30 d之间返饲效果较好,病毒感染仔猪的风险最低。为临床防控该病提供理论依据。     

不同配比IBD油苗预防鸡传染性法氏囊病的试验

在相同条件下，给11日龄试验鸡注射不同配比的IBD油苗，注射后第21天采备姐鸡血液。分鼻血清，用酶联免疫法测定IBD抗体水平，并于第23天攻毒，注意观察记录其临床表现。攻毒后第7天和14天分剐将各组鸡半数致死剖解，观察其法氏囊、肾等病理变化。试验结果从临床保护率、法氏囊和肾病变及N／P值三个方面进行综合评价，筛选出用浓缩液制成的油苗和浓缩液加TF制成的油苗预防IBD效果较好。     

猪伪狂犬病病毒灭活疫苗对猪伪狂犬病病毒流行毒株和经典毒株的免疫保护效果评估

为评估猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）灭活疫苗（HN1201-ΔgE株）免疫后对PRV流行毒株和经典毒株的保护效果,本研究对试验猪分别免疫PRV灭活疫苗（HN1201-ΔgE株）和PRV活疫苗（Bartha-K61）,免疫后第0、7、10、14、17、21、24和28天采血测定PRV gB抗体,并分别使用PRV流行毒株HN1201株和经典毒株闽A株测定免疫后第0、7、14、21和28天血清的中和抗体水平,于免疫后第28天分别使用HN1201株和闽A株攻毒并观察,之后测定体温,测定攻毒后第7和14天PRV gE抗体,及攻毒后0~8 d的排毒情况。结果显示,HN1201-ΔgE免疫组较Bartha-K61免疫组gB抗体和中和抗体产生早,且抗体水平较高。两个免疫组试验猪在攻毒后虽然均无明显临床症状,且免疫组织化学检测（IHC）组织中的病毒抗原均为阴性,但HN1201-ΔgE免疫组试验猪脏器未见任何病理损伤,Bartha-K61免疫组试验猪部分脏器具有病理损伤。与未免疫对照组相比,2个免疫组试验猪在HN1201株和闽A株攻毒后,gE抗体转阳时间晚且排毒率低,HN1201-ΔgE免疫组gE抗体水平整体均低于Bartha-K61免疫组,攻毒后排毒检测中,Bartha-K61免疫组于2个毒株攻毒后第3~5天可检测到排毒,而HN1201-ΔgE免疫组全程未检测到排毒。研究结果表明,灭活疫苗（HN1201-ΔgE株）对PRV流行毒株和经典毒株均可提供完全保护。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究

猪圆环病毒2型（PCV2）经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和二免后第14天进行ELISA抗体检测。同时为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果,笔者进行了猪体免疫效力试验。通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗免疫效果进行评价。结果如下：①PCV2能被0.2%甲醛完全灭活,灭活时间为16 h。②PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答,并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗。③猪体免疫效力试验表明,两种油苗均能产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后,攻毒对照猪的体温高于免疫猪,空白对照猪体温正常。免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低,且两个免疫组和空白对照组之间平均日增重差异显著（P〈0.05）。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明两油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明,PCV2灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答,并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。     

感染“白点病”番鸭抗氧化功能的变化

用“白点病”病毒人工感染雏番鸭，于感染后第1、3、5、7、10和14d测定了雏番鸭血浆中丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果，雏番鸭感染“白点病”病毒后血浆中MDA的含量、SOD和GSH-Px活性发生明显变化，其中攻毒组雏番鸭在攻毒后第3d MDA含量开始升高，第5和第10d显著高于对照组；攻毒组雏番鸭SOD活性在攻毒后第3d开始显著低于对照组，随后在低于或显著低于对照组的范围内波动；GSH-Px的活性在攻毒后第7d开始下降，攻毒后第10d攻毒组显著低于对照组。提示，自由基可能在雏番鸭“白点病”的发病过程中起关键作用。     

鸡新城疫、禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗在商品蛋鸡和商品肉鸡上的免疫效果

为探讨鸡新城疫、禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗在商品蛋鸡和商品肉鸡上的免疫效果,以鸡新城疫、禽流感二联灭活疫苗免疫7日龄商品蛋鸡与商品肉鸡,在免疫后第7,14,21,28,35天分别采血检测新城疫与禽流感抗体水平;并于免疫后第14天和第21天分别进行禽流感病毒(H9N2 HP株)攻毒,观察其攻毒保护效果。结果表明:商品蛋鸡免疫组在免疫后第7天新城疫抗体与禽流感抗体开始快速上升,第14天时抗体水平高于4 lb,且抗体峰值高;商品肉鸡免疫组免疫后第14天新城疫抗体与禽流感抗体才开始快速上升,第21天时抗体高于4 lb,抗体峰值低于商品蛋鸡组的峰值。商品蛋鸡免疫组第14天与第21天的攻毒保护率均达到100%,而商品肉鸡组免疫组第14天的攻毒保护率达到了90%,第21天的攻毒保护率也达到了100%,两者均有较好的免疫保护效果。