铜对肉鸡肝细胞线粒体膜通透性及呼吸的影响

为进一步了解铜对生物体的生物学效应，选用硫酸铜作为铜源，向即时分离的肉鸡肝细胞线粒体培养液内加入终浓度分别为5、10、20μmol／L的铜（以铜计），孵育10min后，观察肝细胞线粒体膜通透性及呼吸的变化。结果显示，铜对线粒体膜通透性转换孔有较显著的影响，造成线粒体不同程度的肿胀，表现为线粒体悬液在540nm处的吸光值下降，且铜浓度越高，吸光值下降越明显，在孵盲6min后3种浓度的吸光值下降百分比差异显著（P〈0．05）。随着铜浓度的升高，线粒体呼吸逐渐减弱，RCR、P／O、OPR均显著降低（P〈0．05），这些变化可能是微量元素铜对生物机体产生毒害作用的本质原因之一。     

谷胱甘肽对铜孵育的肉鸡肝线粒体膜电势及膜通透性的保护作用

线粒体是细胞内主要的能量形成场所,也是各种损伤最为敏感的细胞器之一,所以无论在生理上或病理上都具有十分重要的意义。大量的研究表明,细胞凋亡的最早期阶段在细胞核病理改变出现之前,线粒体膜电位就已下降,膜电位消失亦是线粒体损伤的一个重要标志。线粒体跨膜电位一旦崩溃,则细胞凋亡不可逆转;线粒体膜内外的各种物质进出线粒体的通道被称之为线粒体膜通透性转变孔(mitochondrialpermeability transition pore,MPTP),是线粒体内外信息交流的中心枢纽,其开放状态指示着线粒体正常功能的发挥与否;铜是细胞色素氧化酶和铜蓝蛋白等     

铜对肉鸡肝线粒体Ca~(2+)、8-OHdG含量及膜电势的影响

将200羽1日龄Cobb商品代肉鸡随机分为4组,各组日粮中铜含量分别为:对照组(Ⅰ组)11mg/kg、试验Ⅱ组110mg/kg、试验Ⅲ组330mg/kg、试验Ⅳ组550mg/kg。饲养至10、20、30、40及50d时每组各取5只鸡用于采集肝脏样品,提取肝脏线粒体测定其膜电势及Ca2+、8-OHdG含量。试验结果显示:随着铜质量浓度的增加及饲喂时间的延长,线粒体膜电势降低,Ca2+和8-OHdG含量升高,表明饲喂高铜日粮可导致肝细胞凋亡。     

高铜对肉鸡肝线粒体膜通透性和肝脏病理变化的影响

本试验选用1日龄AA肉鸡为研究对象,通过观察高铜日粮下肉鸡肝脏病理损伤和肝细胞线粒体膜通透性转换孔的开放程度,探讨肉鸡对高铜作出的应答反应,为进一步分析铜对生物体亚细胞结构的作用提供一定的科学数据,为深层次的探讨铜的生物学特性奠定研究基础.     

氨基胍对内毒素血症肉鸡肝线粒体自由基代谢的影响

为探讨自由基在肉鸡内毒素血症发病机理中的作用，将120只30日龄的肉鸡，公母各半，随机分为A、B、C、D共4组，每组30只。A组为对照组，B组为内毒素组，C组为氨基胍治疗组，D组为氨基胍组。分别在处理后第1、3、5、7、9h每组各宰杀6只提取肝线粒体，检测肝线粒体中的总抗氧化能力（T—AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性以及丙二醛（MDA）含量的变化。结果显示，内毒素血症时肝线粒体中SOD、GSH—Px和CAT活性降低，MDA含量明显升高，肝线粒体中T—AOC活性下降，而氨基胍治疗组则情况明显好转。结果表明，由于自由基的增多而引起的脂质过氧化损伤在肉鸡内毒素血症发病机理中起着重要的作用，氨基胍可有效拮抗脂质过氧化造成的损伤。     

黄曲霉毒素B_1对肉鸡肝线粒体自由基代谢的影响

为观察黄曲霉毒素B1(AFTB1)对肉鸡肝线粒体自由基代谢的影响,并研究亚硒酸钠(Na2SeO3)与复方中药对AFTB1的颉颃效应。10日龄120只试验肉鸡随机分为4组,每组30只,分别为第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,第Ⅰ组为空白对照组;每天以0.2 mg/kg剂量给第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肉鸡灌胃投用AFTB11次,并在第Ⅲ组肉鸡基础日粮中添加2%复方中药,在第Ⅳ组肉鸡基础日粮中添加无机硒2 mg/kg(亚硒酸钠),试验期共28 d。并于处理后第17、24、31、38日龄时,检测肉鸡肝线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量变化。结果显示,第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肉鸡肝线粒体SOD、CAT活性及T-AOC均显著降低(P<0.05),线粒体MDA含量显著增高(P<0.05);当投用亚硒酸钠或复方中药后,与第Ⅱ组试验结果比较,第Ⅲ、Ⅳ组肉鸡肝线粒体SOD、CAT活性及T-AOC均显著增强,而线粒体MDA含量明显降低。试验结果表明,在肉鸡日粮中添加亚硒酸钠或复方中药,均能明显缓解AFTB1所致肉鸡肝线粒体抗氧化功能下降的影响,且亚硒酸钠的效果明显优于复方中药。     

线粒体膜通透性变化与细胞凋亡的关系

线粒体膜通透性转换孔是一种位于线粒体内膜的非选择性孔道,它的开放引起线粒体膜通透性改变,导致细胞色素C、凋亡诱导因子和Ca²⁺及膜间隙中的胱冬肽酶原等凋亡因子释放到细胞质中,致使细胞整体结构破坏、功能紊乱,发生凋亡。以前普遍认为线粒体膜通透性改变(mitochondrial permeability transition,MPT）是导致细胞凋亡的关键点,但一些新的研究结果表明,MPT与细胞凋亡并不存在必然的联系。作者结合细胞凋亡方面的研究着重就线粒体膜通透性转换的生物学功能和腺嘌呤核苷酸转位子、环孢素A 结合蛋白D及Bcl-2家族蛋白定位、转位在通透性转换中的作用及其与细胞凋亡的关系进行概括性论述与分析。     

高铜对肉鸡肝脏线粒体抗氧化功能的影响

为了探讨高铜对肉鸡肝脏线粒体抗氧化功能的影响,试验选择1日龄健康AA肉鸡200只,随机分成4组,使用硫酸铜作为铜源并添加到玉米-豆粕型基础日粮中,对照组饲料中铜含量为11mg/kg,3个高铜组饲料中铜含量分别为110,330,550 mg/kg,试验至肉鸡50日龄时结束.结果表明:高铜110,330,550 mg/kg...     

不同来源日粮铜水平对肉鸡肝线粒体H_2O_2 生成变化的研究

本研究旨在探讨不同来源日粮铜水平对肉鸡肝线粒体H_2O_2生成变化的影响.选用硫酸铜、蛋氨酸铜作为源铜,每种源铜均设4个浓度梯度.288只1日龄科宝商品代肉鸡随机分为8组,每组36只,分别喂以对照日粮(Cu 11 mg·kg~(-1),Ⅰ组)和高铜日粮(Cu 110 mg·kg~(-1),Ⅱ组;Cu 220 mg·kg~(-1),Ⅲ组;Cu 330 mg·kg~(-1),Ⅳ组)60 d,并于12、36和60日龄取样,观察肉鸡肝线粒体H_2O_2生成速率变化.结果:与对照组相比,2种来源的高铜Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肉鸡肝线粒体H_2O_2生成速率显著加快(P＜0.05或P＜0.01);试验第36和60天时,蛋氨酸铜各组肉鸡肝线粒体过氧化氢生成速率均高于相应的硫酸铜各组(P＜0.05或P＜0.01),并且,高铜日粮饲喂的肉鸡肝线粒体H_2O_2生成部位主要集中在线粒体呼吸链复合体Ⅳ.结果表明:高铜日粮可诱导肝脏的氧化应激损伤;同剂量的有机铜螯合物比无机铜更易加快肝脏线粒体H_2O_2生成速率,并可推测,线粒体呼吸链复合体Ⅳ是机体在高铜刺激下攻击的靶部位之一.     

线粒体通透性转换孔及其与细胞凋亡的关系

线粒体通透性转换孔,又称线粒体巨型通道,是横跨线粒体内外膜之间的非选择性高导电性通道,由多种蛋白质复合组成。多数理论认为,它的开放所导致的线粒体膜通透性转换是线粒体导致细胞凋亡众多途径中关键的一个。现阶段对线粒体通透性转换孔有各种方向的研究。论文对其结构、作用机制及其与细胞凋亡的关系进行了综述。     

不同剂量的蛋氨酸铜对肉鸡肝脏病理组织结构和粪便铜含量的影响

选择1日龄健康AA肉仔鸡120只,随机分成4组。使用蛋氨酸铜作为铜源,饲喂玉米-豆粕型基础日粮,对照组饲料铜含量为11mg/kg,3个高铜试验组分别为:110mg/kg、220mg/kg和330mg/kg,试验至60日龄结束。于第12,36,60日龄在各组内随机采血,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;测量60日龄各组肝脏和粪便的铜含量并观察肝脏组织病理变化。结果显示:①血清ALT和AST活性均在正常范围内,没有异常升高;②110mg/kg和220mg/kg组的肝脏组织中铜含量比对照组有所升高,但是差异不显著(P>0.05),而330mg/kg组则极显著高于其他3个试验组(P<0.01);110mg/kg,220mg/kg和330mg/kg组的粪便中铜含量均极显著高于对照组(P<0.01);③330mg/kg组的肝脏组织大部分细胞中度变性,其他各组病理变化不明显。试验结果表明,日粮中蛋氨酸铜浓度达到330mg/kg时,肝脏内的铜蓄积量会迅速增多且对肝脏造成较大的损伤,粪便中的铜含量随着日粮中铜含量的增加而迅速增多,可能对环境造成不利影响。     

铜孵育对鸡肝脏线粒体呼吸功能的影响

以CuSO4.5H2O为铜源,用含Cu2＋终浓度为0μmol/L（A组）、5μmol/L（B组）、10μmol/L（C组）、15μmol/L（D组）、20μmol/L（E组）和30μmol/L（F组）的孵育介质对从肉鸡肝脏提取的线粒体进行孵育,每个铜浓度下孵育时间为10,25,40min;采用Clark氧电极法对孵育后的线粒体进行呼吸功能测定：呼吸控制率（RCR）、氧化磷酸化效率（OPR）和磷氧比（P/O）。结果显示,随着铜离子浓度的增加和孵育时间的延长,线粒体RCR,P/O和OPR这3项指标均出现不同程度降低;表明铜引起体外孵育的鸡肝脏线粒体功能损伤,且呈明显的时间、剂量效应。     

铜、铁、锌、锰添加量对0～3周龄肉鸡生产性能和免疫器官发育的影响

将960只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分为16组,每组4个重复,每重复15只;采用D-最优设计,以基础日粮含量为最低水平,以2倍NRC(1994)推荐量为最高水平,按16种方案添加铜、铁、锌、锰,研究不同添加水平对0～3周龄肉鸡生产和免疫器官发育的影响,以确定0～3周龄肉鸡日粮铜、铁、锌、锰的适宜添加水平。结果表明:不同铜、铁、锌、锰添加水平对0～3周龄肉鸡日增重、耗料量、料肉比、死淘率及免疫器官发育均无显著影响(P>0.05),说明基础日粮中的铜、铁、锌、锰含量能够满足0～3周龄肉鸡生长和免疫器官发育的需要。     

硼对铜中毒肉用乌骨鸡肝铜含量及肝功能的影响

选用560只1日龄肉用乌骨鸡,采用二因子多水平随机化试验设计研究日粮硼对铜中毒肉鸡肝铜及肝功能的影响。分别在玉米-豆粕型基础日粮中(Cu50.9 mg/kg,B10.1 mg/kg)添加549.1、749.1 mg/kg的铜和49.1、109.1 mg/kg的硼。结果表明,硼可在一定程度上抵御高铜对肝细胞的毒害,并减少肉鸡肝铜的蓄积量,说明硼对肉用乌骨鸡铜中毒具保护效应。     

Melatonin improves cryopreservation of ram sperm by inhibiting mitochondrial permeability transition pore opening

Cryopreservation damages permeability of sperm mitochondrial membranes, with formation of a mitochondrial permeability transition pore (mPTP). Mitochondria are both a primary synthesis site and principle target for melatonin, which can directly inhibit mPTP formation. The objective was to determine effects of melatonin on mPTP opening of frozen-thawed ram sperm and elucidate underlying pathways by antagonist and agonists of melatonin receptors (MTs), and antagonists of PI3K and GSK 3β treatments; furthermore, plasma membrane integrity, mitochondrial membrane potential (ΔΨm), mitochondrial cytochrome c (Cyt c) release and fertilization were analysed to assess the effect of mPTP status mediated by melatonin on quality of frozen-thawed sperm. Fresh ram semen was diluted in glucose-egg yolk buffer with 0 or 10^–7 M melatonin (frozen and frozen + melatonin groups, respectively) and slow-frozen. In frozen-thawed sperm, melatonin added at initiation of 4°C equilibration was most effective for inhibiting mPTP opening, decreasing peptidyl-prolyl-cis/trans isomerase activity of cyclophilin D and increasing plasma membrane integrity, ΔΨm, mitochondrial Cyt c concentration and fertilizing ability (p < .05). In a mechanistic study, the melatonin receptor (MT)1 antagonist eliminated inhibition of melatonin on mPTP opening, whereas MT1 agonist had opposite effects (p < .05). Neither MT2 antagonist nor agonist had significant effect, but PI3K and/or GSK 3β antagonist decreased inhibition of MT1 agonist on mPTP opening (p < .05). In conclusion, melatonin improved sperm cryopreservation, perhaps by acting on MT1 via the PI3K-Akt-GSK 3β pathway to inhibit mPTP opening.     

Effects of dietary supplemental methionine source and betaine replacement on the growth performance and activity of mitochondrial respiratory chain enzymes in normal and heat‐stressed broiler chickens

This study aimed to evaluate the effects of dietary supplemental methionine (Met) source and betaine (Bet) replacement for Met on performance and activity of mitochondrial respiratory chain enzymes (MRCEs) in normal and heat‐stressed broiler chickens. Total of 1,200‐day‐old Ross 308 chicks were allocated to two houses, each consisted of 12 treatments, five replicates of 10 birds each with 2 × 2×3 × 2 (temperature × Met source × Met level × Bet, respectively) split‐plot factorial arrangement. Met level in the basal diets was 70% requirements (Req) that was increased to the requirement or 130% by supplemental dl ‐ or l ‐Met. Bet was or was not substituted at the rate of 30% supplemental dl ‐ or l ‐Met. Feed conversion ratio (FCR) in chicks fed 70% l ‐Met was lower than those fed 70% dl ‐Met diet during 1–10 days (p = 0.04). Broilers fed diets containing requirement or 130% Met, regardless of its source, showed higher weight gain (WG) than those received 70% Met diet during 11–42 days (p < 0.001). Feed intake (FI) of broilers fed 130% Met diet was decreased compared to other two groups during 11–42 days (p < 0.05). One hundred thirty percent Met requirement diet resulted in lower FCR comparing to other two groups during 11–42 days (p < 0.001). Heat‐stressed birds grew less than those under normal condition (p < 0.05). Broilers fed Req Met diet under normal temperature exhibited higher activities of complexes (Cox) I and III (p < 0.05). Cox I activity in heat‐stressed birds fed Bet + diet was similar to those fed Bet‐diet under normal temperature (p = 0.046). It is concluded that performance and the activities of Cox I and III were increased as the level of Met increased. Bet replacement for 30% supplemental Met resulted in similar consequences comparing to non‐Bet replacement diets on performance, but increased the activity of Cox III. l ‐Met was effective than dl ‐Met at the cellular level. High ambient temperature depressed performance and MRCE activity.