吲哚-3-乙酸间接酶联免疫吸附测定法的建立

报道了一种利用兔抗IAA-N-BSA 抗血清和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG 建立的IAA 固相抗原型(或称间接)酶联免疫吸附测定法;该法的线性测定范围在0.8～200ng 之间;本文研究了合成包被抗原的适宜方法;并在植物样品测定冲对该法做了一系列的质量控制试验。     

玉米素核苷间接酶联免疫吸附测定法的建立

报道了一种利用兔抗ZR 抗血清和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG 建立的ZR 固相抗原型(或称间接)酶联免疫吸附测定法;该法的线性测定范围是0.05～12.5ng;本文表明应用生物素抗生物素标记系统能大大改善本法的测定灵敏度.     

麻栎橡子抗氧化及抗糖尿病活性的试验研究

通过在紫外285nm处测定抗氧化活性物质（蛋白质、芳族胺、酚类等化合物）的含量,在450nm处测定类胡萝卜素的含量,采用DPPH法测定不同溶剂橡子提取物的自由基消除能力,测定羟自由基消除活性及橡子提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,研究麻栎橡子抗氧化活性及抗糖尿病活性。结果表明：70%甲醇提取物中的抗氧化活性物质含量最高,而水提取物中最少;70%甲醇提取物和70%乙醇提取物的类胡萝卜素含量较高;70%甲醇提取物的DPPH自由基的消除能力最强;橡子的水提取物对羟自由基的清除作用最强;甲醇提取物的α-葡萄糖苷酶抑制率较高。说明麻栎橡子具有抗氧化活性和抗糖尿病作用。     

酶标兔抗鸡IgG的制备

无菌采健康鸡心脏血 ,辛酸—硫酸铵法提取血清IgG ,SephadexG2 5柱层析 ,SDS -PAGE电泳检测IgG纯度 ,分光光度计测定含量 ,透析袋浓缩。与福氏完全佐剂和不完全佐剂乳化后 ,免疫 4只雄性健康家兔 ,1 0d心脏采血。用同样方法纯化兔IgG。过碘酸钠氧化法标记辣根过氧物酶 ,即得酶标兔抗鸡IgG。     

苎麻纤维中β-葡聚糖酶活力测定条件的比较研究

[目的]为了获得苎麻纤维β-葡聚糖活力测定的最佳条件,比较苎麻纤维和饲料添加剂中β-葡聚糖酶测定方法的异同点。[方法]采用DNS法,对苎麻纤维中β-葡聚糖酶活性的测定条件进行比较研究。[结果]测定苎麻纤维中β-葡聚糖酶活力的最佳条件为:50℃条件下反应30 min后沸水浴10 min。[结论]该方法可以为苎麻纤维中β-葡聚糖酶的酶活力测定提供借鉴。     

大豆β-1,3-葡聚糖酶的抑菌活性

为了明确β-1,3-葡聚糖酶与大豆抗疫霉根腐病的关系,测定了大豆叶片β-1,3-葡聚糖酶的活性和对疫霉菌的抑菌作用,结果表明,在接种大豆疫霉菌后48 h β-1,3-葡聚糖酶活性达到峰值,利用接种48 h提取的β-1,3-葡聚糖酶粗酶液进行抑菌试验,发现β-1,3-葡聚糖酶粗酶液对大豆疫霉菌的菌丝生长和孢子萌发有明显的抑制作用.     

小麦抗感白粉病品种过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶的比较测定

对小麦抗感白粉病品种苗期、成株期叶片过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶进行比较测定。结果表明感病品种苗期过氧化物酶同工酶谱带数多于抗病品种;酯酶同工酶抗感品种无明显差异。成株期过氧化物酶同工酶带数抗感品种无明显差异,但个别酶带有所加强或减弱;感病品种的酯酶同工酶酶带数多于抗病品种。两种同工酶在苗期和成株期测定的酶谱类型均不一致。     

不同抗性小麦品种受叶锈菌侵染前后防卫酶活性变化研究

对小麦叶锈菌侵染前后2个不同抗性小麦品种叶片中的POD、PPO、PAL、β-1,3-葡聚糖酶4种防卫酶的活性变化进行了研究。结果表明:在接种前,抗病品种的POD和PPO活性均高于感病品种,而抗、感品种间PAL和β-1,3-葡聚糖酶的活性差异不大;接种叶锈菌后抗病品种和感病品种小麦叶片中的4种防御酶活性均高于未接种处理,并且抗病品种接种后PPO活性变化幅度明显高于感病品种;抗病、感病的小麦接种叶锈菌处理与未接种处理的POD、PPO、PAL、β-1,3-葡聚糖酶4种防卫酶的活性均升高,POD、PPO、PAL 3种酶活性在接种后3 d达到峰值,β-1,3-葡聚糖酶在接种后4 d达到峰值;相对于其他防御酶,PAL在测定期内活性变化程度不高,表现平稳。     

枯草芽孢杆菌W-QX-1碱性蛋白酶的性质及其抗烟草花叶病毒活性初步研究

为发现新的天然源抗植物病毒活性物质,从枯草芽孢杆菌W-QX-1的发酵液中粗提了碱性蛋白酶,并初步测定了其抗TMV活性及其酶学性质。结果表明,W-QX-1碱性蛋白酶作用最适温度为50℃;在硼酸-硼砂缓冲液中的作用最适pH为7.8;在Tris-HCl缓冲液中的作用最适pH为8.0;在pH6~10范围内,45℃以下酶的性质稳定;对干酪素、明胶、牛血清白蛋白和精炼丝素均具有一定的降解能力,其中对干酪素的降解力最强。采用半叶法测定了其抗烟草花叶病毒TMV的活性,发现该酶对TMV的体外钝化作用明显,在酶液浓度为50 mg/L时,其钝化效果即可达到53.40%;而该酶对TMV的初侵染和体内复制增殖也具有一定的抑制能力。试验结果表明,在TMV侵染前24 h施用浓度为200 mg/L碱性蛋白酶液抑制其侵染力的效果达到50.35%,而在TMV侵染后抑制其复制增殖的作用并不明显。可见,该酶是一种性质稳定的广谱性蛋白水解酶,并具有一定的抗TMV活性。     

四种酶与春小麦抗蚜性的相关性研究

采用田间用蚜量比值法划分了抗感性不同的15个小麦品系,用紫外分光光度计测定了各品种(系)旗叶中过氧化氢酶、过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶、几丁质酶的活性.结果表明,苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、几丁质酶活性与春小麦蚜量比值显著相关,其相关系数分别为r=-0.842 0、r=-0.798 0、r=-0.795 5.抗蚜的春小麦品系在蚜虫取食后苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、几丁质酶活性急剧上升,感蚜春小麦虽然酶活性有上升,但较为缓慢;而过氧化氢酶活性与春小麦蚜量比值相关性不显著,其相关系数为r=-0.219 6,在抗感性春小麦中无明显的差异.     

New applications of microbial products

Microbial secondary metabolites are now being used for applications other than as antibacterial, antifungal, and antitumor agents. These applications include use against parasites (coccidia, helminths) and insects as well as for animal and plant growth stimulation, immunosuppression, uterocontraction, and other pharmacological activities. Further applications are possible in various areas of pharmacology and agriculture, a development catalyzed by the use of simple enzyme assays for screening prior to testing in intact animals or in the field.     

Production and Identification of High Affinity Monoclonal Antibodies Against Pesticide Carbofuran

To produce high-affinity monoclonal antibodies against pesticide carbofuran, and the develop immunochemical assays for people＇s health and environmental protection, the hapten 4-[[（2,3-dihydro-2,2-dimethyl-7-benzofuranyloxy） carbonyl]- amino]-butanoic acid （BFNB） of carbofuran was synthesized and Balb/c mice were immunized by the hapten-carrier （BFNB-bovine serum albumin, BFNB-BSA） conjugates. The splenocytes of immunized mice were fused with Sp2/0 cells and the cultural supernatants of hybridoma cells were screened by the indirect enzyme-linked immunoabsorbent assay （ELISA）, based on BFNB-ovoalbumin conjugates （BFNB-OVA）. Purified monoclonal antibody （McAb） was obtained from fluids of ascites, deposited by octanoic acid and ammonium sulfate. The affinity and the specificity of McAb were characterized by ELISA or indirect competitive ELISA. A hybridoma cell line （5D3） secreting anti-carbofuran McAb had been established. The titer of culture medium and ascites was up to 1：2.048 × 10^3 and 1：1.024 × 10^6, respectively, and the subtype of the McAb was IgG1. The affinity constant of the McAb was about 2.54 × 10×9 L mol^-1, with an IC50 value of 1.18 ng mL^-1 and a detection limit of 0.01 ng mL^-1. Cross-reactivity studies showed that the McAb was quiet specific for carbofuran, as among the four analogous compounds, they were all hardly recognized （4.59 × 10^-4% for 2,3-dihydro-2,2- dimethyl-7-benzofuranol and less than 3.0 × 10^4% for others）. The prepared McAb had a very high affinity and specificity, and it could be used to develop ELISA for rapid determination of carbofuran.     

芒果皮渣多糖的超声波辅助提取及其抗氧化活性研究

为研究芒果皮渣中多糖的提取工艺及其抗氧化活性,在单因素试验的基础上,通过正交试验优化芒果皮渣多糖的提取工艺参数,同时利用清除DPPH·法、·OH法和O2-·法评价其体外抗氧化活性。结果表明,超声波辅助提取芒果皮渣多糖的最佳工艺条件为提取温度80℃、超声功率160 W、提取时间90 min、料液比1∶2 g/m L、提取次数2次,在此条件下多糖提取率可达0.81%。体外抗氧化试验表明,芒果皮渣多糖对DPPH·、·OH和O2-·均有一定的清除能力,随着质量浓度的增加,清除能力逐渐增强。当浓度为1.0 mg/m L时,他们的清除率分别达到93.1%、94.5%和8.89%。本研究建立了新鲜芒果皮渣多糖的提取工艺,并评价了其体外抗氧化活性,可为芒果资源的充分利用、研究开发等提供理论依据。     

Prediction of chemical carcinogenicity in rodents from in vitro genetic toxicity assays

Four widely used in vitro assays for genetic toxicity were evaluated for their ability to predict the carcinogenicity of selected chemicals in rodents. These assays were mutagenesis in Salmonella and mouse lymphoma cells and chromosome aberrations and sister chromatid exchanges in Chinese hamster ovary cells. Seventy-three chemicals recently tested in 2-year carcinogenicity studies conducted by the National Cancer Institute and the National Toxicology Program were used in this evaluation. Test results from the four in vitro assays did not show significant differences in individual concordance with the rodent carcinogenicity results; the concordance of each assay was approximately 60 percent. Within the limits of this study there was no evidence of complementarity among the four assays, and no battery of tests constructed from these assays improved substantially on the overall performance of the Salmonella assay. The in vitro assays which represented a range of three cell types and four end points did show substantial agreement among themselves, indicating that chemicals positive in one in vitro assay tended to be positive in the other in vitro assays.     

克仑特罗CLEIA试剂盒与ELISA试剂盒的比较分析

用研发的克仑特罗化学发光酶联免疫（CLEIA）试剂盒与克仑特罗酶联免疫（ELISA）试剂盒进行检测效果比对,结果显示,CLEIA试剂盒检测时间为33 min,而ELISA试剂盒则需要50 min,CLEIA试剂盒方法要比ELISA试剂盒方法更节省时间;CLEIA试剂盒IC50为400 ng·L-1,对猪尿和猪肉的最低检测限分别为201 ng·L-1和907 ng·kg-1,而ELISA试剂盒IC50则为1252 ng·L-1,对猪尿和猪肉的最低检测限分别为235 ng·L-1和993 ng·kg-1,CLEIA试剂盒方法的灵敏度要高于ELISA试剂盒方法的灵敏度。综合分析得知：CLEIA法比ELISA法灵敏度更高、反应时间更短。     

微波消解-微分电位溶出法同时测定蔬菜中铅、镉

采用微波消解-微分电位溶出法对蔬菜中铅、镉同时进行测定。结果：铅、镉同时测定的线性范围分别为0～32、0～16 ng,回收率为93.2%～105.4%,相对标准偏差为2.3%～3.6%。该法操作快速、简便,结果准确、可靠。     

幼龄绵羊血清中T_3含量的季节和昼夜动态变化

幼龄绵羊血清中T_3含量的RIA测定表明,年平均含量1.246±0.49ng/ml。冬季昼夜平均含量最高为1.748±0.13ng/ml,极明显地高于其它三个季度。春季昼夜平均值1.567±0.20ng/ml,也极明显地高于秋、夏季。秋、夏季的昼夜平均值较接近,为0.851±0.06ng/ml和0.816±0.07ng/ml,并无明显差异,但昼夜升降变化,恰好相反。年平均值的昼夜变化及春季含量的昼夜变化,仅见最高值显著高于最低值。其余季度的昼夜含量变化,无明显差异。     

绵羊卵泡颗粒细胞体外培养条件的优化

为了探讨绵羊卵巢卵泡颗粒细胞体外培养时FSH(Invitrogen)与胰岛素的最佳质量浓度,试验在无血清条件下培养绵羊卵泡颗粒细胞,并向其中加入不同质量浓度的FSH与胰岛素,体外培养7 d后测定细胞数目以及培养液内雌二醇浓度。结果表明,当培养液内FSH质量浓度为25 ng/mL、胰岛素质量浓度为100ng/mL时,颗粒细胞的数目最多;当FSH质量浓度为1 ng/mL、胰岛素质量浓度为10 ng/mL时,培养液内雌激素质量浓度最高。     

贵州草海沉积物-水界面无机汞和甲基汞的扩散通量

以贵州省草海湖泊沉积物孔隙水为研究对象,实测其溶解态甲基汞和溶解态无机汞的质量浓度,并根据质量浓度梯度和菲克第一定律,初步估算了沉积物-水界面溶解态无机汞和甲基汞的扩散通量.结果表明:不同季节沉积物孔隙水中无机汞、甲基汞与上覆水体中的无机汞、甲基汞之间均存在质量浓度梯度,其溶解态无机汞的质量浓度梯度在枯水期和丰水期分别为8.6 ng/L和25.1 ng/L;溶解态甲基汞的质量浓度梯度分别为0.46 ng/L和2.7 ng/L.在枯水期和丰水期沉积物孔隙水中无机汞的释放通量分别为31.4 ng/(m2.d)和52.8 ng/(m2.d);甲基汞的释放通量分别为1.7 ng/(m2.d)和3.9 ng/(m2.d).沉积物-水界面无机汞和甲基汞的扩散通量远低于同背景区的阿哈湖、红枫湖,并存在明显的季节性变化,其变化与孔隙水中汞的质量浓度的季节性变化一致,均为在丰水期的扩散通量大于在枯水期.