诱变选育木聚糖酶高产菌株及其发酵条件的研究

以黑曲霉(Aspergillus niger)XE6为出发菌株,经微波(MW)和硫酸二乙酯(DES)诱变处理,选育出一株遗传性状稳定的高产木聚糖酶菌株mAn1。利用单因素轮换法和正交试验法对菌株mAn1固态发酵产酶工艺进行了研究。结果表明:最适产酶条件为麸皮与玉米芯的添加比例6:4,硝酸铵2g,培养基起始pH值为4.5,固液比为1:1.8,500ml三角瓶中装培养基50g,30℃培养72h,在此条件下所产木聚糖酶的酶活为81151U/g,比出发菌株的酶活提高了34.88%。     

蜂蜜酒发酵参数控制研究

通过对蜂蜜酒发酵参数的控制研究,确定最佳的发酵参数指标并进行优化组合,最终获得品质优良的蜂蜜酒产品,为工业化控制提供理论依据。     

蜂蜜花粉酒发酵工艺的研究

酶解破壁后的莲花蜂花粉液,绢布过滤和离心处理分别得到的花粉浆、浊液和清汁,用蜂蜜调节糖浓度,用葡萄酒酵母、耐高温酿酒高活性干酵母、专用酿酒高活性干酵母和实验室筛选的酵母4种菌种发酵性能比较,通过单因素试验和正交试验确定蜂蜜花粉酒的最佳酿制工艺。结果表明:花粉浊液最适合用于蜂蜜花粉酒的酿造,葡萄酒酵母为蜂蜜花粉酒发酵的最适菌种,并确定其最佳接种量为1‰。主发酵的最佳条件为:初始糖度26%,SO2添加量100 mg/L,花粉浓度20 g/L,发酵温度25℃。     

蜂蜜酒发酵工艺的研究与展望

蜂蜜的主要成分是葡萄糖和果糖,还含有丰富的酶类、有机酸、维生素、激素、蛋白质等高级营养成分。以蜂蜜为原料发酵制成的蜂蜜酒蜜香纯正,风味柔和,营养丰富。从广义上,蜂蜜酒是以蜂蜜为原料生产的一切含酒精的饮料;从狭义上,蜂蜜酒是以蜂蜜作为原料,经过稀释、调整、发酵、澄清、过滤、陈酿后所获得的酒精饮料。蜂蜜酒的分类基本上可分为8种:按生产方式分类、按酒精度分类、按含糖量分类、按原料的使分类、按所使用的酿酒酵母分类、按色度分类、按是否含有二氧化碳的分类、按是否添加香料分类。蜂蜜酒的酿造方法各不相同,但是大同小异。综述了国内有关蜂蜜酒的分类法以及蜂蜜酒的研究进展。     

紫外线诱变选育桑椹酒发酵用酵母菌

对普通酿酒酵母进行紫外线诱变,以三苯基四氮唑（TTC）为指示剂的培养基平板筛选,结合桑椹酒的生产工艺特点,筛选得到1株桑椹酒发酵酵母;实验结果显示该酵母的起酵速度快、发酵液酒精度可达11．6％且幽香,综合发酵性能表明该酵母适合用于桑椹酒发酵。     

亚硝基胍诱变选育丁二酮高产菌株

以乳酸乳球菌乳酸亚种丁二酮变种为出发菌株，采用亚硝基胍进行诱变选育，得到高产丁二酮菌株，用邻苯二胺比色法检测突变株丁二酮，其产量达到0．72mg／L，比出发菌株产量0．056mg/L提高12．9倍，且遗传性质稳定。     

蜂蜜酒发酵工艺的研究与展望

<正>蜂蜜的主要成分是葡萄糖和果糖,还含有丰富的酶类、有机酸、维生素、激素、蛋白质等高级营养成分,具有很高的营养价值和保健作用[1]。常饮蜜酒对失眠、易忘、精神不振和性功能衰退等有疗效;对胃肠道慢性疾患有明显好转;对慢性支气管炎和哮喘等疾病亦有良好作用;特别是能使皮肤红润,抗衰老和增强抵抗力[2]。虽然蜂蜜营养丰富,但其含水量高,易发酵变质,影响贮存和消费。因此,如何通过加工防止蜂蜜发酵,对提高产品质量,方便消费者都有十分重要的意义。本文就蜂蜜酒的分类以及蜂蜜酿造、研究进展作一综述。     

纤维素酶菌株选育的研究进展

自1906年Selliere在蜗牛的消化液中发现了纤维素酶以来,纤维素酶在细菌、真菌等微生物中相继被分离到,纤维素酶的性质和组分都比较清楚了。但是,纤维素酶的产量还远远满足不了日益增大的市场需求。诱变育种使大部分菌株产量有较大提高,现代分子生物学技术应用于菌株的遗传改造和提高酶活带来了新的希望,使纤维素酶及其产生菌成了动物分子营养学研究的热点〔3~19,28~31,40~41〕。1纤维素酶的分类来自于微生物的纤维素酶(Cellulase)是多酶组分,按结构和功能可分为Cx酶、C1酶、β-葡萄糖苷酶〔13,26〕。1.1Cx酶,又称葡聚糖内切酶、内切型纤维…     

链霉素抗性突变选育那西肽高产菌株

通过对那西肽产生菌N106的孢子进行紫外诱变处理(15 W,253.7 nm,距离30 cm),再利用链霉素抗性突变作为筛选模型(链霉素最低抑制浓度为3 u/mL)获得了链霉素抗性基因突变的高产菌株NUS146和NUS182,摇瓶发酵水平分别达到3233和3452 u/mL,比出发菌株N106的摇瓶水平2502 u/mL分别提高了29.22％和37.97％.传代试验表明,该两突变株遗传特性相对稳定.     

降解木质纤维素的优良菌株C-3的诱变选育

以降解木质纤维素的优良菌株Ｃ－３为出发菌株,经两次诱变和反复筛选,获得了使原料粗蛋白显著提高的突变株ＵＥ－２６。     

酸乳中乳酸菌的筛选及乳酸发酵研究

从酸乳中分离出乳酸球菌和乳酸杆菌,通过对它们发酵特性测试,筛选出菌种进行乳酸发酵,根据正交试验得出最佳生产工艺：发酵温度40 ℃,还原添加量90%,白砂糖添加量5%,球杆菌比例1：1.     

螺旋霉素高产菌株的选育

以螺旋霉素链霉菌(Streptomyces spiramyceticus)SPM-14078菌株作为出发菌株,利用常压室温等离子体(ARTP)诱变、紫外线(UV)诱变和亚硝基胍(NTG)诱变的方法对菌株进行诱变处理,比较3种方法的诱变效果,通过诱变筛选出1株遗传稳定性好且具有Co~(2+)和豆油耐受性、噬菌体抗性的菌株SPMAR-1603,其发酵效价比出发菌株提高了294.9%,此结果对螺旋霉素高效生产、品质提升具有重要意义。     

紫外诱变选育黄霉素高产菌

采用紫外线诱变方法对黄霉素产生菌进行诱变处理,利用菌株抗自身代谢物的特征,在添加高浓度黄霉素的分离培养基上选育获得比出发菌株高的突变株sg2-U-5,效价比原始菌株提高了5.4倍。而且突变株的菌落形态与亲本菌株差异较大。     

Study on Formula Screening and Mixing Technology of Microbial Solid-state Fermentation Feed for Mutton Sheep

The experiment was designed to develop a microorganism fermentation feed for mutton sheep,and determined its solid-state mixing technology.In this experiment,the wheat bran,rice bran and jujube fruit residues were chosen as the solid-state fermentation media,and combined the Saccharomyces cerevisiae strains BC,XR4 and Bacillus subtilis strain A15 as the fermentation strains.The DPS software was applied to design the uniform mixture experiment,and 8 formulas were selected for solid-state fermentation experiments,and evaluated the optimal formula by measuring the number of live bacterium and three kinds of nutritional active substances (β-glucan,mannan and peptide).Meanwhile,we studied the mixing technology on the selected formula,and the control group was without turned mixing,the experimental group 1 was turned mixing once and the experimental group 2 was turned mixing twice.The optimal mixing technology was determined by monitoring the feed temperature,the number of live bacterium and the content of three kinds of nutritional active substances (β-glucan,mannan and peptides) during the solid-state fermentation.The results showed that the number of live bacterium of 8 formulas all increased first and then decreased rapidly.Three kinds of nutritional active substances were significantly increased with the extension of fermentation (P<0.05).The formula 7 had the optimal comprehensive index,of which the living bacterium number reached 37.30×10⁵ CFU/g and the contents of three nutrient active substances were 97.41 mg/100 mg,37.66 mg/100 mg and 20.17 μg/100 mg.In the mixing technology experiment,the number of live bacterium and nutritional active substances of the experimental groups were significantly higher than the control group (P<0.05).Comparing with the control group,the number of live bacterium and the content of nutritional active substances in experimental group 2 increased by 10.1%,7.5%,7.6%,3.0%,respectively.     

肉羊微生物固态发酵饲料组方筛选及翻料工艺的研究

本试验旨在研制一种肉羊微生物发酵饲料,并确定其固态翻料工艺。以酿酒酵母菌BC、XR4与枯草芽孢杆菌A15为协同发酵菌株;选取麦麸、米糠、枣渣等为发酵饲料原辅料,采用DPS软件对原料进行均匀混料试验设计,选取8个组方进行固态发酵试验,通过测定发酵料中的活菌数,β-葡聚糖、甘露聚糖、多肽等营养活性物质的含量来筛选最优的组方。同时,对筛选出的组方进行翻料工艺的研究,其中,对照组不翻料,试验1组翻料1次,试验2组翻料2次,通过测定发酵过程中的料温变化、发酵料活菌数及3种营养活性物质的含量来确定翻料工艺参数。结果显示,8个试验组中的活菌数均呈现先上升然后快速下降的趋势,3种营养活性物质含量随着发酵时间的延长而显著升高（P<0.05）,其中组方7的综合指标最优,其活菌数最高达到了37.30×10⁵ CFU/g,β-葡聚糖、甘露聚糖、多肽含量分别为97.41 mg/100 mg、37.66 mg/100 mg、20.17 μg/100 mg;翻料工艺试验中,发酵结束时2个试验组的活菌数和3种营养活性物质均显著高于对照组（P<0.05）,试验2组显著高于试验1组（P<0.05）,试验2组的活菌数最高值、β-葡聚糖、甘露聚糖、多肽含量分别比对照组提高10.1%、7.5%、7.6%、3.0%。     

1株解淀粉芽孢杆菌B7快速液态发酵优化工艺研究

本试验以1株饲用益生菌解淀粉芽孢杆菌B7（Bacillus amyloliquefaciens B7，B.amyloliquefaciens B7）为研究对象，为了增强其在液态条件下的发酵水平，提高其芽孢发酵工艺优化效率，拟采用测定芽孢吡啶二羧酸（dipicolonic acid，DPA）浓度的方法来代替传统的平板芽孢计数法，以探讨此测定方法在芽孢发酵优化工艺中的可行性。首先，通过单因素试验筛选出对菌株产孢有显著促进作用的因子，进一步通过正交优化试验确定蛋白胨、玉米粉、大米蛋白粉和Mn²⁺组合的最优水平。结果表明，发酵液中的芽孢浓度与测定的DPA荧光强度呈线性相关，在蛋白胨20 g/L、玉米粉10 g/L、大米蛋白粉20 g/L、Mn²⁺1.0 mmol/L时发酵48 h，检测到DPA荧光强度达到最大，其相应的芽孢浓度达到7.0×10⁹ CFU/mL。与实验室常用的LB培养基相比，芽孢浓度提高了3.3倍；与工业生产用培养基相比，芽孢浓度提高了2.2倍。本研究为芽孢杆菌发酵过程中芽孢浓度测定提供了一种快速方法，为工业菌株B.amyloliquefaciens B7的发酵提供了一种成分简单且高产芽孢的培养基。     

黄芪发酵散剂稳定性的研究

为黄芪发酵散剂的储存条件及有效期的制订提供参考。依据发酵黄芪制剂的性状、粒度、外观均匀度检查、黄芪发酵散剂活菌数、黄芪甲苷含量为检测指标评价不同条件对药剂的影响程度，通过影响因素试验，高温试验，高湿度试验，强光照射试验等方法探究影响该制剂的因素，运用加速试验、长期试验为制订药物有效期做初步预定。经稳定性影响因素试验，发现黄芪散剂易受温度、湿度、光照等条件的影响，且以湿度和温度影响较大，考察项中以粒度、黄芪甲苷含量及活菌数变化明显，粒度易受到湿度的影响，黄芪甲苷及活菌数可受三种因素的影响，为了减少温度、湿度、光线因素对该药剂稳定性的影响，选用铝箔+PE复合包装袋密闭包装为市售包装，并对其进行了加速试验及长期试验，经包装处理后的黄芪发酵散剂稳定性显著提高，粒度均合格，黄芪甲苷含量、活菌数有所下降，但均高于最低限度值。湿度、温度、光线三种因素对黄芪甲苷含量及活菌数均影响较大，在工业生产中应选择隔湿包装，在包装过程中也应控制环境湿度、温度，建议可将黄芪发酵散剂的有效期暂定为2年，使用铝箔+PE复合包装袋密闭包装，室温保存。     

反式-4-羟基-L-脯氨酸发酵菌株的筛选

为选育出反式-4-羟基-L-脯氨酸发酵生产的优良菌株，以8株产反式-4-羟基-L-脯氨酸的大肠杆菌（Escherichia coli）为出发菌株，对其生长特性、发酵效率进行了比较分析，筛选出2株遗传稳定性好、生产效率高的菌株Hyp-Y1801、Hyp-Y1808，其发酵效价分别为50.4 g/L、47.5g/L，对实现反式-4-羟基-L-脯氨酸的工业化生产具有重要意义。     

不同温度条件下发酵时间对完全混合发酵日粮(TMF)发酵品质的影响

本试验旨在研究不同温度条件下，发酵时间对完全混合发酵日粮（total mixed fermentation ration，TMF）发酵品质的影响。将0.5% CT-10（同型发酵乳酸杆菌）、5%糖蜜和TMR装入发酵袋内并于5、15和25℃条件下密封发酵，在发酵5、10、15、20和30 d时开袋取样测定其发酵品质。结果显示：5℃时，随着发酵时间的延长，各组间中性洗涤纤维（NDF）和粗灰分（Ash）无显著差异（P > 0.05），而干物质（DM）、粗蛋白质（CP）、粗脂肪（EE）和酸性洗涤纤维（ADF）含量均随时间的增加而显著降低（P < 0.05）；15℃时，各组间NDF含量无显著差异（P > 0.05），而其他指标含量均呈现下降趋势；25℃时，各组间EE、Ash、NDF和ADF无显著差异（P > 0.05），而CP随着发酵时间的增加显著降低（P < 0.05）。不同的发酵时间对TMF有机酸含量影响显著（P < 0.05），在5和15℃时，发酵30 d天时pH分别降至4.23和4.36，达到发酵过程中的最低点；各个发酵温度条件下，氨态氮（NH₃-N）含量变化趋势一致，前15 d持续增加，之后又呈现先缓慢降低再增加的趋势；25℃时，发酵20 d，pH降至4.57，乳酸含量和TVFAs含量分别达到最高。综合以上结果和V-Score评分最终得出：5℃时，发酵20 d效果较好，15℃时，发酵15、20 d效果较好；25℃时，发酵5 d效果较好，饲料等级均为优。     

兰花炭疽病颉颃细菌Z-62的发酵条件优化

通过单因素试验和正交试验确定了兰花炭疽病颉颃细茵的最佳发酵条件为:葡萄糖3%、大豆蛋白胨3%、FeSO4·7H2O 0.05%、KCl 0.05%、种龄20 h、培养基初始pH值为6.0、250 mL三角瓶装液量30 mL、接种量4%、发酵时间60 h.在该条件下培养得到的发酵液抑菌圈直径可达26,28min,抑菌活性提高了29.4%.