利用基因检测技术鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜

浙江大学胡福良教授团队采用基因检测技术成功地建立了准确鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法。论文“Authentication of Apis ceranaHoney and Apis mellifera Honey Based on Major Royal Jelly Protein 2 Gene”于2019年1月14日在线发表在国际学术期刊《Molecules》上。中蜂蜂蜜也称“土蜂蜜”,其营养和保健功效深受消费者信赖,然而因产量较低,其市场价格是普通意蜂蜂蜜的好几倍。受利益驱使,一些不法商贩用意蜂蜂蜜冒充或掺入中蜂蜂蜜中以赚取高额利润,给中蜂养殖者以及相关蜂产品企业造成了严重损失,同时引发了消费者的信任危机。因此,如何鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜是当前蜂产品行业亟待解决的一大问题。     

意蜂蜂蜜和中蜂蜂蜜的区别

我国现在饲养的蜜蜂主要有两大种群:一种是中华蜜蜂(简称中蜂、土蜂),另一种是引进的意大利蜜蜂(简称意蜂、西蜂)。中蜂是我国土生土长的蜜蜂,已经在中华大地上繁衍生活了近千年,多为黑色,个体较意蜂小,我们所说的土蜂蜜就是中蜂产的。笔者到云南省西双版纳搞蜜蜂育种,当地老百姓经常会问中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜有什么区别,现将我所知的和大家分享。     

鉴别蜂蜜真实属性实时荧光PCR法的建立

通过建立能够鉴别完全掺假蜂蜜的实时荧光PCR检测方法,为打击掺假蜂蜜的不良市场风气提供技术储备。筛选显花基因NADH、油菜基因和龙眼基因的引物探针;通过验证这三对引物探针的特异性、灵敏度来确定其可行性;提取蜂蜜的DNA进行这三组实时荧光PCR法的测试,同时采用传统蜂蜜感官检测法辨别真假蜂蜜,比较两者方法。结果显示三组引物探针的特异性强,灵敏度分别为0.0001ng/μL、0.01 ng/μL和0.1 ng/μL;蜂蜜的DNA浓度与花粉粒数目呈正相关;NADH基因对15份蜂蜜样品的检测结果与传统检测法结果一致,一份样品镜检未见到花粉粒,其实时荧光PCR结果为阴性,掺假率达6.67%;6份油菜蜂蜜均检出油菜源性成分;6份龙眼蜂蜜中只有有3份检出龙眼源性成分。结论认为相对传统方法,该方法安全性好、操作简单、灵敏度高、结果直观,能够鉴别完全掺假蜂蜜,为蜂蜜掺假检测提供技术支持。     

中蜂和意蜂（西蜂）不能杂交

中蜂和意蜂（西蜂）不能杂交（编者按）中蜂和意蜂虽然都是蜜蜂，但分属于两个不同蜂种。中蜂属于东方蜜蜂种；而意蜂（还有喀蜂、黑蜂、高加索蜂及中近东的一些蜜蜂）属于西方蜜蜂种，它们之间就好比水牛和黄牛一样，是不能杂交的。近来，由于某专业杂志刊登了用介入意蜂...     

"材迳经验"和中蜂蜂蜜高产稳产略谈

山区定地饲养的中蜂,主要产品是蜂蜜,怎样夺取蜂蜜的高产稳产,这是养蜂者所共同关注的问题.     

实时荧光定量PCR技术

荧光定量PCR技术是一种目前国内外应用较为广泛的定量PCR技术,是通过始点定量和荧光检测系统实时监测累积荧光强度而实现的,具有灵敏度高、特异性强、线性关系好、操作简单等优点,不但能够用于基因定量检测,还能准确定量疾病相关基因的表达,现已广泛应用于人类和动物疾病的快速检测、定量分析、早期诊断、基因分型等方面。它可以采用绝对定量和相对定量2种方式实现定量检测,但都有各自的优缺点,需根据具体的试验选择合适的定量方式,从而得到更准确的试验结果。提高荧光定量PCR技术的特异性和灵敏度需从多方面着手,主要指特异性探针及引物的设计,选择合适的Mg2 浓度、引物和探针浓度、循环数等。     

十多年防治意蜂盗抢中蜂的经验

意蜂盗中蜂,来势凶猛,盗取蜂蜜、扰乱蜂场正常秩序、影响生产、降低养蜂效益,严重者可导致全场蜂群覆没.     

中,意蜂蜂王浆氨基酸含量比较测定

中、意蜂蜂王浆氨基酸含量比较测定陈华生罗岳雄张学峰（广东省昆虫研究所）由于中蜂只能以生产蜂蜜为主,而意蜂既能生产蜂蜜,又能大量生产蜂王浆,两者相比,经济效益相差较大。能否利用中蜂生产蜂王浆？中、意蜂生产的蜂王浆有什么差别？我们曾进行了探讨。下面就本所...     

实时荧光定量PCR技术研究进展及应用

实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术.它利用荧光实时检测PCR反应,具有灵敏度高、特异性强、节约时间等优点.文章就常用的4种方法,即DNA结合染色、水解探针、分子信标和杂交探针的原理和特点进行介绍,同时综述了荧光定量PCR技术在实践中的应用.     

中华蜜蜂和意大利蜜蜂受精卵呼吸代谢的研究

本试验用华勃式微量呼吸检压仪连续测定了中华蜜蜂和意大利蜜蜂受精卵不同发育时间的耗氧量。结果显示:中、意蜂卵平均耗氧量的曲线趋势大致相同,都是随着卵的生长发育而增加,但中蜂平均蜂耗氧量明显高于意蜂;在26h和44h两个时间点,中、意蜂平均耗氧量出现突然下跌形成两个谷点。26h时的谷点可能是试验蜂卵"分化中心"作用结束的时间点,也就是在这时完成了胚胎的早期发育;而44h时谷点可能是胚芽已基本形成并准备进入成长的时间点。从而证明了中、意蜂卵期的呼吸代谢是受内在生理发育因素的调控。     

中蜂和意蜂三型蜂上颚腺蛋白的比较研究

上颚腺是蜜蜂重要的外分泌腺,其分泌物在蜂群生活中有重要调控作用.为研究中蜂、意蜂三型蜂上颚腺蛋白的异同,对中蜂、意蜂的外勤工蜂、初出房蜂王、巢内雄蜂的上颚腺蛋白进行定量和SDS-PAGE.结果表明:每个腺体中,蜂王的蛋白含量最高,工蜂次之,雄蜂最少,三者差异明显;两蜂种三型蜂的上颚腺蛋白相同的较多,但也有明显差异.意蜂王的76 kD蛋白和中蜂王的74 k蛋白;意蜂工蜂的54 kD蛋白和中蜂工蜂的36 kD蛋白;意蜂雄蜂的27 kD蛋白和中蜂雄蜂的48 kD蛋白;均为相同级型之间的差异蛋白,它们可能与生理功能差异相关.     

意大利蜜蜂和中华蜜蜂在温室内传粉行为的比较

对中蜂和意蜂为日光温室草莓授粉时的行为和活动方式进行了比较研究.结果表明:中蜂和意蜂都能较好地适应温室内环境,代替人工或激素为温室草莓完成有效的传粉任务.中蜂和意蜂为温室草莓授粉的传粉行为相似但具体活动方式不同,中蜂的日活动时间和采集高峰时间比意蜂的长,访花持续时间比意蜂的长,而访花间隔时间却比意蜂的短,表明中蜂在为温室草莓授粉时的有效工作时间更长,授粉效率更高.据此得出中蜂为日光温室草莓授粉的活动特性优越于意蜂,从而产生更高的授粉效益.     

中蜂与意蜂合群饲养及其工蜂监督

本实验以中华蜜蜂和意大利蜜蜂为实验材料,通过特殊的方法对中华蜜蜂与意大利蜜蜂进行合群饲养,并对中意合群蜂中工蜂监督等行为特性进行了初步研究。结果表明:中华蜜蜂和意大利蜜蜂可以同群饲养,并且可以培育出中意合群蜂和意中合群蜂两种特殊的蜂群;中意合群蜂中工蜂在24h内会清除将近一半的外源意蜂受精卵,但保留了将近90%的中意合群蜂受精卵,差异显著;中意合群蜂中工蜂对外源中蜂受精卵辨认效果差异不显著,对外源意蜂雌性幼虫的辨认效果差异也不显著。     

东方蜜蜂蜂王对西方蜜蜂工蜂卵巢发育的抑制作用研究

蜜蜂是典型的二态型社会性昆虫,蜂王和工蜂有不同的分工,在正常情况下工蜂的卵巢几乎不发育,因此工蜂也几乎不会产卵,蜂王分泌的蜂王信息素是其最重要的抑制因素。本实验将西方蜜蜂幼蜂介绍到东方蜜蜂蜂群内,定期检查其卵巢发育的情况,结果显示:西方蜜蜂工蜂的卵巢发育与正常蜂群内的工蜂没有显著差异,与失王群内的工蜂的卵巢发育有显著差异,表明东方蜜蜂蜂王对西方蜜蜂工蜂的卵巢发育有抑制作用。     

2019年江西省中蜂蜂蜜品质调查及分析

为全面调查和了解江西省中蜂蜂蜜品质情况,以"2019年全省中蜂蜂蜜品质评审"大赛为契机,采集全省中蜂蜜样品;参照蜂蜜团体标准(T/CBPA 0001-2015蜂蜜)进行初审评分,评选出50～60个中蜂蜜样品;依据GB 14963-2011,送检专业检测机构,进行中蜂蜜品质分析。结果显示,全省中蜂蜜样品整体品质良好,66.67%的中蜂蜜样品浓度在40～42波美度范围内;因中蜂蜜品种因素,其中90%以上的山乌桕蜜样品的淀粉酶值偏低,需要后续研究分析原因;其它指标均符合标准要求。     

中蜂生产野桂花蜂蜜优质高产技术研究

野桂花是一种特色蜜源,其蜂蜜色、味俱佳,被称为"蜜中之王"。但采野桂花蜂蜜的蜂群产量不高、质量不稳定。根据中蜂生物学特性,改良设计了一种中蜂蜂箱,同时开展蜂群采野桂花蜂蜜优质高产饲养技术的研究工作。结果表明:实验组蜂群繁殖速度、野桂花蜂蜜产量都显著高于对照组,但2组生产的野桂花蜂蜜浓度差异不显著。     

中蜂与意蜂营养杂交对意蜂微卫星遗传多态性的影响

通过人工添加中华蜜蜂王浆技术来培育江山2号与法国意蜂的杂交蜂王,并测定江山2号、法国意蜂、中华蜜蜂、营养杂交子1代和子4代工蜂的微卫星遗传多态性。结果表明,经过营养杂交,亲本蜜蜂与营养杂交子代的遗传距离发生明显的变化,中华蜜蜂和意大利蜜蜂的特有DNA条带发生了转移。说明通过蜂种之间的营养杂交可以改变其微卫星多态性。     

中华蜜蜂与意大利蜜蜂访花行为特点与区别

蜜蜂作为重要的经济昆虫与传粉昆虫,在维持自然界生态平衡、促进农业生产与提供优良蜂产品等方面具有重要意义。概述了中华蜜蜂与意大利蜜蜂的访花行为特点,并对中华蜜蜂与意大利蜜蜂在访花时间、访花范围、访花携粉能力、访花种类、访花目的和访花频率等方面的差别进行了系统综述,可为研究提高农作物与自然界植物授粉率和蜂产品生产提供理论依据。     

中、意蜂Atg12基因克隆表达及生物信息学分析

试验旨在探究自噬相关基因Atg12(autophagy-related 12 gene)在中华蜜蜂(中蜂)、意大利蜜蜂(意蜂)中的表达差异,为探讨中蜂抗螨分子机理提供参考。参照GenBank中东方蜜蜂Atg12基因序列(登录号:XM_017048509.1)设计引物,扩增中、意蜂头部组织Atg12基因,并对其进行克隆、测序、原核表达及其氨基酸序列和蛋白结构分析,同时采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在中、意蜂头部组织中的表达差异。结果显示,本试验成功扩增出大小为450 bp的目的片段,并表达出大小约42 ku重组蛋白;遗传进化树分析表明,在Atg12基因进化过程中,中蜂(Apis cerana cerana)、意蜂(Apis mellifera)、大蜜蜂(Apis dorsata)和小蜜蜂(Apis florea)亲缘关系较近;重组蛋白生物信息学分析显示,该蛋白的二级结构中共含有6个多肽结合位点、6个β-折叠和4个α-螺旋,分子质量约为16.13 ku,等电点为6.73;实时荧光定量PCR结果显示,Atg12基因在中蜂头部组织中表达极显著高于意蜂(P<0.01)。本试验结果为后续深入研究Atg12基因在中蜂抗螨上的作用机制提供了参考。