应用仔猪肾细胞培养荧光抗体法诊断猪瘟的研究(摘要)

我们曾经进行了应用猪扁桃体冰冻组织切片荧光抗体法诊断猪瘟的研究,证明在人工感染猪瘟强毒后72～96小时检查到阳性反应,对急性猪瘟的早期诊断可以达到快速、特异的诊断目的。但是自然感染病例在病的后期往往由于细菌的继发感染,扁桃体化脓导致扁桃体隐窝上皮细胞部分或全部破坏,或扁桃体的采取、处理不当等都可影响检出率。基于上述原因,又开展了应用细胞培养免疫荧光抗体法诊     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅱ有关扁桃体冰冻切片荧光抗体法在应用上的几个问题

前报已报导了用免疫荧光抗体法对人工感染猪瘟猪扁桃体冰冻切片诊断猪瘟的研究结果,证明这是一种特异的、快速的实验室诊断方法。本报提出了制备荧光抗体用高免血清效价的测定方法、活体扁桃体病料的采样方法、感染猪瘟病毒猪扁桃体免疫荧光的检出时间和猪瘟兔化弱毒疫苗接种后是否产生免疫荧光等研究结果。     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅰ 对人工感染猪瘟猪扁桃体冰冻切片荧光抗体法诊断的研究

Solorzand(1962)首先提出用荧光抗体法诊断猪瘟,认为此法不仅敏感,而且特异性亦高。1963年Stair,1964年Aikenct等应用组织切片和压片做了猪瘟荧光抗体法的研究。1963年Mengeling等应用猪肾继代细胞(РК—15)进行了猪瘟荧光抗体的研究。1969年须原贤治等报导了应用扁桃体冰冻切片荧光抗体染包诊断猪瘟的方法。目前,美、日、法、荷等国均已广泛采用荧光抗体法做为常规的猪瘟诊断方法。荧光抗体     

猪瘟荧光抗体的制备及应用评价

制备猪瘟荧光抗体并用于猪只活体扁桃体组织抹/涂片检测。将制备的猪瘟高免血清采用硫酸铵分级沉淀法纯化免疫球蛋白,反向透析法标记荧光素,过葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-50)去除游离荧光素,通过扁桃体组织匀浆吸附去除异嗜性或交叉反应抗体。以5?S做稀释液,以RT-PCR检测阳性样本的冰冻切片确定其最大稀释度为1/60,最佳工作浓度为1/30,阻抑试验证明荧光为特异荧光。用标记的荧光抗体检测活体扁桃体样本39份,检出阳性11份,与IDEXX猪瘟抗原检测试剂盒复核结果完全吻合。结果表明,本实验所制备的猪瘟荧光抗体具有很高的灵敏性和特异性,可用于猪瘟净化中扁桃体组织抹/涂片检测。     

用冰冻切片荧光抗体法诊断猪瘟自然病例

采用冰冻切片荧光抗体法对猪瘟自然病例进行诊断,收到了满意的效果,现报告如下。材料和方法一、被检材料:来自全省几个地、市、县的养猪场和个体饲养户的发病猪,主要采集扁桃体和肾脏。大部分病料在本站剖检采集,部分病料由低温保存送检。二、荧光抗体:由中国兽药临察所提     

荧光抗体技术在猪瘟净化中的应用研究

猪瘟(HC)是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒引起猪的一种高度传染性、致病性病毒病.控制和净化猪瘟的关键在于采取有效方法尽快查出抗原体,找出"带毒猪"并淘汰.采用荧光抗体试验(fluorescentantibody teclmology,FAT)检测猪瘟病毒是一种灵敏而又特异的诊断方法.因此,2005年应用FAT技术在广西一些规模化猪场进行了检测猪扁桃体猪瘟病毒、清除带毒猪、控制与净化猪瘟的试验,达到了预期的净化效果.     

猪瘟荧光抗体的制备及其在自然感染病例中的应用

用硫酸铵盐析法从抗猪瘟高免血清中提取免疫球蛋白，应用搅拌标记异硫氰酸荧光素（FITC），葡聚糖凝胶G-25层析除去标记物中游离的荧光素，制备出猪瘟荧光抗体（CSF—FA）。经测定．标记荧光抗体的染色效价为1：4。用此浓度荧光抗体，结合常规诊断检测猪瘟，从33例采自陕西省不同地区自然发病猪的扁桃体中检出猪瘟阳性病例7份，阳性率21．3％（7／33）。结果表明，制备的荧光抗体诊断猪瘟敏感性高、特异性强；陕西省猪瘟自然感染发病率高。     

ELISA间接法检测猪瘟抗体的研究

本文介绍了以中国株猪瘟兔化弱毒乳兔组织冻干疫苗为原料提取猪瘟抗原,以酶标葡萄球菌蛋白 A(PPA)代替酶标抗猪IgG,建立ELISA间接法检测猪瘟抗体的方法。该方法与血清兔体中和试验对73份猪血清进行检测猪瘟抗体的同步试验,结果基本一致( P >0.05)。敏感性、特异性及准确性分别为100％、92.16％及94.52％。用该方法对1528头份猪血清及36头份猪扁桃体浸出液进行猪瘟抗体测定,结果稳定,重复性好。     

国外猪瘟的荧光抗体诊断

对于典型的猪瘟病例,一般根据流行病学、临床表现及病理变化即可确诊,但对不典型的、有并发症的和流行早期病变不明显的猪瘟病例,单依靠上述方法即难于做出确诊。因此,许多人都研究试图通过直接检查猪瘟病毒的方法来确诊本病。早期曾应用接种易感猪的     

双抗夹心ELISA法及荧光抗体法检测猪瘟抗原的应用与分析

猪瘟（classical swine fever,CSF;或hogcholera,HC）是由黄病毒科瘟病毒属,猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV;或hog cholera virus,HCV）引起的呈现急性、亚急性、慢性、非典型性或不明显型猪瘟表现的高度传染性疫病。双抗夹心ELISA猪瘟抗原检测法对CSF的诊断,特别是早中期的检测具有优势,为此,笔者引入该法进行应用试验,旨在了解该法在种猪隐性感染、疑似疫情诊断、疫源净化,以期推广应用于CSF疫情确诊、疫源净化、病原流行病学调查与防控。     

规模化猪场猪瘟病原与抗体检测分析

为了解规模化猪场猪瘟野毒感染情况和猪瘟疫苗免疫效果,分别采用RT-PCR和ELISA方法对某场72份猪扁桃体样和419份血样进行了猪瘟病原和抗体检测。结果表明,该场无猪瘟野毒感染;种猪群猪瘟抗体阳性率高于90.3%、离散度低于33.1%,猪瘟疫苗免疫效果理想;保育猪猪瘟抗体阳性率仅为79.3%,离散度达到50.4%,抗体水平参差不齐,需采取综合防控措施进一步提高猪瘟抗体水平;母猪猪瘟抗体阳性率随着胎次的增加而呈递减趋势。     

种猪场猪瘟病原和抗体检测与分析

为了解某规模化种猪场猪瘟野毒感染情况和猪瘟抗体免疫状况,研究分别采用RTPCR、基因测序和阻断ELISA方法对该场36份猪扁桃体样品和102份血样进行了猪瘟病原和猪瘟抗体检测。结果表明:群体猪瘟野毒阳性率为8.3%,其毒株基因型属于2.1c亚型;种母猪群猪瘟抗体阳性率91.7%、离散度23%,猪瘟免疫效果理想;仔猪猪瘟抗体阳性率80%、离散度46%,猪瘟抗体水平较高但参差不齐。该场通过淘汰野毒感染猪、抗体阴性猪群补打疫苗等综合措施实施猪瘟净化,节本增效,净化取得初步成效。     

非洲猪瘟诊断

正由于非洲猪瘟与古典猪瘟等疫病症状相似,临床上很难鉴别诊断,必须依靠实验室检测进行确诊。发现免疫过古典猪瘟的猪无症状突然死亡,或出现步态僵直,呼吸困难,腹泻或便秘,粪便带血,关节肿胀,局部皮肤溃疡、坏死等症状,剖检表现脾脏肿大,淋巴结出血,可判定为非洲猪瘟可疑病例,应立即向当地兽医部门报告。兽医人员应按照《非洲猪瘟防治技术规范(试行)》要求采集抗凝血、脾脏、扁桃体、肾脏、     

浅谈猪瘟发病机理

<正>自然条件下,猪是唯一能被猪瘟病毒感染的动物。猪瘟病毒通过直接接触、口鼻气溶胶、生殖器官等感染猪体。1感染强毒株多发急性型猪瘟1.1猪瘟强毒最初入侵的靶器官是扁桃体,最终侵害的是机体免疫系统。猪瘟强毒首先在扁桃体隐窝上皮细胞内增殖,然后通过扁桃体淋巴管转移到附近区域淋巴结进行复制,再通过血液扩散到周围淋巴网状组织,在脾、骨髓、内脏淋巴结以及小肠淋巴样组织中大量增殖,最后侵入实质器官。由于     

螢光抗体技术在猪瘟诊断中的应用

现在日本采用萤光抗体法诊断猪瘟。萤光抗体技术是将抗体(或抗原)标记上萤光色素,与相应抗原(或抗体)结合后,在萤光显微镜下,呈萤光现象的一种特异免疫萤光反应方法。诊断猪有三种作法。 1.组织切片法:从病猪采取扁桃体的薄     

直接荧光抗体技术在规模猪场检测净化猪瘟中的应用

猪瘟目前在生产实践中多以所谓非典型、温和性或亚急性的症状出现．以及猪瘟病毒的持续感染、胎盘垂直感染、初生仔猪耐受和妊娠母猪带毒综合症等。对规模化猪场除实行兽医生物安全措施,减少和切断病原微生物侵入猪群外,还应采取有效的方法快速查出病原体并淘汰“带毒猪”．控制净化规模猪场猪瘟病毒,彻底清除带毒种猪对控制猪瘟持续感染尤为关键。     

猪瘟间接血凝抗体与猪瘟病毒感染的相关性分析

运用猪瘟间接血凝方法和猪瘟抗原ELISA方法对广西6个规模猪场送检的1614份血清进行猪瘟免疫抗体滴度和猪瘟病毒的检测,观察不同间接血凝抗体与感染猪瘟病毒是否存在一定关系。结果发现在任何一个免疫抗体滴度,都有可能有感染猪瘟病毒,二者无明显相关性,当间接血凝抗体滴度过低(小于1:16)或过高(大于1:512)时猪感染猪瘟病毒的机会相对大一些。     

初生仔猪猪瘟的诊断

某五个大中型养猪场因母猪带猪瘟病毒，部分母猪成为隐性带毒猪，造成初生仔猪的先天性感染，致使一少部分仔猪于出生后１－２日内开始发病死亡，通过冰冻切片猪瘟荧光抗体试验，病理组织切片，病原细胞分离培养和动物接种试验，结合流行病学的调查和病理剖检，并用ＨＣ－ＦＡＴＳＴ在初生仔猪肾及扁桃体组织细胞中检出ＨＣＶ，从而证实五个大中型养猪场初生仔猪发病死亡是ＨＣＶ，从而证实五个大中型养猪场初生仔猪发病死亡ＨＣＶ引     

猪瘟疫苗治疗猪瘟的探讨

猪瘟因其死亡率高而被列为一类动物传染病。临床上因各种原因导致猪瘟时有发生，亚临床感染屡见不鲜，而其临床表现不一，病理变化差异明显，常有混合感染或继发感染现象出现。运用猪瘟疫苗治疗猪瘟的效果众说纷纭。因此，在近几年猪瘟防控中，笔者对数千例猪瘟病猪进行了探索性治疗，现列举其中三例，以供商榷。     

猪瘟的实验室诊断

通过对病猪的尸体剖检、病理组织学观察,及ELISA检测猪瘟抗原,扁桃体为1.108 ,脾为2.354 ,均为阳性.故确诊该猪群发生猪瘟.