碱性蛋白酶酶解藜麦芽制备多肽工艺的研究

为寻找开发藜麦蛋白，提高藜麦应用价值的最佳条件，本研究以白藜麦芽为原料，采用正交试验法优化碱性蛋白酶酶解藜麦芽制备多肽的最佳工艺条件。以碱性蛋白酶添加量、酶解pH、酶解时间、酶解温度和底物浓度这5个因素进行单因素试验，再通过正交试验分析，获得制备多肽的最佳酶解条件为：加酶量2000 U/g，酶解pH 10.0，酶解温度50 ℃，酶解时间3 h，底物浓度9％，在此条件下进行的验证试验，多肽含量达（0.4105±0.0021）mg/mL，表明该工艺稳定、可行，具有较高的应用价值。 [关键词] 藜麦|酶解|多肽|单因素试验|正交设计     

大米蛋白胃蛋白酶酶解物体外抗氧化作用的研究

本试验采用正交设计,以羟自由基清除率为评定指标,用胃蛋白酶酶解大米蛋白,旨在确定其酶解物体外抗氧化作用最佳的酶解条件。试验结果表明:当酶解温度为37℃时,影响大米蛋白胃蛋白酶酶解物抗氧化效果的因素大小排序为:pH酶浓度底物浓度酶解时间;最佳酶解条件为:pH1.4、酶浓度5%、底物浓度8%、酶解120min,此条件下酶解物的羟自由基清除率为72.78%,多肽浓度为5.49mg/mL,水解度为15.62%。     

酶法辅助回流提取荷叶中荷叶碱的工艺研究

为了优化纤维素酶辅助乙醇回流提取荷叶中荷叶碱的工艺,在单因素试验的基础上,通过正交试验设计考察了提取荷叶碱过程中的酶解p H值、酶解温度、纤维素酶用量及酶解时间对荷叶碱提取率的影响,得出优化的酶解辅助提取工艺为:酶解p H值4.5、酶解温度45℃、纤维素酶用量1.5 mg/g、酶解时间50 min,在此条件下荷叶碱提取率达到0.536%。该提取工艺合理、稳定、可行,为进一步工业化生产提供理论依据。     

大豆虾粉肽适宜酶解好条件的研究

为了筛选生产大豆虾粉肽的适宜蛋白酶及酶解条件,试验采用单因素试验设计,以水解度为检测指标,按酶浓度、底物浓度、pH值、酶解温度和酶解时间逐一分别对3种微生物发酵产生的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的适宜酶解条件进行筛选.试验结果表明:酶解体系中的酶浓度、底物浓度、pH值、酶解温度和酶解时间均显著影响3种蛋白酶对脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的酶解效果.在3种蛋白酶中,酸性蛋白酶的酶解效果最好,其次是碱性蛋白酶,中性蛋白酶的酶解效果最差.酸性蛋白酶水解脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的适宜条件为:酶浓度为2000 U/g,底物浓度为9%,pH值3.5,酶解时间为3.5 h,温度50℃.     

响应面优化酶法制备米糠抗氧化肽的工艺条件

以脱脂米糠为原料,选用碱性蛋白酶酶解制备米糠抗氧化肽,以温度、pH、底物质量分数(S%)、加酶量(E/S)和时间作为研究对象,以酶解液的还原能力为评价指标,在单因素试验的基础上。采用Design-Expert软件,通过Box-Behnken进行4因素3水平分析,得到的最佳酶解条件是温度50℃,pH 9,底物质量分数(S%)4%,加酶量(E/S)1.9,时间5 h,在这个条件下,酶解液的还原能力达到0.829。     

桑叶蛋白血管紧张素转换酶抑制肽的酶解制备

本研究旨在探讨桑叶蛋白血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的酶解制备方法,从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、芽孢杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶6种蛋白酶中筛选出最佳蛋白酶,并运用单因素逐级优化法对酶解反应的底物浓度、加酶量、温度、pH、酶解时间进行参数优化.选取这6种常用蛋白酶,利用酶解法制备桑叶蛋白多肽,以ACE抑制率为主要指标,水解度为辅助指标,研究桑叶多肽对ACE抑制活性的影响.结果 表明,酶解效果最佳的酶为芽孢杆菌蛋白酶,最佳酶解参数为底物质量浓度20 g/L、加酶量7.5％、温度60℃、pH7.0和酶解时间50 min,此时酶解产物的ACE抑制率为81.51％,水解度为15.86％.     

复合酶水解乳清蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

以乳清蛋白为原料,采用酶法水解,分析酶解温度、pH值、底物浓度和酶底比对复合酶水解乳清蛋白的影响,通过单因素试验确定各因素的最适工艺参数,再通过正交试验及验证实验进一步确定乳清蛋白的最佳酶解条件。结果表明:根据单因素试验结果,并综合考虑水解度、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率和铁离子螯合能力4项指标的正交试验结果,最终确定乳清蛋白的最佳酶解条件为酶解温度60℃、pH 8.5、底物质量浓度2.5 g/100 mL、酶底比3.5％。以上述最佳参数为酶解条件进行验证实验的结果表明,验证实验结果与正交试验结果相符,进一步验证了本研究确定的酶解条件为最佳条件。     

酶解法制备菜籽多肽的工艺研究

本文以菜籽粕为原料,酸处理将菜籽粕脱毒后,采用碱溶酸沉法提纯菜籽蛋白,再用碱性蛋白酶酶解菜籽蛋白制备菜籽多肽,采用单因素逐级优化试验设计,以酶解液中菜籽多肽的含量为指标优化酶解工艺参数。结果表明:酸处理后的硫甙含量下降了84.32%,碱溶酸沉后,蛋白的提取率为76.25%。单因素逐级优化试验的结果表明:碱性蛋白酶酶解的最适条件为底物浓度4%、加酶量7%(E/S)、温度50℃、p H 8.5、酶解时间120 min,该条件下多肽含量为(35.4±0.11)mg/m L。     

玉米黄粉免疫活性肽的制备工艺

试验以玉米黄粉蛋白为原料,采用小鼠脾淋巴细胞增殖试验检测小鼠胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶等5种酶的免疫活性。结果表明,胰蛋白酶酶解物对小鼠脾淋巴细胞刺激显著(P0.05),小鼠脾淋巴细胞的增殖指数(SI)为1.679,可作为制备玉米黄粉免疫活性肽的最适水解酶。以加酶量(E/S)、p H和底物质量浓度作为研究对象,在单因素试验的基础上,采用正交试验进行4因素3水平分析,得到最佳酶解条件:加酶量2.0 g/L、pH 8.0、底物质量浓度80.0 g/L和酶解温度40℃;酶解90 min;在这个条件下,玉米黄粉免疫活性肽水解度可达12.50%。     

利用风味蛋白酶制备蚕蛹蛋白多肽的工艺研究

蚕蛹蛋白是一种优质蛋白资源,蚕蛹蛋白多肽分子量更小,可广泛应用于食品、保健品。以裸蛹家蚕一代杂交种的新鲜、无污染的蚕蛹为研究基础材料,通过有机溶剂提取的方法脱脂后得到蚕蛹粗蛋白,选择市场价格低廉、反应条件温和、酶解产物品质高的风味蛋白酶酶解蚕蛹蛋白,制备蚕蛹蛋白多肽。通过单因素和正交试验确定了蚕蛹蛋白酶解制备蚕蛹蛋白多肽的最佳工艺条件:酶解温度50℃,酶解时间4h,料液质量浓度111g/L,酶解液pH值6.0,酶用量750U/g,此条件下水解度(DH)达到30.12%。     

谷朊粉的胰蛋白酶水解工艺研究

选用胰蛋白酶水解谷朊粉,用甲醛滴定法测定其水解度。在对温度、时间、pH值、底物浓度(固液比)和酶浓度(酶与底物的比值)等单因素试验的基础上做4因素3水平正交试验。试验结果表明:胰蛋白酶水解谷朊粉的最佳条件为温度40℃、时间4h、pH值8.5、底物浓度(固液比)1.5%、酶浓度8%(酶与底物的比值),得到的水解度为15.34%。     

红三叶寡肽酶解制备工艺研究

本试验以水解度为指标研究不同蛋白酶对红三叶叶蛋白的水解作用.通过单酶筛选试验确定了中性蛋白酶Ⅱ(来源于1398枯草芽孢杆菌)为最佳水解酶,进一步的单因素试验和正交试验结果表明,酶解最佳工艺条件为酶解温度40 ℃,pH值7.6,酶活添加量5000 U/g,底物浓度1%,酶解时间3 h.     

卵转铁蛋白制备抗菌活性肽的研究

本试验以卵转铁蛋白为原料,利用胃蛋白酶酶解技术制备抗菌活性肽,优化实验条件,确定分子量范围。结果表明,胃蛋白酶酶解卵转铁蛋白制备抗菌肽在温度为40℃,pH值为2.0,底物浓度为4%,酶的加入量为1%,水解时间为2 h时,抑菌率达到90.36%;通过正交试验得出底物浓度及酶与底物浓度比对抑菌率的影响显著性水平达到0.05。并对在最优条件下得到的抗菌活性肽进行HPLC分析,确定相对分子质量范围主要在5 000～9 000之间。     

双酶分步水解制备棉籽多肽工艺条件优化

为高效制备棉籽多肽,采用Alcalase酶和Flavourzyme酶对棉籽蛋白进行双酶分步水解.在前期单因素试验的基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其多肽得率的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素,然后通过三因素三水平的 Box-Behnken 响应面分析法确定双酶分步水解棉籽蛋白的最优操作条件为:底物浓度(w/v)8.36%,先用Alcalase 酶在温度59.9℃、pH值8.0、酶用量25000 U/g的条件下水解150 min,再用Flavourzyme酶在温度50℃、pH值6.0、酶用量27430 U/g的条件下水解120 min,多肽得率可达到65.07%.     

响应面分析法优化酶解制备酵母肽的工艺研究

为研究酶解处理对啤酒酵母肽得率的影响,文中首先研究了碱性蛋白酶和胰蛋白酶对多肽得率的影响,然后采用响应曲面试验对工艺进行优化。结果表明,胰蛋白酶更适合作为酶解制备酵母肽的工具酶,酶解制备酵母肽的最佳工艺条件是:酶解时间为12h时,温度60℃,pH7.5,底物浓度15.0%,酶添加量0.10%。在此参数条件下做验证实验,检测多肽含量为20.4%。在该工艺条件下,经喷雾干燥,粗粉得率为48%,经测定,其中总氮含量为52.8%,多肽含量为42.6%。     

血清加工废弃蛋白质水解工艺研究与优化

为了提高血液蛋白质的利用率,降低其对环境的污染,得到风味蛋白酶水解血清加工废弃蛋白质的最优工艺,试验以血清加工废弃蛋白质为原料,以水解度为评价指标,选择风味蛋白酶的添加量、温度、时间和pH值为自变量进行单因素试验,筛选部分因素进行三因素三水平的响应面试验,同时测定最优工艺条件下酶解液中多肽含量、肽段种类及游离氨基酸种类和含量。结果表明：最佳酶解工艺为酶添加量7 g/L,温度50.8℃,pH值5.0,时间5 h,在该条件下血清加工废弃蛋白质的水解度为(55.40±0.34)%。酶解液中多肽含量为(7.23±0.23)mg/mL;含有5 757种肽段,且分子质量集中在1 000 ku以下;含有18种游离氨基酸,总含量为37.085 7 g/L,占总蛋白质含量的46.36%。说明优化后的酶解工艺具有一定的合理性,在节约时间成本及投资成本的基础上具有较好的酶解效果。     

酶解猪血制备氨基酸液体肥工艺条件优化

试验以猪血为原料,利用风味蛋白酶水解猪血中的蛋白,以水解率为指标,得到酶解血液的最佳条件。通过单因素试验研究料液比、酶添加量、pH值、温度和水解时间对猪血蛋白水解率的影响;正交试验确定水解的较佳工艺条件为:料液比1∶10.5 g/mL、pH值6、水解温度50℃、酶浓度12 000 U/g蛋白、水解时间7 h。在此条件下,水解率为40.42%。     

猪小肠黏膜加工下脚料酶解工艺的研究

以猪小肠黏膜提取肝素后的下脚料为原料,利用木瓜蛋白酶对肠黏膜蛋白质进行水解。在单因素分析的基础上采用正交实验对水解条件进行优化,得出最适酶解条件为:酶加量3000 U/g底物蛋白,底物浓度6%,pH值7.5,温度45℃,水解时间3h。在此条件下的水解度为20.63%。     

酶解猪血红蛋白工艺条件的研究

试验选用中性蛋白酶水解猪血红蛋白。通过单因素试验,研究水解温度、pH值、酶加量、底物浓度、水解时间对水解效果的影响。通过正交试验,得出最佳的水解条件为:温度55℃、pH值7.5、酶加量5000U/g蛋白、底物浓度10%、水解时间3h,在此条件下的水解度为22.03%、三氯乙酸可溶性氮含量(SN-TCA指数)为63.83%。     

猪肠膜双酶分步磕解工艺的研究

以猪小肠黏膜提取肝素后的滤渣为原料,利用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶对猪肠膜进行双酶分阶段水解.在单因素试验的基础上采用正交试验对水解条件进行优化.结果表明木瓜蛋白酶和中性蛋白酶双酶分阶段水解的最佳酶解工艺为木瓜蛋白酶-中性酶的加酶量比为1∶2,总酶量8000U/g蛋白,底物浓度为5%,pH7.0,温度55℃,酶解时间3h.通过喷雾干燥生产出成品,其蛋白质含量为37.5%.