根癌农杆菌介导转化抗虫基因获得转基因烟草

将抗虫ＰＩ基因构建到ｐＩＧ１２１Ｈｍ质粒的Ｔ－ＤＮＡ上，利用农杆菌ＬＢＡ４４０４介导转化烟草，获再生植株。经ＧＵＳ检测和Ｄｏｔ ｂｌｏｔ分析，证实外源基因已插入植物细胞基因组中，再生植株的转化率为６４．３％。     

根癌农杆菌对中华猕猴桃的转化

猕猴桃含有丰富的维生素Ｃ，被誉为“水果之王”本实验用中华猕猴桃无菌苗的茎段和叶片被根癌农杆菌感染后，能够自主生根，但茎段的生根率与叶片的生根率有一定的差异。     

根癌农杆菌介导转化抗虫基因获得转基因烟草

将抗虫ＰＩ基因构建到ｐＩＧ１２１Ｈｍ质粒的Ｔ－ＤＮＡ上，利用农杆菌ＬＢＡ４４０４介导转化烟草，获再生植株．经ＧＵＳ检测和Ｄｏｔｂｌｏｔ分析，证实外源基因已插入植物细胞基因组中，再生植株的转化率为６４．３％．     

根癌农杆菌对结球白菜的转化

为了给外源有用基因导入结球白菜并高效稳定地表达提供依据，以结球白菜的子叶－子叶柄为外植体，采用农杆菌共培养法把外源基因C58／pV11导入结球白菜，在选择最优的转化条件－根癌农杆菌侵染外植体15min，农杆菌培养和共培养时在培养基中均加入AS，培养基pH为5．2，共培养3d的条件下，获得转基因植株，其中抗性植株的抗草丁膦试验，转基因植株DNA的PCR及PCR－Southern斑点杂交鉴定等结果表明，50％的抗性植株的基因组中有外源基因的整合。     

用根癌农杆菌介导获得籼稻转基因植株

用携带p13W4质粒的根癌农杆菌EHA105感染籼稻龙特甫品种的幼胚愈伤组织，经共培养并在潮霉素25－50mg/L浓度条件下筛选2－3次，获得了对潮霉素表现抗性的愈伤组织，其愈伤组织转化频率为25.3%,将抗性愈伤组织转入分3化培养基培养形成植株，经GUS活性测定和PCR检测，结果证明外源基因确已导入这些转基因植株之中。     

根癌农杆菌介导的番茄遗传转化

利用根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA101携带LycB基因（番茄红素β-环化酶）和潮霉素抗性基因，以东农704、708、709三个番茄品种的子叶、茎段为转化受体对番茄进行遗传转化，经PCR分子检测初步证明，目的基因LyeB已整合进番茄基因组中．     

根癌农杆菌介导基因转化的研究进展

本文综述了根癌农杆菌介导基因转化的一些最新研究进展,包括近几年来备受关注的参与农杆菌介导转化的相关植物编码因子的研究,标记基因的剔除方法,介导转化范围的扩展等.针对上述领域,指出了其中仍然存在的一些问题并提出了一些构想.     

根癌农杆菌介导玉米遗传转化的研究进展

对根癌农杆菌介导的玉米基因转化中包括外植体、基本培养基及其附加物、共培养温度、信号分子与vir基因的活化的几个关键因素研究进展作了论述。近年来的研究发现,大小为1~2mm的幼胚是较为理想的转化外植体,在外植体培养基本培养基一般多选用MS和N6,在基本培养基上附加有机氮和氨基酸、金属离子均有利于转化效率的提高。转化中的共培养温度一般在200C~250C之间。研究认为根癌农杆菌转化禾本科植物的困难在于禾本科植物缺乏酚类物质,难以诱导Vir基因活化表达,因此在转化中多采用加入外源的酚类物质如乙酰丁香酮来提高玉米转化的成功率。     

根癌农杆菌介导的植物遗传转化研究

介绍了农杆菌介导的植物原位转基因方法发展状况、技术环节以及在转化机制上的研究结果,并对存在的问题以及应用前景进行了讨论。     

根癌农杆菌介导FPF1基因转化菊花的研究

经过转化材料的筛选、KM筛选浓度、Cef抗菌浓度以及延迟筛选时间的测定,以根癌农杆菌（Agrobactriumtumefaciens）LBA4404菌株介导FPF1基因转化菊花,对转化材料进行连续KM筛选,获得105株抗性苗,部分植株经PCR检测呈阳性.田间观察部分抗性株与对照相比在株型、叶色及花期上表现出差异.     

玉米几丁质酶基因导入甘蓝型油菜的研究

以甘蓝型油菜（Brassica napus L.)下胚轴为转化材料,通过根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens)介导将玉米几丁质酶基因（Maize Chitinase gene)导入双低油菜品种D2中,获得了抗卡那霉素（Kanamycin Kan)的再生植株,并对影响遗传转化的一些因素进行了研究。结果表明：适当的预培养对油菜下胚轴的遗传转化是必要的;油菜下胚轴遗传转化过程中的过敏反应可通过一些措施缓解;延迟筛选可提高油菜下胚轴的转化率。对抗性植株进行PCR检测表明：部分抗性植株在多次重复检测中的均显示较强的阳性反应,初步证明外源基因已整合到油菜基因组中。     

利用农杆菌转化花椰菜组织的研究

供试的四个花椰菜品系对农杆菌T_(37)反应极为敏感,但各品系反应程度有所不同,肿瘤发生率变动于64%-82%之间。利用含有二元载体的农杆菌LBA_(4404)与无菌幼苗的下胚轴切段共培,获得卡拉霉素抗性植株。DNA分子杂交证明,二元载体上的T—DNA确实整合到植物染色体上,其npt嵌合体基因使转化体具有卡拉霉素抗性。由胭脂碱Ti质粒pTiT_(37)诱导的丛生芽,通过组织培养较易分化出不定根,但这些芽状结构很难发育成正常植株。     

利用PIG基因枪进行水稻基因转化的研究

我们利用自行安装的ＰＩＧ基因枪瞬时转化水稻悬浮细胞，对其操作参数及转化条件的优化进行了研究。ＰＩＧ基因枪结构简单，操作方便，价格及维持费很低。研究结果表明，在设计参数为轰击持续时间５０ｍｓ及样品室真空度为２９～３０ｉｎ．Ｈｇ时，其它操作参数的优化值为氦气压力６０ＰＳｌ，轰击高度为１７ｃｍ，缓冲网板高度为ｇｃｍ。水稻悬浮细胞在轰击前后分别进行高渗处理（含有０．５Ｍ甘露醇的ＬＳ０．５培养基）４ｈ和１０～１６ｈ可提高转化率４倍以上，在ＤＮＡ吸附过程中，用乙醇进行后处理比用水处理可提高转化率３．８倍。另外，用金粉为ＤＮＡ载体比钨粉效果好，转化量可提高一倍以上。这些结果证实ＰＩＧ基因枪的可靠性及稳定性。这对促进ＰＩＧ基因枪在植物基因工程中的应用有着重要意义。     

向日葵遗传转化影响因素研究

以向日葵茎尖为外植体,通过农杆菌介导转化,将草酸氧化酶基因(OXO)导入向日葵,对影响转化频率的因素:卡那霉素浓度,头孢霉素浓度,农杆菌感染时间和浓度等进行了探讨。当卡那霉素浓度为50 mg/L,头孢霉素浓度为500 mg/L,农杆菌菌液浓度OD600=0.3~0.4,感染时间为9min~10 min时,抗性芽比率可达7.4%。对抗性苗进行PCR检测,初步证明草酸氧化酶基因(OXO)已整合到向日葵的基因组中。     

农杆菌介导法将FPFJ基因导入油菜的研究初报

将拟南芥早花基因FPF1（flowering promoting factor 1)插入双元高效表达载体pBI 121中,构建了植物表达载体pBIUbi-FPF1。以“双低”甘蓝型晚熟油菜品种2000 F4102,2000 F4153的下胚轴为转化受体,通过农杆菌介导的遗传转化获得抗卡那霉素的再生转基因植株,并探讨了影响油菜再生频率以及遗传转化效率的几个因素。对部分经卡那霉素筛选得到的再生植株进行了PCR检测,其中70％以上的卡那霉素抗性植株表现阳性,初步证明FPF1基因已整合到油菜细胞核基因组中。     

一次防治大豆灰斑病籽粒灰斑

通过室内及田间大豆不同生育期接种试验证明，籽粒感染灰斑病的关键时期是Ｒ３－Ｒ５期．Ｒ２期以前侵染不造成籽粒斑驳，据此提出一次防治大豆籽粒灰斑病的关键时期为Ｒ２－Ｒ４期．     

美味猕猴桃的离体繁殖及种质试管苗保存

美味猕猴桃(Actinidia deliciosaa C.F.liang et A. R. Ferguson)的试管苗离体腋芽,在附加.BA(3.0μg/g)、IBA(0.5μg/g)、GA(0.5μg/g)的MS培养基上,腋芽的萌发率达100%,可以代替昂贵的玉米素(ZT);用5μg/g NAA加在MS培养基中,促使小苗生根,生根率达100%,平均每株生根数19.9条;待茎木质化后移栽,移栽成活率在80%以上。美味猕猴桃种质试管苗,在MS培养基中附加50μg/g的B₉(N-dimethyl-succinamic acid),室温(8℃～34℃)下保存9个月后存活率达85%。