细胞因子对绵羊体外受精胚胎发育的影响

绵羊卵巢采自乌鲁木齐市屠宰场，卵母细胞体外成熟24－25h后，由体外获能的附睾精子授精，50h后，将卵裂至2－8细胞的绵羊胚胎移入添加了不同浓度细胞因子的培养液中继续培养，结果表明，加入5、10、15μg/ml胰岛素（Insulin)分别得到17.46%、23.81%、22.95%的囊胚率，与对照组9.52%相比差异显著（P＜0.05)。高浓度（500μg/ml)的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（Granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)可获得21.82%的囊胚率，与对照组7.27%相比差异显著（P＜0.05)。胚胎培养液中分别加入10、100、500ng/ml的白细胞介素－3（Interleukin-3,IL-3)、白细胞介素－8（IL－8）和神经生长因子（Nuclear growth factor,NGF)与对照组相比，囊胚率差异不显著。本研究表明，胰岛素、GM－CSF对绵羊体外受精胚胎早期发育有促进作用，IL－3、IL－8、NGF对绵羊胚胎的早期发育无明显作用。     

绵羊营养调控技术及研究进展

自古以来,我国绵羊饲养方式以放牧和放牧+补饲为主,此种方式缺点为过度消耗草地资源,严重破坏草原生态,降低了绵羊生产效率。解决上述问题,需要调整绵羊的饲养方式:实行季节性放牧以及分区域轮牧,推动产业化推广模式(化散为整),提高绵羊良种繁育机制以及绵羊生产能力。目前,绵羊营养理论和技术现状相对欠缺,现将通过绵羊营养调控技术展开论述。     

影响绵羊体外受精因素的研究

本试验对影响绵羊体外受精的因素进行了分析。结果表明:在相同条件下添加和不添加VEGF(血管内皮生长因子)的卵裂率分别为81.5%、84.9%(P>0.05),但囊胚发育率分别为31.5%和22.4%,差异显著(P<0.05)。受精时间8 h和12 h对卵裂率(80.8%、83.9%;P>0.05)和囊胚发育率(28.8%、23.5%;P>0.05)没有显著影响。卵巢采回后立即切割和在25~30℃的生理盐水中保存3 h的卵裂率分别为82.9%、86.5%,囊胚发育率分别为30.4%、29.7%,差异均不显著(P>0.05)。     

绵羊多胎性状基因调控研究进展

绵羊的繁殖性状受多基因控制，本文综述了现已发现并证明的主基因和QTL住点，如FecB基因、FecX基因、FecX2基因、BMP15(形态发生蛋白15)突变、Q249R突变及Thoka基因等。通过分析这些基因或QTL位点的作用、遗传方式、遗传效应及基因定位，旨在为探讨绵羊多胎性状的基因调控规律提供理论依据。     

影响绵羊体外受精技术因素的研究

作者对影响卵母细胞体外成熟和体外受精的因素进行研究。结果表明,激素FSH和LH明显促进卵母细胞的体外成熟,且10、20和40μg/m l组成熟率高于5μg/m l组,差异显著;运输温度在28~32℃的成熟率高于22~24℃和35~37℃,差异显著;用BO受精体系卵子卵裂率高于TALP受精体系,差异显著;用绵羊冻精进行体外受精,受精前除去大部分卵丘细胞的成熟卵母细胞卵裂率高于保留大部分卵丘细胞的成熟卵母细胞。     

两种采卵方法对绵羊卵母细胞体外受精的影响

研究对获取绵羊卵母细胞不同采集方法进行了初步探讨。切剖法平均每个卵巢可采集得到可用卵母细胞数3．95枚(1953枚／494卵巢),显著高于抽吸法的1．96枚(219枚／112卵巢)。抽吸法和切剖法获得的卵母细胞其体外受精后囊胚率分别是20.21％和18．85％,差异不显著。     

季节效应对绵羊体外受精的影响

试验结果表明进行体外受精试验时，不同季节绵羊体外受精的结果差异很大。卵母细胞的成熟率、受精率、囊胚率均以秋季处理的为高，尤其是卵母细胞的体外成熟率（P＜0.01）秋季为80.78％。     

新疆绵羊环境调控探讨

分析了新疆家畜生态区气候特点 ,养羊现状 ,提出了一系列绵羊环境调控措施。如改善羊舍结构 ,调整日粮配方 ,加强管理等 ,以获得最高生产效率 ,从而推动新疆养羊业持续快速发展。     

蒙古绵羊体外受精胚胎干细胞建系培养研究

蒙古绵羊体外受精的胚胎干细胞(SESC)一直未能成功建系,确定一种适合的培养体系及传代方法对其成功建系有着重要的意义。本研究将获得的体外受精胚胎直接培养,以胎鼠成纤维细胞为饲养层,运用机械传代法传代,采用培养液Ⅰ和培养液Ⅱ两种不同的培养液培养绵羊胚胎干细胞。采用形态鉴定、碱性磷酸酶染色、类胚体形成,免疫荧光染色等方法对获得的SESC进行干细胞检测。结果显示:培养液Ⅰ和培养液Ⅱ都可用于SESC的培养,而无血清的培养液Ⅱ更利于细胞的生长;机械传代法适合于SESC的传代培养;冷冻复苏之后经过形态鉴定、碱性磷酸酶染色、体外分化以及免疫荧光染色,均与胚胎干细胞的形态特征一致。     

新疆绵羊环境调控措施探讨

本文分析了绵羊生长发育所需的适宜温度范围和生产环境界限、新疆家畜生态区气候特点,养羊所用的主要羊舍类型,提出了一系列绵羊环境调控措施,具有一定的生产实践指导意义.     

不同发情阶段的绵羊血清对绵羊精子获能和体外受精的影响

为比较不同发情阶段和不同浓度的绵羊血清在绵羊体外受精过程中对绵羊精子体外获能及存活时间、受精效果的影响,试验以绵羊输卵管合成液(SOF)为基础获能液,在其中分别添加发情当天、发情结束和发情间期的绵羊血清,血清浓度分别为0%、2%、5%、10%和20%.利用金霉素荧光染色(CTC,chlortetracycline)法及体外受精2种方法检测不同血清及其浓度对绵羊精子获能的影响.结果表明:1)当在获能液中添加发情当天绵羊血清时,在10%和20%血清浓度下作用45 min的获能效果最好,其获能而且未完成顶体反应的精子率(45.28%和44.52%)显著高于0%、2%和5%血清浓度组(30.14%、28.71%和35.49%,P<0.05);2)当在获能液中添加发情结束时或发情间期的绵羊血清时,在含不同浓度的这2种血清的获能液中作用45 min后,各浓度组引起的获能精子百分率变化均不显著(P>0.05);3)在含20%发情当天绵羊血清的获能液中,精子的存活时间(18 h)显著高于含20%发情结束和发情间期的绵羊血清的获能液(11 h;11 h);4)在不同血清诱导获能后进行的体外受精的试验中,添加发情当天绵羊血清组的卵裂率和囊胚率(62.5%和26.25%)均显著高于发情结束时血清组(42.22%和11.11%,P<0.05)和发情间期血清组(37.36%和15.38%,P<005).以上结果表明:在进行绵羊体外受精试验中,采用20%发情当天绵羊血清作用45 min比采用发情结束和发情间期的绵羊血清能更好地诱导精子获能.     

白藜芦醇对绵羊卵母细胞体外受精的影响

本试验旨在研究不同浓度（0、0.5、2.0、5.0 μmol/L）白藜芦醇（resveratrol,RES）对绵羊卵母细胞体外受精（in vitro fertilization,IVF）、卵母细胞抗氧化能力及卵丘细胞分泌类固醇激素的影响。绵羊卵母细胞在含不同浓度RES的体外成熟（in vitro maturation,IVM）液中培养24 h以后进行体外受精,并收集IVM液,测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）的活性及脂质过氧化产物丙二醛（monochrome display adapter,MDA）的含量;用酶联免疫法测定雌二醇（estradiol,E₂）和孕酮（progesterone,P₄）的浓度。研究结果表明,与对照组相比,在IVM液中添加0.5 μmol/L RES显著提高卵裂率（P<0.05）,但对受精率和囊胚率没有显著影响（P>0.05）;5.0 μmol/L RES显著降低受精率、卵裂率和囊胚率（P<0.05）,对胚胎发育有抑制作用;在IVM和体外培养（in vitro culture,IVC）液中分别添加0.5 μmol/L RES均显著提高受精率、卵裂率和囊胚率（P<0.05）。与对照组相比,在IVM液中添加RES对卵丘细胞分泌E₂有一定的抑制作用,5.0 μmol/L RES显著降低E₂浓度（P<0.05）;0.5 μmol/L RES显著提高卵丘细胞P₄分泌量（P<0.05）。0.5和2.0 μmol/L RES增加SOD和GSH-Px等酶的活性,但与对照组相比无显著差异（P>0.05）,却显著降低MDA含量（P<0.05）;而5.0 μmol/L RES显著降低抗氧化酶活性并增加MDA含量（P<0.05）。综上所述,在IVM和IVC液中同时添加0.5 μmol/L RES,通过增强卵母细胞抗氧化能力和P₄的浓度,并降低MDA含量,从而提高胚胎卵裂率和囊胚率。     

绵羊体外受精技术条件优化的研究

探讨了卵泡液、受精时间和季节对绵羊卵母细胞体外培养效果的影响。从屠宰场采集羊卵巢,抽取卵巢表面2mm-6mm的卵泡卵母细胞,进行体外成熟培养;卵母细胞成熟后,与处理后的精子共同培养进行受精。结果表明,在卵母细胞成熟培养液中添加绵羊卵泡液（SFF）组的卵裂率和囊胚发育率均优于添加同等浓度的牛卵泡液（BFF）组;受精22、18、12h组的卵裂率分别为64.85%、54.39%、48.72%,受精22h和18h组间差异显著（P〈0.05）,受精22h组和12h组间差异极显著（P〈0.01）。秋季绵羊体外受精的卵裂率和囊胚率均高于夏季,差异显著（P〈0.05）,但秋季与春季相比差异不显著（P〉0.05）。因此,进行绵羊卵母细胞体外成熟培养时,培养液中添加SFF;受精时,精卵共培养时间为22h的效果较好。在绵羊的繁殖季节秋季进行体外受精较春季和夏季的结果好。     

绵羊精液不同处理方法对体外受精效果的影响

试验通过开展绵羊低温保存精液和冷冻精液制备精子对体外受精效果影响的研究,旨在探讨制备绵羊IVF优质精液的新方法。结果表明:利用低温保存精液和冷冻精液,分别采用Percoll离心法和上游法制备精子进行体外受精,低温保存精液上游法的卵裂率78.6%显著高于低温保存精液和冷冻精液Percoll离心法和60.2%、62.3%,(P<0.05),极显著高于冷冻精液上游法21.1%,P<0.01;低温保存精液和冷冻精液Percoll离心法组间无显著(P>0.05)差异,但均显著(P<0.05)高于冷冻精液上游法。低温保存绵羊精液可用于制备IVF精子,上游法优于Percoll离心法,可显著提高体外受精效果。     

小鼠体外受精及胚胎发育的影响因素

为了完善小鼠体外受精和胚胎的体外培养系统 ,以 M16为基础培养液 ,探讨了葡萄糖、磷酸盐、EDTA、谷氨酰胺及β-巯基乙醇等对小鼠体外受精和胚胎体外培养的影响。结果表明 ,在 M16液中添加 EDTA和 L -谷氨酰胺(m M16液 ) ,小鼠的体外受精率由 2 6 %提高到 5 1%;当在 m M16液中去掉磷酸盐 ,或添加 Hepes,或添加 β-巯基乙醇 ,体外受精率由 5 1%增至 6 2 %～ 74%;m M16液中添加 Hepes,或去掉磷酸盐 ,可阻碍胚胎的体外发育 ,囊胚的扩张率由 80 %降至 49%和 5 8%,而在无糖 m M16液中添加 β-巯基乙醇 ,可显著地提高扩张囊胚率 (91%)。以上结果表明 ,M16液中添加 EDTA、谷氨酰胺和 β-巯基乙醇后 ,适用于小鼠体外受精 ;同时去掉葡萄糖后 ,则适用于 2细胞胚的体外培养。     

不同采卵方式对绵羊卵母细胞质量、体外成熟及体外受精的影响

随着胚胎工程及胚胎相关技术的发展,绵羊卵母细胞和绵羊胚胎的需求量日益增加.获得尽可能多的结合型卵母细胞是体外受精的关键环节.本试验通过剖切法和抽吸法两种不同采卵方式获取卵母细胞并进行体外成熟培养.剖切法获得的卵母细胞数量高于抽吸法,所用时间相差不大.A、B级卵母细胞的比例在剖切法中显著高于抽吸法(P＜0.05),抽吸法所采集的C级卵母细胞显著高于剖切法(P＜0.05);剖切法中卵丘扩散率和第一极体排出率要显著高于抽吸法(P＜0.05),受精后不同时期胚胎的发育率差异不显著(P＞0.05).表明剖切法是采集绵羊卵母细胞的理想方法.     

绵羊的卵泡发育及其调控

卵泡是绵羊卵巢上的基本发育单位,卵子发生是在卵泡内进行的;即卵泡为卵子发生提供一个最佳的微环境。卵泡的发生受内分泌、旁分泌和自分泌调控。本文对绵羊卵泡发育及其调控机理作一概述。     

水禽毛囊发育特征及分子调控研究进展

本文概述了鹅、鸭胚胎期皮肤初级毛囊和次级毛囊的区别,毛囊形态发育的特征,周期性生长的特点;影响毛囊发生发育的相关信号通路和信号分子,目前在鹅鸭毛囊上的相关研究,并提出了目前研究中仍存在的问题,旨在为进一步研究水禽羽绒,提高水禽羽绒的产量和质量提供参考.     

不同因素对绵羊卵母细胞体外受精效果的影响

本试验研究了发情羊血清、不同个体的冷冻精液和新鲜精液、精子密度、受精时颗粒细胞的有无及不同培养液对绵羊体外受精效果的影响。结果表明,发情3d的血清与发情当天的血清相比,对卵裂率和囊胚率有极显著的影响(P0.01);不同个体的冷冻精子对卵裂率和囊胚率都有显著的影响(P0.05),但鲜精和冷冻精子的受精效果与个体有关;精子密度在2×106～6×106个/mL之间对受精效果没有影响(P0.05);颗粒细胞对受精的作用不明显(P0.05);不同的培养液对受精效果没有显著影响(P0.05)。因此,选用好的公羊个体精子,用发情3d的发情羊血清能显著提高受精效果。