小黑杨转几丁质酶基因及酶活性

This paper reports a successful transformation of chitinase gene into Populus simonii×P. nigra by Agrobacterium-mediated means. For reducing adventitious buds,the optimal concentration of kanamycin was 40 mg·L~ -1 . Up to 700 mg·L~ -1 of Cefazolin Sodium had no obvious effect on differentiation of leaves. About 20-day-old leaf disc explants were pre-cultured for 3-4 d,then immersed in Agrobacterium suspension for infection for 6-15 min,then co-cultured on non-selection culture medium for 3 d in the dark at ...     

苏云金杆菌杀虫晶体蛋白基因转化美洲黑杨的研究

本研究首先建立了美洲黑杨叶片外植体的再生系统，并利用Ｈｏｒｓｃｈ等人１９８５年发明的叶盘法，将分别带有嵌合基因ＮＰＴＩＩ和１．８ｋｂ或２．１ｋｂ Ｂｔ．基因的土壤杆菌ＬＢＡ４４０４与美洲黑杨叶片共培养。采用３０ｍｇ／ｌ和５０ｍｇ／ｌ两种浓度的卡那霉素筛选转子，约２８天左右的时间，有不定芽从外植体切口处形成。两种卡那霉素浓度下共形成２７５个伸长芽，存活了１８７株。这１８７株分别进入卡那霉素３０ｍｇ／     

四倍体刺槐转甜菜碱醛脱氢酶基因的研究

试验以所建立的四倍体刺槐高频再生体系为基础,通过农杆菌介导法转化甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因,以GUS染色组织分析法为依据探讨了影响转化效率的各种因素,建立了优化转化体系,结果如下:20mg·L~(-1)乙酞丁香酮可显著提高转化效率;菌液浓度OD_(600)值0.3～0.7、预培养2d为宜;转化后暗培养对转化效率没有影响。并在以上研究基础上,成功地建立了高效、可重复的遗传转化体系,选择培养基上头孢霉素400mg·L~(-1)可有效地抑制农杆菌;卡那霉素50mg·L~(-1)时愈伤组织的白化死亡率达96.4％。经PCR检测,外源基因已成功的整合到植株的基因组DNA中,获得了15个转基因株系。     

泡桐转TCS基因初步研究

运用花粉管导入和农杆菌介导两种方法,对泡桐转TCS基因受体表现性状进行研究,结果表明:泡桐花导入TCS基因后导致泡桐坐果率和畸形率升高;农杆菌介导TCS基因于泡桐组培苗的愈伤组织、茎段、茎尖后,致使其死亡率、分化率、分化数、苗高和颜色发生显著变化,极差分析表明,最佳转基因方式是以茎尖为受体,预培养3d,浸染时间15min,共培养条件为半黑暗。     

单倍体小黑杨对潮霉素的敏感性研究

以单倍体小黑杨的叶片、不定芽和茎段为材料进行潮霉素敏感性研究的结果表明,在叶片筛选阶段,潮霉素的适宜浓度为3.0mg/L;在抗性芽和茎段生根筛选阶段,适宜浓度分别为2.0和6.0mg/L.     

反义磷脂酶Dγ基因与几丁质酶基因转化美洲黑杨G2

建立美洲黑杨G2组培再生体系,确立美洲黑杨G2分化最适宜培养基和生根培养基.然后分别进行卡那霉素和潮霉素敏感性试验,利用叶盘法依次将反义磷脂酶Dγ(Anti-PLDγ)基因和几丁质酶(CH5B)基因转入美洲黑杨G2中.首先转入反义磷脂酶Dγ基因,经诱导不定芽及生根阶段卡那霉素(选择性抗生素)连续筛选,获得了21株卡那霉素抗性植株.抗性植株经PCR及PCR-Southern杂交检测,有13株均呈阳性,证明Anti-PLDγ基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中.耐盐性试验表明,4株转基因植株抗NaCl能力比对照都有不同程度提高.选择4号株系继续转入几丁质酶基因,通过潮霉素(选择性抗生素)筛选不定芽及诱导生根获6株潮霉素抗性植株,经PCR及PCR-Southern杂交检测,6株均呈阳性,证明CH5B基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中.由于CH5B基因与报告基因GUS处于同一开放阅读框(ORF)内,因此通过GUS基因的组织化学染色分析,证明了6株转化植株几丁质酶基因均获得正常表达.     

转betA基因小黑杨的耐盐性分析及优良转基因株系的选择

在前期获得13个小黑杨转胆碱脱氢酶基因(betA)株系的基础上,选择9个生长正常的转基因株系与非转基因对照,用0、100、140、170、200 mmol·L-15种浓度的NaCl处理盆栽苗木,分2、7、12、17、22 d取处理材料叶片,测定转基因株系叶片中外源基因的最终合成产物--甜菜碱含量.盐处理60 d后,测定苗木高度及转基因株系的盐害指数.结果表明,转基因株系与对照间的甜菜碱含量差异达到极显著水平,9个转基因株系的甜菜碱平均含量超过对照的27.1%;转基因株系的平均盐害指数较对照低15.8%;转基因株系的平均高度超过对照44.1%.综合转基因株系的生长速度,兼顾其耐盐性,初步选择转基因株系T4、T6、T5、T1作为生长速度快耐盐性高的优良株系.     

耐盐基因Bet—A转化小黑杨的研究

本研究建立了小黑杨 (Populussimonii×P .nigra)组培再生体系 ,确定小黑杨芽分化最适宜培养基、生根培养基 ,然后进行卡那霉素敏感性试验。以小黑杨无菌苗叶片为转化受体材料 ,通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefacien)介导法将外源基因Bet A(编码胆碱脱氢酶 ,催化胆碱生成甘氨酸甜菜碱 )导入小黑杨(P .simonii×P .nigra)。对获得的 11株转化苗进行了PCR扩增检测和斑点杂交检测 ,其中 7株获得了 1 7Kb特异性扩增条带和杂交斑点 ,表现为阳性。从斑点杂交检测的转化苗中选取 3株杂交斑点明亮的转化子进行Southern印迹杂交分析 ,结果证实外源基因已整合到小黑杨基因组中     

L35等黑杨新品种抗逆性研究

以山东省新选出的3个速生黑杨品种和I-69(Populusdeltoides'Lux'I-69/55)(CK)为材料,研究了4个黑杨新品种的耐寒性、耐旱性和耐盐性能,测定了各品种在不同低温水平下的电导率(P)的变化,离体叶片在恒定温、湿度条件下不同时间失水率的变化以及在一定含盐量土壤中的成活率和生长量。结果表明:L323(P.deltoides'L323'),L324(P.deltoides'L324')和L35(P.×euramericana'L35')3个黑杨新品种在耐寒性、耐旱性和耐盐性能均优于I-69(CK)。     

落叶松枯梢病寄主抗病机制的研究

对落叶松枯梢病寄主抗病机制进行系统研究发现,易感病品种(如华北落叶松)开始抽新梢时间都提前7~15 d,抗病品种(如日本落叶松)开始抽新梢时间都晚10~15 d;落叶松品种K 、Mn 含量低、儿茶酸含量高时则抗病;证明了落叶松枯梢病的发生与新梢含水率的关系呈正相关。提出利用寄主抗病机制的研究结果鉴定抗病良种的生理生化数量指标为:(1)落叶松不同品种在同一栽植地点开始抽新梢的时间变化:(2)K 、Mn 及儿茶酸的含量。     

杨树木材变色病病原菌的鉴定

杨树木材变色病已影响了我国木材工业从粗放加工型向精细加工型的发展,已给木材工业带来重大经济损失。山东杨树木材变色病主要为褐变和红变。经分离培养、纯化、接种试验,依其培养性状和形态学特征,鉴定出杨树褐变、红变变色病的病原菌分别为Lasiodiplodia theobromae和Fusarium decemcellulare。     

白腐菌预处理对杨木硫酸盐法制浆性能的影响

以杨木和白腐菌为研究对象,测定白腐菌预处理前后杨木化学组成与纤维形态的变化,找出合适菌株和最佳的预处理时间,进行硫酸盐法制浆前的预处理,比较制浆后浆料的卡伯值、得率、黏度和纸张的物理性能.结果表明:对木质素降解程度由大到小为香菇菌、云芝菌、杂色木云芝菌、脉射菌、佛罗里达侧耳和糙皮侧耳,香菇菌对综纤维素的降解程度最大,杂色木云芝菌的降解最小;预处理后,杨木纤维平均长度略有降低,纤维的长宽比得到了提高,壁腔比下降;与参照样相比,经脉射菌、杂色木云芝菌和佛罗里达侧耳预处理后制得的浆料,卡伯值降低、得率增加、黏度增加、脱木素选择性提高,纸张的撕裂指数和抗张指数均增加;经过香菇菌预处理后得到的浆料,虽然卡伯值降低、脱木素选择性增加,但是黏度和得率却在下降,纸张的撕裂指数和抗张指数减小.经过这4种白腐菌预处理后,纸张的耐折度和白度均大于对照.     

诱导杨树抗溃疡病机理的研究

用１００、５００、１０００ｐｐｍ－浓度的５４０６细胞分裂素和稀土分别诱导群众杨的离体枝条，３ｄ后进行接种。实验证明，用“５４０６”发病率降低了６３．３％～７０％，病情指数降低了５１．５～６５．２；用稀土发病率降低了６０％～７０％，病情指数降低了２９．１～７３．９。接种后的群众杨皮部ＳＯＤ活性在７２～９６ｈ内达到最高峰，以后逐渐下降，并趋于稳定；呼吸强度４８ｈ达到最大值，９６ｈ明显减弱，并基本稳定。发病后，皮部总蛋白含量增加１．７～４．４倍（对照总蛋白含量仅增加０．９倍），增加的量随诱导剂的浓度增大而增多。     

外生菌根菌和植物生长物质复合制剂对杨树扦插苗生长及抗逆性的效应

通过扦插试验研究了由植物生长物质和树木菌根菌组成的复合制剂对108杨扦插苗成活率、苗高、地径、根茎比、菌根侵染率、毛根数、生物量、树体电容、叶绿素含量以及抗病性相关酶活性等指标的影响。发现复合制剂可以促进苗木的根系生长，苗木根系的毛根数、菌根侵染率及根茎比指标较对照有显著提高；可以促进苗木地上部分的生长发育，成活率、苗高、地径、生物量、叶绿素含量、长势等指标较对照均有显著提高；可以提高苗木的抗病能力，苗木的树皮相对膨胀度、过氧化物酶活性、多酚氧化酶活性及苯丙氨酸解氨酶活性较对照均有显著提高。经IBA溶液浸泡处理亦可有效提高苗木的生长，但整体效果不及复合制剂的最佳处理。初步确定了复合制剂的最有效成分配比及处理方法。     

杨树苗期抗寒性综合指标的研究

文章以11个杨树无性系的一年生枝条为试验材料,以采用连续低温处理和4次冻融间隔处理后的枝条萌芽率作为衡量指标,结果表明:中绥12杨抗寒速生,适应性强。     

杨树的农林间作

论述了杨树实行农林间作重要意义,介绍了以林为主的农林间作和在平原农区的少地少林区采取杨树团状配置的实践。     

杨树抗寒性研究进展

在综述国内外植物抗寒性研究进展和方法的基础上, 阐述杨树抗寒性研究的最新动态, 认为通过对相对电导率、脯氨酸、可溶蛋白、可溶性糖、丙二醛及保护酶系统、水分参数等指标的综合分析, 能够对植物的抗寒性做出科学的判断; 同时, 分析植物抗寒性研究的最新发展趋势, 提出进一步开展杨树抗寒性研究的方向。     

杨树苗木带菌状况与烂皮病发生关系的研究

室内和田间诱发试验及山东造林定植试验表明：春季定植后杨烂皮病的发生与危害，主要来源于苗木带菌。不同苗源的苗木生长状况及带菌量不同，定植后发病与危害程度有较大差异，杨树苗圃周围又有发病大树，杨苗带菌率高，定植后发病重。清除苗圃周围病源，减少苗木带菌数量，苗期和栽前集中喷药预防，是控制该病的重要环节。