犬Ⅱ型腺病毒的分离鉴定

在做犬腺病毒分子流行病学调查的过程中，从送检的犬粪便中分离出多株犬腺病毒，并对其中１株进行了系统鉴定。经形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学鉴定，证明为１株犬传染性喉气管炎病毒的强毒，即犬Ⅱ型腺病毒。     

一例犬细小病毒与圆环病毒混合感染的诊断报告

本试验的目的是对1例以呕吐和血便为突出症状的6月龄博美犬进行病原检测。采用PCR方法检测了犬细小病毒、犬冠状病毒、犬瘟热病毒、犬圆环病毒和犬星状病毒五种致犬腹泻的病毒,结果显示为犬细小病毒和犬圆环病毒的混合感染。本试验为犬病毒性腹泻的病原诊断提供了参考。     

犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立

通过分析对比GenBank公布的几株犬Ⅰ型腺病毒序列,针对犬Ⅰ型腺病毒特有的E3区,设计了1对特异性引物。对引物浓度、退火温度、扩增体系等条件优化后,建立了犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法,并对40份CAV-Ⅰ人工感染银黑狐的粪便样品进行了检测。结果表明,与普通PCR相比,建立的犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性强的特点。该检测方法可用于Ⅰ型犬腺病毒的快速诊断与监测,并能够定量分析CAV-Ⅰ的感染程度。     

犬传染性喉气管炎病毒南昌株的分离鉴定

在与解放军军需大学合作进行犬腺病毒分子流行病学调查过程中，从南昌送检的犬粪便中分离出多株犬腺病毒，并对其中1株进行了系统鉴定，经形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学鉴定，证明为一株犬传染性喉气管炎病毒（犬2型腺病毒）的强毒。     

核酸探针检测犬冠状病毒方法的建立和初步应用

以^32P标记犬冠状病毒特异性RT—PCR及产物制成核酸探针，与CCV NL-18株、犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒、狂犬病病毒反转录产物、正常CRFK细胞以及做10～10000倍稀释的CCV NL-18株反转录产物杂交，进行核酸探针的敏感性和特异性试验。结果表明，该探针仅与CCV HLl8株反转录产物呈阳性杂交，与对照病毒和正常细胞反转录产物均呈阴性反应。初步应用试验结果，该探针可与国内CCV分离病毒YSl、CI1株杂交，且可从8份腹泻犬粪便中检出5份CCV阳性病料。本研究为在我国开展犬冠状病毒感染的分子流行病学调查和临床诊断提供了一种敏感、特异的检测方法。     

犬传染性气管支气管炎相关的呼吸道病毒研究概况

犬传染性气管支气管炎或犬窝咳是世界各地的犬类中常见的一种疾病。引起该病的病原有多种,包括犬副流感病毒、犬腺病毒、支气管败血波氏杆菌、支原体、马链球菌兽疫亚种、犬疱疹病毒以及犬呼肠孤病毒-1、2、3型等。几种病原的混合感染能够加重疾病的严重程度。近些年,A型流感病毒以及冠状病毒感染成为引起犬类急性呼吸道疾病的重要病原。本文主要介绍了上述常见的犬呼吸道病毒。     

犬Ⅰ型腺病毒的分子生物学研究进展

犬腺病毒Ⅰ型（CAV-1）是传染性犬肝炎（infectious canine hepatitis，ICH）的病原。犬及狐对本病毒易感，各种年龄特别是2月龄到1岁的幼犬易感性更大，自然条件下还可感染狼、猫、浣熊、黑熊等。该病毒可引起急性败血性传染病，主要表现肝炎和眼部疾患，狐狸则表现为脑炎。病毒存在于急性感染病例的全身组织以及各种分泌物、排泄物中，在慢性感染病例中，病毒主要存在于肾脏，     

昆明某犬场犬传染性肝炎的病毒分离鉴定及防治研究

在犬腺病毒分子流行病学调查过程中，从昆明某犬场发生的一起临床上表现犬传染性肝炎的病犬脏器中，分出了１株病毒（ＣＡＶ－１－ＫＭ），并对其进行了病毒形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学系统鉴定，证明为一株犬传染性肝炎强毒，用特异性的抗犬生肝炎免疫血清对处于危险中的犬，进行了紧急预防注射，有效地控制了疾病的流行。用犬Ⅱ型腺病毒疫苗作预防注射，一年多来该犬场再未发生该病。     

北京地区犬呼吸道冠状病毒感染状况的监测与分析

本研究旨在分析犬呼吸道冠状病毒(canine respiratory coronavirus, CRCoV)的感染情况和在北京地区的流行病学状况。采用RT-PCR方法,对自2015年12月—2017年3月于中国农业大学动物医院采集的487份犬咽鼻拭子进行了CRCoV检测,同时,对部分样本进行了犬副流感病毒(canine parainfluenza virus, CPIV)、犬腺病毒II型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬瘟热病毒(canine distemper virus, CDV)等病毒的混合感染情况调查。结果表明：CRCoV的阳性率为21.36%(104/487);CRCoV与CPIV、CAV-2、CDV的混合感染率分别为3.43%(11/321),0%(0/156)和3.85%(6/156)。在所有呼吸道症状记录完整的455例样本中,无呼吸道症状的犬CRCoV携带率为27.19%(31/114);呈轻度呼吸道症状(鼻液、咳嗽)的犬CRCoV感染率为19.73%(59/299);呈中至重度呼吸道症状(肺炎)的犬CRCoV感染率为14.28%(6/...     

混合感染病例中犬冠状病毒变异株的分离鉴定

某犬群发生具有呼吸道和消化道症状的传染病,86只幼犬发病,治愈65只,死亡21只.为确诊病原,用MDCK细胞,从死亡犬肠道病料中分离到2株病毒,经理化学鉴定、动物复归试验、电镜检查、PCR检测证明为犬冠状病毒和犬腺病毒2型,定名为CCV-KM和CAV2-KM,确认此次犬群发病由CCV和CAV2混合感染所致.其中对CCV的分离采用含CCV和CAV2的混合感染病料攻击耐过CAV2的幼犬,导致幼犬单纯感染CCV发病后采集的病料.动物试验表明,CCV-KM株可以导致幼犬发病,具有较强的毒力;CCV-KM能被较高浓度的抗CCV1-71参考毒株的血清中和,而抗CCV-KM的血清却不能中和CCV1-71毒株,说明两者在抗原性和致病性上存在差异;基因测序结果表明,CCV-KM的M基因212 bp序列同其他已知CCV的基因序列差异较大,在进化树的位置上介于CCVⅠ型和CCVⅡ型之间,较偏向CCVⅠ型.提示CCV-KM株可能是一个新的变异株.     

犬腺病毒CAV-BJ02株的分离与鉴定

本研究旨在分离犬腺病毒（CAV）的北京地区流行株,采集北京地区某宠物医院2~4月龄发生咳嗽等呼吸道症状犬的鼻咽拭子,经胶体金和PCR检测,初筛为犬腺病毒阳性。经过处理后,将其处理液接种于MDCK细胞,进行连续传代培养,出现变圆、脱落、葡萄串样等特征性细胞病变。通过形态学观察、PCR鉴定及动物回归试验等方法对其进行鉴定。PCR扩增片段测序结果表明,该分离株为犬腺病毒Ⅱ型,遂将其命名为CAV-BJ02（GenBank：MN744708）株。用Reed-Muench法测得CAV-BJ02株的TCID₅₀为10^6.7·（100 μL）^-1。电镜下可清晰地观察到呈正六边形的二十面体、直径在86 nm左右的犬腺病毒颗粒。遗传进化分析结果表明,本株病毒为CAV-Ⅱ型。动物回归试验结果表明,CAV-BJ02株可引起犬发热等轻微临床症状,以口鼻分泌物为主要排毒方式,排毒期为5~6 d,不导致犬死亡。上述研究结果为深入了解北京地区CAV的流行情况,为犬腺病毒病的诊断、防治及后续相关研究奠定了理论基础。     

犬腺病毒I型和II型TaqMan双重荧光定量PCR方法的建立

为鉴别检测犬腺病毒（CAV）I型和II型,根据GenBank中CAV-I和CAV-II型参考基因序列,设计合成1对通用引物和2条鉴别探针,建立了可鉴别检测CAV-I型和CAV-II型的双重荧光定量PCR检测方法。同时,对该方法进行了优化,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了试验,并与普通PCR检测方法进行样品检测符合率分析。特异性试验结果显示;本研究建立方法对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬冠状病毒均未产生扩增曲线。敏感性试验结果显示,建立方法对CAV-I的检测敏感度为100 copies/μL,对CAV-II的检测敏感度为10 copies/μL。重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于5%。临床样品检测对比结果显示,建立方法与普通PCR方法的符合率为95.12%。结果表明,本研究建立的TaqMan双重荧光定量PCR方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,可用于临床鉴别检测CAV-I和CAV-II型。本研究为CAV-I和CAV-II型感染的检测、鉴别以及流行病学调查提供了便捷快速的方法。     

犬腺病毒Ⅰ型和Ⅱ型Taq Man双重荧光定量PCR方法的建立

为鉴别检测犬腺病毒(CAV)Ⅰ型和Ⅱ型,根据GenBank中CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ型参考基因序列,设计合成1对通用引物和2条鉴别探针,建立了可鉴别检测CAV-Ⅰ型和CAV-Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法。同时,对该方法进行了优化,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了试验,并与普通PCR检测方法进行样品检测符合率分析。特异性试验结果显示;本研究建立方法对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬冠状病毒均未产生扩增曲线。敏感性试验结果显示,建立方法对CAV-Ⅰ的检测敏感度为100 copies/μL,对CAV-Ⅱ的检测敏感度为10 copies/μL。重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于5%。临床样品检测对比结果显示,建立方法与普通PCR方法的符合率为95.12%。结果表明,本研究建立的Taq Man双重荧光定量PCR方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,可用于临床鉴别检测CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ型。本研究为CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ型感染的检测、鉴别以及流行病学调查提供了便捷快速的方法。     

犬Ⅱ型腺病毒蚀斑技术的建立和初步应用

犬Ⅱ型腺病毒(CAV-2)是犬喉气管炎的病原,通常只引起轻微的呼吸道疾病[1],但是在其它病毒或细菌继发感染的情况下可诱发较严重的肺炎、支气管炎、扁桃体炎[2],直接影响我国军、警犬和实验犬的培育、训练和使用.本文拟建立一个广泛适用的犬腺病毒蚀斑技术,为进一步以犬腺病毒为载体的重组弱病毒疫苗的筛选提供一个有效的技术方法.介绍如下.     

犬呼吸道病毒研究综述

传染性气管支气管炎或犬窝咳是世界各地的犬类中常见的一种疾病。引起该病的病原有多种,包括犬副流感病毒、犬腺病毒、支气管败血波氏杆菌、支原体、马链球菌兽疫亚种、犬疱疹病毒以及犬呼肠孤病毒-1,2,3型等。几种病原的混合感染能够加重疾病的严重程度。近些年,A型流感病毒以及冠状病毒感染成为引起犬类急性呼吸道疾病的重要病原。     

犬呼吸道病毒研究综述

传染性气管支气管炎或犬窝咳是世界各地的犬类中常见的一种疾病。引起该病的病原有多种,包括犬副流感病毒、犬腺病毒、支气管败血波氏杆菌、支原体、马链球菌兽疫亚种、犬疱疹病毒以及犬呼肠孤病毒-1,2,3型等。几种病原的混合感染能够加重疾病的严重程度。近些年,A型流感病毒以及冠状病毒感染成为引起犬类急性呼吸道疾病的重要病原。     

犬传染性呼吸道疾病的诊断

犬传染性呼吸道疾病是犬类的常见疾病。至少有9种病原微生物被认为在犬传染性呼吸道疾病发生过程中起着重要作用,它们分别是支气管败血波氏菌、马链球菌兽疫亚种、支原体、犬流感病毒、犬瘟热病毒、犬呼吸道冠状病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒、犬疱疹病毒。本文主要介绍了这些疾病的诊断方法。     

东北虎感染犬腺病毒Ⅰ型病例分析

2018年9月5日,吉林省野生动物救护繁育中心发生1例自繁自养的东北虎感染犬腺病毒Ⅰ型病例。该病例从发病到死亡病程较长,以食欲下降至废绝,饮水量降低,精神萎靡不振,呕吐,眼窝凹陷为特征。剖检发现,肝脏颜色暗黑,肾脏肿大,脾脏肿大,胃部有出血,牙龈及口腔色泽苍白无血色。临床血液生理生化指标检测显示,此虎贫血,肝、肾功能损伤。通过试纸条检测确诊感染犬腺病毒Ⅰ型病毒。     

犬Ⅰ型腺病毒TN株的分离鉴定

应用MDCK细胞采用单层吸附接毒和带毒传代的方法，从新疆阿克苏送检的犬粪便中分离出1株犬腺病毒，并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的TN株为1株CAV－I病毒的强毒株。