灵芝液体发酵培养基筛选研究

[目的]优选灵芝液体发酵的最优培养基。[方法]以不同碳源的培养基培养灵芝,研究不同碳源对灵芝液体发酵菌丝生长情况及生物量和多糖含量的影响。[结果]玉米粉水解液发酵得到的灵芝菌丝体生物量最大;不同培养基发酵得到的菌丝体生物量大小顺序为玉米水解液〉玉米粉〉葡萄糖＋玉米粉〉蔗糖＋玉米粉〉麦芽糖＋玉米粉〉葡萄糖＋麦芽糖〉蔗糖;灵芝菌丝体多糖含量顺序为麦芽糖＋玉米粉〉葡萄糖＋玉米粉〉玉米粉〉玉米水解液〉葡萄糖。综合各方面因素,选择玉米粉为灵芝液体发酵的最优培养基。[结论]筛选出灵芝液体发酵的最佳培养基为以玉米粉为碳源的培养基。     

28个灵芝菌株品比研究

对28个灵芝菌株的栽培性状、子实体商品特性进行比较,结果表明,信中、信州、韩1的菌丝生长旺盛,原基形成时间和菌盖分化期较短,单芝产量达110g/个以上,菌盖肾形,直径大于11 cm,子实体丛生,综合性状良好.     

11个灵芝菌株的栽培性状和酯酶同工酶研究

利用短段木熟料栽培法对11个灵芝菌株进行栽培，结果表明：不同灵芝的栽培性状互有差异。其中8、新6、6、12、13具较好的栽培性状（产量高、子实体形状好、产孢量大）。此外，通过PAGE分析，并分别测定相关的酶谱相似度（T）和联合系数（S），结果发现：S1与其余各菌株间的差异最为明显。与其它菌株的亲缘关系最远；亲缘关系最近的是6新6、新6C1、13C3（T，S值最大，T＝1，S＝1，6、新6、C1三菌株酶带数量和位置一样，但酶活性存在区别）；另外具有较好栽培性状的菌株（8、新6、6、12、13）其酶活性都较强，表现为酶带宽且色深。     

不同核数的灵芝菌丝体转录组比较分析

以野生灵芝[Ganoderma lucidum(Leyss. ex Fr.)Karst.](D)、自然单核灵芝（Mo）、双核灵芝（Mu）的菌丝体为材料,利用高通量测序技术筛选差异表达基因,并进行GO分析和KEGG富集分析。通过差异基因分析,筛选出568个差异表达基因。GO分析结果表明,野生灵芝（D）与自然单核灵芝（Mo）菌丝体的差异表达基因主要富集在转录调控及DNA模板化、tRNA氨酰化、组蛋白甲基化等过程;野生灵芝（D）与双核灵芝（Mu）菌丝体的差异表达基因主要富集在染色质沉默、L-丝氨酸代谢、硫化合物代谢等过程;自然单核灵芝（Mo）与双核灵芝（Mu）菌丝体的差异表达基因主要富集在染色质沉默、DNA模板转录、谷氨酸分解等过程。KEGG富集结果表明,自然单核灵芝（Mo）与双核灵芝（Mu）菌丝体在代谢通路上有明显的差异,差异基因主要被注释到过氧化物酶、维生素代谢等通路。野生灵芝（D）与自然单核灵芝（Mo）菌丝体、野生灵芝（D）与双核灵芝（Mu）菌丝体的差异基因并没有KEGG富集的结果,说明其代谢通路没有明显差异。筛选出3个品系中表达量差异均显著的基因,共12个,并对基因的主要功能进行预测...     

海南产灵芝Ganoderma sp.室内栽培方法研究

灵芝是一类木腐真菌,具有重要的药理价值,灵芝栽培方法研究能为实际应用提供技术支撑。本研究选择一株分离自海南五指山的灵芝进行室内栽培方法研究,并分析其出芝和菌盖形成的动态变化规律以及子实体的形态特征。结果表明,灵芝出芝动态具有显著的规律性,随着时间的进行,出芝逐渐减少;而菌盖形成没有明显的时间规律。此外,室内栽培灵芝出芝率及菌盖形成率较高,但子实体大小相对大田栽培灵芝小,反映了可通过增加栽培原料的营养成分提高灵芝子实体大小,为进一步推广应用室内栽培方法提供参考。     

不同灵芝菌株产量比较试验

通过对日平、TZ、泰山等28个灵芝菌株子实体的生长特性、产量和转化率的分析比较,筛选出TZ、日平、信州、信中等高产优良菌株,其转化率均达到50%以上,子实体丛生,出芝整齐,产量稳定,后续生长力强;美灵、合立适合早产栽培,菌丝长速快,开袋仅22d即可采收,子实体单生,半圆形,菌盖大,出芝整齐。生产者可根据不同需要选择不同品种。     

灵芝富硒栽培研究

[目的]研究不同浓度的Na2SeO3对灵芝产量、质量和硒富集量的影响。[方法]采用平板自然选育法对灵芝菌种进行筛选,将筛选出的菌种进行栽培试验,以生物量和菌丝多糖产量为指标,考察不同浓度的Na2SeO3对灵芝产量、质量和硒富集量的影响。[结果]平板筛选结果表明,泰芝一号灵芝的菌丝体生物量最高,多糖产量最高,因此选择泰芝一号作为富硒栽培试验对象;在液体培养液中添加不同浓度的Na2SeO3,可有效促进菌体的生长,但对于菌体多糖的合成则没有明显的促进作用,当添加的Na2SeO3浓度达到0.08%时,菌体生物量达到最大;栽培培养基中添加不同浓度的Na2SeO3对灵芝的生长和多糖的合成均有一定的促进作用;灵芝子实体中硒含量随着Na2SeO3浓度的增加而增加。[结论]栽培培养基中添加Na2SeO3对灵芝子实体的生长及多糖的合成均有一定的促进作用。灵芝子实体中硒含量随着Na2SeO3浓度的增加而增加。     

不同栽培模式下灵芝菌株农艺性状和活性成分研究

了解不同灵芝菌株的差异,探究其最佳的栽培模式,可为灵芝精深加工源头提高优良的栽培品种和栽培模式。通过不同栽培模式对4个灵芝菌株其子实体农艺性状和活性成分进行研究,结果显示,段木栽培中黄灵芝子实体农艺性状表现最好,代料栽培中野生灵芝子实体农艺性状表现最佳;段木栽培中平芝多糖和三萜含量最高;代料栽培中野生灵芝多糖含量最高,而平芝三萜含量最高。灵白、平芝和黄灵芝其多糖和三萜含量段木栽培皆高于代料栽培,野生灵芝其多糖和三萜含量代料栽培明显高于段木栽培。由此可见,不同灵芝菌株适宜于不同的栽培条件和栽培模式,这为选择获得活性成分高的专有灵芝菌株及相应的栽培模式提供参考。     

不同栽培模式对灵芝菌株农艺性状及活性成分积累的影响

探究段木栽培模式及代料栽培模式对不同灵芝菌株主要农艺性状及活性成分积累的影响,以确定灵芝子实体优质高效栽培模式。分别以段木及代料(木屑、麦麸、石膏)为栽培原料,比较两种不同栽培模式下,不同灵芝菌株菌丝平均生长速度、菌丝长势、菌丝长满菌袋时间、菌丝特征以及灵芝子实体单重、菌柄长度、菌柄直径、菌盖直径、菌盖厚度、生物学效率等主要农艺性状。采用药典及国标方法检测灵芝子实体三萜及甾醇、多糖、蛋白质、16种氨基酸含量,比较不同栽培模式对灵芝子实体主要活性成分积累的影响。研究结果表明,6个供试灵芝菌株在不同栽培模式下,菌丝平均生长速度、菌丝长势、菌丝长满菌袋时间、菌丝特征均存在一定差异。不同栽培模式下供试灵芝菌株子实体质量、菌柄长度、菌柄直径、菌盖直径、菌盖厚度、生物学效率等主要农艺性状差异较大,段木栽培模式下灵芝菌株CZ22子实体质量最大(117.15 g),生物学效率最高(7.54%),代料栽培模式下灵芝菌株CZ22子实体质量最大(40.58 g),生物学效率最高(9.02%)。不同栽培模式下相同灵芝菌株子实体三萜及甾醇、多糖含量存在一定差异,代料栽培模式下灵芝菌株CZ27子实体中三萜及甾醇含...     

富硒灵芝菌株的选育及发酵性能研究

[目的]选育富硒灵芝高产菌株并研究其液体发酵性能。[方法]应用添加Na2SeO3的培养基筛选富硒能力较强、菌体生物量及菌体多糖产量均较高的菌株,并研究其发酵性能。[结果]筛选到菌株Ganoderma lucidumZ-4-25,在液体培养基中添加浓度0.08%的Na2SeO3即能有效促进菌体生长,在浓度0.16%的Na2SeO3液体培养基中培养192 h,灵芝菌粉有机硒含量达到13 000μg/g菌体。在添加浓度0.08%的Na2SeO3条件下,10 L发酵罐发酵216 h,菌体生物量干重达到26.82 g/L,灵芝菌粉有机硒含量达到9 800μg/g菌体。[结论]该研究为富硒灵芝的液体发酵生产奠定了基础。     

聊城灵芝种植的气象条件适宜性分析

[目的]分析灵芝（Ganoderma Lucidum）对气象条件的要求,并探讨聊城市适宜灵芝种植的气象因子灾害性天气。[方法]根据灵芝对气象条件的要求,通过分析聊城市4～10月的月平均气温和月平均相对湿度;最后针对聊城市每年4～10月发生的灾害性天气提出了防御措施。[结果]在聊城4月下旬比较适宜灵芝种植接种。[结论]该研究可为地方政府部门决策及灵芝的种植者提供参考。     

灵芝工艺化栽培技术研究

从培养料、酒精浓度和CO2浓度等方面对灵芝工艺进行了研究。结果表明：选择适宜的培养料,利用韩芝的生物学特性,通过药物处理和不同CO2浓度处理等手段,可以对灵芝造型起到很大的促进作用。     

不同硒源栽培模式下紫芝的富硒研究

[目的]研究不同硒源栽培模式下紫芝的富硒情况。[方法]微波消解-ICP-MS法对不同栽培模式富硒紫芝中的Mg、Ca、Fe、Cr、Co、Cu、Zn、As、Cd、Pb、Se、Ag、Hg 13种元素进行测定和基质中的Se检测。通过添加无机硒元素(亚硒酸钠、活化硒矿)富硒栽培和天然富硒原料富硒栽培,研究不同硒源栽培模式下紫芝的富硒情况。[结果]14个富硒样品中检测出Mg、Ca、Fe、Cr、Co、Cu、Zn、As、Cd、Pb、Se,未检出Ag、Hg这2种元素。添加亚硒酸钠为硒源时,当基质中硒含量为41.00 mg/kg,富硒效果最佳;当基质中硒含量大于110.00mg/kg,富硒效果较差。在添加活化硒矿为硒源时,富硒效果较差。其他元素含量较接近。[结论]添加亚硒酸钠硒源比添加活化硒矿硒源的富硒效果较好。     

观赏灵芝高产栽培技术研究

以美国大灵芝为试验材料,探讨了灵芝栽培时的接种量、培养料、每袋培养料装量、专用肥加用量、栽培方式和培养料C/N与产菇的关系.结果表明,接种量为30袋时灵芝产量最高;灵芝产量高低与每袋培养料装量成正相关(培养袋越大,产量越高);后期专用肥的施用会使灵芝增产;半覆七及覆土栽培要比传统的袋培增产,其中覆土增产更为明显,增产24.9%,而且成熟期比传统袋培提前了5～10 d;C/N低的培养料(添加占培养料5%的牛粪)要增产24.8%.     

灵芝液体发酵的研究

从7个灵芝菌种中筛选产灵芝多糖较多且生长较快的菌株紫灵芝,并以紫灵芝为菌种,研究了不同氮源、碳源及金属离子对产灵芝多糖的影响。结果表明,最佳碳源为2%的蔗糖,最佳氮源为0．2%的玉米粉,0．2%的Fe~(2 )有利于粗多糖产量的明显提高。发酵罐放大实验表明,每100 mL发酵液胞外粗多糖含量最多达1460．7 mg,菌丝体含量最多达到571 mg,pH值的变化比较缓和,发酵罐发酵更适合于灵芝多糖的分泌。     

灵芝设施化栽培关键技术

对设施大棚下袋料栽培灵芝的生产工艺,特别是关键技术环节进行了较为详尽的阐述。     

赤芝菌株的SCAR标记鉴别

赤芝是种重要的药用真菌,品种繁多,由于目前食用菌管理制度不完善,为稳定菌株质量迫切需要建立起快速鉴定赤芝菌株的有效办法。在对赤芝（Ganoderma lucidum）菌株进行SRAP多态性分析基础上,将属于某几个菌株的SRAP特异片段转化为稳定性较高的SCAR标记,共获得17个SCAR标记。聚类分析显示,供试的23个赤芝菌株在遗传距离0.63下分为4类,其中19个菌株在遗传距离0.50下聚成一类。将其中的9个SCAR标记线性组合,建立起赤芝菌株的多标记综合鉴别法,可对供试的23个菌株进行有效鉴别。由此可见,SCAR分子标记能很好地解释赤芝菌株间的亲缘关系,是种快速、稳定、准确鉴别赤芝菌株的方法。