印楝素抑菌活性的研究

印楝(Azadirachta indica A.Juss)系楝科楝属乔木，被美国农业部誉为“可解决全球问题之树”。从印楝植株中发现了以印楝素(Azadirachtin)为主的80余种活性物质，可防治10目400余种农林、仓库和卫生害虫，是理想的生物杀虫剂，但其杀菌活性的研究在国内尚属空白。本研究选用公认的质控菌株，对其抑制细菌生长活性进行了研究。     

印楝质杀虫剂的生物活性及作用机制研究进展

印楝质杀虫剂对昆虫有忌避、拒食、干扰生长发育、降低生殖力等多方面的生物活性。印楝质杀虫剂对不同昆虫的取食影响差异较大，鳞翅目昆虫较敏感。对不同昆虫的生长发育、生殖等方面的效应较为一致，但处理方法对效果有影响，注射处理比点滴、口服效果好。印楝质杀虫剂的作用机制包括：（1）影响触角、跗节、产卵器化上化学感受器的功能导致忌避作用；（2）影响口器上厌食及其他化学感器产生初生拒食反应；（3）作用于消化系统形成次生拒食反应；（4）障碍形态发生肽类激素的释放，影响蜕皮激素、保幼激素滴度，抑制生长发育并使生殖力下降；（5）抑制细胞分裂、损害发育中的器官组织。印楝质杀虫剂在细胞、分子生物学水平上的作用机制尚待阐明。     

快速搅拌法室温浸提印楝油和印楝素

在室温下用间歇式快速搅拌法从印楝种仁中浸提印楝油和印楝素。讨论了料液比以及浸提时间对得率的影响。结果表明:印楝种仁300g,以750mL石油醚做溶剂,在快速搅拌条件下浸提21min时印楝油得率最高;将300g去油后的印楝种仁以900mL甲醇做溶剂,在快速搅拌下浸提21min时印楝素得率最高。由此得出,快速搅拌法浸提印楝油的最佳条件是:溶剂石油醚、料液比1∶2.5(g∶mL,下同)、时间每次7min、浸提3次,出油率30.4%;快速搅拌法浸提印楝素的最佳条件是:溶剂为甲醇、料液比1∶3、时间每次7min、浸提3次,印楝素A的得率为0.438%,印楝素B的得率为0.142%。     

菲律宾发展“天然杀虫剂”——印度楝

印度楝(Azadircchta indica A.Juss)在菲律宾被誉为“天然杀虫剂”。迄今为止,人们已经发现印度楝的衍生物能够抵御123种昆虫,可以用于生产“安全”型生物杀虫剂,在害虫综合防治规划中起到生物防治的作用。     

印楝素和苦楝素对植物病原菌的抑制作用

印楝(Azadirachta indica．A．juss)系楝科楝属乔木，被美国农业部誉为“可解决全球问题之树”。从印楝植株中发现了以印楝素(Azadirachtin)为主的80余种活性物质，可防治10目400余种农林、仓库和卫生害虫，是理想的生物杀虫剂。其杀真菌活性的研究在国内未见报道。本文选用4种植物病原菌，测定了其抑菌活性；并与另一种     

新型无公害生物农药印楝素开发成功

近日，我国开发出一种新型无公害生物农药――印楝素。制备印楝素的植物印度楝，是一种防治干热地区荒漠化的优良树种，同时也是制备无公害生物农药利用价值最高的植物。在我国，云南省是最适宜种植印度楝的地区，从1995年开始引种，已造林成活1 666.67 hm2。专家认为，这项成果不仅有力地促进了中国无公害生物农药的研究、开发和生产，而且通过种植印度楝还将有助于生态环境恶劣和经济欠发达地区的农民脱贫致富，对区域经济的发展起到积极推动作用。 新型无公害生物农药印楝素开发成功     

超声波用于强化有机溶剂提取印楝素

研究了用超声波强化有机溶剂提取印楝素的工艺过程，分别考察溶剂、料液比、超声波作用时间、超声波功率对提取率的影响实验发现，较理想的提取条件为：13．3g印楝种仁粉，料液比1：2，超声波功率200W；超声波作用时间与溶剂有关。甲醇15min、乙醇20min、乙酸乙酯10min；3种溶剂较佳提取率分别为0．3786％、0．3658％、0．2462％提取样晶利用高效液相色谱仪采用外标法测定提取物中印楝素的含量。实验结果表明，超声波强化提取与搅拌提取相比，不仅缩短了提取时间，而且提取率有所提高。     

室温粉碎搅拌法从印楝种仁中萃取印楝素的研究

用快速粉碎搅拌的方法从印楝种仁中萃取印楝素,分别研究了萃取时间、溶剂的选择及用量对印楝素萃取产率的影响。优化的工艺条件为:208g去油后的印楝种仁(相当于300g印楝种仁),以750ml甲醇做溶剂,在快速粉碎搅拌下萃取21min即可以达到最高萃取产率,与微波辅助法、超声波法、浸提法相比,具有提取率高、设备和操作简单、节约溶剂、快速等特点。     

微波辅助法提取印楝素的研究

介绍了一种有效利用微波辅助从印楝(Azadirachta indica A.Juss)种仁中提取印楝素的方法。通过考察辐射时间、溶剂、物料比以及辐射功率等因素对提取率的影响，得出结论为：预处理过的印楝种仁粉末6.65g(相当于印楝种仁10g)，以甲醇做溶剂、微波功率210w、物料比1：3(g／mL)、辐射时间为3min*3次，提取率最高。与传统的磁搅拌法相比，该方法不仅工艺简单，而且可以提高产率，缩短提取时间。用高压液相法定量地测定了所提取印楝素的含量，其提取率可达0．519％．     

苦楝果实中川楝素粗提物稳定性研究

为研究溶剂、温度、p H值、光照、添加抗坏血酸和常见金属离子对川楝素稳定性的影响,苦楝果实中川楝素粗提物在甲醇、乙醇、二甲基亚砜、二甲苯+甲醇混合液4种不同溶剂,-4℃、4℃、20℃、40℃、60℃和80℃6种不同温度,p H 2、p H 4、p H 6、p H 8和p H 10等5种不同p H值,253 nm紫外线照射和暗箱,加抗坏血酸,不同金属离子即K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Al3+和Fe3+处理下,分别于第0天、2天、4天、6天、8天、10天、20天和30天取样,在215 nm处用紫外可见分光光度法测定川楝素含量,计算川楝素的降解率。结果表明,川楝素的稳定性随溶剂的极性增加而减弱、随温度的升高而降低,p H值在4~8时较稳定,遇光易分解,抗坏血酸的添加、金属离子对其稳定性影响不大。苦楝果实中川楝素生产、贮存、应用条件建议为,溶剂为甲醇、温度在室温以下、酸性、避光。     

影响印楝素稳定性及其含量的主要因素

印楝素的稳定性及其含量的高低受许多因素的影响。印楝素对光敏感，暴露在光下会逐渐失去活性；室温及低于20℃的贮藏温度有利于印楝素的稳定，而高于室内温度会加速印楝素的降解；印楝素在中性条件下比较稳定，室温条件下，在pH值为4～6的酸性水溶液中也稳定，但在碱性和强酸溶液中不稳定；中性有机溶剂对其稳定性有利。微生物的活动会加快印楝素的降解，不同的地理种源和种植土壤对印楝种实中印楝素的含量高低影响很大，在干季所结果实的种子中印楝素含量高于在雨季种植所结果实的种子。而不同组培条件对组培体的印楝素含量也会产生影响。     

影响印楝愈伤组织生长和印楝素积累主要因素的初步研究

采用干重法和分光光度法分别测量印楝愈伤组织的生长量和印楝素含量,研究了愈伤组织固体培养条件。结果表明,印楝愈伤组织的最适固体培养基为MS NAA 3.0mg/L 6-BA 1.0 mg/L 蔗糖40g/L 琼脂0.7%,以pH值为5.8,培养温度(25±2)℃,光照900Lx培养条件下的印楝素产出率最高,达44.76OD457/皿。     

印楝素的分离、分析和合成研究进展

综述了最近几年分离纯化印楝素的新技术如逆流色谱、快速色谱和真空色谱技术,分析印楝素的特异性免疫技术、常规技术和色谱-质谱(LC-MS)联用技术以及人工首次全合成印楝素取得重大研究进展。     

印楝素在不同剂型中的稳定性研究

印楝素加工后的稳定性是剂型选择的关键,通过对不同剂型添加剂筛选,并测定其稳定性与杀虫活性的关系,从而确定印楝素微乳剂、可溶性片剂和及其添加剂。对美国白蛾三龄幼虫测定,三种剂型,以微乳剂最好,其LD50为1.8375μ/g,次为乳油,可溶性片剂居后。     

印楝素乳油对蜀柏毒蛾的防治效果研究

采用室内浸渍和室外喷雾的方法研究了不同浓度0.25%印楝素乳油对蜀柏毒蛾的防治效果。结果表明:室内药效测定600倍和900倍浓度处理36h之后幼虫的死亡率均达到100%,1 100倍溶液在48h后死亡率达到100%;林间喷药试验中,600倍液、900倍液、1 100倍液在72h后的幼虫死亡率分别为100%、90%和85%。因此,采用0.25%印楝素乳油防治蜀柏毒蛾,其浓度以900～1 100倍液为宜。     

复合微生物杀虫剂大面积防治松毛虫的效果

对用质型多角体病毒和苏云金杆菌制成的复合微生物杀虫剂,在云南南涧、禄丰县大面积对云南松毛虫和思茅松毛虫的防治效果进行了林内调查、定枝套袋观察和室内药效实验,结果表明,林内、袋内和室内的防治死亡率云南松毛虫分别达86％、79％和49％,思茅松毛虫分别为62％、73％和100％,防治效果十分显著。     

高效毛细管电泳法检测印楝素A的初步研究

从理论角度分析了高效毛细管电泳技术检测印楝素A的可能性，并以试验进行证明。在十二烷基硫酸钠（SDS）浓度为25mmol／L、0．02mol／LpH值6．86混合磷酸盐缓冲溶液，甲醇-缓冲溶液（体积比7：3）作为运行缓冲液，分离电压20kV下得到稳定的电流曲线，二极管阵列检测器（PDA）检测波长214nm，在迁移时间2．6min处检测到印楝素A的电泳特征峰，电泳谱图面积积分结果和高效液相色谱分析结果无显著差异。     

大孔树脂对印楝素A吸附纯化的研究

通过比较5种大孔吸附树脂对印楝素A的吸附率和解吸率,成功地筛选出比较理想的树脂。研究结果表明:XAD-1180树脂对印楝素A有较好的吸附和解吸效果。并对其动态吸附、解吸性能进行了考察,发现较佳的吸附条件为:印楝素A质量浓度2.23 mg/mL(溶剂为30%甲醇-水溶液,以下同),流速1 BV/h,饱和吸附量4.5~5 BV;解吸条件为:以50%、60%、70%的甲醇-水溶液梯度洗脱。一次提纯产品的纯度为85.14%,经过二次提纯的纯度可达93.18%。纯化产物经HPLC-MS进一步确认为印楝素A。     

复合生物杀虫剂防治马尾松毛虫研究

用白僵菌、千胜Bt、25%灭幼脲Ⅲ号和1.8%阿维菌素等4种生物杀虫剂的单一药剂和复合生物杀虫剂对马尾松毛虫进行室内毒力测定.结果表明,单一药剂以阿维菌素的毒力效果最佳,而复合生物杀虫剂以阿维菌素4000倍液+千胜Bt2 000倍液+灭幼脲Ⅲ号8 000倍液+白僵菌1.3×105n/ml为最佳组合,毒力效果达90%以上.应用该复合剂防治不同世代的松毛虫,以第1代的效果最佳,迭93.3%,而越冬代仅为73.5%,用其防治越冬代松毛虫幼虫应选择11月之前.     

正交试验法优化超声波提取苦楝果实中川楝素

在单因素试验基础上,选取甲醇浓度、提取时间、料液比、超声波功率等4个主要因素,采用L16(45)无重复试验正交设计和方差分析优化超声波提取苦楝果实中川楝素的工艺条件,研究各因素交互作用对苦楝果实中的川楝素提取率的影响。结果表明,甲醇浓度和料液比2个因素对川楝素提取率有显著影响。苦楝果实中川楝素的超声法提取最佳工艺参数分别为,甲醇浓度70%、提取时间20 min、料液比1 g︰30 m L、超声波功率200 W,在此条件下,川楝素的提取率达到了0.32%。超声提取法提取苦楝果实中川楝素的精密度、稳定性、重复性、加标回收率均良好。