灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

蝴蝶兰无菌播种及快繁技术研究

以蝴蝶兰无菌种子为材料,对蝴蝶兰种子消毒和萌发、原球茎诱导、增殖和分化培养、芽生根培养基、壮苗培养基配方进行研究。结果表明,种子经次氯酸钠和洗衣粉消毒,有利于促进种子萌发和原球茎的形成;最适合种子萌发的培养基为MS＋香蕉泥100g/L＋马铃薯50g/L＋NAA 0.5mg/L;原球茎的形成及增殖培养以MS＋6-BA 2.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋香蕉泥100g/L为佳,分化培养基为MS＋6-BA 0.1mg/L＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥80g/L＋蔗糖20g/L＋活性炭2.0g/L＋卡拉胶7.0g/L。小苗生根培养基为MS＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥100g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L,生根率达98%以上;壮苗培养基为MS＋香蕉泥80g/L＋马铃薯汁50g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L。经过适当驯化处理,将壮苗移栽到疏松的水草或苔藓基质中,注意温度、湿度及光照管理,成活率可达90%以上。     

白芨种子萌发及其原球茎高效增殖体系建立

[目的]筛选白芨原球茎诱导和增殖的最适培养基,建立白芨原球茎高效增殖体系,为白芨种苗工厂化组培生产提供技术支持.[方法]以白芨种子为外植体,筛选适宜其无菌萌发的灭菌方法;以MS或1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长物质和附加物,通过单因素试验,确定最佳光照和温度条件,筛选最适合其原球茎诱导的培养基;通过正交试验,筛选最适合其增殖的培养基.[结果]采用75%乙醇处理白芨蒴果10 min,无菌萌发率达90.0%,且种子萌发不受影响.在原球茎诱导过程中,30.0 μmol/m2·s光照强度和25 ℃温度环境有利于原球茎诱导;最适合原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA.在原球茎增殖过程中,添加土豆泥、椰子汁、香蕉泥等附加物对原球茎增殖有益,其中添加50.0 g/L土豆泥的增殖效果最佳.正交试验结果表明,原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥,增殖倍数达5.270.[结论]建立的白芨原球茎高效增殖体系可在白芨种苗工厂化组培生产中推广应用.     

铁皮石斛种子试管苗的快速繁殖研究

为研究铁皮石斛种子试管苗的快速繁殖技术,以铁皮石斛的种子为外植体。在不同培养基、不同的激素组合进行诱导产生试管苗,用松树皮作为移栽基质。结果表明:铁皮石斛种子在不同激素的培养基上均能萌发;不同培养基对铁皮石斛原球茎的增殖、分化有明显差异,其顺序依次为改良MS>N6>MS>1/2N6>1/2改良MS>1/2 MS,以改良MS培养基最好;不同激素组合对铁皮石斛原球茎的增殖、分化有明显差异,其顺序依次为B5>B2>B3>B1>B4;不同激素组合对铁皮石斛生根有影响,其顺序依次为C2>C3>C1。因此,比较适合铁皮石斛种子萌发的激素是1/2MS+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L;适于铁皮石斛原球茎增殖、成苗的培养基及激素组合为改良MS+6-BA0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L;适于铁皮石斛原生苗生根的培养基为改良MS+ABT60.6 mg/L+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖15 g/L。在改良MS培养基中不加任何水果汁诱导铁皮石斛种子,获得了大量试管苗,移栽成活率达到90%以上。     

蝴蝶兰组培快繁技术研究

通过组织培养的方法诱导蝴蝶兰花梗上的腋芽萌发,可以得到无菌的蝴蝶兰不定芽。以不定芽上的幼叶为外植体,建立蝴蝶兰的无菌培养体系。结果表明:诱导腋芽萌发的培养基为MS+5 mg/L 6-BA;利用幼叶进行原球茎诱导的最佳培养基为MS+5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.1 g/L活性炭(AC)+150 mL/L椰汁(CM);原球茎增殖的培养基为3 g/L花宝一号(HyponexNo.1)+5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+150 mL/L CM;生根培养基为3 g/L Hyponex No.1+0.1 mg/L6-BA+1 mg/L NAA+0.5 g/L AC+100 mL/L土豆汁。     

春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术研究

为探索春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术提供参考,以♀大花蕙兰‘冰瀑’×♂春兰‘新春梅’杂交所结果荚为试验材料,分别进行基本培养基、GA₃、琼脂、AC 4因素3水平的杂交种子无菌萌发试验,基本培养基、6-BA、NAA 3因素3水平的杂交种原球茎增殖试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的杂交种原球茎分化试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的壮苗生根培养试验,筛选适宜的培养基。结果表明：1)适宜杂交种子无菌萌发的培养基为MS+GA₃0.50 mg/L+琼脂4.5 g/L+蔗糖20 g/L+AC0.50 g/L+蛋白胨1 g/L,平均萌发启动时间为50 d,平均萌发率为88.7%。2)适宜杂交种原球茎增殖的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂4.0 g/L+蛋白胨1.0 g/L,增殖系数达12.5。3)适宜杂交种原球茎分化的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/...     

铁皮石斛高效快速繁殖体系研究

为了建立铁皮石斛(Dendrobium officinale)种子高效快速繁殖体系,以铁皮石斛种子为外植体,在萌发培养基上萌发为原球茎,原球茎经悬浮培养增殖,再接种于分化培养基分化、生根长成完整植株。结果显示,原球茎增殖最佳培养基为1/2 MS培养基+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+0.33 g/L(NH4)2SO4+0.525 g/L KNO3+30 g/L蔗糖;原球茎分化最佳培养基为N6+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+100 g/L土豆汁+25 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;幼苗生根最佳培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA+50 g/L土豆汁+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;悬浮培养与固体培养相结合的技术优于固体组织培养技术,其具有生长周期短、节省空间、节约成本,促进原球茎增殖、提高分化率,促进生根的特点,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供基础。     

蕙兰杂交种子的无菌萌发和快速繁殖研究

实验采用蕙兰传统品种''崔梅''与普通蕙兰进行杂交,对不同发育阶段的种子进行无菌萌发实验,并作不同培养基的对照.对萌发原球茎的增殖及分化进行研究.探讨不同培养基、6-BA和NAA对根状茎增殖和分化的影响.结果表明:110天的种子接种在KC培养基上萌发效果最佳,蕙兰原球茎增殖的最佳培养基为、W+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,根状茎分化和生根的最佳培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA0.5mg/L.     

梳唇石斛快速繁殖技术

通过组织培养方法研究梳唇石斛快速育苗技术,利用不同培养基诱导种子直接萌发形成原球茎,并进一步分化获得再生植株。结果表明,种子萌发原球茎诱导的最佳培养基:1/2MS NAA 0.2 mg/L;最佳原球茎增殖培养基:1/2MS 6-BA 0.5 mg/L;最佳生根培养基:1/2MS 香蕉泥100 g/L NAA 0.5 mg/L。     

独占春种子非共生萌发和低温离体保存

独占春(Cymbidium eburneum Lindley)成熟种子无菌播种诱导原球茎,并以原球茎进行低温离体保存。结果表明:在培养基花宝1号3g/L LH(水解乳蛋白)1g/L BA(细胞分裂素)0.5 mg/L NAA(生长素)0.1 mg/L CM (椰子汁)100 ml/L AC 2 g/L 蔗糖25 g/L中种子萌发出原球茎;原球茎在培养基1/2 MS LH 0.5 g/L BA 0.5 mg/L NAA 0.1mg/L AC 2g/L 蔗糖20g/L中于6℃黑暗条件下连续保存了20个月,成活率达85%,并能在恢复培养基MS BA 3～5 mg/L NAA 0.2 mg/L AC 1g/L CM 100 ml/L 蔗糖25 g/L中进行恢复增殖培养。     

胭脂花(Primula maximowiczii)种子消毒及无菌播种的研究

为获得胭脂花无菌苗,本试验利用单因子试验和正交试验设计,探索了不同消毒方法、基本培养基、大量元素浓度和蔗糖对无菌种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:种子表面消毒的最佳方法是以6%NaClO消毒6min;最佳无菌萌发基本培养基是MS或B5培养基;MS培养基大量元素浓度在1倍时,最适宜于胭脂花种子萌发;蔗糖含量在15～45 g/L范围内对发芽率的影响差异不明显。     

多花白澳山龙眼组织培养研究

对多花白澳山龙眼组织培养中的无菌发芽、增殖培养、幼芽伸长生长、根诱导等进行了研究。结果表明:在固体培养基中的发芽率比在液体培养基中的发芽率高5%,最佳丛芽增殖配方为1/2MS 1.0BA 0.01NAA 15B9 30 g/L蔗糖,最佳幼芽伸长生长配方为1/2MS 1.5BA 0.01NAA 5B9 30 g/L蔗糖,最佳生根配方为1/2MS改良 30 g/L蔗糖。     

建兰种子无菌萌发技术初探

以赣南地区野生建兰蒴果为材料,研究了不同培养基对种子无菌萌发的影响以及生长素浓度对无菌芽生根的影响,并对建兰种子无菌萌发过程进行了观察。结果发现：添加外源植物生长调节剂6-BA与NAA以及适宜的蔗糖浓度都能显著提高建兰种子的萌发率,建兰种子无菌萌发最适培养基为：1/2 MS +8 g/L 琼脂粉+ 60 g/L蔗糖+2.0 mg/L NAA+ 0.4 mg/L 6-BA+1g/L活性炭;当0.8 mg/LNAA与0.4mg/L 6-BA组合时,生根率最高,在90天时最高可达80.50%;通过观察建兰种子萌发无菌芽的过程发现,建兰种子在播种后到形成根状茎分枝大约要经历250d。     

野生贵州地宝兰无菌播种及根状茎繁育技术研究

[目的]研究以贵州地宝兰种子为外植体进行无菌播种快繁技术体系,筛选出各个阶段较优的培养基,以提高繁育系数。[方法]以贵州地宝兰种子为外植体,通过无菌播种获得大量根状茎,经过根状茎增殖培养、诱导芽分化、生根壮苗培养等不同培养基试验,分别筛选出贵州地宝兰最适合各阶段成长的培养基。[结果]适宜贵州地宝兰种子萌发的培养基为:1.0 g/L Hyponex1+1.0 g/L Hyponex2+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L ZT+100.0 mg/L CM+20.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜原球茎的增殖培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+100.0 g/L马铃薯+30.0 g/L蔗糖。适宜诱导根状茎分化培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜生根壮苗培养基为:B5+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.5 g/L AC,pH 5.4~5.8。[结论]该研究为珍稀濒危贵州地宝兰野生种群恢复种植试验提供了重要的种苗资源,也为今后该快速繁育技术提供了参考数据。     

铁皮石斛人工杂交育种快繁技术

通过人工授粉获得铁皮石斛蒴果,再以蒴果种子为材料进行组培快繁试验,结果表明：人工杂交育种结实率达83％。经种子萌发诱导培养、原球茎增殖培养和壮苗生根培养等试验的结果表明：种子萌发最佳培养基为1／2MS＋蛋白胨2g／L,发芽率达到95％;原球茎增殖最佳培养基为1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋15...     

大晶帽石斛再生体系建立研究

本文以成熟度70%原生大晶帽石斛荚果内种子为外植体,探究采用不同消毒时间、培养基成分构成及浓度配比对大晶帽石斛无菌萌发的影响。结果表明,大晶帽石斛荚果用5%次氯酸钠消毒15 min,可有效降低污染率;将消毒后荚果种子接入MS+蛋白胨2 g/L+NAA 0.5 mg/L+花宝1号2 g/L+0.1%活性炭+0.58%琼脂+2%蔗糖培养基中,种子萌发率达88%,是适宜大晶帽石斛无菌萌发的培养基配方。     

春兰杂交种子无菌萌发及根状茎增殖的研究

研究了杂交塑果的成熟度、植物激素、有机添加物及培养方式对春兰杂交种子无菌萌发和根状茎增殖的影响。结果表明：成熟度为五个月的春兰杂交蒴果萌发率最高,杂交种子高萌发率和中等萌发率的比例也比较高。1/2MS＋0.3 mg/L NAA＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂和1/2MS＋1.5 g/L蛋白胨＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂的培养基配方培养根状茎的增殖系数较高,根状茎生长优良;薄层液体培养有利于根状茎的增殖。     

棉花无菌苗培养条件的探讨

以棉花(Gossypium hirsutum L.)种子为试验材料,对无菌苗培养前种子消毒和接种的最佳条件进行了研究。结果表明,棉花种子消毒的最佳条件为1.0 g/L升汞消毒5 min或50.0 g/L次氯酸钠消毒15min,无菌水冲洗5～6次,无菌水浸泡24 h,倒掉瓶中的无菌水后换上新的无菌水继续浸泡至种子露白约3～4 mm,手捏种子的子叶端挤掉种皮,胚根端接触培养基的方式接种至MS基本培养基。     

竹叶兰的无菌播种快繁技术研究

以竹叶兰种子为外植体进行无菌播种,成功诱导原球茎并再生植株,建立其快繁体系。试验结果表明：（1）1／2MS＋香蕉泥30．0g／L为最佳种子萌发与原球茎诱导培养基;（2）1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋香蕉泥30．0g／L为最佳芽增殖培养基,且芽生长健壮;（3）1／2MS＋IBA0．5mg／L为最适生根培养基。