Dot-ELISA检测猪胴体中沙门氏菌的研究

应用Dot-ELISA法对西宁某猪屠宰点 85份猪胴体进行了沙门氏菌的检测 ,同时采用常规分离培养鉴定技术作对照实验。结果在 85份肉样中 ,Dot-ELISA检出沙门氏菌阳性 6 5份 ,阳性率为 76 .4 7% (6 5 /85 ) ;而常规分离培养鉴定技术检出沙门氏菌阳性 6 7份 ,阳性率为 78.82 % (6 7/85 ) ,此两种方法的阳性符合率为 86 .5 7%。经统计分析 ,两种方法差异不显著 (P >0 .0 5 )。     

应用Dot-ELISA检测羊胴体中沙门氏菌的研究

应用Dot ELISA法对西宁某屠宰点 1 0 1份羊胴体淋巴结进行了沙门氏菌的检测 ,同时采用常规分离培养鉴定技术作为对照。结果显示在1 0 1份羊胴体中 ,Dot ELISA检出沙门氏菌阳性 56份 ,阳性率为 55 44% (56/ 1 0 1 ) ;而常规分离培养鉴定技术检出沙门氏菌阳性 48份 ,阳性率为 47 52 % (48/ 1 0 1 )。 2种方法的阳性符合率为 85 71 % ,差异不显著 (P >0 0 5)。     

Dot-ELISA检测香肠、火腿肠中沙门菌的研究

沙门菌属是一群形态、生化特性和抗原结构相似的细菌,迄今已知有2 000多个种(型),某些细菌是人和动物的重要致病菌,也是主要食物中毒菌之一,能污染各类食品、饲料、添加剂,且能引起人和畜禽流行性疾患[1]。为此,快速、准确地检测沙门菌已成为     

沙门菌PCR快速检测试剂盒的研制与应用

为建立一种简单、快速、灵敏、准确的沙门菌检测方法，根据沙门菌fimY保守基因序列设计合成了1对引物，建立了快速检测沙门菌的PCR方法，并对反应条件进行优化，组装成快速检测试剂盒。结果显示，所有沙门菌均扩增出526bp的特异性条带，而非沙门菌均未扩增出任何条带。检测灵敏度达93CFU，还可检出含3CFU的样品用BP预增菌的菌液或用MM增菌后的菌液，而且稳定性良好，冷冻至少能保存12个月。采用直接菌体加入法、热裂解法、反复冻融法、CTAB碱裂解法和柱式试剂盒提取法分别提取核酸模板，结果CTAB法效果最好，但操作烦琐，而直接菌体加入法和热裂解法可以达到和柱式试剂盒提取法相同的效果，且操作简便、快速、经济、效果好。通过对临床样品的检测，证实该试剂盒具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、稳定性高等优点，值得推广应用。     

牛沙门菌病的流行、诊断及防治措施

牛沙门菌病又名牛副伤寒,是由于鼠伤寒沙门菌、都柏林沙门菌以及肠炎沙门菌引起的一种以发生败血症、毒血症或胃肠炎为特征的传染病。沙门氏菌属是一群寄生于人和动物肠道内的革兰氏阴性杆菌,可发生于各种年龄的牛。本文就近年来沙门菌流行特点、临床症状、病理变化、诊断要点、防治措施做扼要概述,重点介绍了本病的病理特点,希望能为防治牛沙门菌病提供一点儿帮助。     

饲料中沙门菌检测技术研究进展

饲料中沙门菌是影响畜牧业健康发展和公共安全的重要因素之一。目前饲料中沙门菌的检测方法主要有传统培养法、免疫学检测方法及分子生物学检测法。本文对各种检测方法的原理、应用及优缺点进行概述。     

沙门菌PCR检测方法的建立

本实验根据沙门菌的侵袭性抗原保守基因肠毒素(STN)基因上的靶序列设计一对引物,对沙门菌基因组DNA进行PCR扩增,建立了沙门菌的PCR检测方法,与传统的细菌分离鉴定方法比较,该方法具有快速、特异、灵敏的特点,在沙门菌监测领域具有广阔的应用前景。     

白鱼粉饲料中沙门菌的检测

沙门菌是饲料中常见的肠道杆菌,能够引起食源性动物败血症,从而间接危害人类的健康,是一种重要的人畜共患病原菌.试验依据常规分离鉴定技术,通过细菌的分离、生化反应和血清学鉴定,对白鱼粉饲料样品中是否含有沙门菌作出了准确的检测,排除了饲料由于污染而可能导致的危害.结果显示,其中一份样品已受到沙门菌污染,不能作为饲料使用.     

家禽产品中沙门菌检测新技术

食品微生物检测是食品加工过程中确保食品安全的关键项目。在对生禽肉中沙门菌进行检测时,传统培养检测技术由于采集样品所经历的前处理和后加工方法缺乏统一的标准容易造成结果假阳(阴)性。而基于rRNA的检测技术与传统培养方法相比,可在很大程度上简化检测程序,提高检测结果的精确度,节约人工成本,减少实验室污染和失误的可能性。本文重点介绍了可用于环境和食品(包括家禽产品)中细菌检测的rRNA分子生物学技术。     

沙门菌多重PCR检测方法的建立及其应用

为鉴定临床上常见的3种沙门菌血清型,针对特异性基因invA(沙门菌属)、sdfl(肠炎沙门菌)、Stm4495(鼠伤寒沙门菌)和SPUL-2693(鸡白痢沙门菌)设计引物,利用标准菌株通过优化体系成功建立了沙门菌的四重PCR检测方法.结果 显示:该方法特异性好,敏感性高(检测下限:基因组为500 pg/mL,菌液为10...     

DOT-ELISA检测牛胴体中的沙门氏菌

沙门氏菌是一种人畜共患病，它型别繁多．WHO沙门氏菌研究和咨询协作中心报告至1987年底已有2213个血清型，目前国际沙门氏菌中心实验室报告沙门氏菌约有255个菌型及变异型。人的大多数沙门氏菌感染直接或间接地与所食的动物性食品有关．且致病因素复杂多变，近年来，人和动物的沙门氏菌感染十分严重，为此，许多学者致力于沙门氏菌检验方法的研究。     

基于鸡白痢沙门菌LPS的D群沙门菌抗体间接ELISA检测方法的建立

通过热酚水法提取并纯化鸡白痢沙门菌的脂多糖(lipopolysaccharide, LPS),以LPS作为包被抗原,建立D群沙门菌抗体间接ELISA检测方法。结果显示,通过方阵滴定法等确定抗原包被质量浓度为2.233 mg/L;血清最佳稀释度为1∶200,最佳作用时间为60 min;最适封闭条件为5%脱脂乳封闭60 min;酶标二抗最适工作质量浓度为1∶8 000,作用60 min;底物显色时间为15 min;阴阳性判定标准为S/P值≥0.5。特异性、敏感性和重复性验证表明,该方法可特异性检测鸡白痢沙门菌等D群沙门菌的阳性血清,与鼠伤寒沙门菌、大肠杆菌等家禽病原菌的阳性血清无交叉反应,其检测灵敏度是鸡白痢平板凝集的400倍,批间重复和批内重复变异系数均小于10%。对临床血清的检测结果表明,该方法与Biochek公司的D群抗体检测试剂盒的阳性符合率为94.67%,阴性符合率为98.11%,总符合率为98.59%。结果表明,该检测方法可用于临床鸡白痢沙门菌等D群沙门菌感染的抗体检测。     

沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒的研制与应用

根据沙门菌保守的fimY基因序列设计合成了引物和TaqMan探针，建立了快速检测沙门菌的实时荧光定量方法，并对反应条件进行了优化，组装成快速检测试剂盒。通过对临床样品的检测，该试剂盒的检测灵敏度达4.5CFU（25μL反应体系），比常规PCR高100倍，而且稳定性良好，至少可以冷冻保存9个月。结果表明，所建立的沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒具有操作简便、快速、特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性强等优点，适于大量样品的检测。     

肠炎沙门菌LAMP检测方法的建立

为建立一种能快速检测肠炎沙门菌(SE)的方法,本研究根据基因库中SE种特异性基因(sdfⅠ)的保守序列,设计一套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,建立了SE的LAMP可视化检测方法。该方法的敏感性可达100fg DNA,高于常规PCR方法100倍;全部反应可在1h内完成;可通过肉眼观察颜色直接判定结果;对其他常见病原体的检测结果均为阴性。结果表明建立的LAMP方法简便、快速、灵敏、特异,可用于SE感染的快速检测。     

禽沙门菌病检测技术研究进展

禽沙门菌病是家禽养殖领域中的常见病与高发病,给家禽产业中造成严重的经济损失,同时也严重威胁着禽产品消费者的健康安全.文章从沙门菌分类学、禽沙门菌流行血清型、快速检测技术以及分子分型技术等方面阐述了当前禽沙门菌的研究进展,以期为禽沙门菌病的防治提供参考.     

沙门菌和志贺菌二重PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank提供的沙门菌invA基因序列和志贺菌ipaH基因序列设计引物,建立了二重PCR方法,在同一反应体系同时检测两种致病菌核酸,经二重PCR方法扩增后,在同一泳道同时检出沙门菌284 bp和志贺菌611 bp特异性扩增条带,而普通大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、阪畸大肠埃希菌、绿脓杆菌、蜡样芽胞杆菌、马链球菌、产单核细胞李斯特菌、鹅大肠埃希菌、猪水肿病大肠埃希菌均未出现这两种条带.对PCR产物进行测序,测序结果与已发表的基因核苷酸序列比较,沙门菌同源性为93%～100%,志贺菌同源性为98%～100%.应用建立的沙门菌和志贺菌二重PCR方法对广西6个试验猴养殖场1 665份猴粪便样品进行检测,检出沙门菌阳性25份,志贺菌阳性90份,阳性检出率分别为1.5%和5.4%.表明建立的沙门菌和志贺菌二重PCR检测方法特异性强、敏感性高,适用于临床粪便样品的快速检测.     

沙门菌疫苗的应用现状及研究前景

沙门菌病（salmonellosis）是由沙门菌属（Salmonella）细菌感染引起的人畜共患病。接种疫苗是预防和控制畜禽沙门菌病的有效途径。由于当前使用的沙门菌减毒疫苗成本较高,免疫效果不稳定,免疫程序复杂,导致使用率不高。口服植物型沙门菌疫苗具有产量高、生产时间短、成本低、安全性高等特点。对口服植物型沙门菌疫苗的研究前景和研究方向进行综述,以期为该类疫苗的进一步研究开发和广泛利用提供参考。     

应用复合PCR方法检测沙门菌的研究

参照文献报道的沙门菌Repeat se和hisJ基因片段的引物序列，设计并合成了2对引物，对沙门菌属和非沙门菌属的标准菌株及分离菌株进行了复合PCR扩增反应。结果，沙门菌PCR产物均出现199bp与495bp的特异性DNA扩增条带．而非沙门菌均未出现扩增条带，证明这2对引物具有沙门菌属特异性。将提取的沙门菌DNA做梯度稀释，测定该复合PCR体系的敏感度。结果表明，此体系可检出10^3CFU／mL菌液提取的DNA模板。应用上述方法，对进境鱼粉阳性样品进行了检测，均出现阳性结果。本研究表明，复合PCR是一种特异、敏感、快速的沙门菌检测方法，可应用于口岸系统鱼粉、肉骨粉的日常检测。     

检测沙门菌活菌数的MTT方法建立

本研究旨在探讨MTT法用于沙门菌(Salmonella)活菌计数的可行性及操作的最佳试验条件。通过改变波长、反应时间、试剂剂量等,确定MTT法测沙门菌活菌数的最佳试验条件,同时采用Pearson相关模型进行双变量的相关性分析。结果显示MTT检测沙门菌活菌数与平板计数法的测量结果是一致的,并且不同生长阶段的沙门菌对检测结果没有影响。研究表明MTT法用于检测沙门菌活菌数是可行的。     

动物粪便沙门菌PCR检测技术的研究

为了建立一种动物粪便样品中快速、特异、敏感的沙门菌检测方法,根据沙门菌肠毒素stn基因设计一对引物,对不同血清型的沙门菌和非沙门菌进行PCR检测,并对该PCR方法进行反应的灵敏度、模拟粪便样品的最低检出限测定及粪便样品的检测。运用该方法对250份粪便样品进行检测,同时用传统方法进行验证。结果表明,设计的引物特异性好,能专一性扩增出约260 bp条带;该引物灵敏度高,能进行有效检测的核酸最低起始量为43.85 pg,纯菌检测灵敏度达1 cfu/mL。接种沙门菌到粪便样品中,当粪便样本中菌量达103cfu/mL以上时,不需要增菌,沙门菌可立即检出,增菌后检出限可以达到1 cfu/mL。PCR检测250份样品共检出18份阳性,同时传统细菌培养方法证明结果正确。该方法可用于粪便样品的检测。