反相高效液相色谱法同时测定碧螺春茶中4种儿茶素类化合物及咖啡因含量

[目的]建立同时测定碧螺春茶叶中没食子儿茶素(GC)、表没食子儿茶素(EGC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸(ECG)及咖啡因(CAF)含量的高效液相色谱法。[方法]以碧螺春茶为样本,探索出新的样品提取方法和色谱分离条件。[结果]色谱条件为:Shimpack C18色谱柱(150.0 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-0.2%冰乙酸体系为流动相进行梯度洗脱;紫外检测器,检测波长为280 nm;流速为1.0 ml/min;进样量5μl;柱温为30℃。在优化条件下,GC、EGC、CAF、EGCG、ECG 5种成分的进样量分别在0.177 5～1.065 0、0.125 0～0.750 0、0.535 0～3.210 0、0.342 5～2.055 0和0.370 0～2.220 0μg范围内与色谱峰面积的线性关系良好(r=0.999 3～0.999 9);加标回收率在98.60%～100.19%;RSD均小于1%。[结论]该方法简便、快速、准确,可用于碧螺春茶中茶多酚类成分及咖啡因的质量控制,同时也适用于其他绿茶的质量鉴定与评价。     

高效液相色谱法测定茶叶中的咖啡因

[目的]建立HPLC法快速测定茶叶中的咖啡因。[方法]色谱柱Zorbax-C8（4.6 mm×250.0 mm,5.0μm）;流动相为0.04 mol/L柠檬酸水溶液∶N,N-二甲基甲酰胺（DMF）∶四氢呋喃（THF）=90∶16∶4;流速为1.00 ml/min;柱温60℃;检测波长280 nm;进样量为10μl。[结果]咖啡因在20~100μg/ml时,浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,加标回收率为98.9%~102.3%,相对标准偏差RSD为0.23%。[结论]该方法简单、快速、准确,适用于茶叶和茶饮料中咖啡因含量的测定。     

超高效液相色谱法快速测定食品中的咖啡因研究

采用超高效液相色谱测定食品中的咖啡因,采用ACQUITYUPLC BEHC18色谱柱分离,以甲醇-水溶液为流动相进行洗脱,流速为0.4mL/min,柱温30℃,检测波长为272nm。结果表明,咖啡因与其他杂质均能达到基线分离,咖啡因的浓度在2～200mg/L时与峰面积成良好的线性关系。回收率为95.0%～99.1%,精密度测试结果的RSD为1.02%。该方法简便、准确、快速、重现性好、回收率高,适用于食品中咖啡因的测定。     

高效液相色谱法测定饮料中咖啡因含量研究

用高效液相色谱法测定饮料中的咖啡因,考察了波长、流动相、柱温、流速等因素对可乐中咖啡因测定的影响。结果表明,饮料中咖啡因含量的最佳测定条件为:波长273 nm,流动相为乙腈∶水=20∶80,柱温为20℃,流速为1 mL/min。在0~15μg/mL的浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9);加标平均回收率为99.69%。该方法适合于饮料中咖啡因的含量测定,操作简便、快速、灵敏、准确,可作为饮料中咖啡因的质量控制方法。     

反相高效液相色谱法测定茶叶和速溶咖啡中咖啡因的含量

建立了用反相高效液相色谱法测定水仙绿茶、铁观音和速溶咖啡中咖啡因含量的方法,并考察了不同水温对茶叶中咖啡因溶出量的影响.方法检出限为49.68ng/L,精密度分别是2.65%、2.96%、2.77%.     

反相高效液相色谱法测定茶叶和速溶咖啡中咖啡因的含量

建立了用反相高效液相色谱法测定水仙绿茶、铁观音和速溶咖啡中咖啡因含量的方法,并考察了不同水温对茶叶中咖啡因溶出量的影响。方法检出限为49.68ng/L,精密度分别是2.65%、2.96%、2.77%。     

超高效液相色谱法测定茶叶中三氯杀螨醇

[目的]建立一种超高效液相色谱快速测定茶叶中三氯杀螨醇的方法。[方法]采用Waters H-Class超高效液相色谱仪,ACQUITY UPLC BEH?C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),测定波长230 nm,流动相为A(甲醇)∶B(1%乙酸水)=90∶10,流速0.5 mL/min。茶叶中的三氯杀螨醇采用丙酮和正己烷进行提取,经浓硫酸净化和浓缩后,用甲醇定容后进行分析检测。[结果]三氯杀螨醇在0.05～10.00 mg/L具有较好的线性关系(R²=0.999 2),检测限为0.05 mg/L。茶叶样品中添加3个浓度三氯杀螨醇的平均回收率为93.9%～106.0%,变异系数为3.3%～11.1%。[结论]该方法快速、准确、灵敏,可用于茶叶中三氯杀螨醇的分析检测。     

从茶叶中提取咖啡因方法研究

采用不同乙醇提取时间,DMSO共沸收集-冷冻干燥制备咖啡因的方法,并用高效液相色谱检测、分析纯度。研究表明,95%乙醇提取3 h,DMSO共沸收集-冷冻干燥制备的咖啡因经高效液相色谱分析,纯度较高。用冷冻干燥方法制得咖啡因的最佳条件为10 g茶叶粉末,95%乙醇75 mL,提取时间2 h,DMSO共沸收集,冷冻干燥。     

高效液相色谱法测定茶叶儿茶素

本文采用高效液相色谱法,对茶叶的主要生化成份多酚类物质中的儿茶素进行分离、测定。用 ODS—C18反相柱子,以甲醇等作流动相,梯度洗脱、流量1ml/min 等条件,分离效果理想,定量准确,样品处理简便,分析速度快,进一个样约需30min。     

碧螺春茶树微繁殖技术研究

洞庭碧螺春是中国十大名茶之一,苏州太湖之东西洞庭山为碧螺春原产地[1].名茶的基础是良种,因此加强原产群体种茶树种质资源的保护和开发十分重要[2].虽然有关茶树的组织培养曾有报道[3],但碧螺春茶树的组织培养研究尚未见报道.本试验以从碧螺春原产地选出的早芽茶的腋芽为外植体,对无菌外植体的建立、试管苗的增殖和生根等各个阶段的培养条件进行优化,以期为碧螺春茶树优质种苗生产奠定基础.     

茉莉花茶与碧螺春抗氧化性能的比较研究

根据在碱性介质中,抗氧化性物质能强烈地抑制鲁米诺-Na Cl O的化学发光的原理,利用流动注射技术,建立了一种评价茶叶抗氧化性能的方法。在最优的浓度条件下,测定结果表明:碧螺春的抗氧化性能优于茉莉花茶。     

二氯甲烷萃取绿茶咖啡碱工艺参数的优化

为探寻从绿茶中提取咖啡碱的工艺,以二氯甲烷为萃取剂,以咖啡碱得率与纯度为考察指标,采用单因素试验得出较佳茶汤质量分数、料液比(茶汤与二氯甲烷的体积比)、摇匀时间、静置萃取时间、萃取温度、萃取次数和茶汤pH值,选取料液比、摇匀时间、静置萃取时间、萃取温度等4个主要影响因素设计正交试验,并对正交试验结果进行验证.结果表明,...     

HPLC-DAD分析红茶儿茶素类物质和咖啡因的方法研究

建立一种梯度洗脱的儿茶素类和咖啡因HPLC-DAD灵敏、快速的定量方法。确定最佳波长为205 nm,5种儿茶素(EGCG,EGC,ECG,EC,+C)和咖啡因的检测限(LOD)达到0.01~0.04 g.mL-1。采用反向C18(150×4.6 mm,ID;5μm)柱分离,以乙腈和0.03%三氟乙酸溶液为流动相梯度洗脱,在1 mL.min-1的流速下,整个色谱运行过程仅需15 min。目标物质的回收率在92%~110%范围,相对标准偏差小于2.7%。该方法稳定性好、专一性强,适合红茶儿茶素类和咖啡因的准确定量分析。     

普洱茶中咖啡碱在小鼠体内的吸收情况研究

对比研究了普洱茶、绿茶和咖啡碱以3种剂量（5、25和50 mg·kg^-1·d^-1）对小鼠灌胃给药之后,咖啡碱在小鼠体内的吸收情况。研究结果显示,以咖啡碱剂量为25和50 mg·kg^-1·d^-1,分别灌胃小鼠普洱茶、绿茶和咖啡碱纯品,普洱茶灌胃后小鼠血浆中咖啡碱的水平明显低于灌胃绿茶和咖啡碱组。同时,用AUC（30-150 min）梯形计算公式计算咖啡碱吸收总量,灌胃咖啡碱剂量为25和50 mg·kg^-1·d^-1的普洱茶血液中咖啡碱总量也明显小于灌胃绿茶和咖啡碱（P<0.05）。研究结果表明,相同咖啡碱剂量下,普洱茶中的其它成分能够显著抑制咖啡碱的体内吸收。     

茶树咖啡碱合酶cDNA在大肠杆菌中的表达

通过RT-PCR法扩增出茶树咖啡碱合酶(TCS)cDNA编码区全序列，并将其克隆到表达载体pET32a( )中，得到重组质粒pET-TCS，在表达宿主菌B121trxB(DE3)中高效表达，产生相对分子质量约为62000的融合蛋白。该融合蛋白包括112个氨基酸残基的硫氧还原蛋白及370个氨基酸残基的茶树TCS蛋白。实验结果表明，随着诱导时间的延长，表达的融合蛋白产量逐渐增加，表达蛋白总量最高可达到菌体总蛋白的39．14％；在15、25和37℃ 3个不同的诱导温度下，均能诱导产生融合蛋白，而且产生的总量及其可溶性部分所占比例均随诱导温度升高而增加；在菌体的各个部位中，融合蛋白主要在细胞质中以可溶的形式进行表达，有少量在外周质中表达或以包涵体形式在细胞质中表达。另外，体外酶促反应表明，表达的融合蛋白能催化可可碱甲基化生成咖啡碱，具有正常的生物学活性。     

茶树咖啡碱合成酶基因cDNA在烟草中的表达

为了在烟草中合成咖啡碱,将咖啡碱合成酶(Tea caffeine synthase,TCS)基因cDNA全序列克隆到双元载体pBI121中,通过农杆菌叶盘转化法将TCS基因成功转入烟草,结果得到72株转基因烟草植株。对其中3株转基因植株进行PCR检测和PCR-Southern检测,证实TCS基因已整合到基因组中;RT-PCR和Northern分析显示,TCS在这些植株中均能正常转录。用从转基因植株中提取的粗酶液进行体外酶促反应,能催化7-甲基黄嘌呤和可可碱向咖啡碱的转变,由此表明,转基因烟草植株中能产生具有正常生物学活性的TCS,但从3株转基因烟草中均未检测到咖啡碱。     

HPLC法测定茯砖茶中芦丁含量

建立了茯砖茶中主要黄酮类物质芦丁的高效液相色谱测定方法。采用Hypersil ODS色谱柱C18色谱柱,流动相:A乙腈;B磷酸溶液(pH=2.5),梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长258nm,样量为20μL,柱温30℃。对照品芦丁的回归方程Y=16007.7ρB(μg/mL)-11115.2,R=0.9993,线性范围为10.000～80.000mg/L,平均回收率99.0100%,RSD为2.0700%。测得茯砖茶中芦丁含量为0.1435%,RSD为3.4900%。该方法简便、快速、准确,可用于茯砖茶中芦丁含量的测定。