免疫胶体金法快速检测水产品中喹诺酮类药物

利用QH12杂交瘤细胞株生产抗体,研制高灵敏度的免疫胶体金试剂条,其对洛美沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星的最低检出限分别为2.0、2.5、2.5、5.0 ng·mL^-1。通过样品预处理方法优化,建立免疫胶体金快速检测方法(GICT)。将其与HPLC法进行比较,并用LC-MS/MS法验证效果。结果表明,GICT灵敏度高于HPLC法,检测结果与LC-MS/MS法较一致,单个样品检测耗时25 min。综合比较分析,GICT宜作为水产品中喹诺酮类药物残留的快速筛查检测方法进行推广。     

用胶体金免疫层析法检测饲料中莱克多巴胺含量

本试验用胶体金免疫层析法对某区域内生产和销售的中大猪配合饲料进行莱克多巴胺含量检测,以摸索有效快捷的莱克多巴胶检测方法.     

胶体金免疫层析技术在检测乳制品中三聚氰胺的应用

[目的]基于竞争抑制免疫层析原理,建立一种快速检测乳制品中三聚氰胺的方法.[方法]在胶体金免疫层析(GICA)技术的基础上,以胶体金为标记物,建立乳制品中三聚氰胺(MA)快速检测方法、研发GICA检测试纸;验证该方法的灵敏度、重复性和特异性.[结果]所研发的GICA试纸测定乳制品中MA的检出限为40～160μg/kg,...     

牛初乳IgG的特性及检测方法

主要介绍了牛初乳中IgG的理化特性和生理功能及其在胃肠内的抗降解特性,同时介绍了牛初乳IgG的提取及常用检测方法,并对牛初乳IgG作为保健产品和医疗药品基料的趋势作出展望。     

胶体金免疫层析法与酶抑制率法快速检测果蔬中农药残留比较研究

运用胶体金免疫层析法与酶抑制率法快速检测蔬菜、水果中高风险农药残留,以腈菌唑、三唑磷、水胺硫磷、氟虫腈、百菌清5种农药为例.结果显示,胶体金免疫层析法重复性好,有较高的特异性和灵敏度,检出限可满足GB 2763—2019中规定的最大残留限量要求,无假阳性、假阴性现象,相对准确度较高.与现行有效的国家标准GB/T 5009.199—2003中酶抑制率法相比,胶体金试纸条具有操作简便、检测速度快、受检测环境温度影响较小等特点,适用于对蔬菜、水果中农药残留的现场筛查和检测.     

胶体金免疫层析试纸条法和HPLC-QTOF-MS法检测保健品中那非类化学药物的比较

采用胶体金免疫层析试纸条法与高效液相色谱-飞行时间串联质谱法(High performance liquid chromatography-quadrupole time of flight-mass spectrometry,HPLC-QTOF-MS)检测保健品中的那非类药物,并对这两种方法进行了比较.结果表明:胶体金免疫层析试纸条法对豪莫西地那非的检测限为30μg/mL,对硫代艾地那非、红地那非、那红地那非及伪伐地那非的检测限均为60μg/mL;HPLC-QTOF-MS法对豪莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伪伐地那非的检测限为0.2μg/mL.两种方法对实际样品的定性检测结果一致.与HPLC-QTOF-MS相比,胶体金免疫层析试纸条具有操作简便、快速、直接的特点,可作为样品的快速定性筛查,HPLC-QTOF-MS法可作为阳性样品的进一步确证和精确定量.     

牛初乳冻干粉及其产品中IGFs和NGF的含量测定及其变化

[目的]研究牛初乳冻干粉(LBC)及其产品中胰岛素样生长因子(IGFs)和神经生长因子(NGF)含量变化。[方法]采用冷冻干燥工艺制备泌乳1~7 d的LBC和常乳冻干粉(LM),用酶联免疫分析法测定IGFs和NGF含量。[结果]泌乳第1天的LBC中IGF-Ⅰ、Ⅱ和NGF含量最高,分别为3 277.1、2 179.5和31.5 ng/g,并随泌乳期逐渐下降,至第7天时接近LM水平。泌乳第1~3天的IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ平均含量分别为2 874.5和1 704.7 ng/g,均是LM中的8.1倍。泌乳第1~3天的NGF平均含量是24.8 ng/g,是LM的20.7倍。3种牛初乳保健食品中IGF-Ⅱ和NGF含量分别为539.9~1 064.3和7.6~12.0 ng/g,均显著高于LM和2种市售奶粉。牛初乳产品1号中游离IGF-Ⅰ含量是LM中的7.1倍,它占总IGF-Ⅰ的85.8%。[结论]IGFs和NGF含量在泌乳第1~7天的LBC中呈下降趋势,至第7天时接近LM水平;泌乳第1~3天的LBC中IGFs含量达到μg/g级水平。牛初乳保健食品较常乳冻干粉和奶粉含有更多的IGFs和NGF。     

同时检测牛奶中喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法研究

【目的】喹诺酮类药物和庆大霉素均为高效、广谱抗菌药物,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有显著的抗菌效果,是中国畜牧业和水产业中常用的两类兽药。由于这两类药物在动物源性食品中的残留可能导致对人类健康的危害,因此,为了保护消费者的健康,研究和制定动物源性食品中同时检测这两类药物的残留检测方法对完善中国的食品安全监测体系具有重要意义。【方法】建立了同时检测牛奶中13种喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并对喹诺酮类和庆大霉素单克隆抗体按比例进行混合标记。同时,采用方阵法系统研究了胶体金标记这两类抗体时的pH值和抗体用量对灵敏度的影响,并对这两类药物抗原的包被条件进行选择确定。在此基础上研发出可同时检测牛奶中13种喹诺酮类药物和庆大霉素的胶体金快速检测试纸条,试纸条采用直接竞争法原理。【结果】该方法可同时检测恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氟甲喹、培氟沙星、氧氟沙星、依诺沙星、噁喹酸、麻保沙星、氟罗沙星、奥比沙星、达氟沙星和洛美沙星这13种喹诺酮类药物和庆大霉素,对其他喹诺酮类药物如：沙拉沙星、二氟沙星、司帕沙星、帕珠沙星等无交叉反应,同时对其他氨基糖苷类药物如：链霉素、新霉素、卡那霉素等也无交叉反应。该试纸条对牛奶中这13种喹诺酮类药物和庆大霉素的检测限均为20 ng·mL^-1,完全满足国家对这两类药物的残留限量要求。牛奶样本直接检测,无需处理,整个检测过程5 min内完成。【结论】采用该方法和HPLC-MS/MS对60份牛奶盲样进行比对试验,阳性样品全部检出,同时筛选方法未出现假阳性和假阴性现象,二者的测定结果基本相符,表明该方法准确可靠,适用于现场大批量样本的快速检测和筛选。实际操作过程中,可以采用胶体金免疫层析对样品进行现场快速初筛;筛选的疑似阳性样品,可以采用HPLC-MS/MS方法对样品中QNS和GEN的含量进一步确认。     

胶体金免疫层析法快速检测水产品中四环素类药物残留

为建立用于快速检测水产样品中四环素类药物残留含量的胶体金免疫层析检测试剂,采用免疫竞争法,将抗四环素单克隆抗体-胶体金复合物包被在胶体金结合垫上,并将人工合成的四环素抗原包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线(T线),其残留药物与待测样品中四环素竞争结合胶体金标记的四环素单克隆抗体,最终能以颜色直观显示检测结果。检测水产品试样时,试剂灵敏度最低值可达100 ng/mL,仅需5~10min,与金霉素、土霉素、强力霉素等四环素族抗生素有很强的交叉反应,故可同时检测四环素族中几种主要抗生素,而与沙丁胺醇、莱克多巴胺等其他兽药无交叉反应。试验证明检测试剂具有较高的灵敏度及特异性,操作便捷,稳定可靠,可作为四环素残留现场监控的有效筛检手段。     

牛初乳中免疫因子研究进展——以长江中下游油菜和水稻种子生产商为例

对牛初乳中富含的免疫球蛋白、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、溶菌酶等多种免疫因子的稳定性、分离纯化技术以及相应生物学功能的研究进展进行了综合分析,为牛初乳进一步开发提供参考。     

牛初乳在畜牧生产中的研究与应用

阐述了牛初乳的营养成分及生理活性物质的种类、来源及功能,并介绍其在畜牧业生产中的应用情况。     

牛初乳生理功能研究进展

主要介绍了牛初乳具有改善胃肠道功能,提高机体的抗氧化能力,提高机体的免疫力,促进细胞正常生长、组织修复和外伤愈合等生理功能的研究进展,以及牛初乳作为功能性保健食品的发展前景。     

牛初乳中几种重要酶及其生物功能的研究进展

牛初乳是指奶牛产犊后几天内所分泌的乳汁,含有丰富的营养成分。目前已在初乳中测出50余种酶,它们具有重要的生物功能。因此,牛初乳不仅是新生幼儿及仔畜最理想的食品,也是优良的纯天然保健食品。笔者介绍8种牛初乳中存在的酶,并对其功能和酶活力变化作简要阐述。     

牛初乳对仔猪血清抗氧化酶活性及丙二醛水平的影响

以饲喂牛初乳的仔猪血清为材料,测定了其中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛水平。结果显示,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶明显上升,丙二醛含量下降,提示牛初乳粉可提高仔猪抗氧化水平。     

琼脂双向免疫扩散法测定牛初乳中IgG

应用特异性免疫学原理,采用琼脂双向免疫扩散方法,以兔抗牛IgG检测牛初乳中IgG,根据检品IgG最大稀释度与已知标准牛IgG最大稀释度之比,计算出牛初乳中I gG含量.此方法批内变异系数为0～22.2;,批间变异系数为18.8;,加标回收率为87.5;.方法特异性强,具有准确、简便、费用低等优点,适于基层检测单位和企业运用.     

不同个体牛的血清IgG水平的差异分析

研究了仔牛哺乳期血清IgG水平的变化及血清IgG含量与牛龄、性别的关系。结果表明:仔牛吃完母乳24h后血清中的IgG达到峰值(65.58±9.87)mg.mL-1,提取免疫球蛋白的原料血液应选择的牛龄在8年以下为宜;当以6￣8年的牛血液作为原料时,母牛血液IgG含量比公牛血液IgG含量高1%。     

乳铁蛋白牛初乳颗粒的毒理安全性研究

[目的]为判定聪贝优牌乳铁蛋白牛初乳颗粒对人体健康是否产生危害,进行了聪贝优牌乳铁蛋白牛初乳颗粒的安全性毒理学评价。[方法]采用急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓微核实验、微小鼠精子畸形试验和30 d喂养试验对聪贝优牌乳铁蛋白牛初乳颗粒急性毒性、致突变性以及亚慢性毒性进行了研究。[结果]聪贝优牌乳铁蛋白牛初乳颗粒小鼠急性毒性试验LD50大于20.0 g/(kg.bw),属实际无毒;对基因、体细胞与生殖细胞无明显致突作用;受试物分别按1.00、2.00、4.00 g/(kg.bw)的剂量喂养大鼠30 d,结果表明动物未出现异常。[结论]根据试验结果,可判定聪贝优牌乳铁蛋白牛初乳颗粒为安全性食品。     

Isolation and Purification of Bovine Colostrum sIgA and IgG

To further utilize bioactive substance such as bovine colostrum sIgA and IgG,sIgA and IgG were isolated and purified simultaneously by salting out,ultrafiltration and gel chromatography,etc.The analysis of results were showed quantitatively by non-hydrogenized SDS-PAGE,and quanlities of sIgA and IgG were respectively detected by Western Blot.The results showed that the purity and yield of bovine colostrum sIgA were 85.3%and 42.8%,respectively,while the purity and yield of bovine colostrum IgG were respectively 97.2%and 64.4%.This preparative method provides theoretical and experimental foundation for sIgA industrial production.     

Isolation and Purification of Bovine Colostrum slgA and IgG

To further utilize bioactive substance such as bovine colostrum sIgA and IgG, sIgA and IgG were isolated and purified simultaneously by salting out, ultrafiltration and gel chromatography, etc. The analysis of results were showed quantitatively by nonhydrogenized SDS-PAGE, and quanlities of sIgA and IgG were respectively detected by Western Blot. The results showed that the purity and yield of bovine colostrum sIgA were 85.3% and 42.8%, respectively, while the purity and yield of bovine colostrum IgG were respectively 97.2% and 64.4%. This preparative method provides theoretical and experimental foundation for sIgA industrial production.     

金标记免疫共振散射光谱法测定牛初乳中免疫球蛋白G

采用柠檬酸三钠还原法制备了粒径为9 nm的金纳米微粒。结果表明:在pH 7.0的Tris-HCl缓冲溶液中,金标记羊抗牛免疫球蛋白G(IgG)与牛IgG产生特异性结合,羊抗牛IgG包裹的金纳米微粒释放出来,在聚乙二醇-20000的作用下发生聚集,导致体系在580 nm处的共振散射峰增强。当牛IgG浓度在0.013 3～1.33μg/mL范围内,随着牛IgG浓度的增加,共振散射强度线性增强,方法的检出限为0.007 95μg/mL,用于定量分析牛初乳中的IgG,结果令人满意。