木薯主栽品种高效再生体系的建立与优化

[目的]通过研究建立木薯主栽品种的再生体系,获得更多的优质研究材料。[方法]根据细胞全能性理论,以木薯幼叶、腋芽为材料,优化培养基组分,诱导木薯体细胞发生、分化,器官等发育,培养再生株系。[结果]不同品种材料间的再生能力总体表现由大到小为:GR3、SC205、GR9891、GR911;腋芽诱导体细胞胚性愈伤组织的效果明显优于幼叶;IBA诱导木薯体细胞胚发生效果优于6-BA,且二者间具有互作作用;IBA与NAA激素组合对诱导木薯不定芽生根效果优于单一使用效果。[结论]建立了4个木薯主栽品种(SC205、GR891、GR911和GR3)高效的再生体系,为木薯种质保护、创新利用研究提供技术基础。     

玉米湘农3号幼胚愈伤组织诱导及再生体系建立

以玉米品种湘农3号幼胚为外植体,以MS为基本培养基,研究2,4-D与NAA浓度配比对愈伤组织诱导、KT与IBA浓度配比对愈伤组织分化、NAA与6-BA浓度配比对试管苗生根的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;愈伤组织分化的最适培养基为MS+KT 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;生根的最适培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.6 mg/L。     

木薯叶片愈伤组织对枯萎病病原菌的抗性筛选

以木薯品种"GR911"、"面包木薯"试管苗叶片为材料,研究木薯枯萎病病原菌粗提物对愈伤组织增殖与分化的影响,以期建立枯萎病病原菌粗提物为选择压力的木薯离体抗病筛选体系。结果表明:所用品种幼叶愈伤诱导与增殖的适宜配方为改良的MS培养基+0.5-0.75mg/L2,4-D;愈伤分化适宜配方为的MS培养基+0.75-1.0mg/LZT。"GR911"与"面包木薯"愈伤增殖过程中,愈伤褐化率达到50%所需的细菌液粗提物浓度分别为5.5×106、2.5×106cfu/mL;愈伤组织分化过程中,愈伤褐化率达到50%所需的菌液粗提物浓度分别为7.0×106、4.0×106cfu/mL。通过建立木薯愈伤组织离体抗病筛选体系,为木薯无性系变异育种奠定基础。     

紫玉兰愈伤组织的诱导及胚状体获得试验研究

用正交统计方法,以MS为基本培养基,调节2,4-D、6-BA和NAA之间的配比,对紫玉兰的雌蕊、雄蕊、花被、花萼和带腋芽枝条等组织进行愈伤组织诱导,试验结果表明:雌蕊在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 1.00 mg/L+NAA 4.00 mg/L能够产生浅黄绿色丝状愈伤组织;花萼在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 1.00 mg/L+NAA 2.00 mg/L能够产生淡黄色块状愈伤组织;腋芽在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 2.00mg/L+NAA 4.00 mg/L能够诱导产生浅绿色团状愈伤组织,该组织经转接培养后产生胚状体。     

银杏幼胚培养的多因子正交试验研究

以MS为基本培养基,选用银杏幼胚为试验材料,采用L9(34)正交设计分析比较2,4-D(A因素)、6-BA(B因素)、酸水解酪蛋白(CH,C因素)3个因素及其组合对银杏幼胚愈伤组织诱导率、褐化率及生长量的影响。结果表明:2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+CH 500mg/L组合银杏的幼胚愈伤诱导率最高,为100%,同时该组合处理愈伤组织生长量也最大,增长倍数达8.11倍;而2,4-D 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L组合褐化率最高,为60.3%。经直观分析、方差分析和主因素效应的多重比较后认为,3个因素中,2,4-D对银杏幼胚愈伤诱导率及褐化率的影响最大,极差分别为74.196和63.702;CH对银杏幼胚愈伤生长量影响最大,极差为2.148。银杏愈伤组织诱导及生长的培养基最优组合为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+CH 500mg/L。     

毒莠定对郁金香愈伤组织诱导及胚状体产生的影响

应用"311-B"回归最优设计研究毒莠定等3种试剂对郁金香胚性愈伤组织诱导及胚状体产生的影响.结果表明:胚性愈伤组织出愈率及胚状体产生与毒莠定浓度呈极显著相关,毒莠定对郁金香胚性愈伤组织的诱导起决定性作用,培养20 d愈伤组织就可以产生,最佳培养基配方为MS培养基+毒莠定6 mg/L+BA0.5 mg/L,出愈率达100%,每块愈伤组织平均产生10个胚状体.毒莠定与BA呈正交互作用,可以配合使用;与恶霉灵呈负相关,不必配合使用.     

培养条件对木薯胚性愈伤组织中3种保护酶活性的影响

以GR891木薯胚性愈伤组织为材料,常规保存(GD培养基+12.0 mg/L毒莠定+20 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂)培养基为对照(CK),研究处理培养基中添加不同浓度蔗糖(25、30、35、40 g/L)、甘露醇(20、30、40、50 g/L)和多效唑(4.0、6.0、8.0、10.0 mg/L)对木薯胚性愈伤组织保存40 d时超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果表明,在20℃条件下,处理组与对照组SOD、POD、CAT活性呈先升高后降低的趋势,甘露醇和多效唑处理比蔗糖处理的3种保护酶活性高,下降的速度也较缓慢。与对照相比,蔗糖和甘露醇浓度均为30 g/L胁迫时,SOD、POD、CAT活性同时出现峰值,且一直维持较高水平;随着多效唑浓度(4.0～8.0 mg/L)的升高,SOD、POD、CAT活性不断升高,多效唑浓度为8.0 mg/L时木薯胚性愈伤组织中3种保护酶活性最高。说明将木薯胚性愈伤组织保存在添加蔗糖或甘露醇30 g/L、多效唑8.0 mg/L的常规固体培养基上,可以有效地延长木薯胚性愈伤细胞寿命,延缓保存时细胞的衰老。     

影响玉米愈伤组织发生因素的研究

研究不同基因型、外植体和培养基对玉米愈伤组织发生的影响。结果表明,在试验的几种培养基中,玉米芽尖较幼叶易于诱导形成愈伤组织。培养基MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D 0.2mg/L+CH 500mg/L和MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L+CH 500mg/L较适于玉米愈伤组织发生,鲁原92和农大108品种较郑单958更易于诱导形成愈伤组织。     

油茶优良无性系幼胚和子叶高效再生体系的建立

以油茶(Camellia oleifera Abel.)优良无性系的幼胚和子叶为外植体,采用正交试验设计方法,研究了基本培养基、IBA、6-BA和NAA等植物激素共4个因素的不同组合对其幼胚再生体系及子叶胚性愈伤组织诱导的影响,并进一步研究了不同植物激素对体细胞胚再生体系的影响。结果表明,植物激素的选择对幼胚再生体系的建立起着关键作用,NAA促进了幼胚再生苗的形成,IBA的添加反而阻碍了该体系的建立;由数据分析综合评定法,得出幼胚再生植株诱导最适培养基的理论值为WPM+2.0mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA;子叶胚性愈伤组织诱导的最适培养基为WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;子叶胚性愈伤组织的最适分化培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA。     

3个木薯品种的光合特性研究

[目的]研究3个木薯（Manihot esculenta Crantz）品种的光合特性,为木薯的栽培提供参考。[方法]利用美国PP—SYSTEM公司生产的TPS-2便携式光合作用测定系统,在大田条件下对3个木薯品种的株光合特性进行测定。[结果]3个木薯品种的净光合速率株变化呈先增后降的趋势,SC205在株变化中下降明显,GR891、GR911下降缓慢,GR911净光合速率最高,SC205最低;GR891、GR911的胞间c0：浓度稳定在310∥L左右,SC205净光舍速率强时胞间c0：浓度较低,随后升高。较GR891、GR911而言,SC205具有较高的水分利用效率,更能节约并有效地利用土壤水分。[结论]SC205净光合速率有提高的潜力。     

玉米幼胚愈伤组织诱导及植株再生研究

以玉米幼胚为外植体,研究了2,4-D不同浓度对愈伤组织诱导以及6-BA不同浓度对愈伤组织分化的影响.结果表明,2,4-D浓度显著影响愈伤组织的诱导,愈伤组织诱导培养基中2,4-D适宜的浓度范围是2～3 mg/L,但不同品种的外植体对2,4-D浓度反应不同,其中辽单565愈伤组织诱导2,4-D最佳浓度为2.62 mg/L,自交系742愈伤组织诱导2,4-D理论最佳浓度为2.60 mg/L;6-BA对植株的再生有促进作用,胚性愈伤组织分化的最适6-BA浓度为1.0 mg/L.     

粗毛淫羊藿幼叶愈伤组织诱导及其总黄酮含量

为了对粗毛淫羊藿野生资源的保护及淫羊藿黄酮离体生产体系提供技术参考,以粗毛淫羊藿幼叶为外植体,研究粗毛淫羊藿愈伤组织诱导的灭菌剂、消毒条件、培养基、激素配比和光照条件,并测定愈伤组织中总黄酮的含量。结果表明:利用粗毛淫羊藿幼叶进行愈伤组织培养,用2%的NaClO消毒14min,接种于培养基MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L+NAA 1mg/L,在24℃光照强度为1 000lx条件下进行诱导效果最好,继代和保存应在适宜的黑暗条件下进行;诱导出的胚性愈伤组织总黄酮含量较高,达5.38%,与野生粗毛淫羊藿总黄酮含量想当,高于药典规定的标准。     

生长调节物质对半夏人工种胚形成的影响

以半夏叶片为外植体,研究了生长调节物质6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、α-NAA(α-萘乙酸)、IBA(吲哚丁酸)对半夏人工种胚诱导和增殖的影响。结果表明,6-BA和2,4-D有利于半夏叶片愈伤组织的诱导和增殖,适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;6-BA、IBA和NAA对半夏人工种胚的诱导和增殖效果较好,适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 2.0 mg/L或MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L。结果为对半夏人工种胚诱导及工厂化提供了试验依据。     

中华芦荟快繁技术研究

实验通过诱导愈伤组织和促进腋芽分枝能力两种途径对中华芦荟进行快繁。结果表明:在MS培养基中加入600mg/L的抗坏血酸可有效预防外植体的褐化。愈伤组织诱导途径中由叶诱导愈伤组织阶段和愈伤组织诱导芽阶段的最佳PGR种类和浓度配比分别为2mg/L6-BA+1.7mg/L2,4-D、4mg/L6-BA+0.5mg/LNAA;促进腋芽分枝能力方式中腋芽诱导丛生芽阶段的最佳PGR种类和浓度配比为2mg/L6-BA+0.5mg/LNAA;由芽诱导生根阶段最佳PGR种类和浓度配比为0.3mg/LNAA。促进腋芽分枝能力方式比诱导愈伤组织方式更适合中华芦荟的快速繁殖。     

半夏疏松愈伤组织诱导条件的优化研究(英文)

[目的]建立半夏细胞悬浮培养体系。[方法]以半夏叶柄为外植体,采用正交试验设计研究了2,4-D、NAA、毒莠定和KT4种植物生长物质及其配比对疏松愈伤组织形成的影响。[结果]2,4-D和毒莠定对半夏叶柄愈伤组织诱导效果最显著,KT和NAA次之。诱导半夏叶柄形成疏松愈伤组织的适宜培养基为MS+0.5mg/L2,4-D+1.0mg/LNAA+1.0mg/L毒莠定+1.5mg/LKT。[结论]为通过半夏细胞悬浮提取有效成分和生产人工种子奠定了基础。     

玉米自交系幼胚高效再生系统的建立

以22份玉米自交系为试验材料,以幼胚为外植体,研究基因型、诱导（分化）培养基、继代次数、Ag-NO3浓度对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、保持和植株分化的影响。结果表明,玉米幼胚培养能力受基因型、培养基及二者互作效应的影响,基因型是主要的影响因子。3 mg/L的2,4-D对胚性愈伤组织诱导和保持起关键作用;0.5 mg/L 6-BA抑制胚性愈伤组织的发生;8-12 mg/L AgNO3明显改善部分基因型愈伤组织质量,提高胚性愈伤组织诱导率。分化培养基中添加1 mg/L的KT和0.5 mg/L的IBA促进绿苗的分化和根系的生长。胚性愈伤组织继代3-5次后调整到最佳状态。确定了玉米幼胚培养胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为N6＋3 mg/L 2,4-D＋8-12 mg/L AgNO3＋0.2 mg/L IAA,最佳分化培养基为N6＋1 mg/L KT＋0.5 mg/L IBA。     

赤皮青冈幼胚愈伤组织诱导的研究

以赤皮青冈幼胚为外植体,以MS为基本培养基,探讨了2,4-D和6-BA两种激素共同作用下对赤皮青冈幼胚诱导的影响,以及在4℃条件下不同冷藏天数(5、15、30 d)和不同激素(6-BA和2,4-D)浓度组合对赤皮青冈幼胚诱导的影响。结果表明:6-BA对愈伤组织诱导的影响较大;接种在"MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+0.1g/L肌醇+1.0g/L水解酪蛋白"培养基上的幼胚,以4℃冰箱中冷藏15d的幼胚愈伤组织诱导率最高(41.1%)。在此基础上,选取冷藏15 d的赤皮青冈幼胚,探究了不同基本培养基种类(MS、1/2MS和WPM)和不同激素(6-BA和2,4-D)浓度组合对赤皮青冈幼胚诱导的影响。结果表明:3种培养基对愈伤组织诱导的影响没有显著差异,但是每一种培养基中诱导率最高的激素组合各不相同。     

喜树愈伤组织诱导与抑制褐化的研究

[目的]筛选喜树外植体的最佳诱导培养基,研究抑制外植体及继代愈伤组织褐化的方法。[方法]以喜树的幼叶和种胚作为外植体,通过测定过氧化物酶和多酚氧化酶的活性,从外植体选择、培养基种类、激素配比、添加物的处理等方面进行愈伤组织的诱导和抑制外植体及继代愈伤组织褐化的研究。[结果]幼叶外植体的最佳诱导培养基为:SH+NAA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.25mg/L;种胚外植体的最佳诱导培养基为:MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L。抑制幼叶外植体褐化的方法为:增加外植体大小,吹干培养基表面水分。抑制愈伤组织继代培养褐化的方法为:最佳诱导培养基附加30mg/L抗坏血酸和5g/L活性碳;1次继代后,将质地致密的愈伤组织转移到MS培养基上培养。[结论]该研究为喜树的遗传转化和植株再生提供理论基础。     

玉米自交系幼胚再生体系建立的研究

[目的]探索出玉米高频诱导具有胚性的愈伤组织和植株再生的条件。[方法]以玉米自交系幼胚为外植体,研究了不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、6-BA浓度对试管苗分化以及IBA浓度对试管苗生根的影响。[结果]2,4-D对玉米胚性率诱导有明显影响,其最佳诱导培养基为N6＋2,4-D 2 mg/L＋水解酪蛋白（CH）500 mg/L＋脯氨酸（pro）500 mg/L＋AgNO310 mg/L;试管苗分化适宜的培养基是N6＋6-BA 0.5 mg/L＋水解酪蛋白500 mg/L;试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS＋IBA 0.5 mg/L。[结论]该研究可为玉米抗病基因的遗传转化和优良抗病玉米品种的培育奠定基础。     

杂交构树体细胞胚诱导研究

以杂交构树叶片为材料,建立通过愈伤组织制备体细胞胚的技术途径。结果表明,光照强度750 lx、构树幼叶面积4~5 cm~2有利于诱导愈伤组织。最佳诱导培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D,pH值6.0,其愈伤组织诱导率达94.6%。构树愈伤组织最佳继代培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT,p H值6.2,愈伤组织增殖速度快。选择表面颗粒多、质地松软、浅黄色或白色的愈伤组织进行体细胞胚诱导,最佳诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,p H值6.4,体细胞胚的发生频率达到96.0%。