富硒乳酸粪肠球菌微胶囊包埋工艺及产品抗性试验研究

对富硒乳酸粪肠球菌采用0.03%к-卡拉胶、0.25%刺槐豆胶和2.5%明胶喷雾干燥的方法,进行三层微胶囊生物包埋,获得产品率为82.68%,包埋后菌体存活率为72.15%,菌体硒含量为0.571 mg/g.产品抗性试验表明:在人工胃酸 (pH2.1) 环境下,经2h包埋的乳酸肠粪球菌的存活率达96%以上,不受胃酸的影响;耐贮存性试验证明,包埋的富硒乳酸肠粪球菌在常温下贮存1年,由初始的5.7×108cfu/ml活菌数降为5.4×107cfu/ml,菌体存活率保持在19.5%以上,包埋菌体的耐贮存性能好;在一定加热条件下,50℃、30min菌体存活率为89.71%,100℃、5min为86.91%,120℃、2min为89.18%,证明经3层微胶囊包埋的富硒乳酸粪肠球菌,其微胶囊产品的耐热稳定性好.     

1株高产乳酸粪肠球菌的筛选、鉴定及益生性能的研究北大核心

研究旨在获得能够高产乳酸的畜源益生菌。试验从新鲜仔猪粪便中筛选得到一批乳酸菌,根据碳酸钙透明圈结果和乳酸含量测定结果得到1株高产乳酸菌株SWS50,对其进行形态特征、生理生化特征、分子生物学结果及系统发育树等鉴定,并进行抑菌试验、抗逆性试验和胃肠道模拟试验。结果显示,菌株SWS50为粪肠球菌,培养48 h后乳酸产量最高可达117.9 mmol/L;菌株SWS50对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌表现出较强的抑制作用;菌株SWS50具有较高的抗胆盐能力和耐酸能力,在人工肠液中基本可正常生长,存活率较高。研究表明,菌株SWS50具有较强的抗逆特性和一定的胃肠道存活能力,可发展为畜禽领域应用的潜力益生菌。     

乳酸粪肠球菌对泰和鸡生产性能的影响

试验旨在研究不同水平乳酸粪肠球菌对泰和鸡生产性能的影响。试验选用1日龄健康正常的泰和乌鸡1200羽,随机分为6组,每组5个重复,每重复40羽,试验期分为0~4、5~8、9~12周等3个阶段。试验采用单因子试验设计,分别在对照组、试验组Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组的日粮中添加不同水平的乳酸粪肠球菌,测定平均采食量、平均日增重、和料重比等生产性能指标。结果表明:(1)0~4周龄泰和乌骨鸡的采食量、平均日增重、饲料转化率随着乳酸粪肠球菌添加不同水平的提高而呈现提高的趋势。其中,50g/t组的平均日采食量与对照组和试验40g/t组差异显著(P0.05);50g/t组的日增重与对照组和试验30g/t组、40g/t组差异显著(P0.05);50g/t组的料重比与对照组和其他试验差异显著(P0.05)。(2)5~8周龄泰和乌骨鸡的平均采食量、平均日增重、饲料转化率随着乳酸粪肠球菌添加不同水平的提高呈现提高的趋势。其中,40g/t组的平均日采食量与对照组差异显著(P0.05),其他各组差异不显著(P0.05);40g/t组的平均日增重与对照组和60g/t组差异显著(P0.05),其他各组差异不显著(P0.05);40g/t组组的料重比与对照组、30g/t、50g/t、60g/t试验组差异显著(P0.05)。(3)9~12周龄泰和乌骨鸡的平均日采食量、平均日增重、饲料转化率随着乳酸粪肠球菌添加不同水平的提高而呈现先提高后下降的趋势。但各组差异不显著(P0.05)。上述结果提示:在泰和乌鸡日粮中添加乳酸粪肠球菌能改善其生产性能,提高其采食量和饲料转化率,促进泰和乌鸡生长发育。0~4、5~8、9~12周龄泰和乌骨鸡适宜添加量分别为50g/t、40g/t、30g/t。     

乳酸L-68型粪肠球菌对肉鸡免疫功能的影响

为了研究乳酸L-68粪肠球菌对肉鸡的免疫功能的影响,选用3 000羽1日龄的艾维菌肉用仔鸡,随机分为2个处理组,每组1 500羽.对照组饲喂基础日粮,实验组饲喂基础日粮并在饮水中加入微生态制剂乳酸L-68粪肠球菌,实验期为42 d.通过检测鸡群的健康状况、抗体水平、和免疫器官指数探索该制剂对肉鸡的免疫增强作用.结果表明,微生态制剂试验组鸡的抗NDV的HI效价、免疫器官指数均优于对照组鸡,差异显著(P<0.05);肉鸡饮水中添加乳酸L-68粪肠球菌,能促进免疫器官的生长发育,提高免疫器官指数;能明显提高循环抗体的水平.     

乳酸粪肠球菌对锦江黄牛免疫功能及粪便菌群的影响

试验选取18头体质量270 kg左右的锦江黄牛,随机分为对照组和试验组,每组9头牛,试验组日粮中添加200 mg/kg的乳酸粪肠球菌,对照组不添加,研究乳酸粪肠球菌对锦江黄牛免疫功能及粪便菌群的影响。预试10 d,正试60 d。结果表明:正试期第30天,免疫球蛋白G(Ig G)含量试验组比对照组增加11.57%(P0.05);白细胞介素1(IL-1)含量试验组减少26.38%(P0.05);肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量试验组比对照增加1.68%(P0.05);第60天,Ig G含量试验组比对照组增加4.94%(P0.05);IL-1含量试验组比对照组减少6.24%(P0.05);TNF-α含量试验组比对照组增加20.03%(P0.05)。正试期第30天,大肠杆菌试验组比对照组降低38.00%(P0.05);乳酸杆菌试验组比对照组增加1897.6%(P0.05);第60天,大肠杆菌试验组比对照组降低26.96%(P0.05);乳酸杆菌试验组比对照组增加86.20%(P0.01)。结果表明:乳酸粪肠球菌复合菌在一定程度上可以增强锦江黄牛的免疫功能,但效果不显著(P0.05);乳酸粪肠球菌复合菌可以提高动物肠道中优势菌群的数量,改善锦江黄牛肠道内环境。     

乳酸粪肠球菌对锦江黄牛生长性能及养分消化率的影响

本试验选取体重270 kg左右的锦江黄牛18头,随机分为对照组和试验组,每组9头牛,试验组日粮添加200 mg/kg的乳酸粪肠球菌,对照组不添加,研究乳酸粪肠球菌对锦江黄牛生长性能及养分消化率的影响。预试10 d,正试60 d。结果表明:①处理组与对照组生长性能相比,平均日采食量增加了9.29%(P﹥0.05),平均日增重减少了15.71%(P﹥0.05),饲料转化率降低了20.12%(P﹥0.05)。②处理组与对照组养分表观消化率相比,有机物质降低了4.87%(P﹥0.05),蛋白质降低了4.69%(P0.05),粗脂肪降低了10.63%(P﹥0.05),中性洗涤纤维升高了1.11%(P﹥0.05),酸性洗涤纤维降低了26.92%(P0.05)。以上结果表明:日粮中添加乳酸粪肠球菌对锦江黄牛生长性能及养分表观消化率没有改善作用。     

饲用粪肠球菌培养基及发酵条件的优化研究

为提高饲用粪肠球菌发酵活菌数,通过单因素试验和正交优化试验对粪肠球菌的培养基和发酵条件进行优化.确定最佳发酵培养基为蛋白胨3.2％,酵母粉1％,葡萄糖2.8％,吐温-80 1 ml/L,柠檬酸三铵0.2％,七水硫酸镁0.02％,一水硫酸锰0.005％,碳酸钙1.0％.最佳发酵条件为培养基初始pH(7.1+0.1),接种量2.5％～5.0％,温度34～37℃,150 r/min振荡培养.在最佳培养基和发酵条件下,粪肠球菌活菌数最高可达8.5×109 cfu/ml.     

5 L发酵罐中粪肠球菌发酵工艺参数优化

本试验旨在通过单因素试验及Box-Behnken响应面试验设计法优化饲用粪肠球菌EXW 27发酵工艺,探索搅拌速度、中和剂、pH、接种量、初始糖含量、通气方式以及补料工艺等对菌体在发酵罐内生长的影响。优化菌体小试发酵工艺为:将种子液以3%(V/V)接种于装液量为70%的5 L小罐,发酵温度37℃,搅拌转速165 r/min,通空气保压0.02 Mpa,自动流加12.5%的氨水控制pH在5.5,当pH高于5.5流加葡萄糖补料发酵18 h左右结束,在此最佳条件下所得发酵液的活菌浓度约为3.799×10^10 cfu/mL,比优化前提高了近3倍,为以后工业化生产提供参考。     

酸乳中乳酸菌的筛选及乳酸发酵研究

从酸乳中分离出乳酸球菌和乳酸杆菌,通过对它们发酵特性测试,筛选出菌种进行乳酸发酵,根据正交试验得出最佳生产工艺：发酵温度40 ℃,还原添加量90%,白砂糖添加量5%,球杆菌比例1：1.     

产enterocin E5细菌素粪肠球菌发酵条件的优化

采用琼脂扩散法测定粪肠球菌发酵上清液对大肠埃希菌K88的抑菌活性,从而确定产enterocin E5细菌素粪肠球菌的发酵条件。结果表明,粪肠球菌E5产细菌素的发酵培养基为MRS培养基,最适温度为37℃,最适起始pH值6.5,最佳接种量2%,种龄14 h,发酵时间16 h,最佳培养基组分氮源为1%胰蛋白胨、0.5%酵母浸粉,最佳碳源为1%葡萄糖、0.5%蔗糖,0.1%Tween-80有利于enterocin E5的产生。这是分离自北京优良商品猪黑六产enterocin E5粪肠球菌的首次报道。     

粪肠球菌生长曲线的测定

用分光光度仪和活菌计数两种不同的方法对粪肠球菌生长曲线进行测定,结果表明,在细菌对数生长期以前,两种方法所得结果基本一致,但在衰亡期,两种方法具有差异,活菌记数法更能如实反映细菌的生长情况.     

乌鲁木齐市宠物源粪肠球菌和屎肠球菌耐药性及耐药基因检测

为了解乌鲁木齐市宠物源粪肠球菌和屎肠球菌对临床常用抗菌药物的耐药性及其耐药基因携带情况,在乌鲁木齐市多家宠物医院、警犬基地、犬养殖基地采集宠物(犬和猫)直肠粪样449份进行粪肠球菌和屎肠球菌的分离鉴定,通过琼脂稀释法测定10种抗菌药物的最小抑菌浓度,利用PCR方法检测11种耐药基因.结果分离鉴定出宠物源粪肠球菌和屎肠球...     

猪源粪肠球菌的分离鉴定

对来自四川地区送检病猪采样分离到2株致病性革兰氏阳性球菌进行分离纯化,根据培养形态、理化特性和16SrRNA序列同源性分析,综合判定所分离菌株为粪肠球菌,采用纸片扩散法进行药物敏感性实验,结果显示分离的致病菌均对供试的头孢唑啉钠、利福平药物高度敏感,对氨苄西林、红霉素、氧氟沙星等药物不同程度耐药,根据结果制定相应防治措施,经处理后,病情得到控制。     

粪肠球菌R-WL发酵培养基的优化

本试验旨在优化培养基提高粪肠球菌(Enterococcus faecalis)R-WL发酵液的菌体密度,为高效、优质的微生态制剂产品研制奠定基础。首先通过生长曲线的测定、培养条件和培养基成分的单因素试验,确定菌种RWL的最适培养条件为:时间14 h、pH 8.5、温度37℃、接种量3%,最适碳源为乳糖,浓度为10 g/L,最适氮源为蛋白胨+酵母膏,浓度为30 g/L。然后通过Plackett-Burman试验分析培养基中对粪肠球菌发酵影响最重要的主要因素为蛋白胨、乙酸钠和柠檬酸二铵,再通过最陡爬坡试验获得主要因素的最适范围,最后通过Box-Behnken试验和响应面分析得到主要因素的最适添加量。结果表明:最优发酵培养基配方为:乳糖10 g/L、酵母膏15 g/L、蛋白胨12.18 g/L、乙酸钠4.5 g/L、柠檬酸二铵4.5 g/L、硫酸镁0.58 g/L、硫酸锰0.25 g/L、磷酸氢二钾2 g/L、轻质碳酸钙3 g/L,初始pH 8.5。通过试验验证,优化后发酵培养基的发酵菌液活菌数可达(6.44±0.10)×109cfu/mL,比原MRS培养基活菌数提高了71.28%。     

猪源粪肠球菌的分离鉴定

对来自四川地区送检病猪采样分离到2株致病性革兰氏阳性球菌进行分离纯化,根据培养形态、理化特性和16S rRNA序列同源性分析,综合判定所分离菌株为粪肠球菌,采用纸片扩散法进行药物敏感性实验,结果显示分离的致病菌均对供试的头孢唑啉钠、利福平药物高度敏感,对氯苄西林．红霉素、氧氟沙星等药物不同程度耐药,根据结果制定相应防治措施,经处理后,病情得到控制。     

粪肠球菌动物致病的研究进展

粪肠球菌又称粪链球菌,能在不同环境中生长存活,对外界环境抵抗力较强,部分属于动物肠道中的正常茵群,还有部分在长期的进化中出现了毒力基因。近年来,粪肠球菌感染人和动物的报道日益增加,逐渐得到人们的广泛关注。论文综述了猪、牛、羊、禽和犬粪肠球菌的主要致病性、毒力基因及耐药性,为防制动物粪肠球菌感染提供参考。     

福建省某鸡场粪肠球菌耐药情况调查

选取粪肠球菌为指示菌,经过PCR方法进行鉴定,采用美国临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的肉汤微量稀释法的规范进行操作,测定从福建某鸡场分离的98株粪肠球菌的MIC值。试验结果显示:该场分离的粪肠球菌对土霉素、红霉素、氯霉素、环丙沙星的耐药率依次是95.8%、88.8%、63.3%、53.1%,都表现出较高的耐药率,对万古霉素和氨苄西林较为敏感,耐药率分别为0%和6.1%。     

某养殖场鸡源粪肠球菌分离鉴定及耐药性研究

本文从辽宁某鸡场100份肉鸡盲肠拭子中分离获得粪肠球菌24株,通过ATB细菌鉴定仪进行鉴定确认为粪肠球菌,并对这24株粪肠球菌进行了14种抗生素的药敏试验。结果显示,粪肠球菌对青霉素、万古霉素、氨苄西林和替拉考宁敏感;对红霉素、氯霉素、环丙沙星、四环素、左氧氟沙星和奎奴普汀/达福普汀耐药,耐药率均达到100.0%,养殖场抗菌药物耐药严重。     

猪源粪肠球菌的基因型及耐药性分析

为了解上海地区规模化猪场中粪肠球菌的耐药性和基因型,2013年3月-2014年5月从上海地区10个规模化养猪场收集到分离鉴定的粪肠球菌133株,采用微量肉汤稀释法对12种抗菌药物进行药敏试验,采用PCR技术分别检测分离株中β-内酰胺类抗生素耐药相关基因(TEM)、氨基糖苷类抗生素耐药相关基因[aac(6’)/aph(2")和aph(3’)-Ⅲ和ant(6)-Ⅰ]、四环素耐药相关基因(tetM)、红霉素耐药相关基因(ermB和mefA)和万古霉素耐药相关基因(vanA和vanB)。结果显示,在133株粪肠球菌中,耐药基因ermB、tetM、TEM、ant(6)-Ⅰ、aac(6’)/aph2"、aph(3’)-Ⅲ、vanA的检出率分别为:95.5%(127/133)、91.0%(121/133)、63.2%(84/133)、45.9%(61/133)、42.1%(56/133)、24.1%(32/133)、3.0%(4/133);未检出mefA和vanB基因的菌株。分离菌株对12种抗菌药物的耐药性较为严重,且以6~9耐为主要耐药株,占81.2%。试验表明,上海地区猪源粪肠球菌多重耐药现象严重,携带抗菌药物相关耐药基因是导致分离株耐药的主要原因。