传统稀释液配方中添加不同保护剂对藏羊精液冷冻效果的影响

为探索在传统稀释液配方中添加保护剂对藏羊精子的冷冻保存效果,在传统稀释液配方(果糖-蔗糖-柠檬酸钠-甘油)中,由Tris(三羟甲基氨基甲烷)代替柠檬酸钠,乙二醇代替甘油,在果糖-蔗糖-Tris-乙二醇基础上添加维生素B12、维生素E、维生素C、复合维生素B等,以增强精子缓冲力,减少毒性,提高精子活力、顶体完整率及受精力。结果表明:精液冷冻保存稀释液中添加Tris比添加柠檬酸钠有更好的冷冻保存效果,能有效改善冻后精子活力和顶体完整率;精液冷冻保存稀释液中添加维生素B12对精子有良好的保护作用;用等体积乙二醇代替甘油作为防冻剂,对精子冷冻时的保护作用不亚于甘油;藏羊细管冷冻精液的制作中,用果糖-蔗糖-Tris-乙二醇-维生素B12组合稀释液配方进行2次稀释,8 min冷冻,其冷冻效果最佳,顶体完整率最高。     

怎样进行山羊精液冷冻及输精

<正> 1 精液稀释1.1 稀释液的配方稀释液是精子的保护剂,对精子冷冻效果有着决定性影响.国外常用稀释液为:三基+柠檬酸钠+葡萄糖(或果糖)+20%卵黄+6～8%甘油;脱脂奶+3～7%的甘油,国内采用的配方主要有两类,即:葡萄糖+柠檬酸+柠檬酸钠+卵黄+甘油;乳糖+脱脂牛奶+卵黄+甘油。在精液冷冻过程中,甘油对精子具有重要的保护     

不同稀释液配方对奶牛冷冻精液的影响

采用假阴道法采集成年种公牛精液,经精液品质检查后,合格精液用四种不同冷冻稀释液进行稀释、冷冻、以筛选出适宜的冷冻稀释液和最佳冷冻保护剂.结果表明:Ⅱ号稀释液优于其它3种稀释液(P＜0.05);甘油为最佳冷冻保护剂.优于乙二醇和DMSO冷冻效果(P＜0.05),其最佳浓度为7%,精子冷冻后活率平均可达0.45±0.575,畸形率15.44%,项体完整率57.82%;奶牛细管冻精的解冻效果以75℃水浴,2 S到6 S的解冻时间最佳.     

山羊冷冻精液糖类保护剂试验的报告

家畜精液的冷冻保存，是人工授精的一项重大改革，在精液冷冻技术发展过程中，由于稀释液中加入甘油作为保护剂，而使精液保存技术取得重大突破，但不同畜种的精子对甘油的反应不同。牛冷冻精液稀释液中甘油浓度或高或低对精子活率及受胎率关系不大，对猪和羊来说，甘油浓度增加时，冷冻精液的精子活率虽高，但受胎率极不理想。现将采用最新研制的无甘油糖类保护剂，     

冷冻距离和冷冻保护剂种类对超低温保存新西兰兔精液品质的影响

为了探讨新西兰兔精液超低温冷冻保存的最佳方法,试验采集新西兰成年公兔精液,采用0.25 mL细管冷冻法进行超低温冷冻,以解冻后精液活率、质膜完整性、顶体完整率为指标,研究距离液氮面不同高度和冷冻保护剂种类对冷冻保存兔精液品质的影响。结果表明:冷冻精液距离液氮面3 cm,其精液活率、质膜完整性和顶体完整率明显优于1 cm和5 cm;在冷冻稀释液中添加甘油相对于其他冷冻保护剂对精液品质的保护效果好,甘油浓度为3%时相对其他浓度效果较好。说明了距液氮面3 cm冷冻,冷冻稀释液中添加3%甘油对兔精液的保存效果较好。     

陕北白绒山羊精液冷冻稀释液配方优化

为筛选陕北白绒山羊精液冷冻保存稀释液中最适的甘油及卵黄浓度,试验以三羟甲基氨基甲烷(Tris)6.057 0 g,蔗糖5.134 6 g,果糖1.500 0 g,柠檬酸钠3.318 6 g,青霉素10万IU,双蒸水200 m L配制成基础液,采用双因素正交试验研究不同浓度甘油、卵黄对精液冷冻保存的影响;采用一步稀释法冷冻保存陕北白绒山羊精液,复苏后检测活率、畸形率等确定精液冷冻稀释液最佳配方。结果表明:最佳冷冻稀释液配方为基础液80.5%+甘油6%+卵黄13.5%,精液冷冻、复苏后精子活率达到(37.2±0.5)%,精子畸形率为(11.2±0.5)%,质膜完整率为(64.2±0.5)%,均优于其他组,冷冻效果达到最佳,是保存山羊精液的冷冻稀释液最佳配方。     

不同保护剂对藏羊冷冻精液品质影响的研究

本实验研究了不同保护剂对藏羊细管冷冻精液的品质影响。结果表明:含T ris的柠檬酸盐缓冲液可以提高冷冻-解冻后的精子活率(0.41±3.23)和精子顶体完整率(74.45±1.45),以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率(0.41±2.87)和顶体完整率(81.23±1.45)。稀释液中添加维生素B12对提高冷冻后精子活率(0.44±3.26)与保护顶体完整率(83.33±1.93)具有良好的作用。     

小尾寒羊精液冷冻技术研究

本试验对11只2～3岁小尾羊种公羊的精液品质、保存稀释液和冻精制作技术进行了研究。结果表明:小尾寒羊种公羊的射精量、精液品质、精液pH值、密度、色泽、活率和畸形率均属正常范围,优于无角道塞特和莎福克绵羊;4种稀释液中,A液低温保存效果优于B、C、D 3种稀释液,差异极显著(P<0.01)。B液作为小尾寒羊冷冻精液稀释效果较理想(P<0.01)。6％甘油作为小尾寒羊冷冻精液保护剂效果较理想。     

无角陶赛特羊冻精制作技术

对无角陶赛特种公羊 (n =10 )精液品质、精液保存稀释液和冷冻精液制作技术进行了研究。结果表明 :精液密度为 2 0 .0 3± 0 .2 5亿个 /ml,活率 (冻前为 0 .80± 0 .0 6 ,冻后为 0 .5 1± 0 .0 1) ,畸形率 (冻前为 10 .1± 1.0 3,冻后为 2 9.6±0 .3) ,死精子百分率为 14 .1± 7.1;冻精的平均菌落数小于 5 0 0个 /剂。从 3种精液稀释液中选出了一种最佳稀释液 (三羟基氨基甲烷 卵黄 葡萄糖 柠檬酸 ) ;从 3种冷冻保护剂中筛选出甘油为理想的抗冻保护剂 ,其最佳浓度为 4 %～ 6 %。     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

鸡精液冷冻保存效果的研究

本文对鸡精液冷冻保存稀释液、冷冻保护剂进行了研究,同时观察了冷冻保存后精子超微结构的变化,结果表明：1）采用甘油作冷冻保护剂的精子冻后活力及复苏率均显著高于DMSO;甘油作冷冻保护剂时,A配方（5％葡萄糖液）冻后活力及复苏率均显著高于配方B（11％蔗糖液）、极显著高于配方c（1．59％葡萄糖）;A配方中添加13％甘油的冻后活力和复苏率均显著高于10％和15％的甘油且极显著高于4％和7％的甘油;2）采用A配方添加13％的甘油来冷冻保存精液,冻后精子活力为0．852±0．012,输精后受精率只有0．19％,经电镜观察,发现冷冻保存后精子的形态结构出现明显异常和受损,外部形态正常率和超微结构正常率分别只有鲜精的14．3％和12．5％．主要袁现在精子的顶体、核、质膜、线粒体鞘等形态结构的严重损伤。     

稀释液中不同甘油浓度与渗透压的关系及对精液冻后的影响

自推广冷冻精液以来,甘油做为一种冷冻保护剂普遍使用,它在稀释液中浓度多少为宜,说法不一,主要是根据稀释液的组成成份而定。大致为4—9％,不少报道当甘油浓度超过10％时对精子有害,有人提出:猪的冷冻精液中含有甘油虽保护了精子的活力,但顶体和细胞膜膜受到损伤,受精力下降,从而使我们感到甘油在精液冷冻过程中除了对精子的保护作用一面外,其有害的作用和范围,这点国内报道不多。     

3种稀释液对乐至黑山羊精液品质的影响

旨在评价不同种类稀释液对乐至黑山羊精液品质的影响。配制柠檬酸-Tris（1号）、磷酸盐（2号）和OviXcell（3号）3种稀释液,采集8只乐至黑山羊新鲜精液,采用上述稀释液进行冷冻保存;测定并比较添加不同稀释液冷冻保存的山羊精液在采集后、平衡后以及解冻后的精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率。结果表明：在3种稀释液中,添加OviXcell稀释液（3号）的精液其解冻后精子活力和顶体完整率均最高,精子畸形率最低。提示OviXcell稀释液更适用于乐至黑山羊精液的体外冷冻保存。     

东佛里生奶绵羊精液冷冻保存方法的研究

本研究旨在探讨东佛里生奶绵羊冷冻稀释液中添加维生素B₁₂以及不同冷冻保护剂对冷冻精液品质的影响，并筛选适合东佛里生奶绵羊的精液冷冻程序。通过假阴道法采集3只健康配种用东佛里生奶绵羊的精液，分为3组，分别为对照组(基础稀释液+6%甘油)、维生素B₁₂组(基础稀释液+6%甘油+0.05 mg/mL维生素B₁₂)、冷冻保护剂组(基础稀释液+5%乙二醇)。在-10～-100℃温区内设置3种降温速率(40、30、20℃/min)进行冷冻。结果显示：维生素B₁₂组冷冻精液的运动性能和畸形率较对照组没有显著变化；对照组冷冻精液的总活率、前向运动比例、平均路径速度、直线速度、曲线速度、直线性、鞭打频率、摆动性优于冷冻保护剂组(P<0.05)，畸形率低于冷冻保护剂组(P<0.05)。在冷冻程序的设计上，在-10～-100℃温区内以-40℃/min速率进行降温的冷冻程序A，其冷冻精液总活率、前向运动比例、平均路径速度、直线速度、曲线速度、直线性优于其他2个程序(P<0.05)，其畸形率最低(P<...     

稀释次数对辽宁绒山羊细管冻精冷冻效果的影响

传统的山羊冻精稀释液的配方使用甘油作为精液低温保护剂，但是甘油对精子具有毒副作用。在常温添加对冻精质量的影响较大，所以多采用两次稀释低温添加的办法，以减少其负面效应。自从用乙二醇代替甘油作为冻精的保护剂以来，冻精质量有了明显提高。笔者曾使用含有乙二醇的稀释液对辽宁绒山羊精液进行常温添加一次稀释，平衡1．5h即进行冷冻也取得了比较好的效果。一次稀释与两次稀释哪个效果更好？很有必要作进一步的试验，笔者于2003年10月份进行了该项比较实验，现将试验结果介绍如下：     

不同冷冻保护剂在鸡精液冷冻中的作用效果分析

本实验采用一定浓度的甘油、乙二醇、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、二甲基乙酰胺（ＤＭＡ）作为冷冻保护剂，用含冷冻保护剂的稀释液将精液稀释后常温保存，观察精子活率，比较精子生存指数，并进行输精实验，发现在常温下对精子毒害作用最大的是甘油，其次是ＤＭＳＯ，而ＤＭＡ及乙二醇对精子的毒害作用最小。以一定浓度的４种冷冻保护剂将精液冷冻后观察解冻活率，发现以ＤＭＡ作为冷冻保护剂，解冻后精子活率最高。在输精实验中，以ＤＭＡ作为冷冻保护剂采用深阴道输精，取得了５０％的受精率。浅输精取得了４０％的受精率。     

新型稀释液TCM199、EG和GL冻存牛精液效果试验测定

[目的]为探讨新型稀释液冻存牛精液效果。[方法]通过对以TCM199为主要稀释剂,以EG和GL分别为冷冻保护剂的牛细管冻精的活力测定,筛选出了以TCM199、EG和GL为稀释剂和冷冻保护剂的新型牛细管冻精制作配方。[结果]表明:以EG为冷冻保护剂时,配方11的活力最高,达到0.55,以GL为冷冻保护剂时,配方11的活力最高,达到0.6。     

冷冻保护剂对家畜精液冷冻保存的研究进展

家畜精液冷冻保存可以实现在不同时间、不同地点的人工授精,能有效提高优良种公畜的利用率,扩大其基因传播范围,同时也是家畜遗传资源易位保存的主要方法之一。在精液冷冻保存过程中,选择合适的稀释液成分对解冻后精子品质的影响十分重要。精子对低温非常敏感,在稀释液中加入冷冻保护剂可有效提升精子解冻后活力。文章综述了近几年渗透性冷冻保护剂(甘油、乙二醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜)和非渗透性冷冻保护剂(卵黄、大豆卵磷脂、蔗糖、脱脂乳)在猪、牛、羊、鸡、兔以及骆驼上的应用与研究,旨在为进一步深入研究家畜精子冻融损伤机制提供理论依据。     

奶山羊精液冷冻稀释液配方筛选

为了筛选适合我区生产上使用的奶山羊冷冻精液稀释液配方,设计5个奶山羊冷冻精液稀释液配方,渗透压1 070～1 720 mmol/kg,pH值5.97～6.99,挑选5只健康成年种公羊,调教采精、制冻。结果显示:1号配方与对照组(5号配方)的保护效果存在一定差异,但差异不显著(P>0.05);2号配方和4号配方与对照组存在显著差异(P<0.05);3号配方与对照组存在极显著差异(P<0.01)。2号、3号和4号3种配方的稀释液对奶山羊精液冷冻后的保护效果都较好,可以在生产上推广使用。     

细管冷冻精液试验

<正> 目前世界各国盛行用塑料细管冻制牛精液,我国由于设备条件的限制,再加对细管冷冻精液的规格,型号难以统一,生产中未能推广应用。为了尽快地把细管冷冻精液技术应用到生产实践中,我们对细管冷冻精液的封装,冻制,冷冻稀释液的筛选,以及推广使用等进行了试验。试验方法1.稀释液的筛选:冷冻稀释液的好坏直接关系到冻精质量,我们在冻制细管精液时,筛选了三种稀释液配方:第一种是12％蔗糖液73cc、鲜卵黄20cc、甘油7cc;第二种是将第一种中的12％蔗糖液改为,12％蔗糖液与2.9％柠檬酸钠液按1∶1配制后提取73cc,其它成份同第一种;第三种是在第二种稀释液中以每100cc另加入果糖1克即成。