猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪附红细胞体混合感染病例的实验室诊断

为确诊贵州省兴义市某养殖场生猪的发病原因,分别采集病死猪组织样品进行猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒核酸检测,以及病猪耳静脉血进行血液原虫检查.结果:(1)实时荧光定量RT-PCR检测猪瘟病毒核酸和PCR检测猪圆环病毒2型核酸均为阳性.其余病毒核酸检测均为阴性.(2)血涂片姬姆萨染色观察...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型、奇异变形杆菌混合感染病例的病原学诊断

为确诊贵州省都匀市某养殖场的猪死亡病因,采集病死猪病料进行猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型核酸检测,细菌分离鉴定及药物敏感试验。结果:猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量RT-PCR检测和猪圆环病毒2型PCR检测核酸均为阳性,其余病毒核酸检测均为阴性。细菌分离培养表明存在细菌感染,分子生物学鉴定为奇异变形杆菌;分离菌对硫酸安普霉素、硫酸粘菌素、盐酸大观霉素+盐酸林可霉素、氟苯尼考较敏感,对多种药物产生耐药。结论:确诊病例为猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、奇异变形杆菌混合感染。     

猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染病例的实验室诊断

为确诊贵阳市某养猪场生猪发病死亡的原因,采集3头病猪的血液、肺脏、肾脏、脾脏、淋巴结病料,采用PCR、qRT-PCR方法进行猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒核酸检测.结果:在血液及组织样品中猪圆环病毒2型核酸检测均为阳性,猪瘟病毒核酸检测均为阴性;在血液样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测结果为阴性,而...     

猪圆环病毒感染的PCR鉴别诊断

为了确诊临床疑似猪圆环病毒感染病例,为猪场疫病的防控与净化明确目标,采集病例组织样本运用RT-PCR和PCR方法进行猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪支原体、猪圆环病毒检测。结果:猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪支原体检测为阴性,猪圆环病毒检测为阳性,确诊为猪圆环病毒感染。     

病害生猪及其产品无害化处理模式对猪主要病毒病处理效果的研究

用掩埋、无害化处理池加微生物和畜禽养殖场有机废弃物处理机等3种无害化处理模式,对病害生猪及其产品进行无害化处理,研究处理前后猪繁殖与呼吸综合征病毒(蓝耳病病毒)、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、圆环病毒等4种生猪常见病毒的变化。结果表明,病害生猪及其产品经掩埋和无害化处理池加微生物处理30 d后,还能检测到猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒核酸阳性;经畜禽养殖场有机废弃物处理机处理24 h后,4种生猪常见病毒检测都为核酸阴性,说明掩埋和无害化处理池处理方式仍然存在生物安全隐患,可造成严重的二次污染,而畜禽养殖场有机废弃物处理机处理方式生物安全等级更高,更安全。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒及混合感染的检测

自2009年7月以来,贵州省几个规模养殖场猪群出现疑似猪繁殖与呼吸综合征的症状,为查明致病原因,以便采取针对性的治疗及防控措施,采用病毒学和细菌学试验对送检病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒检测和细菌分离鉴定。结果猪繁殖与呼吸综合征病原基因检出率为100%,同时继发感染猪瘟病毒、葡萄球菌或链球菌的比例高达85.7%。     

猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒双重RT-PCR检测方法的建立

为建立一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速、鉴别诊断方法,根据GenBank中已发表的2种病毒的基因组序列,选择病毒的保守基因各设计了一对特异性检测引物,建立了可以同时鉴别检测猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的双重RT-PCR方法.该方法能从猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒分别扩增出310 bp和161 bp的特异性片段,对2种病毒混合基因组同时扩增出310 bp和161 bp的特异性片段;该方法对猪乙型脑炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的扩增结果均为阴性;该方法最低可以检出0.2 pg病毒RNA含量.本研究建立的RT-PCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,在一个PCR反应体系中就可以准确、快速鉴别检测出猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒,可以用于临床病料的快速检测.     

猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、链球菌混合感染的实验室诊断

为确诊贵州省某猪场发病原因,对送检病料进行细菌分离鉴定和病毒核酸检测。结果:猪繁殖与呼吸综合征病毒实时定量荧光RT-PCR核酸检测为阳性;猪圆环病毒2型PCR扩增出大小为325 bp目的基因条带;细菌分离与生化鉴定显示存在链球菌感染,且药敏试验结果表明分离菌对硫酸安普霉素、延胡索酸泰妙菌素高度敏感。实验结果诊断为猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、链球菌混合感染。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒LAMP检测方法的建立

应用通用反转录试剂盒和环介导等温核酸扩增技术(LAMP)建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速检测方法,同时评价了该检测方法的特异性、稳定性和灵敏度。结果表明,根据猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白基因保守区设计的LAMP引物能够在64.5℃60min内实现对目标核酸片段的大量扩增,检测结果可通过直接观察反应副产物(焦磷酸镁)进行判读,该检测系统具有很高的特异性,与猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒等均无交叉反应;通过PRRSV不同毒株疫苗、模拟样品和临床样品确定,该检测系统具有很好的稳定性;通过质粒确定该检测系统可以检测到10拷贝/μL的病毒核酸模板。结果表明成功建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒LAMP快速检测方法,为临床提供了一种很好的检测手段。     

猪瘟病毒和猪圆环病毒2型混合感染的PCR诊断

为确诊承德市某规模猪场主要发病原因,对采集病料进行病毒核酸检测。方法：采用PCR方法共检测样品19份。结果：非洲猪瘟病毒核酸和猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型经典株和高致病性变异株核酸均为阴性;猪瘟病毒感染阳性13份,阳性率为68.42%,圆环病毒2型感染阳性8份,阳性率为42.10%,猪瘟病毒和圆环病毒2型混合感染8份,混合感染率为42.10%。结论：本次规模猪场发病诊断为猪圆环病毒2型与猪瘟病毒混合感染,且混合感染情况较为严重。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒混合感染的检测

2005年3月,江苏某猪场仔猪发生体温升高,呼吸困难,四肢末端、耳尖发绀,站立不稳和淋巴结出血为主要症状的疾病。4头发病仔猪的淋巴结、脾、肺脏组织用RT-PCR方法分别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒为阳性,用猪瘟ELISA试剂盒检测猪瘟病毒野毒为阳性。结合本病的临床症状和病理剖检,病例确诊为猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟野毒的混合感染。     

猪繁殖与呼吸综合征与猪圆环病毒2型混合感染的病因分析及综合防控

甘肃省某规模猪场,500头不同胎次母猪,日流产2～4头,主要表现为产死胎、木乃伊胎,平均死亡淘汰率高达20.05%。为确定流产原因,分别采集7份流产胎儿组织样品,进行常见母猪流产疫病的病原学检测;同时随机抽取2份饲料样品进行黄曲霉毒素检测。检测结果表明:猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型核酸检测均为阳性,猪瘟病毒核酸检测为阴性;饲料中黄曲霉毒素未超标。结果显示,猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪圆环病毒2型的混合感染是导致该规模场母猪流产的主要原因。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型和衣原体混合感染引起母猪流产的诊断与防治

2018年10月,甘肃省某规模猪场存栏900头不同胎次母猪,在产仔高峰期内突然出现大量流产现象,临产母猪主要表现为产死胎、木乃伊胎、弱仔、畸形胎,平均产生率为26.92%(365/1 356),乳猪平均死淘率高达16.55%(164/991)。为确定病因,采集5头猪病料,包括木乃伊胎1头、死胎1头、流产胎儿2头、7日龄自然死亡弱仔1头,进行猪常见疫病病原学检测。检测结果显示:5头猪的猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型核酸检测均为阳性,4头的衣原体核酸检测为阳性,猪瘟病毒、细小病毒、乙型脑炎病毒、伪狂犬病毒核酸检测均为阴性。结果表明,猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型和猪衣原体混合感染是导致该规模场母猪流产的主要原因,因此需要加强混合感染的控制。     

一起黑山猪圆环病毒病、猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的诊断

2018年12月,广西河池市天峨县某黑山猪养殖场发生了疫病,采集11份血清样品进行ELISA抗体检测,采集2份组织样品进行PCR检测,经过综合临床诊断和实验室检测结果,确诊为猪圆环病毒病、猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染。     

猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、圆环病毒病等主要疫病的调查分析

为了解广西贺州市猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病毒（PRV）以及猪圆环病毒（PCV）等病毒性传染病的流行情况,2018—2019年在该市无害化处理场进行采样监测,采用实时荧光定量PCR方法进行病毒核酸检测,分别对猪圆环病毒1型、2型、3型进行检测。结果表明,在检测的病毒核酸中,猪圆环病毒核酸阳性率最高,为58.52%。其中,又以猪圆环病毒2型病毒核酸阳性率最高,达53.98%。此外,样品中同时检出猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒混合感染的阳性率最高达14.20%。猪圆环病毒不同基因型的混合感染中,2型、3型混合感染的感染率最高,为4.26%。说明该市存在CSFV、PRRSV、PRV、PCV 4种病毒的散发性流行及混合感染,应加以重视。     

云南猪繁殖与呼吸综合征的诊断与Nsp2基因变异分析

对2019年5月份云南省出现的流产胎儿样品进行猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒核酸检测,2个猪场胎儿样品检测猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸均为阳性,其他病原均为阴性。对核酸阳性样品通过RT-PCR扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因,并对其进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明:2019年云南2株猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因核苷酸序列同源性为97.5%;与VR2332、CH-1a、HUN4、JXA-1、JXAIP80、TJA-1毒株之间的核苷酸同源性为77.1%～98.3%,与JXAIP80毒株同源性最高为97.6%～98.3%,与经典北美毒株VR2332同源性最低为71.1%～71.2%,与经典毒株VR2332和CH-1a相比存在90 bp碱基缺失。     

同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒的多重PCR技术

本试验设计了一种多重聚合酶链反应（PCR）技术,可用于同时检测与猪繁殖和呼吸衰竭相关的3种病毒一猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪圆环病毒2型（PCV2）。根据3种病毒的靶序列设计引物,     

云南地区部分猪场猪呼吸道疾病综合征致病病毒感染的流行病学调查

为了解云南地区猪场猪呼吸道疾病的流行病学,从而为有效防制该疾病提供科学依据,利用ELISA和RT-PCR方法检测了春、夏、秋、冬四季,云南地区不同区域规模养殖场1 164份血清和全血样品中的猪瘟抗原、猪繁殖与呼吸综合征抗原、猪伪狂犬gE抗体、猪圆环病毒2型特异抗体。结果显示:猪瘟抗原阳性率为11.34%,猪圆环病毒2型抗体阳性率为50.86%,猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为35.40%,猪繁殖与呼吸综合征抗原阳性率为44.51%。表明云南地区规模化猪场存在猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病野毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,不同季节和猪群年龄阶段感染情况有一定差异性。     

猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断

为摸清贵州省某猪场猪只发病死亡的原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理解剖诊断、猪繁殖与呼吸综合征抗体快速金标检测卡检测和RT-PCR检测核酸确诊等方法,对该猪场发病猪进行了诊断.试验诊断结果表明:通过流行病学调查、剖检病理和猪繁殖与呼吸综合征抗体快速金标检测卡检测初步诊断该猪场发病猪疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,RT-PCR检测核酸确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒野毒感染.     

屠宰猪常见病毒隐性感染情况的监测与分析

为评估常见猪病原的隐性感染情况,使用荧光PCR检测技术对采自13个屠宰场的1 224份健康猪淋巴结、1 194份健康猪扁桃体进行高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)等主要猪病病原进行核酸检测。结果显示,屠宰场内健康猪群中的病原阳性率分别为PRV 7.5%、PRRSV 4.5%、HPPRRSV 1.4%、CSFV 0.2%,表明健康猪群中有部分猪携带有致病性病原。