百合远缘杂交未成熟子房的离体培养研究

以不同百合种间杂交获得的子房为外植体,根据子房的发育程度,采用子房切片、胚珠或者小胚进行离体培养,观察子房切片、胚珠和小胚的萌发和生长情况,以期筛选出适合小胚、胚珠和子房切片萌发和生长的培养基。结果表明:适合子房切片培养的培养基为MS+NAA 0~0.3mg/L+蔗糖30 000mg/L;适合胚珠培养的培养基为1/2MS+BA 0~0.2mg/L+蔗糖30 000mg/L;适合小胚培养的培养基为1/2MS+BA 0~0.2mg/L+NAA 0~0.2mg/L+蔗糖30 000mg/L。     

无核葡萄‘Kismis’胚挽救技术研究

为获得无核葡萄品种‘Kismis’无涩味后代,以该品种杂交所得幼胚为试材,研究其胚挽救技术。结果表明:通过试验确定采样最佳时期为授粉后41~48 d;通过培养基及不同植物生长调节剂浓度及组合试验筛选出适宜其胚珠发育的培养基为:N69+1.0 mg/L IBA+0.1 mg/L 6-BA+0.5mg/L GA3,发育率最高为55.4%,3种植物生长调节剂因子对胚发育的影响为:GA36-BAIBA;适宜胚萌发培养基为:1/2MS+1.0 mg/L IAA+0.5 mg/L GA3+0.2 mg/L IBA,胚萌发率最高为26.2%,2种植物生长调节剂对胚萌发的影响为:GA3IAA;胚培苗移栽成活率在70%以上。     

用于无核葡萄选育的胚挽救技术研究

通过4a的连续试验,观察了无核葡萄果粒及胚珠发育变化,对胚挽救的多个影响因素包括品种、接种时间、培养基和培养方式进行了研究。结果表明,红脸无核、底来特、黎明无核作母本的胚珠萌发率较高;各品种适宜的接种时间为无核白花后26d,红脸无核花后35d,爱莫无核×火焰无核花后48d,底来特×红宝石无核花后56d;用Nitsch作基本培养基优于B5;添加BA0.2mg/L获得的胚珠萌发率最高;常温黑暗、固体培养有利于胚珠的发育。已定植结果的无核葡萄杂交胚挽救后代的无核比率平均为58.6%。将胚挽救技术用于无核葡萄育种是十分有效的。     

花前施用6-BA对抗寒无核葡萄胚挽救效果的影响

在花前14 d,分别对4个抗寒无核葡萄杂交组合‘火焰无核’×00-1-5、‘秦红10号’×00-1-5、‘秦红2号’ב木星’和‘红宝石无核’×00-1-5的母本花序施用不同浓度6-BA,以MM3固液双相培养基作为胚发育培养基,WPM固体培养基作为胚萌发培养基进行胚挽救,研究花前施用6-BA对胚挽救效果的影响。结果表明:花前施用6-BA对胚的发育起促进作用,但不同浓度6-BA对不同杂交组合的胚挽救效果不同,其中‘秦红10号’×00-1-5、‘秦红2号’ב木星’和‘红宝石无核’×00-1-5在6-BA浓度为50mg/L时,胚发育率、萌发率和成苗率最高;而‘火焰无核’×00-1-5在6-BA浓度为30 mg/L时,胚发育率、萌发率和成苗率最高。无核品种‘秦红2号’‘红宝石无核’最适宜作母本,‘火焰无核’胚挽救效果较差。     

芍药胚离体培养的初步研究

以芍药去皮种子和胚为外植体,研究了不同培养基对胚萌发率和生长状况的影响.结果表明:在诱导种子萌发过程中,3种基本培养基中以MS的效果最好,且在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基上萌发率最高,达71.4％;离体胚培养中,单独添加2.0 mg/L 6-BA时,胚生长受到抑制;MS+ 6-BA1.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L能促进愈伤组织形成;适宜浓度的GA3能够打破上胚轴休眠,MS+6-BA 1.0 mg/L+GA3 0.5 mg/L为胚诱导真叶抽生的最佳培养基.     

李、杏属间远缘杂交及杂种胚培养技术研究

以李为母本、杏为父本进行李、杏远缘杂交,在获得果实的5个杂交组合中,授粉后30d的坐果率为4%～30%,授粉后90～100d的坐果率为4%～16%。杂交后90～100d,取杂种胚进行离体培养,结果表明在S1:改良SH+6-BA1.0mg/L+IAA1.0mg/L和S2:改良SH+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基上,杂种胚均可萌发。对萌发芽进行继代培养,结果在MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基上增殖和生长良好。     

假单性结实型无核葡萄胚挽救影响因子研究

【目的】探究无核葡萄胚发育和胚萌发的影响因子,有利于优化无核葡萄胚挽救技术体系及提高其育种效率。【方法】以早黑宝盛花后100 d种胚为试材,采用剥种取胚进行胚离体培养,研究外源激素和营养添加物质对胚萌发成苗的影响,基于熵权TOPSIS(优劣解距离法)分析法筛选出最佳胚萌发培养基;以无核翠宝(盛花后28～38 d)、丽红宝(盛花后28～32 d)和晶红宝(盛花后28～32 d)未成熟幼果为试材,研究不同取样时间和不同培养时间对胚珠发育率的影响,基于熵权TOPSIS分析法综合评价不同形态胚的萌发成苗效果。【结果】在胚萌发培养基中添加0.1 mg·L-1IAA+0.2 mg·L-16-BA+0.5 g·L-1葡萄汁时,胚的萌发率和成苗率显著高于其他。取样时间接近(或达到)胚败育始期时,胚发育率最高。无核翠宝和丽红宝胚珠离体培养10周后的胚萌发率最高(≥50.00%)。不同形态胚的萌发成苗效果不同,子叶形胚的萌发成苗效果最好,其他排序为:鱼雷形胚﹥球形胚﹥心形胚﹥畸形胚。【结论】胚萌发培养基中添加外源物质有利于胚萌发成苗;离体培养败育时期的胚珠能获得更高的胚发育率和多胚率;子叶形胚和鱼雷形胚更易萌发成苗。     

无核品种中葡萄18号胚挽救技术体系的建立及其杂交后代早期选择

[目的]无核品种是葡萄的主要育种目标之一,通过建立无核品种中葡萄18号的胚挽救技术体系,为无核葡萄的胚挽救育种提供参考依据.[方法]通过研究不同胚珠取样时间(盛花后52、53、54、57、58、61和65 d,DAF),培养基类型(NN 和 ER)及相态(固-液双相和固相),氨基酸(0,2.5mmol·L-1 Ser、Cys、Gln),椰汁(0、100、200 mL·L-1),GA3/KT/NAA组合及4种细胞分裂素TDZ(0和0.2 mg·L-1)、6-BA(0和0.2 mg·L-1)、KT(0、0.2和0.4 mg·L-1)和ZT(0、0.2和0.4 mg·L-1)对中葡萄18号胚发育率、胚萌发率或成苗率的影响,并利用无核基因SSR标记对胚挽救杂种苗进行无核性状早期鉴定,初步建立该品种的胚挽救技术体系.[结果]中葡萄18号在DAF 61取样时胚发育率最高(34.33％);基本培养基NN(29.33％)较ER(25％)的胚发育率更高,且固-液双相培养基的效果较固相更佳;添加2.5 mmol·L-1 Ser(40.74％)、Cys(43.33％)或Gln(44.21％)的胚发育率均高于对照(29.33％);添加200mL·L-1椰汁的胚发育率(37.10％)显著高于对照(29.33％).在3种激素GA3/KT/NAA组合中,发现仅添加GA3和KT时,成苗率最高(60％),而添加NAA的组合均出现异常分化现象,且成苗率较低.四种细胞分裂素TDZ、6-BA、KT和ZT中,添加0.2mg·L-1 ZT更适合胚萌发及成苗,正常成苗的比率达76.36％.分别利用无核SSR标记P3_VvAGL11和5U_VviAGL11对中葡萄18号x玫瑰香的406个杂交株系进行无核性状检测,初步判定229个后代为无核株系,该组合的无核率为56.4％.[结论]中葡萄18号作为胚挽救母本的最佳取样时间为DAF 61前后,可利用固-液双相培养基NN+2.5 mmol·L-1 Cys/Gln+5.5 g·L-1琼脂+60 g·L-1蔗糖+2 g·L-1活性炭+0.5 g·L-1水解酪蛋白进行胚珠离体培养,暗培养9～10周后,接种裸胚于WPM+0.2 mg·L-1 ZT+20 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂+1 g·L-1活性炭进行胚萌发培养.鉴定出拥有无核基因SSR标记的胚挽救苗229株,是潜在的无核葡萄新种质.     

花烛体细胞胚胎发生及植株再生研究

 以花烛(Anthurium andraeanum Lind. ) 盆花品种无菌苗叶片、叶柄、根段为外植体, 对花烛体细胞胚胎发生及植株再生进行了研究, 建立了花烛体细胞胚胎发生体系。结果表明, 花烛叶片较其他外植体更适宜体细胞胚的诱导; 胚性愈伤组织及胚性结构诱导最适培养基为改良MS + 2, 4-D 2.0～3.0 mg·L ^{- 1} + KT 0.5 mg·L ^{- 1} +蔗糖2% +葡萄糖1% , pH 5.5, 暗培养40 d, 诱导率可达90.3%; 体胚发育适宜培养基为改良MS + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} +蔗糖3% , 光强20 μmol·m ^-2 · s^-1 , 培养20 d后体胚萌发率达6219%; 萌发的体胚在发育培养基上继续培养30 d后均能发育成完整植株。对不同阶段培养材料的组织结构及超微结构的观察证明了花烛体胚发生过程。     

猕猴桃种间远缘杂交胚珠培养

狗枣猕猴桃(Actinidiakolomikta)在远缘杂交过程中容易落果,无法获得杂交后代,针对这一问题以中科院武汉植物园猕猴桃资源圃中狗枣猕猴桃为母本,4倍体中华猕猴桃雄株(A.chinensis)为父本进行种间远缘杂交,授粉后29、45d小心剔取胚珠接种于培养基上,4℃条件下暗处理2周后转移至光下培养,每4周继代1次,当幼苗生长高度达3cm以上且根系发达时炼苗移栽。结果显示,培养基MS+GA30.2mg/L+NAA0.2mg/L+ZT1.0mg/L上,胚珠的萌发率最高,达到36.67%,在培养基MS+GA30.5mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA2.0mg/L上,幼苗长势好,而培养基1/2MS+IBA0.7mg/L对根系的发育具有良好的促进作用。     

南岭莪术的组织培养技术研究

以南岭莪术根茎上的芽为外植体,采用不同激素浓度的培养基对其进行了芽诱导、丛生芽继代、试管苗生根等研究。结果表明:在MS培养基中添加TDZ 0.05mg/L时,不定芽的诱导率最高,达到90%;丛生芽的增殖培养以MS+TDZ 0.3mg/L培养基为最佳,增殖倍数达到15.8,同时在芽的基部自发形成不定根;将长约3～4cm的生根苗切出,转入1/2MS基本培养基上壮苗,约4周后即可出瓶移栽,成活率达98%以上。     

菊花的快速繁殖

以带顶芽的菊花茎段为外植体,接种在诱导侧芽生长培养基中(MS NAA0.2mg/L 6-BA2.0mg/L),25d左右诱导成芽,再将芽接种于愈伤组织诱导培养基中(MS NAA0.1mg/L 6-BA3.0mg/L)进行继代培养,最后接种于生根培养基中(1/2MS NAA0.1mg/L),15d即可生根,30～35 d平均生根率达100%.将生根试管苗开盖练苗,移栽,成活率达95%以上.     

白桦组织培养技术研究

以白桦树种子和腋芽为外植体,通过研究培养基中不同植物生长调节剂配比对外植体诱导、芽苗增殖和生根等环节的影响,筛选出适合白桦组织培养的培养基配方.结果表明:以MS为基本培养基,附加蔗糖30 g/L、琼脂6 g/L,适合于白桦种子萌发生长的植物生长调节剂配比为BA 0.2 mg/L NAA 0.05 mg/L,而BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L适合腋芽诱导,诱导率高达87.0%,而且苗形态好,长势强,BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L的植物生长调节剂配比利于芽苗的增殖,繁殖系数可达到每4周4～5倍,适于芽苗生根的培养基为1/2 MS NAA 0.05 mg/L,平均生根数为4.5条,最多根数为8条,根系发达,移栽后成活率达90%以上.     

南昆山莪术的组培快繁技术研究

以南昆山莪术的根状茎腋芽为外植体,采用MS基本培养基,附加不同种类、不同浓度的植物生长调节剂,进行了不定芽诱导、丛生芽继代、试管苗生根等研究,探索其组织培养和离体繁殖的适宜务件。结果表明:在MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基中,不定芽的诱导率最高,达到85%;MS+TDZ 0.5 mg/L培养基最有利于丛生芽的增殖,增殖系数达到13.60;试管苗生根以1/2MS+NAA 0.2 mg/L培养基最好;当试管苗长至6 cm时出瓶移栽,成活率可达95%以上。     

秋福红树莓叶片离体再生植株研究

以红树莓品种秋福(Rubus L.cv.Autumn Bliss)离体叶片为外植体,研究适合其再生植株的叶片部位、放置方式、植物生长调节剂以及暗培养时间等条件。结果表明,叶片外植体接种于MS+TDZ2.00mg/L+IAA0.10mg/L的培养基,暗培养2～3周转移至正常光照下培养效果最好,愈伤组织形成率、不定芽再生率和外植体不定芽数分别为100.00%、95.83%和(5.57±0.27)个。将再生芽接种于1/2MS+IBA0.10mg/L的培养基中,35d后生根率达100.00%。再生植株炼苗后移栽,30d时成活率达97.30%,成功地建立了红树莓叶片的离体再生体系。     

不同浓度IBA对‘中梨一号’生根的影响

以‘中梨一号’试管苗为试材,探讨不同浓度的IBA（0．5、1、1．5、2、3、4、5、6、7mg／L）对其生根的影响。试验结果表明：诱导试管苗生根的最佳培养基为1／2MS＋IBA（Img／L）＋蔗糖（25g／L）＋琼脂（6g／L）,生根率达47．62％,且生根苟发育良好,根系生长健壮。生根苟长至5片叶时,移栽到保水透气好的蛭石中,其移植成活率80％以上。     

百香果组织培养及植株再生

以MS为基本培养基,百香果茎段为外植体,进行百香果组织培养及植株再生的研究。结果表明:MS+6-BA 2.0mg/L适合丛生芽诱导,诱导率达100%;MS+6-BA 1～1.5mg/L+IBA 0.1～0.2mg/L适合继代增殖培养;1/2MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L适合生根诱导,诱导率达100%。     

单叶刺槐组织培养研究

以单叶刺槐(Robinia. pseudoacaciaf. unifolia)带腋芽的茎段为外植体,探讨不同植物激素6-BA、IBA、NAA对试管苗增殖以及植株再生的影响,建立单叶刺槐离体培养技术体系。结果表明:启动最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L;增殖最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基为1/2MS+IBA50mg/L,预培养7d,再转至1/2MS0培养10d;在此体系中诱导率可达95.0%,增殖系数可达5.72,生根率83.3%,移栽成活率可达到100%。     

洋葱高频离体再生体系的建立

 以洋葱（Allium cepa L.）品种‘W465’的幼嫩花序和不同发育时期的幼蕾为外植体材料,研究激素配比对其愈伤组织诱导、再生和生根驯化的影响,以建立洋葱高频离体再生体系。研究结果表明,洋葱幼嫩花序为最佳外植体材料,在含有1.0 mg · L^-1 2,4-D + 1.0 mg · L^-1 6-BA 的B5 培养基上愈伤诱导率为100%,在添加1.0 mg · L^-1 TDZ 的B5 培养基上再生芽分化率为78.13%,在1/2 MS + 0.01 mg · L^-1 NAA 培养基上可诱导生根,驯化移栽成活率达到95%。     

西伯利亚远志组织培养与植株再生研究

以西伯利亚远志带腋芽的茎段为外植体,探讨不同激素处理6-BAI、BA、NAA组合对西伯利亚远志试管苗增殖及生根的影响,建立一套西伯利亚远志离体培养技术体系。结果表明:适合西伯利亚远志增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L,生根培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg/L,在此体系中增殖系数达3.15,生根率100%,移栽成活率可达100%。