利比亚皇后草茎段无性系的建立

利比亚皇后草的茎段在MS BA0.8mg/L 2,4-D0.5mg/L培养基上诱导的愈伤组织,在MS BA1mg/L GA3mg/L IAA0.2mg/L的培养基上分化率达18.8个芽/块,建立了高效分化无性系。把愈伤组织的分化苗在1/2MS IAA0.2mg/L培养基上培养能获得具有大量气生根的生根苗。生根苗经过炼苗,在河沙或炉灰渣的基质上易移栽成活或扦插成活,成活率可达100%。采用组织培养的方法,可以对利比亚皇后草进行试管苗无性繁殖,达到快速繁殖的目的。     

早熟禾品种耐寒变异植株无性系的建立

对草地早熟禾的小矮人品种耐寒变异植株无性系的建立进行了研究,并成功地诱导出小矮人嫩叶的愈伤组织,分化出丛生不定芽.诱导愈伤组织的理想培养基是MS BA 0.1mg/L 2,4-D 1 mg/L;由愈伤组织分化出苗的理想培养基是1/2 MS BA 0.1 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L;试管苗极易移栽成活,耐寒变异性状保持不变.     

光棘豆单细胞培养再生植株

由光棘豆种子无菌苗的胚轴和子叶诱导的愈伤组织建立起细胞悬浮系。由悬浮系分离出单细胞。单细胞在含有1～2mg/L 2,4—D的2/3MS培养基中采用振荡和静止两种方法培养。结果表明。振荡培养愈伤组织再生频率较高,所需时间较短。单细胞再生的愈伤组织转入分化培养基后分化出芽。幼苗转入含有IBA和IAA的1/2MS培养基中生根,成为完整的再生植株。在分化培养基中,只有瘤状愈伤组织能够分化出芽。并且较高浓度的细胞分裂素(6—BA或KT)或6—BA与ZT结合使用对愈伤组织的分化是有利的。     

紫花苜蓿离体培养植株再生及其RAPD分析

对苜蓿(品种农宝)的下胚轴外植体进行离体培养建立了再生体系。结果表明,子叶和下胚轴切段在附加0.2~1.0 mg/L IAA和2.0 mg/L 6-BA或2.0 mg/L KT的MS培养基上培养,均能诱导出愈伤组织,但子叶所诱导的愈伤组织不具有分化能力。下胚轴切段培养5~7 d即可诱导出愈伤组织,并分化出绿色芽点,在原培养基上进而可分化出大量的丛生芽。在含0.2 mg/L IAA和2.0 mg/L 6-BA的MS培养基上,其分化率最高可达到42.6%。这些芽在含0.2 mg/L IAA和0.5 mg/L KT的MS培养基上长成2 cm左右的幼苗时,将其切下转至1/2 MS0培养基上,培养10 d即可诱导生根,得到再生植株。随机选取实生苗和下胚轴愈伤组织再生苗进行RAPD分析,结果表明,所用的50个随机引物中有5个扩增出差异性条带,甚至再生植株之间也有1条引物扩增的条带有差异,这说明经组织培养所得到的再生植株与实生苗相比,在DNA水平上发生了一定程度变异,并且这种变异也存在于再生植株之间。     

草麻黄的组织培养及植株再生

将草麻黄幼苗节间幼茎部分作外植体,培养在附加KT 0.054mg/l+2,4-D 1.11mg/l的MS培养基中,可成功诱导出愈伤组织,愈伤组织分化出芽;同样的外植体培养在附加BA3mg/l+IAA0.2mg/l的MS培养基中,诱导出大量不定芽;不同途径得到的芽转移到MS附加6-BA 0.056mg/l+1.11mg/l2,4-D的培养基后,可分化出不定根,从而形成完整植株.     

柱花草愈伤组织培养与植株再生(简报)

对热研2号柱花草无菌实生苗的胚轴与叶片切段进行愈伤组织培养研究。结果表明,MS NAA 2 mg/L BA 0.5 mg/L及MS 2,4-D 3 mg/L BA 0.3~0.5 mg/L CH 200 mg/L对叶片切段诱导效果最好。而下胚轴愈伤组织的诱导以MS NAA 3 mg/L BA 0.1~0.3 mg/L和MS 2,4-D 3 mg/L BA 0.5 mg/L最优。愈伤组织在MS BA 2.5 mg/L NAA 0.1 mg/L进行分化培养,可实现高频植株再生。最适生根培养基为1/2MS 1.0mg/L IBA 0.5 mg/L IAA,生根率可达95.84%。     

结缕草‘Zenith’离体培养植株再生体系优化研究

以结缕草Zoysia japonica栽培品种‘Zenith’的成熟种子为外植体,通过调整2,4 D浓度和凝固剂种类及其浓度,进行结缕草离体培养植株再生体系优化的研究。结果表明：愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+2,4 D 4.0 mg/L,愈伤组织诱导率为69.97%,其中胚性愈伤组织诱导率达28.78%。胚性愈伤组织包括2种类型：淡黄色、湿润的小颗粒聚集状愈伤组织(27.36%)和黄色、干燥、颗粒状愈伤组织(1.42%)。以结冷胶为凝固剂,有利于提高愈伤组织的诱导率。提高愈伤组织继代培养基中的琼脂浓度,有利于保持胚性愈伤组织的植株再生能力。适宜的愈伤组织分化培养基为MS+KT 4.0 mg/L或MS+6 BA 3.0 mg/L,绿苗分化率达90%以上。适宜的生根培养基为1/2MS ,生根率100%。     

日本矮生沿阶草愈伤组织的诱导及其分化

选用不同外植体和不同培养基,对日本矮生沿阶草Ophiopogon japonicus进行了愈伤组织的诱导及分化的研究.结果表明:幼嫩叶片的基部是最适宜诱导愈伤组织的外植体.G3(MS+KT 0.2 mg/L +2,4-D 0.1 mg/L)培养基的愈伤组织的诱导率达到89%以上,将诱导的愈伤组织置于J1(MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L)培养基中的愈伤组织的分化率最高,达到59%.因此,选用幼嫩的叶片基部置于G3培养基进行诱导,继代一次后置于J1培养基进行分化是最有利于再生的途径.     

日本结缕草植株再生体系的研究

以日本结缕草的成熟胚为外植体,对其组织培养体系进行了优化.试验结果表明,1)培养基中添加脯氨酸能提高愈伤组织诱导率,而添加BA能降低愈伤组织的诱导率,低浓度的NAA(0.1～0.2 mg/L)能促进愈伤组织的形成,愈伤组织诱导的最佳培养基为ND 2,4-D 3.0 mg/L NAA 0.2 mg/L L-Pro 500 mg/L,愈伤组织诱导率达57.3%;2)愈伤组织继代的最佳培养基为MSD 2,4-D 1.0 mg/L;3)愈伤组织分化的最佳培养基为MSD NAA 0.3 mg/L KT 0.5 mg/L BA 0.05 mg/L,分化率达36.7%.     

多年生黑麦草高频再生体系的建立及优化

从外植体预处理方式、基本培养基、激素浓度等方面着手,对多年生黑麦草愈伤组织诱导、继代、不定芽分化及再生过程中的影响因素进行了研究,提高了再生频率。结果如下：切取胚端半粒种子,经75%乙醇处理1min,0.1%HgCl处理15min,在经无菌水清洗4～6次后接种方式较好;愈伤组织诱导培养基以MS＋2,4—D 8.0 mg/L（或另添加甘露醇25 g/L）为佳;愈伤组织接种于MS＋2,4—D 8.0mg/L＋甘露醇25 g/L上进行1～2次继代后于NB＋6—BA2.0 mg/L上进行分化;不定芽转接至MS＋6—BA2.0 mg/L上进行扩繁或于1/2MS＋NAA0.5mg/L＋IAA0.5mg/L上进行生根。     

象草幼穗离体培养植株再生研究

以象草幼穗为外植体材料、改良的MS为基本培养基,研究了不同外源激素组合对不同发育时期幼穗愈伤组织诱导和植株再生能力的影响.结果表明,象草幼穗离体培养最适长度为2～5 cm;愈伤组织诱导培养基中添加4.0 mg/L 2,4-D 0.05 mg/L KT和4.0 mg/L 2,4-D 0.10 mg/L KT时,颗粒状愈伤组织诱导率分别为79.0%和72.6%;转入添加3.0 mg/L 2,4-D 0.2 mg/L 6-BA的继代培养基,分别有40.9%和74.0%的愈伤组织保持颗粒状结构;在添加2.0 mg/L CPPU 0.01 mg/L NAA和0.50 mg/L KT 0.5 mg/L IAA的分化培养基上,经过继代培养后的颗粒状愈伤组织的成苗率分别为36.4%和38.5%,总成苗率达50.2%和43.9%.3片叶大小的幼苗转入附加NAA 0.50 mg/L的1/2 MS壮根培养基,试管苗移栽成活率达95%以上.在继代培养过程中逐代选择外表呈白色、干燥、紧密、颗粒状的愈伤组织,是提高其植株再生能力的有效方法.     

肯塔基草地早熟禾愈伤组织的诱导及再生体系的建立

以肯塔基草地早熟禾成熟种子为外植体,研究了影响愈伤组织诱导、分化以及再生苗生根、移栽的主要因素,建立了肯塔基草地早熟禾高频再生体系。结果表明,在MS培养基上,低浓度的BA(0.1mg/L)配合2,4-D(3.0mg/L)诱导肯塔基草地早熟禾种子出愈率达到74.9±7.35%;0.1mg/L2,4-D在SH培养基上诱导愈伤组织分化成芽,分化率平均每块愈伤可达8.1±0.36个芽;最适生根条件为1/2MS 1.0mg/LNAA。     

蒙农杂种冰草成熟胚愈伤组织的诱导及植株再生

以蒙农杂种冰草成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织的诱导进行植株再生,结果表明:在附加甘露醇(0.2mol/L)和2,4-D(2.0mg/L)的MS培养基中,冰草成熟胚可诱导产生愈伤组织,诱导率为87.6%,但质量较差;将其在降低2,4-D浓度和添加6-BA的继代培养基中继代改造,可明显改善愈伤组织质量,增加胚性愈伤;将筛选改良的愈伤组织置于分化培养基MS+ZT(3.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)中,分化率为82%;分化小苗在1/2MS培养基上可生根并得到完整植株.本研究还建立了一套有效的以成熟胚为外植体的蒙农杂种冰草组织培养再生体系.     

黄花苜蓿愈伤组织诱导与植株再生

以黄花苜蓿下胚轴、子叶为材料,在MS+2,4—D0.5～2mg/L以及MS+2,4—Dlmg/L+6BA0.2～1.0mg/L的培养基上可诱导形成愈伤组织;将它们分别传入MS+2,4—D1mg/L或MS+2,4—D0.2mg/L+6BA0.5mg/L的培养基中3～6个月,可分化出芽或类胚体;转入无激素的1/2MS培养基后,可生根并发育为完整再生植株。     

几种匍匐翦股颖品种植株再生的研究

以匍匐翦股颖Agrostis stolonifera潘娜1号、海滨和普特的成熟种子为外植体,进行愈伤组织诱导、分化及生根研究。结果表明：在MS培养基上,以不同浓度2,4 D诱导潘娜1号、海滨和普特的愈伤组织时,普特的愈伤组织诱导率均高于潘娜1号和海滨。2 mg/L 2,4 D+0.1 mg/L 6 BA为潘娜1号和海滨诱导愈伤组织的最适激素组合,3 mg/L 2,4 D+0.1 mg/L 6 BA为普特愈伤组织诱导的最适激素组合。诱导率分别为45.2%、76.5%和87.0%;MSO(MS培养基的大量、微量元素和铁盐+B5培养基的有机元素)为最适合的分化培养基,分化率分别为50.0%、59.0%和57.6%。1/2 MS +1.0 mg/L IBA为生根培养基。     

桑下胚轴愈伤组织诱导及分化过程中内源激素的变化

以自然受精的桑种子的下胚轴为材料进行组织培养 ,MS +NAA( 1 0mg) +6 BA( 0 .5mg)为培养基诱导的愈伤组织生长正常 ,具有不定芽的分化能力。MS +2 ,4 D( 1 .0mg/L) +6 BA( 0 .5mg/L)诱导的愈伤组织没有分化能力 ,结构疏松并呈现褐变现象。愈伤组织分化培养与继代培养中 ,内源激素测定发现 :培养前期 ,前者的ABA、IAA和GA的含量均较后者保持一个较高的水平 ,而培养后期 ,后者的ABA有较大的上升 ,IAA和GA的含量迅速下降     

小花碱茅组织培养植株再生体系的建立

以小花碱茅成熟种子为外植体,研究了脱颖处理和不同激素配比对愈伤组织诱导和分化的影响,成功建立了其组织培养植株再生体系。结果表明,种子脱颖处理显著提高了种子发芽率,降低了污染率;诱导愈伤组织的最佳培养基为添加5.0 mg/L 2,4-D的MS培养基,诱导率可达55.2%,2周可见白色愈伤组织;最佳芽分化培养基为添加1.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA的MS培养基,分化率可达31.7%,同时伴随根毛的发生,生根率达81.7%,诱导时间为2周;分化后的再生苗移植于1/2MS培养基上,100%生根,炼苗移栽后可全部成活。从小花碱茅种子诱导愈伤组织到植株再生共需16周左右。小花碱茅组织培养植株再生体系的建立为进一步探究小花碱茅耐盐碱分子机制奠定了基础。     

紫花苜蓿基因转化的影响因素分析

通过农杆菌介导法对紫花苜蓿不同品种植株进行了抗旱基因转化的研究,得到了一套紫花苜蓿基因转化的优化体系。研究表明,100 mg/L的卡那霉素对苜蓿愈伤组织的生长有着显著的抑制效应。250 mg/L头孢霉素能够有效地抑制农杆菌菌株LBA4404的生长。紫花苜蓿供试材料被切后直接用OD600值为0.3~0.5的农杆菌LBA4404菌液侵染10~15 min;培养材料共培养3 d后在愈伤组织诱导培养基MS 2 mg/L 2,4-D 0.5 mg/LKT 30 g/L蔗糖 9 g/L琼脂 250 mg/L Cef上诱导出愈伤组织;在体细胞胚分化培养基MS 1.0 mg/L BA 0.3 mg/L NAA 30 g/L蔗糖 9 g/L琼脂 50 mg/L Kan 250 mg/L Cef上促进体细胞胚的分化;分化出的体细胞胚在再生培养基上(同分化培养基,Kan为80 mg/L)进一步发育成抗性转化苗;转化的无根小苗在生根培养基1/2 MS 1.0 mg/L IBA 1%蔗糖 0.8%琼脂 100 mg/L卡那霉素上可生长出根系。     

顿河红豆草下胚轴培养及其植株再生

对顿河红豆草5d龄无菌苗下胚轴愈伤组织诱导及其植株再生条件的研究结果表明,愈伤组织培养基为MS基础培养基,附加0.2mg/l 2,4-D、1mg/l BAP和2mg/l NAA,pH5.8;分化培养基为无激素MS培养基;生根培养基为1/2 MS或1/2 LS+0.05mg/l NAA+0.8%琼脂培养基.其愈伤组织绝大多数生长良好,出愈率达96.8%.体细胞胚分化率为25.3%,具有体细胞胚分化力的基因型(幼苗)占35%,生根率不到10%.     

马蹄金叶片离体培养及植株再生的研究

在不同植物生长调节剂组合、不同培养基条件下，探讨了马蹄金叶片离体培养的方法和影响因素。结果表明，含不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织的诱导频率无显著影响，出愈率均达90％-100％；以MS或B5培养基作诱导愈伤组织的基本培养基效果较好；将叶片接种到MS 2mg／L6—BA的诱导培养基中诱导愈伤组织，再用B5 1．5mg／L6-BA 0．5mg／L ZT 0．2mg／Lα—NAA作分化培养基出苗效果最佳，愈伤组织分化频率高达20％。