外源DNA经减压渗透法处理水稻的变异后代同工酸分析

以小麦、玉米、小米、高粱、狼尾草五个不同属的材料为外源DNA供体，经减压渗透转化受体紫稻。从获得的变异材料中各选一份在苗期、分蘖期、孕穗期、抽穗期四个时期用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和等电点聚焦电泳（PAG-IEF）分．析了过氧化物酶同工酶，结果发现各材料在所检测的四个时期均与受体紫稻存在不同程度的差异．这些差异多表现在变异后代材料在弱带和痕迹带的缺少和增加上。并且在变异材料与受体之间差异存在多种表现形式，在生理生化水平上表明了这些变异后代材料与受体紫稻间存在差异。     

甘蔗野生近缘植物斑茅DNA转导创新育种材料研究初报

以甘蔗野生近缘植物斑茅（S.arundinaceum Retz）为外源DNA供体材料，栽培桂糖11号为受体材料，用“酚/SDS改良法”提取供体DNA，利用基因枪转导法把浓度为1ug/u1的供体DNA诱导入受体细胞并整合至受体染色体上获得表达。从再生植株中筛选获得3个与受体获得3个与受体在农艺性状表现有差异的转异再生杂种株系，并通过叶片过氧化物酶同工酶分析得以初步认定，这种人工种质新材料可供进一步育种研究。     

减压渗透法将外源DNA导入水稻最佳时期的探讨

去壳的水稻种子，当浸渍在２５℃蒸馏水中至４、１４、３６个小时，分别转移到小麦ＤＮＡ溶液内（５００ｍｇ／ｍｌ），施以负压（－０．０６Ｍｐａ）继续浸渍４小时。在同样温度下催芽，做根尖细胞学观察和幼芽同工酶分析。并测定ＤＮＡ浸种后的减少量。结果表明：浸渍４、１４、３６小时后外源ＤＮＡ减压转导处理的水稻种子，对外源ＤＮＡ的吸收量依次降低；细胞染色体数目和形状无明显变化；居中者同工酶差异明显，苗期即出现性状变异。减压渗透法将外源ＤＮＡ导入水稻种子的最佳时期为种子吸水第二阶段的前、中期。     

花生DNA导入栽培大豆的研究初报

利用外源DNA导入技术,将花生DNA导入栽培大豆受体中,并引起了受体的叶片大小、花色、茸毛色、结荚习性、粒形、种皮色、脐色、株高、成熟期、主茎节数和产量性状的广泛变异。超氧物歧化酶(SOD)同工酶鉴定结果表明,在D_2变异株中存在着供体的谱带。     

外源DNA导入水稻的方法及性状变异研究

运用减压渗透法将玉米、小麦、小米、高粱、狼尾草的DNA导入水稻品种紫稻，可产生多种多样的变异类型．性状变异包括：生育期、株型、穗型、粒形、花粉育性等．有的是供体特有性状，有的是新性状。从变异后代中，获得了一批性状优良并能稳定遗传的材料．减压渗透法操作简单，转化率高，为谷类作物导入外源DNA提供了一条新途径．     

外源DNA导入技术在棉种改良中的应用研究

应用授粉后外源DNA 导入技术,将亚洲棉(G.arboreum)常熟黑子的总体DNA 导入陆地棉(G.hirsutum)岱红岱,经连续选择成功地育成了高产优质、吐絮集中、抗逆性强、耐渍涝,兼耐枯萎病的棉花新品种——湘棉12号,并获得一批有价值的品系和种质资源。在进行品种选育的同时,对多种外源DNA 分别导入不同陆地棉品种的后代,进行了田间性状观察及酯酶、过氧化物酶同工酶测定,结果发现:(1)经外源DNA 注射的后代,形态特征(包括子叶数目、真叶形状、植株茎叶腺体分布等)出现变异,还出现雄性不育株以及纤维品质优、强力好、产量高的后代;(2)有些后代的酶酶、过氧化物酶同工酶与受体和供体比较,存在一些差异;(3)从多种外源DNA 对不同受体的引变效果看,以用中子照射过的材料,引变率较大,同工酶谱的差异也比较明显.     

导入大豆的外源DNA同工酶鉴定

本文采用双垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法对海豆、虎林绿草豆的外源总DNA导入后代用过氧化物同工酶酶谱的差异分析,结果表明：酶谱清晰,供体受体及后代后在谱带上存在着差异及相关特性,从生化角度提示了其遗传背景相关性,证明外源DNA已经导入受体,并得到整合,表达。     

减压渗透法将外源DNA导入水稻研究

紫稻(叶和叶鞘紫色,稻谷和米粒分别为黄、白色)为受体,高梁、小麦和小米为外源DNA供体。受体材料的种子播种前用减压渗透法分别导入供体DNA于成熟胚。受体种苗五叶期出现了颜色变异株,紫稻和高梁、小麦以及小米的组合中,幼苗变异率分别为0.36％、1.5％和2.5％。在以后的生长发育过程中,变异株的颜色逐渐趋向受体或供体;始穗期提前或推迟。对供、受体和杂种后代幼芽的可溶性蛋白电泳分析表明:后代明显地不同于亲本。     

外源DNA处理小麦种苗和颖花及其诱导变异的研究初报

采用外源DNA导入技术，研究了DNA种苗浸渍对小麦种子发芽的影响，颖花滴注对结实率的影响以及外源DNA导入受体诱导变异的效果。结果表明，外源DNA浸种对发芽生根有不良的影响。浸种时DNA稀释液的浓度不应大于0.1×ssc。DNA液颖花滴注可获得较高的结实率。外源DNA导受体后产生了具有目的性状的变异（如粒色、芒长、不育性等）和非供体性状的变异（如株带蜡质、抽穗迟等）。而且大麦DNA导入小麦后，成功地获得了高抗白粉病变异株。     

应用浸苗法导入外源DNA转化烤烟遗传性状变异的初步研究(I)

针对严重危胁烤烟大田生产的赤星病病害,培育抗病品种。本研究以烤烟品种Ｎｃ８９为受体,Ｃｖ８７为供体,采用浸苗法将供体总ＤＮＡ导入受体,通过表型、抗病性和过氧化物酶同工酶检测,筛选抗病变异材料。研究结果表明,外源总ＤＮＡ直接导入可有效转移株高、株型、叶色、叶面积大小、生育期及抗病性等性状,并获得了较高转化率（７．１０％）。     

水对蚕豆根尖细胞有丝分裂的影响

[目的]为饮用水的处理提供依据。[方法]以蚕豆根尖细胞为材料,采用微核试验方法,以蒸馏水处理为对照,研究凉开水及分别放置0、12、24、36、48h的自来水对蚕豆根尖细胞微核千分率和染色体畸变率的影响。[结果]随着自来水放置时间的延长,蚕豆根尖细胞的微核千分率和染色体畸变率逐渐降低,放置0、12、24h的自来水诱发蚕豆根尖细胞的微核千分率和染色体畸变率均明显高于对照和放置36和48h的自来水处理。不同放置时间自来水处理后,蚕豆根尖细胞产生多种类型畸变,如间期微核、前期微核、染色体断片等。[结论]凉开水对染色体的损伤小于自来水,放置0h的自来水对蚕豆根尖细胞的遗传毒性较大。     

人参化感物质对其幼苗根尖解剖结构的影响

为探讨人参化感物质的作用机制,采用石蜡切片技术研究人参化感物质对其幼苗根尖解剖结构的影响。利用人参化感物质活性组分培养其幼苗96 h后,取其根尖,进行石蜡切片,采用番红—固绿染色。结果表明:化感物质组分处理后的人参幼苗根尖几个功能部位的细胞大小及排列发生了明显的变化,处理后的幼苗根尖明显变粗,细胞间隙加大,表皮层细胞部分脱落,顶端分生组织和根冠的细胞混乱,这种效应随着处理浓度的增加而增强,且在浓度为40 g·mL-1处理时,一部分顶端分生组织细胞的细胞壁形态异常甚至破裂,中柱鞘细胞明显膨胀。     

武汉东湖水质对蚕豆根尖细胞微核的影响

[目的]采用蚕豆根尖微核检测技术综合评价东湖水体的污染程度。[方法]采集来自9个样点的东湖湖水直接处理蚕豆根尖,检测各组水样对根尖细胞形成微核的诱导效应,并评价对应水体的污染程度。[结果]东湖9个样点的湖水处理蚕豆根尖细胞后的微核率为2‰～8‰,部分水样污染较为严重。其中,3个样点水样形成的微核率均高于5‰,极显著高于对照组水样（P〈0．01）,其污染达中度污染水平,表明东湖水体中存在一定致突变性,具有明显的遗传毒性。[结论]东湖水体具有一定的遗传毒性效应,可显著诱导蚕豆根尖细胞微核率上升,表明湖水已受到不同程度的污染,污染较为严重的采样点主要位于排污口、旅游人群高密集区和交通干线附近的湖水水体。     

氯化钠对豌豆根尖细胞的致畸效应

以不同浓度的氯化钠为诱变剂,运用根尖细胞微核检测技术和染色体畸变实验方法,测定了豌豆根尖细胞的有丝分裂指数、微核率和染色体畸变率。结果表明：氯化钠能降低豌豆根尖细胞的有丝分裂指数,诱发较高频率的微核率和染色体畸变。浓度为0．05～0．25mol／L时,随着氯化钠浓度的增加,有丝分裂指数降低,而微核率、染色体畸变率均升高。即氯化钠对豌豆根尖细胞具有明显的致畸效应。     

生活用品对蚕豆根尖细胞的诱变作用

[目的]研究常见市售生活用品对蚕豆根尖细胞的诱变作用。[方法]选取不同浓度的3种市售生活用品（花露水、洗洁精、牙膏）为诱变剂,分别处理松滋青皮蚕豆根尖细胞,用微核检测法确定蚕豆根尖细胞的微核率。[结果]蚕豆根尖经过不同浓度的花露水、牙膏和洗洁精处理液处理后,根尖细胞形态受到不同程度的损伤,根尖长度明显变短,颜色发黄、变黑。微核诱变试验显示,不同浓度的生活用品处理蚕豆根尖细胞可诱发不同频率的微核率,在一定浓度范围内,其微核率随处理浓度的升高而呈现增加的趋势。当洗洁精处理组浓度达到原液浓度时,微核率却呈现下降趋势,但仍然高于蒸馏水为阴性对照组所得到的微核率。[结论]日常生活用品对蚕豆根尖细胞有一定的诱导作用。     

Ca~（2＋）对蚕豆种子萌发及根生长的影响

[目的]研究不同浓度Ca2＋对蚕豆种子萌发、根长以及根尖细胞有丝分裂的影响。[方法]用不同浓度的CaCl2溶液培养蚕豆种子,以蒸馏水培养为对照,统计不同处理下蚕豆种子萌发率;测量根长;根尖固定、染色、压片后进行观察,计算有丝分裂指数。[结果]1.0～5.0 mmol/L Ca2＋对蚕豆种子萌发没有影响,当Ca2＋浓度超过10.0 mmol/L后,随着Ca2＋浓度的增高,蚕豆种子萌发速率降低,但对最终萌发率没有影响;1.0～10.0 mmol/L Ca2＋能不同程度地促进蚕豆根生长和细胞分裂,其中5.0 mmol/L Ca2＋处理的蚕豆根长和有丝分裂指数最高,之后随着Ca2＋浓度的继续增高,根生长和细胞分裂速度开始下降,甚至受到抑制。[结论]Ca是植物体生长的必需元素,但Ca2＋浓度过高不利于植物生长发育,这为合理施用钙肥提供了科学依据。     

秋水仙素对肇东苜蓿根尖细胞染色体的影响

为了探究秋水仙素对肇东苜蓿根尖细胞染色体的影响,利用不同浓度的秋水仙素(0.01%、0.05%、0.10%、0.15%和0.20%)以及处理时间(12、24、36和48h)分别对肇东苜蓿根尖细胞进行诱导,观察肇东苜蓿根尖细胞染色体、细胞中期分裂指数和细胞加倍指数的变化。结果表明:秋水仙素诱导了肇东苜蓿根尖细胞染色体的变异,细胞内染色体加倍,数目不等(32、64及128条);在时间与浓度互作方面,秋水仙素溶液浓度为0.15%时处理肇东苜蓿根尖12h,使细胞中期分裂指数达到最大值18.51%;利用浓度为0.10%的秋水仙素处理24h,细胞加倍指数达到最高值11.57%。     

乐果和速灭杀丁对洋葱根尖细胞的诱变效应

本实验用细胞学方法观察乐果和速灭杀丁对洋葱根尖细胞的诱变效应,发现稀释一万倍的50％乐果乳剂和稀释一万倍的20％速灭杀丁乳油强烈地抑制尖葱根尖细胞分裂,明显提高微核率。并就农药对作物种质的影响及农药毒性等进行讨论。     

CU2+胁迫对苘麻抗氧化酶系及根尖细胞超微结构的影响

研究Cu2 胁迫对苘麻(Abutilon theophrasti)抗氧化酶系及根尖细胞超微结构的影响。通过室内盆栽试验,测定苘麻在不同浓度Cu2 胁迫下抗氧化酶活性的变化,并采用透射电镜观察对苘麻根尖细胞超微结构的影响。结果表明:随Cu2 胁迫浓度的增加,苘麻根、茎、叶中超氧化物岐化酶(SOD)活性和过氧化物酶(POD)活性呈上升趋势,Cu2 胁迫导致根尖细胞超微结构破坏严重。Cu2 胁迫可增加苘麻抗氧化酶活性并严重破坏根尖细胞的超微结构。     

中国蛤蜊多糖提取物抑制蚕豆根尖细胞微核形成的研究

[目的]研究中国蛤蜊多糖粗提物对丝裂霉素(MMC)诱发的蚕豆根尖细胞微核的影响。[方法]设置阳性对照组(0.5μg/ml丝裂霉素),阴性对照组(自来水)和3个试验组(中国蛤蜊多糖浓度为501、001、50μg/ml),将培养的蚕豆根尖(1.5~2.0 cm长)置于上述处理液在25℃下分别浸根培养4、68、h,进行蚕豆根尖细胞微核试验。[结果]3种浓度的中国蛤蜊多糖对浓度为1.5μg/ml丝裂霉素诱发的蚕豆根尖微核率与阳性对照组均有显著差异。浓度为150、100、50μg/ml的中国蛤蜊多糖对蚕豆根尖微核的抑制率分别为25.553%、13.506%、8.089%,且随多糖浓度增加,蚕豆根尖细胞微核率降低,抑制率增加。[结论]中国蛤蜊多糖可有效抑制丝裂霉素诱导的蚕豆根尖细胞微核的产生。