复发性念珠菌阴道炎患者念珠菌菌落计数及INF-γ、IL-4水平的检测

目的了解复发性念珠菌外阴阴道炎（RVVC）与念珠菌阴道菌落形成单位（CFU）计数、INF-γ及IL-4水平的关系。方法 RVVC患者29例为研究组,健康女性20例为对照组,取阴道分泌物计算念珠菌CFU计数;ELISA双抗体夹心法检测二者外周血单核细胞INF-γ及IL-4水平。结果研究组患者念珠菌CFU计数和外周血IL-4均高于对照组（P〈0.01）,而INF-γ/IL-4明显低于对照者（P〈0.01）;但两组INF-γ水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 RVVC患者阴道念珠菌CFU计数升高,Th1型细胞向Th2型细胞偏移可能是RVVC的一个免疫学特征。     

正常C57BL/6J小鼠器官组织中胸腺间质淋巴细胞生成素的表达

目的观察正常小鼠各种器官组织中胸腺间质淋巴细胞生成素（thymicstromal lymphopoietin,TSLP）的表达。方法利用Real-time PCR、免疫荧光法检测正常C57BL/6J小鼠心、肝、脾、肺、肾、肠、胸腺、阴道中TSLP的表达。结果心、肝、脾、肺、肾、肠、胸腺、阴道中均有TSLP表达,其中心、肝、肾、阴道表达较高,肠道表达最低（P〈0.01）。结论 TSLP在正常C57BL/6J小鼠许多器官组织中均有表达,但以心、肝、肾、阴道黏膜中表达较高。     

六味地黄汤对快速衰老小鼠认知功能及Wnt3a、GSK-3β表达的影响

目的 研究六味地黄汤对D-半乳糖（D-gal）致快速衰老小鼠认知功能及Wnt3a、GSK-3β表达的影响。方法 以500 mg/（kg·d）的D-半乳糖颈部皮下注射复制快速衰老小鼠模型,将动物随机分为正常组,模型组,六味地黄（简称六味）高、中、低剂量组,VitE组,给予相应干预,历时8周。观察小鼠的体质量变化,采用Morris水迷宫实验评价小鼠的认知功能,免疫组化法、RT-qPCR法检测Wnt3a、GSK-3β的表达。结果 六味地黄汤对快速衰老小鼠体质量及水迷宫实验的影响：模型组与正常组比较,差异具有显著统计学意义（P<0.01）;各用药组与模型组比较,差异具有显著统计学意义（P<0.01）;六味高剂量组与其他用药组比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;六味地黄汤对快速衰老小鼠认知功能及Wnt3a、GSK-3β表达的影响：模型组与正常组比较,差异具有显著统计学意义（P<0.01）,各用药组与模型组比较,差异具有显著统计学意义（P<0.01）,六味高剂量组与其他用药组比较,差异具有显著统计学意义（P<0.01）。结论 六味地黄汤可以有效改善D-半乳糖致快速衰老小鼠的学习记忆障碍;增加衰老小鼠Wnt3a的表达,激活Wnt信号通路,下调GSK-3β的表达可能是六味地黄汤延缓衰老健脑益智的作用机制。     

小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达

目的研究小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3表达。方法提取C57/BL6J小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4-＋CD62L-＋T细胞,分为对照组及Th17分化组。对照组用RPMI1640培养;Th17分化组加抗小鼠CD3ε、CD28、IFN-γ、IL-4单抗及IL-6、TGF-β1、IL-23孵育。培养48 h后,采用Real-time PCR检测两组细胞IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达。结果 Th17分化组IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达明显高于对照组（P〈0.01）。结论小鼠脾Th17细胞分化过程中伴有RORα、Stat3 mRNA表达上调。     

结直肠癌中CXCR7、VEGF、Ki-67和PTEN表达

目的探讨结直肠癌中CXCR7、VEGF、Ki-67和PTEN表达情况及意义。方法采用免疫组化Envision法检测CXCR7、VEGF、Ki-67和PTEN在60例结直肠癌、30例结直肠腺瘤、10例正常结直肠黏膜组织中表达。结果 CXCR7、VEGF、Ki-67在结直肠癌中表达明显高于腺瘤和正常黏膜（P〈0.01）,而PTEN表达降低（P〈0.01）。CXCR7、VEGF、Ki-67表达与肿瘤直径、淋巴结转移有关（P〈0.01或0.05）,而PTEN表达与肿瘤分化程度有关（P〈0.05）。结直肠癌中CXCR7表达与VEGF和Ki-67表达有关（P〈0.01或0.05）。结论结直肠癌中CXCR7、VEGF高表达参与肿瘤增殖和淋巴结转移,而PTEN低表达可能与肿瘤低分化有关。     

大肠癌中HSP27、p14^ARF和caspase-3蛋白的表达及意义

目的：探讨HSP27、p14^ARF和caspase-3蛋白在大肠癌中的表达及其与大肠癌I临床病理特征的关系。方法：利用sP法检测大肠癌48例和大肠腺瘤10例以及正常大肠黏膜组织15例中HSP27、p14^ARF和caspase-3蛋白的表达。结果：大肠癌组织中HSP27、p14^ARF和caspase-3蛋白阳性表达率分别为79．2％、58．4％和66．7％,大肠腺瘤组织中分别为40．0％、70．0％和100．0％,正常大肠黏膜组织中分别为33．3％、80．0％和93．3％。p14^ARF和caspase-3蛋白的表达在高、中分化癌组的表达率分别为64．1％、74．4％,明显高于低分化组22．2％、33．3％（Pd0．05）。结论：HSP27、p14^ARF和caspase-3与大肠癌的发生有关,可作为大肠癌临床评价肿瘤生物学行为的指标。     

肝癌组织中PTEN和TIMP-3的表达及其临床意义

目的探讨抑癌基因PTEN和TIMP-3在肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达及其临床意义。方法收集30例HCC、癌旁组织和10例正常肝组织,用qRT-PCR、Western blot、免疫组化SP法检测PTEN、TIMP-3mRNA和蛋白表达,分析PTEN和TIMP-3表达与HCC临床病理特征的关系。结果癌组织中PTEN和TIMP-3mRNA和蛋白表达均明显低于癌旁组织、正常肝组织（P〈0.01）,且在癌旁组织中的表达亦明显低于正常肝组织（P〈0.01）。PTEN和TIMP-3蛋白表达在肝外转移、分化差、血清AFP≥400μg/L和Ⅲ～Ⅳ期肝癌组织中的表达明显低于无肝外转移、分化好、血清AFP〈400μg/L和Ⅰ～Ⅱ期肝癌（P〈0.01或0.05）者;两者在是否伴有肝硬化和不同肿瘤大小肝癌组织中的表达均无统计学意义（P〉0.05）。结论 HCC癌组织中PTEN和TIMP-3表达下调,表达水平有助于判断HCC侵袭转移能力、临床分期和肝外转移。     

复方茵芩制剂血清对小鼠体外肝细胞损伤的保护作用

采用H2O2建立小鼠原代肝细胞的体外损伤模型,小鼠灌胃含复方茵芩制剂药物血清后,检测不同时期肝细胞培养上清液天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、超氧化物岐化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的变化来研究其对体外肝细胞损伤的保护作用.结果表明：与正常细胞组相比,模型组的SOD活性低于药物血清组（P〈0.01）;模型组的MDA含量高于药物血清组（P〈0.01）;与对照组相比,模型组的AST和ALT活性高（P〈0.01）,而药物血清组变化不明显.在损伤的肝细胞中添加药物血清的第3-7天,与模型组相比,药物血清组AST活性在第3-5天均较低（P〈0.01）,第6天差异不显著（P〉0.05）;ALT活性在第3-6天均较低（P〈0.01）.可见,含药的血清可减轻H2O2对肝细胞的损伤和破坏.     

健脾补土组方对体外神经元低氧/复氧后PI3K、Akt、Caspase-3表达的影响

目的 观察健脾补土组方对新生SD鼠神经元体外培养低氧/复氧后的凋亡情况以及PI3K、Akt、Caspase-3表达的影响,探讨其减少神经元凋亡的作用机制。方法 原代分离培养新生SD鼠神经元,随机分为正常血清对照组、低氧模型组、神经生长因子组、健脾补土组。将标本低氧诱导24 h,再复氧培养4 h进行造模。用流式细胞术检测神经元凋亡情况,RT-qPCR法检测PI3K、Akt、caspase-3 mRNA的表达,免疫细胞化学法和Western blot法检测PI3K、Akt、caspase-3蛋白的表达。结果 与正常对照组相比,低氧模型组神经元凋亡率显著增加,PI3K、Akt mRNA与蛋白表达显著减少,Caspase-3 mRNA与蛋白表达显著增加;与低氧模型组比较,神经生长因子组、健脾补土组神经元凋亡率均显著减少,PI3K、Akt mRNA及蛋白表达显著增强,Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著较少（P<0.01）;与神经生长因子组比较,健脾补土组神经元凋亡率显著减少,PI3K、Akt mRNA及蛋白表达显著增加,Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著降低。结论 健脾补土组方能减少脑缺血后神经元的凋亡,其作用机制可能与其通过上调PI3K和Akt的表达水平,最终抑制在细胞凋亡中起关键作用的因子Caspase-3的表达有关。     

14-3-3及Bcl-2蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的通过检测14-3-3和Bcl-2蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况,探讨其在胶质瘤发生、发展中的作用机制.方法采用免疫组化S-P法对5例正常脑组织标本和68例人脑胶质瘤标本进行14-3-3和Bcl-2蛋白检测.结果与正常脑组织比较,14-3-3蛋白在胶质瘤表达异常增强（P〈0.05）;在不同病理分级中胶质瘤组织表达无统计学意义（P〉0.05）,随着胶质瘤恶性程度的增加,14-3-3蛋白表达的强度和范围增加（P〈0.05）.Bcl-2蛋白在不同级别的恶性胶质瘤中阳性表达率有差别（P〈0.05）,且表达强度随着胶质瘤病理分级增高呈明显增高趋势.结论 14-3-3和Bcl-2蛋白对胶质瘤的恶性程度、肿瘤的病理分级有影响,可作为指导临床病理诊断及分级的参考指标.     

隐丹参酮对人胆管癌HCCC-9810细胞增殖、survivin基因及caspase-3蛋白表达的影响

目的 了解隐丹参酮对人胆管癌HCCC-9810细胞增殖及凋亡相关因子surv1vin、caspase-3表达的影响.方法 HCCC-9810细胞用不同浓度隐丹参酮处理24、48、72 h,分别用MTT法、RT-PCR、Western blot检测细胞生长及survivin mRNA、caspase-3蛋白表达.结果 隐丹参酮抑制HCCC-9810细胞增殖;随时间延长,HCCC-9810细胞中survivin mRNA表达逐渐降低,而caspase-3蛋白表达逐渐增高(P＜0.05).结论 隐丹参酮可通过下调survivin基因表达及上调caspase-3蛋白表达来诱导HCCC-9810细胞凋亡.     

宰后鸭肉骨骼肌中caspase-3活化对嫩度的影响

【目的】探讨caspase-3在宰后鸭肉中是否被激活以及参与改善宰后鸭肉的嫩度,为进一步用细胞凋亡机理阐明水禽类肉的成熟机理提供新的试验依据。【方法】分析检测宰后鸭胸肉和腿肉胞浆中细胞色素-C含量变化,caspase-3、-8和-9活化片段和酶活力变化、PARP降解片段的表达水平以及宰后鸭肉剪切力的变化情况。【结果】宰后鸭肉骨骼肌胞浆中细胞色素-C含量均显著升高（P＜0.05）,caspase-3、-8和-9酶原分别劈开成17、18和23 kD左右的活化片段,酶活力于宰后均迅速升高（P＜0.05）;作为caspase系统的标志性蛋白,胸肉和腿肉中PARP蛋白均被劈开成小片段,且剪切力值于宰后4-24 h均显著减小（P＜0.05）。相关性分析的结果显示,宰后胸肉和腿肉中caspase-3酶活力和caspase-8,caspase-9酶活力变化均呈显著正相关（P＜0.05）,与宰后剪切力值的变化呈极显著负相关（P＜0.01）。【结论】酶原的激活,酶活力的上升表明caspase-8和caspase-9各自介导的激活途径共同参与了鸭肉caspase-3的活化;PARP的降解,剪切力值的显著下降则表明活化的caspase-3直接或间接参与了鸭肉的成熟过程。     

Identification of SNPs and Their Effects on Swine Growth and Carcass Traits for Porcine IGFBP-3 Gene

The insulin-like growth factor binding protein-3 （IGFBP-3） was known as a key factor that regulates the effect of insulin- like growth factors （IGF-1 and IGF-2） on pig growth and development. We first identified 38 single nucleotide polymorphisms （SNPs） from a fragment of the IGFBP-3 gene spanning 1 823 bp using the denaturing high-performance liquid chromatography （DHPLC） method and confirmed them by direct sequencing. Among these SNPs, 36 located in introns and the remaining 2 in the 3 prime untranslated region （3UTR）. In addition, 16 PCR-RFLP polymorphisms were identified within these SNPs. Three SNPs were then selected to genotype 272 F2 individuals with PCR-RFLP method and the association of polymorphism with growth and carcass traits were analyzed. The results showed that no significant associations were observed between polymorphisms of A265G and A952G and traits. However, the A2670G significantly related with live body length, loin muscle area, and skin and fat percentage （P〈0.05）; highly significantly associated with weight of carcass lean and lean percentage （P〈 0.01）.     

绿茶多酚诱导肝癌细胞凋亡时Caspase-3蛋白活性与mRNA的变化

[目的]研究绿茶多酚(EGCG)诱导肝癌细胞Hep-G2凋亡过程中半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白活性与mRNA的变化。[方法]100 mg/L的EGCG处理Hep-G2细胞48 h,DAPI染色观察细胞形态学,用MTT检测EGCG对Hep-G2细胞生长的影响,流式细胞技术Annexin V-FITC PI法检测不同浓度EGCG诱导细胞的凋亡率,分光光度法检测Caspase-3的活性,用半定量RT-PCR法检测Caspase-3的mRNA变化。[结果]100 mg/L的EGCG作用Hep-G2细胞48 h后,荧光显微镜观察到细胞出现核碎裂和凋亡小体;MTT法检测到EGCG对肝癌细胞Hep-G2的生长均有显著抑制作用,呈浓度依赖性;Annexin V-FITC PI法检测到不同浓度的EGCG作用与肝癌细胞Hep-G2后,凋亡率较对照组明显升高,并随诱导浓度的增加而增加;不同浓度的EGCG处理组和不同时间EGCG处理组的Caspase-3活性和mRNA表达量均比对照组明显升高。[结论]Caspase-3蛋白活性与mRNA上调是EGCG诱导肝癌细胞凋亡的的重要原因和机制。     

太湖鹅与皖西白鹅腿肌GHR、IGF-I、IGF-IR和IGFBP-3 mRNA表达及其与屠宰性状相关性分析（英文）

[目的]探讨IGFs系统对鹅骨骼肌生长的影响。[方法]以太湖鹅和皖西白鹅为研究材料,采用荧光定量PCR方法研究鹅70日龄腿肌中GHR、IGF-I、IGF-IR和IGFBP-3 mRNA表达的品种、性别特异性,并与屠宰性能做相关性分析。[结果]结果表明,鹅腿肌GHR、IGF-I、IGFIR和IGFBP-3 mRNA表达没有品种差异性,而体重和腿肌重品种差异显著。体重、腿肌重和腿肌率均无性别差异,除了太湖鹅腿肌IGF-I mRNA表达公鹅显著大于母鹅（P=0.032）,其他3个基因均无性别差异。检测的4个基因中仅IGFBP-3 mRNA表达和腿肌率呈极显著正相关,提示70日龄时IGFs系统可能通过IGFBP-3发挥对鹅腿肌生长的调节作用。[结论]为鹅骨骼肌生长发育研究工作提供理论依据。     

鸽念珠菌病的诊治

鸽念珠菌病的病原是白色念珠菌,该菌存在于人和动物消化道、呼吸道和泌尿生殖道黏膜,是机会致病菌。在饲养管理不当、环境卫生条件差和应激因素都可诱发此病的发生。通过对邯郸某养鸽场流行病学调查、临床症状及病死鸽的实验室诊断,确诊该病是念珠菌病。     

诊断超声照射对大鼠早孕胚胎组织细胞Caspase-3表达的影响

目的 了解诊断超声照射对大鼠早孕胚胎组织细胞Caspase-3表达的影响.方法 40只孕7dSD大鼠随机分为4组,用3.5 MHz超声持续照射腹部子宫体表投影区,分别照射0、10、20、30 min,超声照射后24 h取胚胎组织,用SP免疫组织化学检测Caspase-3蛋白表达.结果 超声照射20、30 mir组,Caspase-3表达明显高于对照组（P＜0.01）.结论 经腹诊断超声持续照射大鼠早孕胚胎超过20 min可使Caspase-3蛋白表达增高,从而可能导致早孕胚胎组织细胞凋亡.     

复方中药制剂对SD大鼠胸腺组织结构及Caspase-3蛋白分布的影响

为研究由炒白术、山楂、黄芪、板蓝根、茯苓、陈皮、甘草、山药制成的复方中药制剂对SD大鼠胸腺组织结构及其Caspase-3蛋白分布的影响。选择60只SPF级断奶SD大鼠,随机分为对照组、1.5 mL·kg^-1组、3.0 mL·kg^-1组和6.0 mL·kg^-1组,每组15只,预饲1周后按每千克体质量分别定时灌胃3.0 mL蒸馏水、1.5 mL、3.0 mL和6.0 mL药液(每mL含1 g生药)。至90 d,各处理组SD大鼠禁食禁水3 h,称量、麻醉、处死后取完整的胸腺称量,立即投入4%的多聚甲醛磷酸缓冲液固定72 h,制作石蜡组织切片,经HE、网状纤维和Caspase-3免疫组化染色,显微观察,Image-pro PLUS 6.0软件分析并摄影。结果表明,按每kg体质量灌胃本复方中药制剂3.0 mL可显著增加胸腺皮质区且胸腺的生长指数显著高于对照组(P<0.05)。网状纤维主要分布于SD大鼠胸腺髓质部,3.0 mL·kg^-1剂量组网状纤维含量较对照组显著减少。各实验组均不同程度抑制Caspase-3蛋白的出现,其中以3.0 mL·kg^-1剂量组最为显著。说明灌胃3.0 mL·kg^-1复方中药制剂可改善SD大鼠胸腺组织结构,延缓其结构和功能退化。     

二氢杨梅素诱导MDA-MB-231细胞凋亡

为了探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的机制,利用倒置显微镜观察细胞形态变化,用流式细胞仪检测DMY对MDA-MB-231细胞的致凋亡能力和细胞内钙离子浓度和线粒体膜电位(ΔΨm)的改变,用蛋白质印迹(Western blotting)分析检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的变化。结果表明:MDA-MB-231细胞随DMY质量浓度加大而变圆变小,细胞存活数减少;流式细胞仪检测显示随DMY质量浓度的增加,DMY对MDA-MB-231细胞有促凋亡作用,胞内钙离子浓度逐渐增加,而线粒体跨膜电位(ΔΨm)逐渐减少;Western blotting结果显示DMY可诱导MDA-MB-231细胞中caspase-3和caspase-9蛋白质活化,并呈现浓度依赖关系。表明DMY可通过线粒体途径诱导MDA-MB-231细胞凋亡。