枯草芽孢杆菌和日粮蛋白水平对早期断奶仔猪消化器官的影响

[目的]研究不同日粮蛋白水平下添加枯草芽孢杆菌对早期断奶仔猪生长性能与消化器官发育的影响。[方法]将360头21日龄断奶仔猪分为4个处理组,处理组①和②中日粮粗蛋白水平为20%,处理组③和④中日粮粗蛋白水平为18%,处理组②和④中日粮添加枯草芽孢杆菌,饲喂14 d后测定仔猪生长性能与主要消化器官发育情况。[结果]日粮添加枯草芽孢杆菌的处理组②仔猪的平均日增重显著大于处理组①和③(P0.05)。处理组④十二指肠和空肠黏膜重量及肝脏重等指标显著大于处理组①,而处理组②和③差异不显著(P0.05)。[结论]日粮添加枯草芽孢杆菌有利于肠道、肝脏等主要消化器官的发育,对改善仔猪生长性能有良好效果。     

大豆寡糖和纳豆芽孢杆菌在肉鸡日粮中的应用

选取576只1日龄AA肉仔公鸡,随机分为12组,每组6个重复。以玉米—豆粕型日粮为基础日粮,添加不同水平的大豆寡糖(0,0.1%和0.3%)和纳豆芽孢杆菌(0,0.1%,0.3%和0.5%),研究大豆寡糖和纳豆芽孢杆菌组合对肉仔公鸡生产性能和十二指肠消化酶的影响,试验期为42 d。结果表明:大豆寡糖能提高AA肉仔公鸡日增重(P>0.05),极显著降低料肉比(P<0.01),提高十二指肠淀粉酶活性(P<0.05),胰蛋白酶活性(P>0.05);纳豆芽孢杆菌能极显著提高AA肉仔公鸡日增重(P<0.01),降低料肉比(P<0.01),极显著提高十二指肠淀粉酶、胰蛋白酶活性(P<0.01);大豆寡糖与纳豆芽孢杆菌组合在生产性能和十二指肠淀粉酶、胰蛋白酶活性上表现出互作效应,0.1%大豆寡糖、0.3%纳豆芽孢杆菌组合提高日增重,降低料肉比效率最好0.3%大豆寡糖、0.5%纳豆芽孢杆菌组合提高肉仔公鸡十二指肠淀粉酶、胰蛋白酶活性效果最好。     

四株纳豆枯草芽孢杆菌的分离筛选与鉴定及其对瘤胃发酵的影响

采用酪蛋白平板和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板初筛法、菌落形态和16SrRNA序列比对分别从无菌大豆(DD)、接种稻草的大豆(DC)、市售纳豆(ND)以及实验室储存菌株纳豆枯草芽孢杆菌NY-3(NY)中分离、筛选、鉴定出4株产蛋白酶和纤维素酶活性较高的纳豆枯草芽孢杆菌;通过体外批次发酵试验,向日粮底物中添加1.5×1011cfu筛选出的四株菌,取0h和24h的瘤胃液样测定各个发酵参数.结果表明:与对照组相比,添加纳豆枯草芽孢杆菌(DC组、DD组、ND组、NY组)并不影响瘤胃液pH值(P=0.883),但显著提高瘤胃液中NH3-N值(P0.05)和挥发性脂肪酸(VFA)各成分的浓度(P0.05);与对照组相比,DC组的乙酸/丙酸差异不显著(P0.05),但是DD、ND组和NY组均有显著降低(P0.05).     

纳豆芽孢杆菌的制备及其对番鸭生产性能的影响

采用液态发酵法和固态发酵法制备纳豆芽孢杆菌,并研究日粮中添加不同浓度纳豆芽孢杆菌制剂对番鸭生产性能的影响.结果表明:采用周态发酵法制备纳豆芽孢杆菌优于液态发酵法;在番鸭基础日粮中添加0.2％和0.4％纳豆芽孢杆菌制剂可显著提高番鸭日增重(P＜0.05)、采食量(P＜0.05)和饲料转化率(P＜0.01),以添加0.4％纳豆芽孢杆菌制剂的效果最佳.而日粮中添加0.1％纳豆芽孢杆菌制剂对番鸭日增重、采食量和饲料转化率的作用均不显著(P＞0.05).     

纳豆芽孢杆菌的分离鉴定及纳豆激酶高产菌株的筛选

分别从北京、大连和日本三个产地的纳豆食品中分离纯化得到了9个具有纳豆芽孢杆菌典型菌落特征的芽孢杆菌单菌落,与模式菌株纳豆芽孢杆菌N1株分别从菌落形态、个体形态和生理生化试验三方面进行对比鉴定,结果表明,其中5株芽孢杆菌为纳豆芽孢杆菌。将这5株纳豆芽孢杆菌分别在酪素平板上划线初选,得到了298株具有蛋白酶活力的菌株,从中筛选出活性最高的5株命名为:NB、NC、ND、NE和NF,测定各株发酵液的纳豆激酶酶活力,结果表明NB、NC和ND3株具有较高纳豆激酶活性,酶活力分别达到了1041.37、1125.13和1804.64IU·mL-1。     

纳豆芽孢杆菌的分离纯化及鉴定

根据纳豆芽孢杆菌耐热耐盐的特征分离纳豆芽孢杆菌菌株.由纳豆粉中分离纯化出1株纳豆菌株,由家庭自制纳豆中分离纯化出5株纳豆菌株,并对这6株纳豆芽孢杆菌的细胞、菌落形态及生理特性进行研究.结果表明,这6株纳豆菌均属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).     

日粮补给罗伊乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌对断奶仔猪消化道主要微生物的影响

断奶会显著改变仔猪肠道菌群结构,保持仔猪在断奶过程中肠道微生物结构的稳定性和健康,是缓解仔猪断奶应激的一个有效方法。本研究通过日粮中补给罗伊乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌,探讨罗伊乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌对仔猪胃肠道主要细菌的影响。结果表明,与对照相比,日粮补给枯草芽孢杆菌降低胃和十二指肠中乳酸杆菌含量,提高空肠、回肠和结肠中乳酸杆菌含量,显著降低大肠杆菌在各肠段的含量。日粮补给罗伊乳酸杆菌或者金霉素,显著提高各肠段乳酸杆菌含量,降低各肠段大肠杆菌含量。这些结果为微生物制剂在仔猪断奶上的应用提供肠道微生物方面的依据。     

纳豆芽孢杆菌对泌乳期奶牛产奶量、牛奶品质的影响

文章旨在研究纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis Natto)对泌乳期奶牛生产性能、牛奶品质与机体免疫的影响。选用泌乳期、胎次、产奶量、体重相似的荷斯坦奶牛36头,采用完全随机分组原则分成3组,每组12头。试验期为60d,预饲期10d,分别在试验期的0、30、60d采集奶样,每周测定1次产奶量。试验结果表明,添加芽孢杆菌能显著提高产奶量(P<0.05)、改善乳脂率、提高乳蛋白率(P<0.05)、增加牛奶中干物质含量和降低牛奶中体细胞数。     

纳豆芽孢杆菌脲酶酶学性质的研究

为了研究不同的碳源、氮源和不同的培养条件对纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)脲酶产量的影响,以及不同温度、pH和几种金属离子对脲酶活性的影响,采用了滴定法(国标法,标准号GB/T 1356787-1997)和Bradford蛋白浓度测定试剂盒测定不同碳源、氮源和不同培养条件培养的纳豆芽孢杆菌(CGMCC No.2801)脲酶总活性和浓度,以及不同温度、pH和金属离子条件下的脲酶活性。结果表明,当以谷氨酸为氮源、蔗糖为碳源、pH7、37℃条件下培养12h时脲酶的浓度最高,为57.2μg/mL。脲酶催化反应的最适条件为35℃、pH 7。实验选用的5种金属离子对脲酶活性均有抑制作用,抑制强度为Cu2+Zn2+Fe2+Mg2+Mn2+,最大抑制率为36.4%。这些结果为纳豆芽孢杆菌脲酶的进一步研究及低产氨纳豆芽孢杆菌的构建奠定了基础。     

纳豆芽孢菌剂消除小天鹅转群应激的研究

[目的]在小天鹅放养初期饲喂纳豆芽孢菌剂,研究纳豆芽孢菌剂消除小天鹅转群应激的临床效果。[方法]在转群小天鹅精饲料中加入纳豆芽孢菌剂,纳豆芽孢菌剂为精料量的10%,观察小天鹅的精神状态、体态行动、喙的颜色、羽毛色泽及成活率等。[结果]饲喂纳豆芽孢菌剂16 d后,小天鹅的体质、粪便、采食量等指标显著改善,圈养及外放后未见死亡。[结论]纳豆芽孢菌剂能起到改善小天鹅转群应激反应和降低死亡率的作用。     

纳豆芽胞杆菌KX株纳豆激酶基因的克隆及序列分析

设计引物进行PCR反应,从纳豆芽孢杆菌基因组DNA中扩增和克隆纳豆激酶基因.序列分析表明,所克隆的纳豆激酶基因序列全长1 473 bp,其中阅读框架1 143 bp,阅读框架以GTG为起始密码子,编码包括信号肽、前导肽、成熟肽在内的381个氨基酸;表达产物为前纳豆激酶原,其中N端29个氨基酸组成信号肽,随后的77个氨基酸组成前导肽,最后的275个氨基酸组成成熟肽.     

纳豆生产优良菌株的筛选研究

[目的]筛选出最优的纳豆生产菌株。[方法]以实验室现有的16株纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)为出发菌株,通过蛋白酶、纳豆激酶及产黏(r-PGA)性能的综合指标,筛选出适合纳豆生产的纳豆芽孢杆菌。[结果]综合考虑,菌株DL-1521具有最高的蛋白酶、纳豆激酶和较高的产黏特性,具备作为纳豆生产优良菌种的特性。[结论]筛选结果可为纳豆直投式菌剂的制备提供优良菌株。     

全基因组预测枯草芽孢杆菌BEST195的分泌蛋白

枯草芽孢杆菌BEST195作为纳豆菌的一种,是纳豆生产的重要菌株之一。利用SignalP、ProtComp、TMHMM、Phobius、LipoP、TatP等预测程序对该菌中4456条蛋白质序列进行分泌蛋白找寻,同时,对上述分泌蛋白的氨基酸分布、信号肽长度大小、信号肽切割位点等性质进行分析。结果表明：枯草芽孢杆菌含有分泌蛋白102个,其氨基酸长度、信号肽长度与植物病原菌不同;信号肽切割位点属于A X A类型,与其他已经报道的植物病原真菌、细菌以及卵菌中分泌蛋白信号肽切割位点一致。通过上述生物信息学分析方法有效地实现了枯草芽孢杆菌BEST195分泌蛋白的预测,分泌蛋白的信号肽切割位点具有物种保守型特点。     

纳豆菌生物学特性研究

研究了不同温度、pH值、培养时间、通气量、接种量、盐浓度因素对纳豆菌生长的影响,试验结果表明,该菌种生长适宜条件为：温度30-45℃;通风,转速140r／min,500mL三角瓶装液量100mL;pH值7．0;培养时间24h;接种量2％-5％。纳豆菌耐盐性较强,在含盐量8％的条件下仍能较好生长。     

热应激奶牛瘤胃液中嗜淀粉杆菌的含量

为探讨不同生理状态热应激奶牛嗜淀粉瘤胃杆菌（Ruminobacter amylophilus）的含量差异,选择48头产奶母牛,按照因子试验设计分为泌乳中期和后期牛、高产和中产牛、初产和经产牛。奶牛经历1周热应激后,采集瘤胃液,利用RT-PCR定量分析方法,测定瘤胃液中嗜淀粉杆菌的含量。结果显示,微生物的数量经lg转化后,泌乳中期奶牛嗜淀粉瘤胃杆菌为7.70,泌乳后期为7.95,差异不显著（P〉0.05）;高产牛嗜淀粉瘤胃杆菌为7.46,中产牛为8.20,差异不显著（P〉0.05）;初产牛嗜淀粉瘤胃杆菌为7.97,经产牛为7.68,差异不显著（P〉0.05）。综上所述,在奶牛遭受热应激时,嗜淀粉瘤胃杆菌含量与奶牛的耐受热应激能力无明显关系。     

枯草芽孢杆菌拮抗病原菌黏附和入侵Caco-2细胞的研究

为探讨枯草芽孢杆菌及其培养上清液对产肠毒素大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的抗黏附作用,本试验将产肠毒素大肠杆菌K88或鼠伤寒沙门氏菌SL1344与枯草芽孢杆菌及其培养上清液先后加到Caco-2细胞上,用活菌计数的方法观察产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌及枯草芽孢杆菌黏附Caco-2细胞的情况。结果显示:在排斥、竞争和置换试验中,枯草芽孢杆菌菌体均能够明显抑制K88和SL1344的黏附及SL1344的内化,在竞争试验时K88的黏附减少了71.2%、SL1344的黏附及内化减少了92.9%,但枯草芽孢杆菌的培养上清液只有在竞争试验中才能明显抑制K88和SL1344的黏附及SL1344内化。提示:枯草芽孢杆菌通过与病原菌竞争黏附位点来抑制病原菌对Caco-2细胞的黏附和入侵。     

玉米内生拮抗细菌枯草芽孢杆菌A16对小斑病菌拮抗作用的研究

从甜玉米植株中分离获得90株内生细菌菌株,用平板对峙法获得对玉米小斑病菌有较强拮抗作用的菌株A16。抑菌谱测定表明,A16对多种病原真菌均有明显的拮抗作用。A16对甜玉米种子的萌发没有明显的抑制作用,且显示有一定的促生作用。苗期盆栽表明,经A16处理过的甜玉米植株的玉米小斑病的病情指数比对照低46.3。经形态学观察、生理生化反应及16SrDNA序列同源性分析,鉴定A16为枯草芽孢杆菌。最佳培养条件为:LM培养基、28～32℃、pH6.0、振荡培养36h。     

饲料粉料加工对枯草芽孢杆菌活菌数的影响

研究常规饲料粉料加工对枯草芽孢杆菌活菌数的影响,计数统计结果表明：枯草芽孢杆菌理论添加值（6．02±0．13）×10^7和实际计数值（6．15±0．76）×10^7并无显著差异,说明枯草芽孢杆菌稳定性好,能够经受饲料粉料加工过程中的高温、挤压等的考验,可在饲料生产过程中直接添加应用。