鸡胚接种柔嫩艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫活卵囊的免疫保护试验

给18日龄鸡胚接种一定剂量的柔嫩艾美耳球虫(Eim eria tenella)和/或堆形艾美耳球虫(E.acervulina)孢子化卵囊,出雏后在无球虫环境中笼养,1~10日龄每天收集各组粪便样本,计数克粪便卵囊数(OPG),并于14日龄时以大剂量同源孢子化卵囊攻虫,以相对增重率(RWG)、饲料转化率(FCR)、相对卵囊产量(ROP)评价免疫保护效果。结果显示,以E.tenella或E.acervulina卵囊免疫18日龄鸡胚,其卵囊排出的潜隐期及达到峰值的时间与1日龄雏鸡接种组相一致,有相似的排卵囊曲线,提示其诱导免疫的建立是在出雏后开始建立的。攻虫后各免疫组的RWG由攻虫对照组的31.9%~51.7%提高到了76.5%~83.6%,RCR由攻虫对照组的4.11~4.89改善为2.72~2.96,ROP降至4.7%~23.5%。结果表明以一定剂量E.tenella和E.acervulina卵囊单独或混合经羊膜腔免疫18日龄鸡胚都可以建立起针对出雏后14日龄同源攻虫的良好免疫保护力。比较混合免疫E.tenella和E.acervulina卵囊组与单一接种E.tenella或E.acervulina卵囊组的免疫效果发现,混合免疫组的各项指标均稍优于后者。     

柔嫩艾美耳球虫研究概况

本文简要介绍柔嫩艾美耳球虫生活史、生物学特性、卵囊形状、以及卵囊产量的影响因素，对柔嫩艾美耳球虫日龄与粪便卵囊产量进行科学的分析，旨在为疾病的治疗和预防提供依据。     

柔嫩艾美耳球虫毒害艾美耳球虫变位艾美耳球虫交叉免疫试验

柔嫩艾美耳球虫毒害艾美耳球虫变位艾美耳球虫交叉免疫试验黄兵，赵其平，何林华，吴薛忠，陈兆国，史天卫（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所，２００２３２）鸡感染球虫后会产生一种抵抗再次感染的免疫反应，这种免疫反应具有种的特异性，即感染某种球虫不能保护抵抗另...     

黄艾美耳球虫大配子体发育及卵囊壁形成超微结构的研究

黄艾美耳球虫大配子的发育在盲肠和结肠腺上皮中的带虫空泡内进行。大配子发育过程中出现两种成囊颗粒（ＷＦＢＩ和ＷＦＢⅡ），且ＷＦＢⅡ先于ＷＦＢⅠ出现。其带虫空泡内有被膜空泡存在。作者观察到了被膜空泡从虫体表面脱落的现象。此外，还发现一例大配子体在宿主细胞核中发育的现象。成熟的大配子受精后，囊被开始形成。卵囊形成的标志是大配子两层膜（ｍ１，ｍ２）松弛，ＷＦＢⅠ迁移到两层膜松弛后留下的空隙内，崩解并融合形     

柔嫩艾美耳球虫的抗原分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳，免疫印渍技术，用抗柔嫩艾美耳球虫抗体分析了第二代型殖子、子孢子和未孢子化卵囊的蛋白质。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳银染表明第二代裂殖子主要蛋白质为：１７．６ＫＤ，２９．９ＫＤ，３８．９ＫＤ和５３．７ＫＤ，但用抗Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ抗体免疫印渍法检测出的主要抗原为：７８．０ＫＤ，８３．２ＫＤ和９５．５ＫＤ，这说明并不是含量高的蛋白质就是产生抗体的抗原；子孢子蛋白质含     

柔嫩艾美耳球虫裂殖生殖阶段超微结构的研究

利用透射电镜对柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella)裂殖生殖阶段的超微结构进行了观察描述。其第二次裂殖生殖方式为外裂殖生殖，裂殖子侵入宿主细胞后，裂殖子逐渐变圆形成裂殖体，此过程中裂殖子的棒状体首先消失，引后锥体和极环消失、最后微浅、淀粉颗粒和折光体消失。裂殖体长大后，细胞膜下陷，将裂殖体分成几个部分，随后裂殖体进行核分裂成多核裂殖体，此后在靠近细胞核处细胞膜加厚外突，临近部位的细胞膜凹陷，同时近突起部位内膜复合体加厚形成极环，随着时间的推移逐渐形成幼稚裂殖子，幼稚裂殖子后部与残体相连，此过程中裂殖子的锥、极环、微线、棒状体、淀粉颗粒、折光体依次逐渐形成。裂殖子成熟的标志为从残体脱离，裂殖子的膜下微管24根纵向贯穿裂殖子直达顶端和极环相连，裂殖子内部由锥体、锥体前环1、锥体前环2、极环、微线、线粒体、折光体和3－多个棒状体等组成。     

肠艾美耳球虫内生发育阶段超微结构研究——Ⅲ.小配子发育

肠艾美耳球虫(Eimeria intestinalis)小配子体及小配子的发育均在宿主细胞的带虫空泡内进行,带虫空泡内含有较多的泡内小管以及由小配子体逸出的线粒体和基质小体。多核小配子体是由最初的单核小配子体发育而成。小配子的形成首先是中心粒转变成鞭毛的基粒,此后鞭毛和顶体与小配子体成切线方式长入带虫空泡;几个小线粒体融合成一大线粒体,嵌于核前方一侧,与核一起突入带虫空泡。成熟的小配子体长约6.5μm,有两根鞭毛。鞭毛的横断面为9+2的微管结构。体部由顶体、线粒体和核组成。由顶体的腹侧向后发出4～6根微管,其中只有2～3根延伸到体后部。     

堆型艾美耳球虫与柔嫩艾美耳球虫卵囊最短孢子发育时间的测定

将收集到的新排出的堆型艾美耳球虫(E.acervulina)与柔嫩艾美耳球虫(E．tenella)卵囊于29℃静态系统中孢化。以30min为间隔，对卵囊孢子发育的4个阶段在显微镜下进行观察。以1h为间隔，用发育中的卵囊连续接种无球虫鸡，以确定最短孢子发育时间(MST)。对影响孢子发育的外部因素进行了初步探讨。用堆型艾美耳球虫比较不同卵囊浓度，不同悬液深度在卵囊孢化过程中第20h时子孢子形成的卵囊百分率。E.acervulina与E.tenella的MST分别为11b与18b。卵囊浓度和悬液深度与孢子发育时间呈明显反比关系。     

马杜霉素对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)超微结构的影响

将马杜霉素按 0 .0 0 0 5 %的比例混入饲料 ,作用于鸡体内柔嫩艾美耳球虫 (Eimeria tenella) ,透射电镜观察 ,发现裂殖体变小 ,内含裂殖子的数目减少 ,裂殖子膨胀变为椭圆 ,裂殖子间 (带虫空泡内 )微管结构模糊、膨胀 ,裂殖体中有髓鞘样结构出现 ;细胞膜外突和细胞质分离形成空隙 ,细胞膜有破损、结构模糊 ;细胞质出现空泡化 ,内部出现附加体和髓鞘样结构 ;少数细胞核的外膜外突和内膜分离 ,有的部位的核膜模糊、破损。裂殖子顶体结构发生异常变化 ,棒状体消失 ,微线数目减少或者消失。线粒体表现为形态改变 ,肿大变圆 ,或者变为马蹄形 ,内膜和嵴脱落 ,内部形成空泡、膜状结构、螺旋状或者髓样结构 ,线粒体的嵴与长轴平行排列 ,且贯穿线粒体。作者推测 ,抗生素类抗球虫药的作用机理可能是 ,通过使虫体结构的完整性受损 ,抑制虫体的物质代谢及能量代谢等生理机能 ,达到杀死虫体或者抑制虫体生长、发育和繁殖的目的。     

柔嫩艾美耳球虫的分离鉴定与致病性测定

本实验采用单卵囊分离技术分离纯化球虫,并根据其临床病理变化、潜隐期、最短孢子化时间等指标综合判定其为柔嫩艾美耳球虫。用纯化所得球虫卵囊进行致病性试验,结果表明:该柔嫩艾美耳球虫致病力较强,半数致死量为7.52×104个/只。     

柔嫩艾美耳球虫泛素蛋白功能初步研究

泛素是真核生物中普遍存在的一种小分子蛋白,广泛参与细胞内蛋白质的平衡代谢过程,对维持细胞内环境的稳态具有重要作用.为研究泛素在柔嫩艾美耳球虫中的功能,本研究利用PCR方法克隆了柔嫩艾美耳球虫泛素(EtUb)基因,将其亚克隆至原核表达载体pET28a(+),转入大肠杆菌BL21,诱导表达制备rEtUb蛋白,用纯化的重组蛋...     

柔嫩艾美耳球虫对地克珠利和百球清的交叉耐药性检验

分别采用地克珠利和百球清饮水剂对3株来源和特性不同的柔嫩艾美耳球虫株进行了交叉耐药性检验。结果表明，从未接触过百球清的敏感株和由敏感株诱导而成的地克珠利耐药株均表现出对百球清高度敏感；而曾使用过二种药物的野外分离虫株，则表现出对两种药物高度耐药。由此可见，两种药物并不存在必然的交叉耐药性。     

不同地理株柔嫩艾美耳球虫对地克珠利敏感性试验

进行了3个不同地理株的柔嫩艾美耳球虫(吉林株、山东株、黑龙江株)对地克珠利饮水剂的敏感性试验.分别给予试验组鸡1×105个孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊,感染后饮水给予地克珠利药物治疗.结果表明,3株球虫的敏感性不同,其敏感顺序为:山东株＞黑龙江株＞吉林株.由此可见,柔嫩艾美耳球虫不同地理株间存在对地克珠利的敏感性差异.     

柔嫩艾美耳球虫病毒的鉴定

鸡球虫病是由艾美耳属（Eimeria）的一种单细胞寄生性原虫引起的严重危害养禽业发展的重要疾病之一,遍及世界各地。感染鸡的艾美耳属球虫中,国外已报道在巨型艾美耳球虫（E.maxima）,堆型艾美耳球虫（E.acervu-lina）,毒害艾美耳球虫（E.necatrix）和布氏艾美耳球虫（E.brunetti）中发现了病毒粒子或病毒RNA。但是作为危害最严重的柔嫩艾美耳球虫是否有病毒感染,国内外迄今尚无报道。本研究首次在柔嫩艾美耳球虫中发现病毒并对其进行了鉴定。通过核酸分析、RNA依赖的RNA聚合酶（RDRP）活性和电镜形态观察对病毒进行鉴定。核酸酶的敏感性试验结果表明在柔嫩艾美耳球虫总核酸电泳图谱上观察到的大小分别为1.4、2.4和3.6kb的3条病毒带均不能被DNA酶（100mg/L）降解,但可被RNA酶（1.0mg/L）降解,表明这些核酸为RNA。另外,这些核酸不能被高盐浓度（0.3mol/L NaCl）RNase A（10mg/L）降解,但可被低盐浓度（0.015mol/L NaCl）RNase A（10mg/L）降解,并且采用α-32P标记的UTP掺入法测得该病毒样核酸具有RNA依赖RNA聚合酶（RDRP）活性,表明这些核酸为双链RNA（dsRNA）。利用蔗糖梯度离心和透射电镜技术对柔嫩艾美耳球虫病毒进行了分离和鉴定。电镜负染观察到柔嫩艾美耳球虫病毒粒子外观呈球形,二十面体,无囊膜,直径38nm。     

地克珠利、氨丙啉与左旋咪唑联合使用对Eimeria tenella的效力试验

目的研究地克珠利与氨丙啉、左旋咪唑的联合抗球虫效果。方法应用均匀设计法对地克珠利、氨丙啉和左旋咪唑的各6个不同剂量进行优化配伍,试验设立6个药物试验组,并设药物对照组、感染不给药组和不感染不给药组。除不感染不给药组外,其余全部试验鸡每只接种E.tenella孢子化卵囊1×105个,以抗球虫指数(AC I)判定药物的疗效。结果地克珠利5 mg/kg+氨丙啉240 mg/kg+左旋咪唑1.5 mg/kg组的雏鸡存活率为100%,相对增重率97.5%,病变值15.5,其AC I 181.97;而地克珠利2 mg/kg组的AC I仅为79.35;其余各组AC I均在150~170之间。结论本试验中以地克珠利5 mg/kg+氨丙啉240 mg/kg+左旋咪唑1.5 mg/kg为最佳抗球虫药物组。     

柔嫩艾美尔球虫实验感染雏鸡体液免疫机制研究

本文通过人工复制的鸡球虫病鸡,利用免疫组化技术等方法,检测了柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)初次感染雏鸡后,盲肠局部和免疫器官中IgG生成细胞数的动态变化。结果表明:攻毒后雏鸡盲肠粘膜、脾脏、法氏囊、盲肠扁桃体中的IgG生成细胞分别于第3、3、3、2d开始增殖,在第12、12、16、9d达到峰值,随后即开始下降,盲肠扁桃体中的IgG生成细胞数在第22d仍高于对照组,且差异显著(P<0.05)。     

AA鸡感染E.tenella后某些血清生化指标变化的研究

23日龄AA鸡36只均分为3组。第1组和第2组分别经口感染E.tenella卵囊35万/只和7万/只，第3组为对照组。在感染前（0天）及感染后第5天和第8天对病鸡10项血清生化指标进行检测。结果如下：（1）血清葡萄糖含量在感染前后无显著差异。（2）总蛋白，白蛋白和甘油三酯含量在第5天显著降低；在第8天，前二者回升，后者继续下降，球蛋白含量在第5天和第8天均显著升高。（3）尿酸含量在第1组的第5天和第2组的第8天极显著升高，（4）天冬氨酸氨基转移酶和酸性磷酸酶活性在第5天均极显著降低。前者在第8天回升，后者在第8天继续显著下降。碱性磷酸酶在第5天升高后，在第8天又回落，胆碱酯酶活性在第1组的第5天极显著降低。在第8天又极显著升高；在第2组无明显变化。（5）绝大多数指标在第1组的变化幅度较第2组大，其中总蛋白和甘油三酯含量在两组间的差异达到显著水平。这些结果表明病鸡能量代谢出现大的调整，病理损伤程度与感染剂量有关。     

鸡感染柔嫩艾美尔球虫后某些血清生化指标变化的研究

23日龄AA鸡36只均分为3组，第一组和第二组分别经口感染E.tenella卵囊35万／只和7万／只，第三组为对照组，对病鸡10项血清生化指标进行检测，结果如下：（1）血清葡萄糖含量在感染后5天（5天）和8天与感染前（0天）无显著差异（P＞0．5）。（2）血清总蛋白、白蛋白、甘油三酯的含量，天冬氨酸氨基转移酶、酸性磷酸酶的活性在5天均显著低于0天（P＜0．5），第一组所降的幅度较第二组大，其中总蛋白和甘油三酯含量在两组间的差异达到显著水平（P＜0．5）；甘油三酯含量和磷酸磷酸酶活性在8天继续下降，其他指标在8天都有不同程度回升。（3）两感染组的碱性磷酸酶活性和第一组的血清尿酸含量在5天显著高于0天（P＜0．5），到8天又回落。第二组尿酸含量在0天、5天和8天之间无显著差异。（4）球蛋白含量在5天和8天均显著高于0天（P＜0．5）。（5）胆碱酯酶活性在第一组的8天显著高于0天和5天（P＜0．5），在第二组的0天、5天和8天之间无显著差异