云南保种山羊线粒体DNA限制性酶切研究

采用碱变性法,提取来自云南省不同地区４个保种山羊的１３个个体的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）,并用ＡｐａⅠ,ＡｖａⅠ,ＢａｍＨⅠ,ＢｃｌⅠ,ＢｃＩⅠ,ＢｇｌⅡ,ＣｌａⅠ,ＤｒａⅠ,ＥｃｏＲⅠ,ＥｃｏＲⅤ,ＨａｅⅠ,ＨｉｎｄⅢ,ＫｐｎⅠ,ＰｓｔⅠ,ＰｖｕⅡ,ＳａｃⅠ,ＳａｌⅠ,ＳｍａⅠ,ＳｔｕⅠ和ＸｈｏⅠ等２０种限制性内切酶进行酶切分析。结果发现它们的线粒体ＤＮＡ的分子量大小约为１５．８Ｋｂ;不同限制性内切酶的酶切位点分别为：ＤｒａⅠ有７个酶切位点,ＡｖａⅢ有６个酶切位点,ＥｃｏＲⅤ和ＳｔｕⅠ共有５个酶切位点,ＨｉｎｄⅡ和ＨａｅⅡ有４个酶切位点,ＢａｍＨⅠ,ＢｇｌⅡ,ＰｓｔⅠ和ＰｖｕⅡ有３个酶切位点,ＡｐａⅠ,ＣｌａⅠ有两个酶切位点,其余有１个酶切位点。各保种山羊间未发现变异,说明云南的４个保种山羊极可能来自于共同的母性祖先。     

山羊mtDNA多态性及其起源分化研究

本文用１４种识别６碱基的限制性内切酶ＡｐａⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＤｒａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＫｐｎⅠ、ＰｖｕⅡ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＳｍａⅠ和ＸｈｏⅠ研究了来自我国１２个省和自治区共计１８个地方山羊品种２１８个体ｍｔＤＮＡ的ＲＦＬＰ,并运用Ｎｅｉ氏公式计算了各限制性类型间的遗传距离Ｐ和群丛遗传多态度π值。结果表明,在研究的所有个体中共检测到４１个酶切位点,１８种限制性态,其中Ｂ     

3株减蛋综合征病毒毒株核酸酶切谱分析

选用ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＥｃｏＲⅤ、ＰｖｕⅡ、ＢｇｌⅠ、ＳｍａⅠ和ＰｓｔⅠ等８种限制性内切酶,对不同地区分离的３株减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒进行酶切图谱比较。结果发现３株毒用前６种酶切割后产生的片段数及各片段的大小均相同,而用ＳｍａⅠ和ＰｓｔⅠ切割后,贵州分离毒ＨＳ－１与国际标准毒ＡＶ－１２７、南京他离毒ＧＣ２相比,多出１个片段。表明不同地区ＥＤＳ分离毒的核酸结构基本相同而又略有差异     

云南地方猪种线粒体DNA多态性研究

本文用ＡｐａⅠ、ＡｖａⅠ，ＢａｍＨⅠ，ＢｅｌⅠ，ＢｃｌⅠ，ＣｌａⅠ，ＤｒａⅠ，ＥⅠ，ＥｃｏＲⅤ，ＫｐｎⅠ，ＰｓｔⅠ，ＰｕｖⅡ，ＳａｌⅠ，ＳｍａⅠ，ＳｔｕⅠ，ＸｈｏⅠ等１８种限制性内切酶分析云南猪种的ｍｔＤＮＡ多态性。在全部１８头个体中只检出一种限制性类型，结果表明，云南猪种的ｍｔＤＮＡ变异度很低，遗传多样性贫乏，提示云南猪种起源于一个共同的祖先，在品种形成的早期可能受到创立者效应的制约。     

狂犬病病毒糖蛋白转基因小鼠的构建研究

将狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡ ＢｇｌⅡ（１．６７ｋｂ）片段正向插入ｐＭＴ０１０／Ａ＾＋ＢａｍＨⅠ切点，构建重组质粒ｐＭＴ０１０／Ａ＾＋－Ｒｇｐ，用ＥｃｏＲⅠ＋ＳａｌⅠ对ｐＭＴ０１０／Ａ＾＋－Ｒｇｐ进行双酶切后，回收含有狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡ和绵羊ＭＴ启动子的２．７６ｋｂ片段，通过显微注射技术将该片段注入小鼠单细胞受精卵雄前核内，在进行胚胎移植后，获得４４只小鼠，经ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交及原位     

产蛋下降综合征（EDS－76）病毒DNA酶切图谱分析

选用ＥｃｏＲＩ、ＰｓｔⅠ、ＰｖｕⅡ、ＨｉｎｄⅢ、ＢｇｌⅠ和ＢｇｌⅡ６种限制性内切酶，对国内４株ＥＤＳ－７６病毒鸡源分离株和国外标准株ＡＶ－１２７及１株鹅源腺病毒的ＤＮＡ进行酶切图谱的比较，结果发现４种鸡源分离株与ＡＶ－１２７株用上述６种酶切的片段数分别为４、８、１０、１０、６和７条。各酶切图形、片段大小亦十分相似，表明均为ＥＤＳ－７６病毒。ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ和ＰｓｔＩ－ＥｃｏＲＩ的双酶切也得到同样结果。鹅源分离株的酶切片段数分别为６、７、９、７、４和１０条，酶切图形和片段大小均与ＡＶ－１２７有很大不同，表明该分离株可能为１株血清型相同而基因组不同的ＥＤＳ－７６鹅腺病毒。     

大肠杆菌肠毒素ST1-LTB融合基因的高效表达

用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１,回收０８４ｋｂ的ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因,再将载体ｐＥＴ—２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切,然后将其与ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因连接,转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒,得到了理想重组质粒ｐＸＥＴＳＬＴ１。重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后,其表达产物经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测,结果表明重组菌株可以高效表达ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的３３２１％,而且无天然ＳＴ１生物毒性。     

大肠杆菌肠毒素ST1—LTB融合基因的高效表达

用限制性核酸内切酶Ｅｃｏ ＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１－ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１,回收０．８４ｋｂ的ＳＴ１－ＬＴＢ融合基因,再将载体ｐＥＴ－２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切,然后将其与ＳＴ１－ＬＴＢ融合基因连接,转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ,ＨｉｎｄⅢ,ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒,得到了理想重组质粒ｐＸＥＴ－ＳＬＴ１。     

鸭源和鸡源减蛋综合征病毒（EDSV）酶切图谱的分析

选用限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ、ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ和ＢｇｌⅠ进行鸭源减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒（ＪＥ１株）和鸡源ＥＤＳ病毒（ＮＥ４株）的酶切图谱分析，发现鸭源ＥＤＳ病毒的这些酶切片段分别为９，４，４，６条，而鸡源ＥＤＳ病毒（ＮＥ４株）则为１０，４，４，５条，两者的酶切图形和片段大小有些不同，说明ＥＤＳ病毒宿主不同，即使血清型相同，基因型也有差异。     

狂犬病病毒糖蛋白基因在原核细胞中的表达

将狂犬病病毒糖蛋白（ＲＶｇｐ）基因ＢｇｌⅡ片段（１６７５ｂｐ）分别正向插入到原核高效表达载体ｐＥＴ－１７ｂ和ｐＥＴ－１７ｂ２（用ＳａｃⅠ－ＮｄｅⅠ缺失掉ｐＥＴ－１７ｂ６０ｂｐ含起始密码子ＡＴＧ小片段）的ＢａｍＨⅠ切点，构建重组质粒ｐＥＴ－１７ｂＲＶｇｐ和ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ。将其分别转化表达受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）和Ｅ，ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ．ＩＰＴＧ诱导表达，菌体经超声波裂解处理后ＳＤＳ－ｐＡＧＥ，染色，在分子量约６００００处可见重组质粒表达的较宽的蛋白带，以抗ＲＶｇｐＭｃＡｂ进行Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测，表明该表达蛋白为ＲＶｇｐ。通过扫描显示，表达的ＲＶｇｐ占菌体总蛋白的１０％～１４％，其中ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ在Ｅ。ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中的表达量最高。     

溴氰菊酯对微小牛蜱的敏感度和对雌蜱产卵的影响的研究

１９９１～１９９２年在福建省研究溴氰菊酯对微小牛蜱各变态期的敏感度和对饱血雌蜱产卵情况的影响。结果表明，幼蜱对溴氰菊酯最敏感，当施用浓度为５ｐｐｍ时，幼蜱平均死亡率为１００％；若蜱其次，死亡率２８．９％；未吸虫成蜱敏感度最低，死亡率仅１０％。据Ｘ２检验，微小牛蜱在不同变态期间对溴氰菊酯的敏感度差异极显著（Ｐ＜０．０１）。饱血雌蜱接触溴氰菊酯１０μｇ／虫后，其产卵前期比对照蜱延长６天，产卵期缩短６天，产卵量减少２１８８粒。     

青海草地蕨麻资源及开发应用价值

蕨麻是青藏高原草地的一种特有药-食两用经济植物.本文论述了青海草地蕨麻资源的自然分布、生物学特性以及经济价值和开发利用前景.     

浅谈青海省高寒牧区人工草地的利用

综述了青海高寒牧区人工草地利用中存在的问题 ,并提出相应对策。     

r－球蛋白制剂对肉用雏鸡法氏囊发育影响的超微结构研究

为研究ｒ－球蛋白制剂对雏鸡法氏囊发育的影响，１４０羽２日龄ＡＡ肉鸡被随机等分为两组。试验组鸡分别在１、２和３周龄期注射血清ｒ－球蛋白，１０ｍｇ／羽。对照组不予注射。然后用透时电镜（ＴＥＭ）观察两组鸡法氏囊的形态结构。结果表明：试验组与对照组相比，２周龄期，法氏囊淋巴滤泡内淋巴细胞数量增加，核内常染色质、胞质内线粒体、溶酶体和糙面内质网均增加。３周龄期，中淋巴细胞比例增加、淋巴细胞分裂较快。４周龄期，淋巴滤泡内“冠区”结构明显，ＩＳＥ分泌功能活跃。提示ｒ－球蛋白制剂可能对雏鸡法氏囊发育和淋巴细胞的增殖与分化有促进作用。本文还对ｒ－球蛋白制剂增强幼禽抗病能力的作用机理进行了探讨。     

WTO规则对重庆教育行政管理的挑战及对策研究

在简介重庆教育行政管理的现状及存在的问题的基础上,探讨WTO原则对教育行政管理所提出的挑战及现实的差距,并提出笔者的一些思考.