北冬虫夏草液体发酵培养基优化试验

以优化北冬虫夏草液体培养基为目的,对比分析了不同的碳源、氮源、无机盐对北冬虫夏草液体菌丝生物量及多糖的影响。结果表明:与常用北冬虫夏草液体培养基相比,采用麸皮作为碳源,北冬虫夏草胞内多糖和胞外多糖含量均较高;有机氮作为氮源的菌丝生物量及胞外多糖含量均优于无机氮源;Zn~(2+)对北冬虫夏草菌丝体生长影响较大,当培养基中添加质量分数为0.1%的ZnSO_4,北冬虫夏草的生物量为1.45 mg/mL,菌丝体胞内多糖和胞外多糖含量分别是32.91 mg/g和6.48 mg/100 mL。     

胞外多糖研究

 采用摇瓶培养法对2种真姬菇的发酵工艺进行研究,结果表明：真姬菇Ⅰ、Ⅱ发酵生产菌丝体及胞外多糖的碳源是葡萄糖,氮源是酵母膏;液体发酵培养基是葡萄糖3%、酵母膏 0.4%、vitB1 10mg/100ml、KH₂PO₄ 0.1%、MgSO₄ 0.1%,pH值为6.0;液体发酵的优化条件是初始pH 6.0~7.0,振荡速度110~130r/min,培养温度25~28℃,装液量150ml/250ml。2种真姬菇菌丝体及胞外多糖产量较高,真姬菇Ⅰ菌丝体干重、胞外多糖产量分别是 3.92、8.83 mg /ml;真姬菇ⅠⅠ菌丝体干重、胞外多糖产量分别是3.25、7.69 mg /ml,即真姬菇Ⅰ摇瓶发酵菌丝体干重、胞外多糖产量高于真姬菇Ⅱ。     

深层发酵产樟芝菌丝体和多糖培养基的研究

[目的]加快樟芝的应用和发展。[方法]选取碳源及碳源浓度、氮源及氮源浓度作单因素试验,碳源、氮源、无机盐组合和生长因子作正交试验,优化深层液体发酵法生产樟芝菌丝体和多糖的培养基。[结果]玉米粉作碳源时,樟芝菌丝体干重和胞外多糖含量最大,胞内多糖次之,质量分数4.00%的玉米粉作碳源最合适。以麸皮作氮源时,菌丝体干重和胞内、外多糖含量最大,硝酸铵最少,质量分数0.8%的麸皮作氮源最合适。玉米粉和麸皮是影响菌丝干重和胞内、外多糖含量的主要因素。[结论]深层液体发酵法生产樟芝菌丝体和多糖的最佳培养基组合为:4.00%玉米粉,0.60%麸皮,12mg/LVB1,0.25%KH2PO4,0.05%MgSO4·7H2O。     

钙离子和锌离子对金针菇菌丝生长的影响

在培养基中加入不同质量的Ca~(2+)和Zn~(2+),研究其对金针菇菌丝生长、生物量以及多糖含量的影响。结果表明,固体培养时,Ca~(2+)浓度为1 000～9 000 mg/L促进菌丝的生长,当浓度超过12 000 mg/L时抑制菌丝的生长;Zn~(2+)浓度为10～100 mg/L时促进菌丝的生长,当Zn~(2+)浓度超过150 mg/L时抑制菌丝的生长。液体培养时,Ca~(2+)浓度为5 000 mg/L时,菌丝体多糖含量最多,相比对照组提高139.2%;Zn~(2+)浓度为6 mg/L时,菌丝体多糖含量最大,相比对照组增加141.8%。     

杯伞发酵培养基的响应曲面法优化研究

在原有的Plackett Burman设计与实验结果基础上 ,采用响应曲面法 (RSM )研究了影响杯伞 (Clitocybesp )AS5 112生长与发酵胞外多糖的培养基关键成分的最佳水平。实验结果表明 ,当葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、NaNO3 和MgSO4分别为 14 0 0、 5 11、 2 0 7、 2 0 0和 1 2 8g·L-1时 ,胞外多糖最大预测值为 10 81 80 μg·mL-1(以发酵醪计 ) ;当上述自变量为 2 4 0 0、 3 2 3、 1 5 2、 2 36和 1 6 0 g·L-1时 ,菌丝最大生长量为 6 81mg·mL-1(以发酵醪计 )。欲同时获得最大量的胞外多糖和菌丝量 ,则葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、NaNO3 和MgSO4须为 2 1 74、 4 33、 1 6 5、 2 4 5和1 5 0 g·L-1,在此条件下 ,每毫升发酵醪可同时获得 10 11 30 μg的胞外多糖和 6 6 6mg的菌丝量     

响应面分析法优化葡萄糖和酵母膏对巴西蘑菇菌丝体及胞外多糖生产的影响

通过响应面分析方法,就葡萄糖和酵母膏对巴西蘑菇菌丝体及胞外多糖生产的影响开展研究. 结果表明,葡萄糖浓度20～40 g/L有利于菌丝体的合成, 而酵母膏的浓度2～4 g/L对菌丝体的合成有负影响; 葡萄糖的变化对胞外多糖产生的影响不明显, 而酵母膏的浓度2～4 g/L有正面影响.表明碳氮源对巴西蘑菇菌丝体和胞外多糖合成的影响不一致. 因此,菌丝体和胞外多糖合成有各自最佳的碳氮源浓度,可为下一步实验的目标产物是多糖还是菌丝体调整各因子值的大小.     

深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基优化

[目的]优化深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基。[方法]以不同的培养基深层发酵培养虎奶菇菌丝体和多糖,分离胞内和胞外多糖,在单因素试验和正交试验的基础上,考察碳源、氮源和金属离子对虎奶菇生长及虎奶菇多糖含量的影响。[结果]葡萄糖是最佳碳源,有利于细胞生长和胞内外多糖等代谢产物的积累,从而获得高的多糖产率;酵母膏是最适氮源,可以获得最高的菌丝体生物量和胞外多糖产量;金属离子对细胞生长有影响,在EDTA离子培养基里细胞生长及代谢产物累积效果最佳。在最优培养基培养条件下,总多糖含量为3.34 g/L,胞内多糖含量为1.92 g/L,胞外多糖含量为80.34 mg/g,多糖产率为8.13%,细胞干重为23.62 g/L。[结论]该方法优化了深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基,为虎奶菇的种植栽培提供了科学依据。     

不同氮源对阿魏菇菌丝生长量及多糖含量的影响

分别以蛋白胨、酵母膏、硫酸铵、硝酸铵为氮源,用液体摇床培养法与平板培养法培养阿魏菇,并对胞外多糖产量及菌丝生长情况进行了研究。结果表明:酵母膏为阿魏菇生长的最佳氮源,液体培养基中菌球长势好,胞外多糖产量高,平板培养菌丝生长速度快。     

响应面法优化双孢蘑菇菌株W38液体菌种培养的研究

利用Design-Expert软件,在前期单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman设计和中心组合设计对双孢蘑菇新菌株W38液体菌种培养基及培养条件进行优化。根据响应面分析法建立模型并确定其最佳的培养基和培养条件为:小米粉49.90g·L~(-1),黄豆粉13.60g·L~(-1),KH_2PO_4 2.00g·L~(-1),MgSO_4·7H_2O 1.067 5g·L~(-1),初始pH 6.5,发酵时间7d,发酵温度24℃,摇瓶转速180r·min~(-1)。在此条件下,双孢蘑菇菌株W38液体菌种的菌丝体每100mL生物量可达2.35g,与初始培养条件下的菌丝体生物量相比提高了3.05倍,平均菌丝生长速度加快了14.7%。     

两种真姬菇摇瓶发酵产生菌丝体及 胞外多糖研究

;采用摇瓶培养法对2种真姬菇的发酵工艺进行研究,结果表明:真姬菇Ⅰ、Ⅱ发酵生产菌丝体及胞外多糖的碳源是葡萄糖,氮源是酵母膏;液体发酵培养基是葡萄糖3%、酵母膏0.4%、vitB110mg/100ml、KH2PO40.1%、MgSO40.1%,pH值为6.0;液体发酵的优化条件是初始pH 6.0～7.0,振荡速度110～130r/min,培养温度25～28℃,装液量150ml/250ml.2种真姬菇菌丝体及胞外多糖产量较高,真姬菇Ⅰ菌丝体干重、胞外多糖产量分别是3.92、8.83 mg/ml;真姬菇ⅠⅠ菌丝体干重、胞外多糖产量分别是3.25、7.69 mg/ml,即真姬菇Ⅰ摇瓶发酵菌丝体干重、胞外多糖产量高于真姬菇Ⅱ.     

姬松茸富硒菌丝体多糖提取条件的优化

为探讨姬松茸富硒菌丝体多糖的提取工艺,研发食用菌富硒菌丝多糖保健品,通过单因子试验和正交试验,对热水浸提法提取姬松茸富硒菌丝体多糖的条件进行优化。结果表明:料水比、乙醇沉淀浓度和浸提的温度、时间及次数对姬松茸富硒菌丝体多糖的提取均有较大影响,其最优提取条件为:料水比1∶35(g·mL-1)、乙醇沉淀浓度90%、浸提温度85℃、浸提时间3.5h、浸提次数3次,在此工艺条件下富硒菌丝体多糖的提取量及其硒含量分别达到69.5mg·g~(-1)和12.1μg·g~(-1)(菌丝干重);本工艺简单、稳定、可行,适用于姬松茸富硒菌丝体多糖的提取。     

硒对姬松茸菌丝体酶活性的影响

[目的]探讨姬松茸在富硒过程中的生化机理。[方法]在姬松茸菌丝体培养基中加入浓度分别为03、0、609、01、201、50 mg/L的亚硒酸钠溶液,研究不同浓度硒对姬松茸菌丝体内过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)含量的影响,[结果]当硒浓度为150 mg/L时,姬松茸菌丝体POD活性最高,为241.53μmol/(g.min)。当硒浓度为60 mg/L,姬松茸菌丝体SOD活性和MDA含量最高。低浓度硒能显著提高姬松茸菌丝体内POD和SOD活性、明显降低MDA含量,增强菌丝体的抗氧化能力。高浓度硒则对姬松茸菌丝体有毒害作用。[结论]在培养富硒姬松茸菌丝体过程中,应选取适宜的硒浓度。     

用酶法对啤酒酵母细胞破壁优化条件的研究

试验旨以溶菌酶、蜗牛酶对啤酒酵母进行破壁,从中筛选出最佳的破壁条件。以啤酒酵母作为破壁酵母细胞,采用四因素四水平的正交试验设计进行试验。结果表明,酶量10 mg.mL-1,pH 5.0,温度45℃,时间6 h时的破壁率均高于以上各因素的水平。各因素对破壁率的影响顺序为:温度>时间>酶量>pH。蜗牛酶和溶菌酶破壁率差异不显著(P>0.05)。结果揭示本试验条件下溶菌酶、蜗牛酶最佳破壁条件为酶量10 mg.mL-1,pH 5.0,温度45℃,时间6 h。     

红芪、黄芪水提液体外清除自由基作用的研究

采用Fenton反应建立羟基自由基(.OH)模型,利用邻苯三酚在碱性环境中自氧化产生超氧阴离子自由基(O2-.)模型,研究了红芪、黄芪水提液体外清除自由基的活性.结果表明:2种水提液在生药浓度为5～80mg.mL-1的剂量范围内对.OH的清除效果呈明显的量效依赖关系,其IC50分别为红芪水提液8.686mg.mL-1和黄芪水提液16.662mg.mL-1;二者在生药浓度为25～200mg.mL-1的剂量范围内对O2-.的清除效果呈现明显的量效依赖关系,其IC50分别为红芪水提液176.636mg.mL-1和黄芪水提液185.123mg.mL-1.红芪、黄芪水提液均具有一定的体外清除自由基活性,且红芪的清除效果优于黄芪,因此在以自由基为诱因的疾病防治中建议优先选用红芪.     

龙眼果醋酒精发酵条件的优化

在单因素的基础上探讨了温度、氮源、酵母接种量及龙眼汁含糖量和初始pH对酒精发酵的影响,以龙眼汁含糖量、温度和酵母接种量3个影响酒精发酵的主要因素设计3个因素5个水平的正交试验并进行了优化.结果表明,按固形物含量∶(NH4)2HPO4=900∶1的比例添加(NH4)2HPO4,龙眼汁初始pH为4-5时的最佳发酵条件为:温度27℃,龙眼汁含糖量20%,酵母接种量0.1%,酒精发酵后,酒精含量高达11.6%,VC含量为0.268 mg.mL-1,氨基酸态氮含量为1.13 mg.mL-1.     

费菜无性系建立的研究

对费菜的嫩茎进行了无性系建立和快速繁殖的研究。结果表明:MS+BA0.5 mg·L-1+2,4-D1.2 mg·L-1是诱导嫩茎形成愈伤组织的理想培养基;1/2 MS+NH4H2PO450 mg·L-1+AgNO31.0 mg·L-1+BA1.0 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1是愈伤组织分化培养的理想培养基;1/2 MS+NH4H2PO450 mg.L-1+AgNO31.0 mg.L-1+BA1.0 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+GA31.0 mg·L-1是费菜不定芽继代分化培养的理想培养基;以1/2 MS+NAA0.1 mg·L-1+IAA0.3 mg·L-1为生根培养基,变温、自然光是费菜试管苗生根培养的理想条件;试管苗扦插成活率为94.5%,移植成活的试管苗株型大而整齐、根系发达,当年可正常开花结实。     

艾蒿提取物对13种植物病原菌物的抑制作用

研究了艾蒿乙醇提取物对13种植物病原菌物的抑制活性,并测定了提取物对4种植物病原菌物菌丝生长的毒力.结果表明,在50 mg.mL-1生药浓度下,艾蒿乙醇提取物对水稻纹枯病菌30 h和十字花科菌核病菌48 h的菌丝生长抑制率大于90%,对辣椒疫霉病菌、荔枝霜霉病菌、柑橘青霉病菌、红麻灰霉病菌48 h的菌丝生长抑制率在70%-86%之间,对香蕉枯萎病菌、棉花枯萎病菌、香蕉炭疽病菌、稻瘟病菌、红麻灰霉病菌等孢子的萌发抑制率在90%以上.显微观察说明,加药处理后,菌丝出现扭曲、膨大、液泡增多、分枝增加、分枝间隔缩短等异常变化.毒力测定表明,艾蒿乙醇提取物对水稻纹枯菌抑制作用较强,EC50仅为5.85 mg.mL-1.以上研究结果表明,艾蒿具有开发为新型植物源农药的潜力.     

当归水提液和醇提液体外清除自由基的研究

为了探讨当归不同提取液体外清除羟自由基(.OH)与超氧阴离子自由基(O2.-)的作用.通过Fenton反应产生.OH和邻苯三酚自氧化产生O2.-模型,研究当归水提液和醇提体外清除自由基的作用.结果表明,当归水提液在浓度6.0~50.0 mg.mL-1范围内具有清除Fenton反应产生.OH作用,当归醇提液在浓度12.5~200.0 mg.mL-1范围内具有清除Fenton反应产生.OH和邻苯三酚自氧化产生的O2.-的作用,并且当归水提液和醇提液对羟自由基和超氧阴离子的清除作用与药物浓度之间具有良好的量效关系.因此认为当归水提液和醇提液具有较好的体外清除自由基的作用.     

马波沙星在罗非鱼体内的药物代谢动力学研究

【目的】研究马波沙星在罗非鱼Oreochromis niloticus体内的药物代谢动力学(简称药动学)特征,为临床合理用药提供参考。【方法】将罗非鱼随机分成2组,水温维持在30℃,以10 mg·kg-1分别单剂量肌内注射和口服给药,高效液相色谱(HPLC)-荧光检测法测定血浆中马波沙星的质量浓度,用Win Nonlin 6.1药动学软件的"非房室模型"分析药动学参数。【结果】肌内注射马波沙星后,药物吸收和消除均较口服快,体内分布广泛。达峰时间(tmax)为0.25 h,峰质量浓度(ρmax)为4.31μg·mL~(-1),消除半衰期(t1/2λz)为19.21 h,表观分布容积为3.94L·kg-1,药-时曲线下面积(AUC)为70.36μg·mL~(-1)·h-1。口服马波沙星后,药物吸收和消除均较慢,体内分布广泛。tmax为4.00 h,ρmax为2.45μg·mL~(-1),t1/2λz为22.67 h,表观分布容积为4.27 L·kg-1,AUC为76.66μg·mL~(-1)·h-1。【结论】10 mg·kg-1马波沙星能够有效治疗大多数敏感菌引起的罗非鱼感染。     

2,4-D对姬松茸菌丝体生长的影响

[目的]测试姬松茸在2,4-D最适浓度下的生理生化指标,为探讨其应用价值提供依据。[方法]在马铃薯液体培养基中,加入不同浓度的2,4-D,探讨激素对姬松茸菌丝体生长的影响。[结果]2,4-D对姬松茸菌丝体生长有一定的促进作用。在60~140 mg/L范围内,菌丝体的生长量随2,4-D浓度的增大而增大。当2,4-D浓度为60 mg/L时,菌丝体的增长率为35.41%,当2,4-D浓度为140 mg/L时,增长率最大,为55.65%。浓度在60~100 mg/L范围内的2,4-D提高了姬松茸菌丝体的可溶性糖含量,当2,4-D浓度为60 mg/L时,其可溶性糖含量最高,比对照提高了14.07%。[结论]140 mg/L 2,4-D最有利于姬松茸的生长,60 mg/L 2,4-D有利于提高其可溶性糖含量。