外源性谷氨酰胺和谷氨酸对早期断奶仔猪肠粘膜形态、结构和小肠吸收功能及骨骼肌中DNA、RNA浓度的影响

74头28日龄健康二元杂交断奶仔猪分成3组，用于研究外源性谷氨酰胺（glutamine,Gln)和谷氨酰（glutamate, Glu)对断奶仔猪小肠粘膜形态，结构和功能及骨骼肌中DNA，RNA合成的影响。结果表明：与对照组相比，添加1%谷氨酰胺或1%谷氨酸可防止断奶后1周内空肠绒毛萎缩，减少断奶后2周内空肠固有膜内未成熟细胞数；显著改善断奶后1周内小肠吸收功能，并促进肌肉中RNA合成。这些结果为利用Gln、Glu缓解仔猪断奶应激，改善生产性能提供了实验基础。     

日粮添加谷氨酰胺对早期断奶仔猪小肠酶的影响

选用大长北仔猪40头 ,21日龄断奶 ,随机分为试验组和对照组。按等氮等能的原则配制日粮 ,试验组日粮添加1.2 %的谷氨酰胺。分别在35日龄和49日龄每组屠宰5头性别相同的仔猪 ,以研究日粮添加谷氨酰胺对早期断奶仔猪小肠酶的影响。试验结果表明 ,日粮添加谷氨酰胺可缓解仔猪49日龄时小肠乳糖酶活性的降低 ;可显著增加35日龄和49日龄十二指肠粘膜和组织中亮氨酰氨基肽酶的活性 ;35日龄时试验组仔猪空肠亮氨酰氨基肽酶的活性也明显增加 ,但与对照组相比差异不显著 ;49日龄时试验组仔猪空肠亮氨酰氨基肽酶的活性与对照组无明显差异 ;仔猪回肠亮氨酰氨基肽酶的活性无论在35天和49天都无显著的变化。日粮添加谷氨酰胺可增加肠道亮氨酰氨基肽酶的活性 ,对乳糖酶和碱性磷酸酶活性无明显的影响     

断奶仔猪小肠黏膜脂肪酸结合蛋白和二肽转运载体1mRNA表达发育性变化及谷氨酰胺对其的影响

本试验旨在研究断奶仔猪小肠黏膜脂肪酸结合蛋白( Ⅰ-FABP)和二肽转运载体1( PEPT1) mRNA表达的发育性变化及谷氨酰胺对其的影响.以69头(21±3)日龄断奶杜×长×大仔猪为试验动物,断奶当天选取3头猪进行屠宰,剩余66头随机分为2组,每组3个重复,每个重复11头.对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮+1％谷氨酰胺.断奶后第3、5、7、14天试验组和对照组分别选取3头猪进行屠宰(共计27头),取十二指肠、空肠和回肠黏膜组织样品,通过实时定量PCR法测定Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA的表达量.结果表明:1)Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA的表达量各肠段间无显著差异(P＞0.05);2)Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA在十二指肠、空肠和回肠的表达量均在断奶后急剧下降,断奶第3天的表达量最低,显著低于断奶当天(P＜0.05),而后逐渐升高,第14天达到峰值;3)试验组Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA表达量与对照组无显著差异(P＞0.05),但试验组表现出促使十二指肠、空肠、回肠黏膜的Ⅰ-FABP和十二指肠PEPT1 mRNA表达提前恢复至断奶前水平的趋势.结果提示,断奶仔猪Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA表达量随时间而变化,谷氨酰胺对断奶后Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA表达量的恢复有一定的促进作用.     

断奶仔猪小肠黏膜脂肪酸结合蛋白和二肽转运载体 １ｍＲＮＡ表达发育性变化及谷氨酰胺对其的影响

本试验旨在研究断奶仔猪小肠黏膜脂肪酸结合蛋白（Ｉ-ＦＡＢＰ）和二肽转运载体 １（ＰＥＰＴ１）ｍＲＮＡ表达的发育性变化及谷氨酰胺对其的影响。以 ６９头（２１±３）日龄断奶杜 ×长 ×大仔猪为试验动物,断奶当天选取 ３头猪进行屠宰,剩余 ６６头随机分为 ２组,每组 ３个重复,每个重复 １１头。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮 ＋１％谷氨酰胺。断奶后第 ３、５、７、１４天试验组和对照组分别选取 ３头猪进行屠宰（共计 ２７头）,取十二指肠、空肠和回肠黏膜组织样品,通过实时定量 ＰＣＲ法测定 Ｉ ＦＡＢＰ和 ＰＥＰＴ１ｍＲＮＡ的表达量。结果表明：１）Ｉ-ＦＡＢＰ和 ＰＥＰＴ１ｍＲＮＡ的表达量各肠段间无显著差异（Ｐ＞０．０５）;２）Ｉ-ＦＡＢＰ和 ＰＥＰＴ１ｍＲＮＡ在十二指肠、空肠和回肠的表达量均在断奶后急剧下降,断奶第 ３天的表达量最低,显著低于断奶当天（Ｐ＜０．０５）,而后逐渐升高,第１４天达到峰值;３）试验组 Ｉ-ＦＡＢＰ和 ＰＥＰＴ１ｍＲＮＡ表达量与对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５）,但试验组表现出促使十二指肠、空肠、回肠黏膜的 Ｉ-ＦＡＢＰ和十二指肠 ＰＥＰＴ１ｍＲＮＡ表达提前恢复至断奶前水平的趋势。结果提示,断奶仔猪 Ｉ-ＦＡＢＰ和ＰＥＰＴ１ｍＲＮＡ表达量随时间而变化,谷氨酰胺对断奶后Ｉ-ＦＡＢＰ和 ＰＥＰＴ１ｍＲＮＡ表达量的恢复有一定的促进作用。     

早期断奶犊牛血液谷氨酰胺含量和血清D-木糖含量的变化

本试验选用体重和出生日期相近的3头中国荷斯坦犊牛,(40±1)d一次性断奶,研究了早期断奶应激对犊牛血液谷氨酰胺(Gln)含量以及小肠主动吸收的影响。结果表明:早期断奶应激引起犊牛血液Gln含量显著下降(P<0.01)。同时,早期断奶应激也使犊牛小肠吸收功能显著降低(P<0.05)。     

谷氨酰胺和牛磺酸对仔猪肠黏膜形态的影响

甘氨酰谷氨酰胺( Gly-Gln)和牛磺酸(Tau)对早期断奶仔猪小肠各段黏肠DNA和形态的影响.以28日龄杜×长×大断奶仔猪为研究对象,通过饲养和屠宰试验,研究Gly-Gln和Tau对早期断奶仔猪十二指肠、空肠和回肠黏肠DNA及形态的影响.结果表明:饲粮中分别或同时添加Gly-Gln和Tau均可提高小肠各段黏膜DNA的含量.Gly-Gln组能显著提高空肠和回肠段的黏膜DNA含量,Tau组和复配组对小肠各段黏膜DNA含量影响不显著;Gly-Gln组极显著增加了十二指肠和回肠的黏膜厚度(MT),显著提高了十二指肠和回肠后段的绒毛高度(VH),显著或极显著降低了空肠前段和中段的隐窝深度(CD),极显著提高了空肠前段和中段的VH/CD,显著提高了回肠段的VH/CD;Tau组极显著提高了十二指肠段的VH并降低了CD,极显著提高了十二指肠段和空肠中段的VH/CD;复配组显著或极显著降低了十二指肠段和空肠中段的CD,极显著提高了空肠前段、中段和回肠段的VH/CD.这说明,在早期断奶仔猪饲粮中分别或同时添加0.25%Gly-Gln和0.1% Tau能有效提高仔猪肠黏膜的发育及功能.     

谷氨酰胺对早期断奶仔猪肠黏膜免疫的调节作用

作者综述了早期断奶仔猪肠黏膜免疫系统、谷氨酰胺的营养生理功能、早期断奶对仔猪肠黏膜免疫的影响,以及谷氨酰胺对早期断奶仔猪肠黏膜免疫系统的结构和功能、肠道屏障功能、肠道抗氧化能力及生产性能的影响。     

谷氨酰胺对早期断奶仔猪生长性能及肠道形态发育的影响

选21日龄断奶的杜大长仔猪72头,按试验要求分为2组,每组3个重复,每重复12头。分别饲喂基础日粮和含1%谷氨酰胺(Gln)日粮,试验期21 d,在断奶后0 d、7 d和14 d分别屠宰取小肠测重,并取十二指肠、空肠、回肠测定绒毛高度和隐窝深度。试验结果表明:断奶后7 d,日粮中添加Gln可显著提高仔猪的平均日增重和小肠相对重量,提高十二指肠和空肠绒毛的高度,降低十二指肠和空肠的隐窝深度;断奶后14 d,日粮中添加Gln对断奶仔猪的生长和肠道形态发育影响与基础日粮组相比差异不显著。     

外源核苷酸对断奶仔猪生产性能和小肠发育的影响

选用21日龄断奶仔猪160头,随机分为5组,每组4个重复。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂含0.2%核苷酸的日粮。经21d试验,结果表明:日粮中添加0.2%核苷酸能显著提高断奶仔猪的饲料利用率,饲料转化率比对照组提高16.90%(P<0.05),并能显著提高仔猪断奶后第7天十二指肠绒毛高度和第14天回肠黏膜DNA含量,分别比对照组提高44.79%(P<0.05)和111.65%(P<0.05)。     

谷氨酰胺对早期断奶仔猪胰腺及小肠胰蛋白酶活性的影响

选用大长北母猪所产仔猪 45头 ,2 1日龄断奶。断奶时宰杀 5头公仔猪作为哺乳对照 ,其余仔猪按公母各半随机分为 2组 ,试验组添加 1.2 %谷氨酰胺。断奶后 14d和 2 8d宰杀仔猪 ,以研究谷氨酰胺对早期断奶仔猪胰腺和小肠胰蛋白酶活性的影响。断奶后 14d,日粮中添加谷氨酰胺可极显著提高胰腺胰蛋白酶相对活性和总活性 (P<0 .0 0 1)以及比活 (P<0 .0 1) ,而对十二指肠、空肠和回肠食糜及粘膜中胰蛋白酶活性无显著影响 ;断奶后 2 8d时 ,日粮添加谷氨酰胺对胰腺、十二指肠、空肠和回肠食糜粘膜中胰蛋白酶活性均无显著影响。对照组仔猪胰腺、十二指肠和回肠胰蛋白酶活性在断奶后 14d已基本恢复到断奶时水平 ,空肠胰蛋白酶活性显著超过断奶时水平 (P<0 .0 5 ) ;断奶后 2 8d胰腺胰蛋白酶比活和总活性极显著高于断奶后 14d(P<0 .0 1) ,胰腺和回肠胰蛋白酶相对活性显著高于断奶后 14d(P<0 .0 5 )。试验组仔猪胰腺和空肠胰蛋白酶相对活性和比活在断奶后 14d极显著超过断奶时水平 (P<0 .0 1) ,达到了对照组断奶后 2 8d时酶活性水平 ;断奶后 2 8d胰腺胰蛋白酶相对活性、比活和总活性维持在断奶后 14d水平 ,而空肠胰蛋白酶相对活性和比活又降至断奶时水平。结果表明 ,早期断奶仔猪日粮中添加谷氨酰胺有助于缓解由于早期     

不同水平Gln对早期断奶犊牛免疫功能的影响

选用体质量和出生日期相近的12头中国荷斯坦犊牛,随机分为4组,(40±1)d一次性断奶.采用胃肠外营养(Total parenteral nutrition,TPN)颈静脉灌注丙氨酰谷氨酰胺(Ala-Gln)二肽的方式,研究了不同水平Gln对早期断奶犊牛免疫功能的影响.Ala-Gln灌注剂量为Ⅰ组(对照组,不灌注),Ⅱ组(低水平)0.33 g/(kg·d),Ⅲ组(高水平)1.34 g/(kg·d),Ⅳ组(中等水平)0.68 g/(kg·d),连续灌注7 d.结果表明:补充中等水平的Ala-Gln,可以有效地增加外周血CD2+和CD4+淋巴细胞的含量,使CD4+/CD8+比值增高,同时使血清IgA和IgG含量和空肠和回肠粘液S-IgA含量显著升高.从而增强了机体的免疫功能.     

日粮添加谷氨酰胺对断奶仔猪小肠形态结构的影响

试验选用60头21d断奶、体重均一的杜长大仔猪。按单因素完全随机化设计随机分为2组,一组为对照组,饲喂基础日粮;一组为试验组,基础日粮添加0.5%的谷氨酰胺,研究谷氨酰胺处理对断奶仔猪小肠黏膜形态变化的影响。在断奶当天及断奶后7d和14d每个处理随机选取3头仔猪屠宰,取小肠组织,测定肠黏膜的形态结构变化。结果表明:日粮中添加谷氨酰胺提高了小肠绒毛高度和固有层厚度及皱褶深度。     

早期断奶仔猪日粮中蛋氨酸、苏氨酸水平对机体蛋白质代谢的影响

试验采用早期断奶仔猪(26±1日龄,BW668±004kg)72头,按2×3因素水平设计,即两个蛋氨酸水平(029%,039%)和三个苏氨酸水平(060%,068%和076%)分为6种日粮处理.基础日粮为玉米-小麦-豆粕-花生粕型日粮,试验期为22d.试验结束时,各组选取2头仔猪进行屠宰,取肝脏及背最长肌,分析组织样品中蛋白质(Protein)、DNA和RNA含量,并计算Protein/RNA的比值,以研究蛋白质合成效率的变化.结果表明,日粮中苏氨酸的不同水平对肝脏中蛋白质水平有显著影响(P<0.05),日粮中不同水平蛋氨酸和苏氨酸对肝脏及背最长肌中DNA、RNA含量及蛋白质与RNA比值无影响.     

饲粮不同赖氨酸水平对早期断奶仔猪生产性能的影响

试验旨在研究饲粮不同赖氨酸水平对早期断奶仔猪生产性能的影响。选择28日龄断奶、平均初始体重(6.74±0.03)kg的杜长大三元杂交仔猪150头,随机分为3组,每组2个重复(圈),每个重复25头猪,分别饲喂总赖氨酸水平为1.35%、1.42%、1.60%的3种饲粮,饲养试验时间为20d。结果表明,各项生产性能指标均随饲粮总赖氨酸水平提高呈二次曲线变化。以处理Ⅱ(总赖氨酸水平1.42%)为最佳,随着赖氨酸水平的降低或升高,生产性能均下降。当总赖氨酸水平提高到1.60%(处理Ⅲ)时,其日增重、日采食量和每克赖氨酸增重均显著低于处理Ⅱ(P0.05)。     

日粮不同蛋白水平对猪小肠CaSR基因表达及胃肠激素分泌的影响

本试验旨在研究日粮蛋白水平对不同生理阶段猪胃肠道钙敏感受体(Calcium-sensing receptor,Ca SR)基因表达、血液胃肠激素分泌的影响,探讨蛋白水平与Ca SR基因表达和胃肠激素分泌的关系。选择健康、体重相近约10 kg(9.57±0.64)kg杜×长×大三元杂交断奶仔猪、35kg(36.47±0.20)kg生长猪和60 kg(62.30±0.07)kg肥育猪各18头,分阶段饲养,每阶段18头猪随机分为3组,每组6头,单栏饲养,以玉米-豆粕型日粮为基础,断奶仔猪日粮粗蛋白水平为20%、17%、14%,生长猪日粮粗蛋白水平为18%、15%、12%,肥育猪日粮粗蛋白水平为16%、13%、10%,饲养期分别为45、30、50 d,试验结束后屠宰,采集前腔静脉血液、小肠各部位组织,测定血液中胃肠激素水平、小肠各部位组织中Ca SR的表达。结果表明:当日粮蛋白水平降低后,不同阶段猪小肠Ca SR基因表达下调(P0.05),断奶仔猪血清胆囊收缩素(CCK)、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和酪酪肽(PYY)浓度显著降低,生长猪血清CCK、葡萄糖促胰岛素肽(GIP)浓度也明显下降,而肥育猪只有血清GIP浓度显著降低(P0.05);相关性分析表明,断奶仔猪空、回肠Ca SR表达与血中GLP-1和GIP显著正相关(P0.05),回肠Ca SR表达与血中PYY存在显著正相关(P0.05);生长猪十二指肠Ca SR表达与CCK显著正相关(P0.05),而空、回肠Ca SR表达则与GIP显著正相关(P0.05);肥育猪小肠各段Ca SR表达与胃肠激素无明显相关。我们的结果说明,降低猪日粮蛋白水平可下调小肠Ca SR基因表达和血液中CCK等胃肠激素的分泌,日粮蛋白水平对胃肠激素分泌的影响可能通过Ca SR介导。     

益生茵对断奶仔猪生长表现、微生物区系和小肠黏膜结构的影响

为研究不同益生菌对断奶仔猪生长表现、微生物区系和小肠黏膜绒毛结构的影响,试验选用7kg杜×(长·大)三元杂种断奶仔猪112头,按体重、性别、窝别分至如下7个处理组(1)对照组(不添加益生菌);(2)200×10-6肠球菌制剂组;(3)1 000×10-6肠球菌制剂组;(4)200×10-6乳杆菌制剂组;(5)1 000×10-6乳杆菌制剂组;(6)200×10-6肠球菌与乳杆菌的混合菌制剂组;(7)1 000×10-6肠球菌与乳杆菌的混合菌制剂组.每处理2个重复(栏),每重复8头猪.测定断奶后两周和试验全期仔猪的生长表现,以及断奶两周末仔猪胃内容物pH、回肠内容物微生物区系、小肠黏膜绒毛高度与隐窝深度.结果表明,1)在断奶后两周内,益生菌极显著增加仔猪日采食量与料重比,各试验组均值分别较对照组高14%和10%(P＜0.01),益生菌有提高仔猪日增重的趋势(P=0.090 1),其中,1 000×1-6乳杆菌制剂组仔猪日增重较对照组增加20.6%(P＜0.05);在试验全期(7～19kg),益生菌降低仔猪采食量(P＜0.05),而对日增重与料重比没有影响(P＞0.05).2)益生菌对断奶后两周末仔猪胃内容物pH(P=0.841 8)、回肠大肠杆菌(P=0.503 9)及乳酸杆菌数量(P=0.139 7)均无显著影响.3)益生菌对仔猪绒毛高度/隐窝深度比值影响显著,各试验组均值较对照组增加17.7%(P=0.023 8),并有增加小肠黏膜绒毛高度的趋势,试验组小肠黏膜绒毛高度均值较对照组高12.8%P=0.053 8),但对仔猪小肠黏膜隐窝深度没有影响(P＞0.05).以上结果提示,益生菌能提高断奶仔猪的生长表现,改善小肠黏膜结构,不失为抗断奶应激添加剂的一种理想选择.     

不同蛋白和锌水平对早期断奶仔猪结肠蛋白质腐败产物和腹泻的影响

采用2×2因子设计(蛋白水平23%或17%,ZnO100mg/kg或3000mg/kg),选用21日龄断奶的杜长大三元杂交猪32头,体质量(6.3±0.4)kg,随机分为4组,每组设4个重复,每个重复2头猪,试验期4周。试验结束后,从每个重复中随机挑选1头试猪进行屠宰,收集结肠内容物。结果表明,玉米-豆粕型基础日粮中添加3000mg/kg饲料级ZnO,对高蛋白诱发的高腹泻发生率有极显著的抑制作用(P0.01),这可能是由于高锌可明显降低结肠内容物挥发性盐基氮和氨氮含量(P0.01),显著提高高蛋白日粮的胰蛋白酶(P0.05)、胃蛋白酶活性(P0.05)和CP表观消化率(P0.05)所致。     

DNA指纹、RNA指纹技术及应用

在80年代中期兴起DNA指纹技术和RNA指纹技术，目前此技术已广泛应用于遗传育种、新子鉴定、连锁分析、罪犯鉴别、疾病早期诊断，基因调控等方面的研究。二者特点不同，应用不同，现将其作以综述。     

犊牛小肠不同部位pH值及蛋白酶活性变化规律的研究

本文对0-6月龄黑白花公犊牛小肠不同部位（十二指肠、空肠和回肠）的pH值及胰蛋白酶和糜蛋白酶活性进行了测定。结果表明,犊牛小肠不同部位的pH值不同．回肠pH值高于空肠,回肠和空肠pH值均显著高于十二指肠：小肠不同部位的胰蛋白酶和糜蛋白酶活性不同．空肠胰蛋白酶和糜蛋白酶活性高于回肠,空肠和回肠胰蛋白酶和糜蛋白酶活性显著高于十二指肠．随着犊牛日龄的增长．活性逐渐增长。