供快速检测猪瘟抗体的酶标抗体试验(ELA)的建立和评价

好些作者已认为酶标记抗体可以用于疾病的血清学诊断。本文描述为美国农业部动植物检疫总所(APHIS,USDA)建立的快速筛选程序作为检测猪瘟抗体之用。酶标抗体试验(ELA)的原理与间接荧光抗体试验(IFA)相似。它是用一种抗品种IgG共价结合于辣根过氧化物酶,代替用不同荧光化合物所标记的     

诊断猪瘟常用的方法

猪瘟是一种流行广泛,发病率和死亡率均高的传染病,严重危害养猪业的健康发展。及时、准确地对猪瘟进行鉴别诊断显得尤为必要。本文主要从临床诊断、抗原及抗体检测的角度对常见的诊断方法,如病毒的分离与鉴定、猪体回归感染试验、家兔级别交互免疫试验、ELISA、FAT、IHA、中和试验、免疫酶测定技术或酶标记抗体诊断法做了简明的阐述,为猪瘟的诊断提供参考。     

螢光抗体技术在猪瘟诊断中的应用

现在日本采用萤光抗体法诊断猪瘟。萤光抗体技术是将抗体(或抗原)标记上萤光色素,与相应抗原(或抗体)结合后,在萤光显微镜下,呈萤光现象的一种特异免疫萤光反应方法。诊断猪有三种作法。 1.组织切片法:从病猪采取扁桃体的薄     

酶标直接法与兔体交互免疫法诊断猪瘟对比试验

<正> 酶标记组化法(直接法)诊断猪瘟已在实践中开始应用,它具有特异性高、成本低廉、快速的特点。但据一些单位的实验反映,酶标组化法诊断猪瘟与兔体交互兔疫法诊断猪瘟的符合率相差甚大。农牧渔业部兽医生物药品监察所生化组做的阳性符合率为3％①;四川省乐山地区畜牧局所做的阳性符合率为50％②。为进一步了解酶标直接法     

猪瘟荧光抗体的制备及应用

用硫酸铵盐析法从抗猪瘟血清中提取免疫球蛋白，应用搅拌法标记荧光素，硫酸铵盐析、Sephadex G-25层析和肝粉吸收三法结合去除标记物之游离荧光素，制备猪瘟荧光抗体。经测定，标记的荧光抗体工作稀释度为1：16～1：32。用标记的荧光抗体诊断猪瘟，从39份可疑病料中检出阳性病例12份。     

猪瘟野毒感染抗体阻断ELISA检测方法的建立与初步评价

以猪瘟野毒E2蛋白为包被抗原、辣根过氧化物酶标记的猪瘟野毒单抗作为酶标抗体,建立检测猪瘟野毒抗体的阻断ELISA方法.猪瘟野毒E2最适包被浓度为0.03 μg/mL,待检血清最适稀释度为1∶4,酶标猪瘟野毒单抗稀释度为1∶1 000.用建立的阻断ELISA方法检测369份临床阴性血清,计算阻断率,确定临界值,阻断率＞4...     

ELISA技术检测猪瘟抗原和兔化弱毒苗免疫效果的探讨

笔者在1986年4至6月间作了207头份的猪瘟抗体检测,测出不同水平的抗体194头份,同时检测了147头份的猪瘟抗原,检出阳性6份,它与酶标记抗体检测猪肾(直接法)作了符合率试验,其结果完全一致。一、材料与方法(一)材料 1.猪血清、尿液、肝、脾、心、肺、肾,取我市城关等八区一镇的207头份的,经过不同时期猪瘟兔化弱毒疫苗免疫的猪全血3—4毫升及肝脾心肾肺,全血经     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅰ 对人工感染猪瘟猪扁桃体冰冻切片荧光抗体法诊断的研究

Solorzand(1962)首先提出用荧光抗体法诊断猪瘟,认为此法不仅敏感,而且特异性亦高。1963年Stair,1964年Aikenct等应用组织切片和压片做了猪瘟荧光抗体法的研究。1963年Mengeling等应用猪肾继代细胞(РК—15)进行了猪瘟荧光抗体的研究。1969年须原贤治等报导了应用扁桃体冰冻切片荧光抗体染包诊断猪瘟的方法。目前,美、日、法、荷等国均已广泛采用荧光抗体法做为常规的猪瘟诊断方法。荧光抗体     

应用ELISA法诊断非典型猪瘟的报告

近年来,猪瘟的流行特征发生了重要变化,出现了以非典型、隐性感染为主的流行趋势,致使猪瘟的临床诊断更为困难.酶联免疫吸附试验(ELISA)是快速检测猪瘟的有效方法.本试验通过应用ELISA法检测非典型猪瘟病例,摸索出诊断非典型猪瘟的可靠方法.发现非典型猪瘟——流产型猪瘟病例,其血清中不含抗病毒抗体,因此诊断本病必须通过检测病毒的方法.     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅱ有关扁桃体冰冻切片荧光抗体法在应用上的几个问题

前报已报导了用免疫荧光抗体法对人工感染猪瘟猪扁桃体冰冻切片诊断猪瘟的研究结果,证明这是一种特异的、快速的实验室诊断方法。本报提出了制备荧光抗体用高免血清效价的测定方法、活体扁桃体病料的采样方法、感染猪瘟病毒猪扁桃体免疫荧光的检出时间和猪瘟兔化弱毒疫苗接种后是否产生免疫荧光等研究结果。     

用酶联免疫吸附试验间接法检测猪瘟抗体

酶联免疫吸附试验间接法检测猪瘟抗体系用纯化抗原包被聚苯乙烯微量反应板,洗涤三次;加入待检血清,孵育后洗涤三次;再加入按工作效价稀释的HRP—SPA(辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A),孵育后洗涤三次;用OPD(邻苯二胺)配制酶的底物溶液。如血清中有猪瘟抗体存在,     

人工感染猪猪瘟病毒抗原检查方法的比较

猪瘟是我国猪的三大疫病之一,经常威胁着养猪业的发展。为了更好地控制本病的发生,必须作出快速、准确的诊断。只有尽快确诊,才能及时采取防制措施。在生产实践中,我们常依据临床症状,病理解剖变化,并结合必要的实验室检查等方法诊断猪瘟。目前比较先进的实验室检查方法是免疫荧光技术、酶标抗体法等。这些实验诊断方法已在一些地区得到了推广应用。为了更好的应用这些实验室诊断方法,我们在1982年下半年应用免疫荧光技术、酶标抗体法及强化鸡新城疫病毒试验(END试验),在不同时间检查了42头人工感染猪瘟病毒猪。比较了三种     

应用免疫酶染色快速诊断猪瘟的报告

前言免疫酶技术是借助于酶的催化作用来测定免疫反应中抗原或抗体的优良方法。它目前在各个生物学领域中已经得到广泛应用。医学和兽医学也应用此技术作为特异性诊断方法进行疾病的鉴別。关于猪瘟这一疫病,我国虽多年来使用渚瘟兔化弱毒疫苗进行防预注射,但由于种种原因使一部分猪只仍有猪瘟的发生。而且猪瘟在临床上与常发病付     

斑点免疫金渗滤法检测猪瘟抗体的研究

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜，然后用胶体金标记SPA，建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色，阳性者出现红色斑点，结果易于判断。整个试验过程仅需5min，操作简单，与猪兰耳病、猪伪狂犬病、猪细小病毒、新城疫和禽流感等阳性血清不发生交叉反应。同时将该法与目前猪瘟的常规检测方法Dot—ELISA法和间接血凝试验同时对200份猪血清进行猪瘟抗体检测比较，符合率达98．4％和98．9％。说明该法微量、特异、敏感可靠，检测时间短，效果直观，非常适用于猪瘟的早期诊断和普查以及疫苗免疫效果后抗体水平的检测。     

猪瘟酶标记抗体诊断猪瘟的初步观察

1984年,我们试用猪瘟酶标记抗体技术,对不同来源的猪肾227份,进行了猪瘟诊断,并对经过保存的被检标本进行复检。结果如下。材料及方法一、被检样品来源:1.××肉联厂、××××等农贸市场猪肾180份。其中健康猪     

应用FA及PPA-ELISA技术对猪瘟的检测

用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术检测了猪瘟血清抗体 ,在 40头母猪血清样品中 ,猪瘟弱毒抗体效价 OD值较高 ,有 1 0 0 %的保护率 ,但是发现母猪群中有 1 0 %隐性猪瘟感染 ,其强毒抗体效价 OD值大于 0 .5,体内带有猪瘟病毒。结果及过程表明此两种诊断方法检测快速、鉴别准确、分辨率高     

荧光抗体与酶标抗体诊断野外猪瘟的比较

酶标抗体技术是继荧光抗体技术之后发展起来的又一先进的诊断技术。它的快速性,敏感性及特异性均不亚于荧光抗体技术。因此已逐渐广泛地应用于畜牧兽医诊断领域中。1980年以来,国内先后发表了用荧光抗体技术和酶标抗体技术诊断猪瘟的报告,对这两种快速诊断技术都做了大量的工作和充分的肯定。并且在全国各地进行了推广应用。两种诊断试剂目前均     

应用白细胞总数下降规律诊断猪瘟

如何预防控制猪瘟是养猪生产成败的关键措施之一 ,患猪不仅病死率高 ,而且因其病程长 (可达一个多月 ) ,前期症状难以诊断 ,会使畜主耗费高额的医疗费用 ,最终患猪死亡 ,则损失更大。为此兽医工作者一直都致力于研究快速准确诊断猪瘟的方法 ,以便早期诊断猪瘟 ,采取正确的应对措施 ,把损失降到最低。虽然荧光抗体、免疫琼扩、酶标抗体和单克隆抗体等试验都能快速准确诊断猪瘟 ,但其昂贵的试验费用 ,令广大农户望而却步。笔者经多年临床实践发现 ,结合临床症状 ,同时辅以∑ＷＢＣ下降规律 ,可大大地提高诊断猪瘟的准确性。它既能快速准确诊断…     

应用正向间按血球凝集试验检测猪瘟免疫抗体

猪瘟免疫抗体的检测长期以来没有一种适合于基层应用的方法,琼脂扩散试验和免疫萤光试验虽能测得抗体,但是抗体效价的高低不能判定,酶联免疫试验能够判定抗体效价的高低,但由于操作程序的繁琐而不能在基层广泛应用。我们应用兰州兽医研究的猪瘟正向间接血凝诊断液,在郑州地区9个外贸猪场检测213份猪瘟免疫血清,现将结     

应用ELISA法诊断非典型猪瘟的报告

ELISA法是一种快速而准确的诊断方法,本试验通过应用ELISA法检测非典型猪瘟病例,摸索出诊断非典型猪瘟的可靠方法。发现非典型猪瘟—流产型猪瘟病例,其血清中不含抗病毒抗体,因此,诊断本病必须通过检测病毒的方法。同时采用两种不同温度对抗原进行包被,摸索出包被抗原的适宜条件。