孵化湿度对鸡胚胎发育的影响

鸟类繁衍后代必须经过一个母体外的胚胎发育阶段,这个阶段通称为孵化。家禽的卵细胞(OVUM)与哺乳动物的卵细胞在构造上不同,禽卵内积存了大量的营养物质——蛋黄,将胚盘挤向一侧故称为端黄卵,从而使禽卵的体积变得很大。一个成熟的鸡卵直径平均为3.5厘米,鸵鸟卵的直径可达10.5厘米。而哺乳动物的卵体积很小,如牛卵直径平均为100微米,马卵平均为135微米,分别为鸡卵直径的三百五十分之一和二百六十分之一。这就从结构上保证了胚胎体外发育阶段所需营养物质的供应。但是胚胎发育的好坏以及整个孵化的成败受着多种因素的制约,除了先天性的遗传因素外,主要受着环境条件的影响。众所周知,湿度是必要的孵化条件之一。但是,有关孵化湿度对鸡胚胎发育影响方面的研究资料,目前国内并不多见。本试验的目的在于研究不同的湿度标准     

家禽雌性生殖道对属间异种精子运行和存活时间影响的研究

鸡和鹌鹑形态上有很大差异 ,且鹌鹑精液在体外的存活时时间很短 ,大约 (12± 4 )min。为了深入地研究鸡与鹌鹑的属间杂交 ,研究通过鸡 (♂ )×鹌鹑 (♀ )正交和鹌鹑 (♂ )×鸡 (♀ )反交人工授精试验 ,对输入精液后每隔 1,4 ,7,9h解剖母禽观察其生殖道结构、电导率及其内分泌的酸碱度。结果表明 :鸡和鹌鹑生殖道分泌物 pH值、电导、长度都有很大差异。通过显微观察 ,鸡 (♂ )×鹌鹑 (♀ )正交及鹌鹑 (♂ )×鸡 (♀ )反交后 ,其精子在体内的存活时间长于 1h ,鹌鹑精液大大长于在体外的存活时间 ,精子能在 1h后到达漏斗部。     

葡萄糖在牛体外受精及胚胎发育中的影响

在牛精子获能液中添加不同浓度的葡萄糖,应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育进行研究,通过观察顶体反应、超激活、活率和早期胚胎发育率,筛选出获能液中最适葡萄糖浓度及其有利于牛早期胚胎发育的最佳浓度.结果表明:葡萄糖是精子获能和维持超激活运动的主要能源物质,其代谢过程中产生的活性氧在牛精子体外获能、受精过程中起重要作用,高浓度(超过9.15 mM)葡萄糖有利于获能的完成;但是对早期胚胎发育不利,对早期胚胎发育来说其最适添加量为6.10 mM,此时的囊胚率最高.     

禽卵孵化的发展史

<正>从人类开始圈饲禽类以后,要求不受自然条件限制,按人们的需求扩大群体数量就开始了人工孵化。禽卵的孵化是由天然孵化向人工孵化演变的,不断的形成人工孵化的技术和发展。天然孵化是由母禽就巢性,借其自发体温来孵蛋的。一般局限于春孵,其次为秋孵。天然孵化要选巢念强的健康母禽才能完成,它孵蛋数有限,在15枚左右。母禽就巢后便仃止产卵,也影响母禽的体质。孵出雏后,还喂育幼雏,影响产卵。     

猪第一极体核物质参与卵母细胞受精及其胚胎发育的研究

旨在探索猪卵母细胞第一极体核物质能否参与体外受精及其进一步的胚胎正常发育.第一极体(FPB)获自猪卵巢卵泡中卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外成熟培养的MⅡ期卵母细胞.存活极体从成熟卵母细胞内分离后采用显微操作术注入去核卵母细胞胞质中.第一极体重组卵母细胞分别采用常规体外受精和单精子胞浆注射法进行受精,来自极体核重组的受精卵进行体外培养,观察和分析其进一步体外卵裂发育的能力.结果显示:极体显微操作重组的成功率约为80%,20%左右的重组卵母细胞于重组后的受精和发育培养过程中退化、崩解;常规体外受精和单精子注射后2-细胞卵裂率分别达到12.9%和29.8%.结论:猪第一极体核物质具有参与卵母细胞受精和进一步胚胎发育的能力.据此推测利用第一极体将有可能繁殖正常仔猪后代.     

应用ICSI技术生产转基因水牛胚胎的初步研究

本研究旨在探讨水牛精子完整质膜和破损质膜的方法对水牛单精子注射(ICSI)技术转基因效果的影响。水牛精子经冻融、Triton×-100、超声波3种方法破损精子质膜后与外源质粒DNA混合,采用ICSI的方法将基因转染后的精子注射到水牛体外成熟卵内,观察水牛ICSI卵激活后的发育状态和外源基因的表达效果。结果表明:精子质膜完整性实验中,冻融破损精子质膜组早期胚胎基因表达率为21.8%,显著高于活精子组的5.1%(P<0.01);冻融组与活精子组的卵裂率、囊胚发育率均无显著差异(P>0.05)。以冻融、Triton×-100、超声波3种方法破损精子质膜,冻融组的囊胚发育率(16.7%)最高,显著高于Triton×-100组(P<0.01)。同时,冻融组的早期胚胎基因表达率亦显著高于Triton×-100组和超声断尾组(60.3%vs.31.7%vs.18.2%,P<0.01)。上述结果说明,使用ICSI技术转外源基因可获得表达EGFP基因的水牛早期胚胎;冻融精子质膜破损法能有效破损精子质膜,有利于外源DNA与精子的结合,且提高转基因效率。     

猪体外受精中多精子受精

多精子受精指多于一个的精子进入卵母细胞的胞质中,导致多倍体合子的形成、早期胚胎发育夭折或发育异常。哺乳动物在正常的体内受精中多精受精只占1％～2％,当猪卵母细胞在体外成熟和受精时,多精子受精率明显比体内成熟猪卵母细胞的高。多精子受精而发育的猪早期胚胎可发育至囊胚阶段甚至可以更进一步发育,但和两原核正常胚胎相比它们的囊胚内细胞团细胞数明显减少。     

柞蚕卵管卵的变化及多糖类分布

从组织学观察多滋式卵管卵的发育在家蚕上分为:球状期、杯状期、滋养细胞退化期、卵壳分泌期和完成期等七个时期(小泽,1959)。吴必强(1964)在研究饰腹寄蝇胚胎发育的过程中将卵管内卵细胞的发育分为五个时期即球状期、杯状期、半球状期、卵黄细胞退化期和完成期。本文根据柞蚕卵管内卵细胞的发育及多糖类的分布初步分为九个时期。     

牛卵母细胞注射致死的精子受精获犊

牛卵母细胞体外培养成熟后,注射不活动的(杀死的)牛精子,使其受精。在培养器内与卵丘细胞一起培养6～9天,检验胚胎发育能力。培养1～2天、3～4天、5～6天、7～8天时,其中一些受精卵分别发育到2～     

有关因素对鹅蛋孵化效果影响的观察

家禽受精卵通过母禽输卵管时,已开始发育,产后由于温度下降停止发育。它的胚胎期是在体外完成的,必须在某些适宜的外界因素条件下,才能完成胚胎发育。影响家禽胚胎发育的因素很多,鸡蛋孵化试验证明,种蛋产后一般贮存5—7天,其每贮一天,入孵时间延长20分钟,孵化率低4％:鸡孵蛋大头朝上竖放比平放孵化能显著提高孵化率;鸡蛋在孵     

读者信箱——禽胚脂逐日发育的特点

问:我从事鸡人工孵化多年,但缺乏这方面的专业技术知识,希望了解较详细的鸡的逐日胚胎发育的特点,以利于掌握鸡人工孵化技术,请贵刊给予指导.     

电气孵化设备的选择

禽类是卵生动物 ,其胚胎期是在母禽体外通过孵化来完成的。有些禽类依靠其孵化本能———就巢性 (抱性 ) ,由雌性或雌雄共同进行天然孵化 ;有些禽类在人工驯化条件下 ,丧失了或基本丧失了就巢性本能。为此 ,必须借助于人工孵化 (或其他种类的孵禽天然孵化 )来完成繁衍目的。1　电气孵化机械设备的现状我国人工孵化 (传统技术与设备 )可谓渊源流长 ,但推广应用电气孵化机械设备还是近代的事。上世纪 70年代末与 90年代初 ,随着改革开放政策的指引 ,我国引进了许多国家和地区生产的孵化设备。如加拿大(捷姆斯威型 )、美国 (鸡王牌 )、澳大利亚…     

用单胚mRNA差显方法克隆羊早期胚胎发育阻滞形成的相关基因

为探讨山羊体外培养胚胎发育阻滞的发生机理,用单胚mRNA差异显示技术,对来源于体内发育和体外培养的山羊早期8~16细胞期胚胎的基因表达进行了研究,获得体内发育胚胎特异表达的一些片段,并对其中1个片段进行了分析。结果表明,该片段与犬信号肽酶复合体25亚基(SPC25)基因具有92%的同源性。SPC蛋白可通过切除相关前体蛋白的信号肽,成为成熟的分泌蛋白而影响和作用于早期胚胎发育过程。该基因可望对克服早期胚胎发育阻滞有重要作用。     

家禽胚蛋注射技术的应用研究(综述)——蛋白质、氨基酸和多肽篇

在孵化后期,入孵种蛋的胚胎发育迅速,营养供应紧张,通过胚蛋注射技术供应养分可能有利于胚胎的组织发育和雏鸡出壳后的早期生长。本文介绍了给入孵种蛋注射卵清蛋白、氨基酸和多肽后胚胎的发育及随后出壳雏禽的生长情况。     

孕酮对牛精子体外受精及胚胎发育的影响

通过在牛精子获能液中添加不同浓度的孕酮,应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育进行了研究。通过对顶体反应、超激活、早期胚胎发育率及其与精子孵育时间对精子活率的观察,筛选出获能液中最适孕酮浓度及其有利于牛早期胚胎发育的最佳浓度。结果表明,单独添加孕酮不能诱导牛精子体外获能;孕酮只能诱导获能精子发生顶体反应,而且有一个剂量依赖关系,以1μg/mL的添加效果最好。当浓度超过1μg/mL、作用时间超过4h时,精子活率下降;获能液中添加孕酮,无论剂量多少,对胚胎体外发育无明显的促进作用。     

柞蚕精核在蓖麻蚕卵质中的变化

中国柞蚕和蓖麻蚕是同科异属的绢丝昆虫.我们从柞蚕蛾交配拆对后的母蛾储精囊——导精管中取出有核精子和精液加昆虫生理盐水(PH7.8)稀释,置解剖镜下检查精子活力,将精液(含精子)吸入消毒后洁净的微玻管顺蓖麻蚕处女蛾产出不久的卵细胞的卵孔徐徐注入.于注射后60—90分钟取卵固定,按照常规制连续(8微米)切片标     

禽类胚胎体外培养的研究进展

禽类胚胎的发育过程不同于哺乳动物,胚胎发育至囊胚阶段后随种蛋产出体外,然后在蛋壳内完成整个生长发育过程,不利于直接观察胚胎的连续发育过程,也不利于对胚胎进行遗传操作。因此,一个有效的禽类胚胎体外培养技术将为禽类胚胎操作技术提供广阔的前景。1禽类胚胎体外培养的研究概况自20世纪80年代以来,许多研究者都尝试将转基因鸡作为生物反应器来生产药物蛋白[1-3]。家禽的世代周期短,生产性能高,最适合转基因技术的应用。有多家欧美公司宣布,它们研究出了鸡蛋中含有人体蛋白的转基因鸡的新方法。这一研究结果表明,通过鸡生“蛋”而生出药物是可行的。但是禽类与哺乳动物胚胎发育有很多的不同点,胚胎与配子工程始终落后于其他动物[4]。禽类的卵子含有大量的卵黄,排卵后在母体输卵管内进行卵裂,经过24h排出体外时胚盘中含有6万个细胞,此后在完全独立的蛋壳中完成胚胎发育过程直到出生。由于禽类所特有的生殖特点:不易获得大量的受精卵;受精时多精入卵;卵子重新回到母体输卵管内的技术或受精卵体外孵化技术难度大等,客观上制约了业已在哺乳动物中普及的转基因技术在禽类遗传操作上的广泛应用。自然状态下,禽类胚胎发育由单细胞形成个体分为两个阶段,即体内的输卵管...     

西洛酰胺对绵羊卵母细胞核成熟及后期胚胎发育的影响

本实验研究不同浓度西洛酰胺(Cilostamide)对绵羊卵母细胞核成熟的抑制效果,并探讨FSH对Cilostamide抑制效果的影响,以及延迟卵母细胞核成熟对随后胚胎发育能力的影响,旨在探索提高绵羊体外胚胎发育能力的新方法。结果表明:5μmol/L的Cilostamide为较合适的添加浓度,使卵母细胞核成熟延迟约4 h;FSH与Cilostamide对抑制核成熟起到协同作用;5μmol/L Cilostamide处理可使绵羊卵母细胞孤雌激活后囊胚率达到40.4%,显著高于对照组29.0%的囊胚率(P<0.05)。     

犬卵母细胞体外成熟及其体外受精研究进展

犬科动物胚胎对于改进犬科珍贵物种及保护濒危犬种十分重要,因此对犬科动物体外受精(IVF)以及辅助生殖(ART)的研究逐渐变得必要.通过体外受精和核移植已经成功获得能够发育的犬科动物胚胎,克隆的犬胚胎移植到受体母犬能成功产仔,但是这一技术的效率仍然很低.主要原因是犬科动物胚胎在体外发育能力很低.犬卵母细胞早期发育和其他动物不同,犬卵巢排出的卵母细胞处于生发泡(GV)期,在输卵管中恢复减数分裂.犬卵母细胞核难以观测并且不容易确定排卵时间,所以很难确定精子入卵的确切时间,并且多精受精的情况时常发生.回顾犬卵母细胞体外成熟(IVM)和体外受精取得的进展,对于提高其胚胎生产效率很有必要.     

体细胞克隆的小鼠胚胎在附植前后发育的研究

采用成年小鼠的卵丘细胞核、胎儿成纤维细胞作核供体细胞来进行核移植,研究小鼠卵母细胞的去核程序和影响重构胚附植前发育的激活条件;随后将重构胚与供体细胞系共培养后获得囊胚阶段的小鼠重构胚,并将其移植到受体鼠体内后获得了24%克隆胚胎。结果表明,小鼠卵母细胞质能够进行重编程来支持早期的胚胎发育。